碱性成纤维细胞生长因子对癫痫大鼠海马神经元凋亡的影晌

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对致痫大鼠的神经保护作用及可能机制。方法给予戊四氮（PTZ）致痫大鼠每日腹腔注射bFGF（bFGF组，n=36）、生理盐水（NS组，n=36），分别于痫性发作后6h、12h、24h、48h、3d、5d处死取脑，切片进行bcl-2、caspase-3染色，用原位末端标记（TUNEL）方法检测海马神经元凋亡细胞。结果痫性发作6h后两组海马CA1、CA3区的bcl-2、caspase-3、TUNEL染色阳性表达差异无统计学意义（P〉0．05）；12～48h表达逐渐增强，bFGF组bcl-2、TUNEL的表达显著高于NS组，bFGF组caspase-3的表达显著低于NS组（P均〈0．01）；3d后表达减弱，bFGF组与NS组的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论bFGF能显著减轻癫痫所致的海马神经元凋亡，提示可能通过调控bcl-2和caspase-3基因的表达发挥作用。     

γ-氨基丁酸能中间神经元的数量变化与颞叶癫癎关系的实验研究

目的 探讨含微白蛋白（PV）、钙视网膜蛋白（CR）、钙结合蛋白-D28K（CB）的梁静慧-氨基丁酸（GABA）能中间神经元在颞叶癫痫发生、发展中的作用。方法 采用氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痢大鼠模型，应用免疫组化法分别于制模后6h、12h、24h、7d、15d及60d动态观察海马神经元PV、CR、CB的表达。结果 与对照组相比，实验组大鼠海马PV阳性神经元的数量在CA，区无明显变化，在CA，区呈进行性下降（P〈0．05～0．01），7d时达最低值；在齿状回门区，6h即出现明显的下降（P〈0．05），15d时达最低值（P〈0．01），30d后开始上升，到60d时与对照组相比差异无显著性。实验组大鼠海马各区、各时点CR阳性神经元的数量较对照组均明显下降（P〈0．05～0．01）；在CA3区和CA1区24h组及在齿状回门区15d组数量达最低。CB阳性神经元的数量在CA3区与对照组无明显变化（P〉0．05）；在CA1区，6h后开始减少（P〈0．05），7d后达最低值（P〈0．01），然后稍有回升，但仍明显低于对照组（P〈0．05）；齿状回CB阳性神经元的数量7d时开始较对照组明显增加（P〈0．05），并逐渐升高，60d时达高峰（P〈0．01）。结论 氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痢模型中，海马GABA能神经元在CA1区和CA3区的变化可能诱发了颞叶癫痫的发作；在齿状回的改变可能在颞叶癫痫自发性复发性发作的发生和发展中起重要作用。     

癫痫幼鼠海马和颞叶皮质区缝隙连接蛋白43和突触体素表达的变化

目的观察神经元缝隙连接蛋白43（Cx43）和突触体素（synaptophysin P38）在戊四氮（PTZ）点燃癫痫幼鼠海马及颞叶皮质区中的表达，探讨两者与癫痫的关系及其在癫痫形成中的作用。方法将50只21日龄Wistar大鼠分为对照组和实验组。实验组采用PTZ点燃癫痫幼鼠，按点燃进程分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级及Ⅳ级发作组。采用免疫组化和图像分析技术，观察海马及颞叶皮质区Cx43和P38表达的变化。结果应用PTZ点燃后，实验各组幼鼠海马及颞叶皮质区Cx43和P38的表达明显高于对照组（P〈0．01），且随发作级别的增高，幼鼠海马及颞叶皮质各区Cx43和P38的表达均增加。但各组间海马区和颞叶皮质区Cx43和P38的表达情况的比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Cx43和P38的表达水平与癫痫的发生发展有密切关系，为研究小儿癫痫的病因及发病机制提供依据。     

依达拉奉对大鼠外伤性癫痫海马CA3区的神经保护作用

目的观察外伤性癫痫（PTE）大鼠模型海马CA3区CD133、核因子-kB（NF—kB）及胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的动态表达及自由基清除剂依达拉奉对其的影响,探讨PTE可能的防治机制。方法健康成年雄性SD大鼠采用随机数字表法分为正常组（A,n=6）、对照组（B,n=15）和治疗组（C,n=15）。观察行为学、脑电图,在不同时间点取脑,分别行抗CD133、NF—kB及GFAP酶标免疫组织化学染色,对海马CA3区行病理学观察。结果与A组比较,B、C组1d后海马CA3区CD133表达逐渐增加,7d时表达最强,差异均有统计学意义（P〈0．05）,14d时降低;NF—kB在1d时大量表达,7d后减少,14d明显减少;GFAP在7d表达增强,14d时最多,差异均有统计学意义（P〈0．05）。C组三种指标同一时期的表达均较A、B组弱,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论PTE后的氧化应激反应可诱导海马神经前体细胞的增殖分化,或者神经胶质细胞自身增殖,造成海马结构紊乱。依达拉奉可能抑制这一病理重构过程,从而在晚期PTE的防治中起重要作用。     

硫丙咪胺对戊四氮致痈幼鼠海马GFAP、c—fos表达和学习认知的影响

目的：观察硫丙咪胺（Thi）对戊四氮（PTZ）致痫幼大鼠海马胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）、c-fos表达及学习认知的影响。方法：发育期SD幼鼠40只随机分为对照组、PTZ致瘸组、TM 30mg·kg^-1干预组和Thi15mg·kg^-1干预组（均n=10）。观察各组大鼠瘸样行为，水迷宫实验观察学习认知能力、免疫组化检测海马GFAP和c-fos的变化。结果：对照组无痫样发作，阿z致痫组有重度发作，Thi30mg·kg^-1干预组有轻度发作（P〈0．05）；水迷宫实验中，PTZ致痫组寻找平台潜伏时间延长和通过平台次数减少，Thi30和15mg·kg^-1干预组寻找平台潜伏时间明显缩短，通过平台次数增加明显，差异有统计学意义（P〈0．05）；PTZ致痫组GFAP和c-fos表达明显强于Thi干预组，差异有统计学意义（P〈0．05），其中Tiff30与15mg·kg^-1干预组相比差异也有统计学意义（P〈o．05）；GFAP和c—fos免疫组化表达与大鼠空间学习记忆能力呈正相关。结论：Thi可能通过抑制PTZ致瘸幼大鼠海马GFAP、c—fos表达，减轻癫痫发作程度，提高其学习认知能力。     

白藜芦醇对戊四氮致痫大鼠脑脊液、血清S100B蛋白的影响

目的研究白藜芦醇（Res）对戊四氮致痫大鼠脑脊液、血清S100B蛋白的影响。方法采用戊四氮（PTZ）腹腔注射建立慢性癫痫模型,造模成功后予以Res（15mg／kg·d）灌胃干预10d;采用酶联免疫吸附法测定脑脊液、血清S100B蛋白含量,海马标本行Nissl染色。结果经28d连续给药,18只大鼠符合Racine点燃标准,Res干预组大鼠痫性发作潜伏期明显延长,且发作时间明显低于癫痫模型组、二甲基亚砜组（P〈0．05）。海马Nissl染色提示Res干预对大鼠海马CAl、CA3区神经元有保护作用（P〈0．05）,而对齿状回保护作用不明显（P〉0．05）。Res干预组大鼠脑脊液、血清S100B蛋白含量低于癫痫模型组、二甲基亚砜组（P〈0．05）。结论Res降低PTZ致痫大鼠脑脊液、血清SIOOB蛋白含量,或许减缓癫痫发作脑损伤发挥神经保护作用。     

睡眠剥夺大鼠大脑皮层和海马nNOS表达的改变在其学习记忆损伤中的作用

目的观察睡眠剥夺（SD）后,大鼠学习记忆能力及大脑皮层和海马神经元型一氧化氮合酶（nNOS）蛋白表达的变化。方法采用小平台水环境法建立大鼠SD模型。观察大鼠经过不同时间SD后,各组“Y”迷宫成绩及大脑皮层和海马nNOS阳性神经元的变化情况。结果（1）“Y”迷宫实验：3组SD组的迷宫成绩较正常笼养对照组（CC）分别下降了24．3％、17．6％和41．9％（P〈0．01）。（2）nNOS阳性神经元数目：在皮层,SDld组较CC组增加了8．7％（P〈0．01）,SD2d组和SD3d组较CC组则减少了9．0％和16．0％（P〈0．01）;在海马CA。区,3个SD组较CC组分别减少了9．4％、16．0％和22．0％（P〈0．01）。结论SD可能通过改变大鼠大脑皮层和海马CA．区nNOS蛋白的表达来损害大鼠学习记忆能力。     

神经生长因子对大鼠前脑缺血再灌注后细胞凋亡及FaS蛋白表达的影响

目的：研究神经生长因子（NGF）对大鼠前脑缺血再灌注后海马CA1区Fas蛋白表达和细胞凋亡的影响。方法：夹闭大鼠双侧颈总动脉造成前脑缺血，30min后松夹再灌注，NGF组和生理盐水组于再灌注开始时分别肌肉注射NGF30μg·mL^-1和生理盐水0．1mL，应用免疫组化法和TUNEL法检测各组大鼠海马CA1区Fas蛋白表达和细胞凋亡。结果：再灌注后6和24h，NGF组Fas蛋白平均吸光度值小于生理盐水组（P〈0．001和P〈0．05）。再灌注后48h两组比较差异无统计学意义（P〉0．5）。再灌注后6、24和48h，NGF组TUNEL阳性细胞率均低于生理盐水组，差异有统计学意义（P〈0．005）。结论：NGF可以减少大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区Fas蛋白表达，抑制细胞凋亡，从而发挥其神经保护作用。     

艾司西酞普兰对抑郁大鼠海马BDNF表达及细胞凋亡的影响

目的观察艾司西酞普兰对抑郁大鼠海马BDNF表达及细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。方法40只雄性SD大鼠随机分为对照（A）、对照＋药（B）、抑郁模型（C）和抑郁模型＋药（D）组共4组,采用慢性不可预见性的温和刺激结合孤养法建立抑郁大鼠模型,TUNEL法检测海马细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR方法检测海马BDNF、Bax、Bcl2、Caspase3mRNA的表达。结果（1）C组海马细胞凋亡数显著增加,与A组比较差异有统计学意义（P〈0．01）,而B组细胞凋亡数与A组差异无统计学意义（P〉0．05）;D组细胞凋亡数明显减少,与c组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）C组海马BDNF、Bel—2mRNA表达降低,Bax、Caspase3mRNA表达升高,与A组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）;D组BDNF、Bcl2mRNA表达增加,Bax、Caspase3mRNA表达降低,与C组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论艾司西酞普兰可改善抑郁大鼠的抑郁行为及海马细胞凋亡,其机制可能是通过增加海马BDNFmRNA的表达,上调Bcl一2及下调Bax、Caspase3mRNA的表达,从而预防海马细胞凋亡而发挥脑保护的作用。     

柴胡总皂甙对戊四氮慢性点燃大鼠海马谷氨酸细胞的影响

目的研究柴胡总皂甙对戊四氮(PTZ)慢性点燃癫痫模型大鼠海马区谷氨酸(Glu)阳性细胞表达的影响。方法48只健康SD大鼠被随机分为6组,即空白组(A组)、生理盐水组(B组)、丙戊酸钠(VPA)组(C组)和柴胡总皂甙高、中、低三种剂量组(D组、E组、F组),每组8只,除A组不做处理外,其他各组采用腹腔注射PTZ慢性点燃造模,造模同时给予VPA、柴胡总皂甙等不同处理因素,连续4周后取脑组织切片进行Glu免疫组化染色,从阳性细胞数、灰度值分析结果。结果在CAl区,B组海马阳性细胞数高于A、C、D、E、F组,有显著性差异(P＜0．05),B组海马各区阳性细胞灰度值低于其他各组,与A、C、D各组比较,有显著性差异(P＜0．05)；而在CA2区和DG区,B组阳性细胞数、灰度值与各组差异无统计学意义。结论柴胡总皂甙可以影响PTZ点燃大鼠海马CA1区的Glu表达水平,从而抑制PTZ慢性点燃大鼠的痫性发作。     

托吡酯对戊四氮致癫癎大鼠海马AQP4表达水平的影响

目的探讨托吡酯对戊四氮致癫癎大鼠海马AQP4表达水平的影响。方法将30只Wistar大鼠随机分为戊四氮致癫癎组、托吡酯干预组和正常对照组，每组各10只；癫癎模型点燃后在不同时相点灌注取材，通过HE染色观察大鼠海马神经元的变化，并应用免疫组化法检测大鼠海马AQP4表达水平。结果HE染色显示托吡酯干预组神经元变性和坏死较戊四氮致癫癎组明显减轻；免疫组化显示戊四氮致癫癎组在致癫癎后12hAQP4的表达显著增强，致癫癎后24h达高峰，托吡酯干预组在致癫癎后12h～36h各时相点AQP4表达水平均分别低于戊四氮致癫癎组相应时间点（P〈0．05）。结论托吡酯通过下调大鼠海马AQP4的表达可能参与了对大鼠海马神经元的保护过程。     

胶质细胞谷氨酸转运体在大鼠点燃效应中的作用研究

目的 研究点燃形成过程中和点燃后大鼠海马中氨酸天门氨酸转运体（GLAST）和谷氨酸转运体1（GLT－1）的变化,进一步探讨癫痫的形成机制。方法 将78只雄性成年Wistar大鼠随机分为对照组（I组）和戊四氮（PTZ）组（Ⅱ组）。Ⅱ组腹腔注射阈下剂量的PTZ（335mg/kg）,每日1次,直到达到点燃标准;I组腹腔注射等量生理盐水。采有RT－PCR方法检测海马区GLAST和GLT－1mRNA的表达。结果 PTZ组点燃后,GLASTmRNA的表达下降,60天时恢复至对照组;与对照组比较,PTZ组GLT－1mRNA的表达,在给药后15天时开始上升,点燃后0小时和48小时时显著升高,此后呈下降趋势。60天时,两组比较无明显差异。结论 海马区胶质细胞谷氨酸转运体的下降可能与癫痫敏感性的形成有关。     

托吡酯对戊四氮点燃慢性癫(癎)大鼠海马神经细胞黏附分子的影响

目的:探讨神经元活化在癫发生、发展中的作用及托吡酯对其的影响。方法:采用戊四氮制备慢性癫模型,利用托吡酯干扰,选取不同时间点,观察大鼠行为学变化及神经细胞黏附分子在海马回的表达(免疫组织化学染色)。结果:托吡酯组点燃率在27d明显低于模型组;模型组及托吡酯组神经细胞黏附分子表达增加,并随时间延长明显;而不同时间点该表达的增加程度,托吡酯组均低于模型组。结论:神经细胞黏附分子表达的增加,说明出现了神经元活化及脑可塑性变化,而托吡酯明显地抑制了该表达的增加。     

戊四氮点燃癫(癎)大鼠海马巢蛋白和骨形成蛋白-4的表达研究

目的观察巢蛋白(nestin)和骨形成蛋白4(BMP4)基因在戊四氮(PTZ)点燃癫大鼠海马中的表达,并探讨两者与癫发病机制的关系。方法将81只成年雄性SD大鼠随机分为实验组(n=54)和对照组(n=27)。实验组采用PTZ点燃癫大鼠,按点燃中的不同时相点,又随机分为9组。用免疫组化技术、地高辛标记特异性寡核苷酸探针原位杂交组织化学技术,观察海马nestin和BMP4表达的变化。结果nestin阳性细胞在PTZ注射后3d开始出现在齿状回、CA3区和CA1区,到7d达到高峰,以后逐渐减少。BMP4在PTZ注射后7d开始增多,在点燃后1d达到高峰,以后逐渐减少,主要分布在齿状回、CA3区和CA1区。结论PTZ点燃可引起海马内星形胶质细胞增生、活化和神经发生,这可能是癫海马组织胶质化、神经元可塑性的病理基础;BMP4可能在PTZ癫形成过程中起重要作用。     

丙戊酸钠对戊四氮致痫大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨丙戊酸钠(VAP)对戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马神经元凋亡的影响.方法 将48只成年Wistar大鼠随机平均分为正常对照(NC)组、PTZ组和VAP组,PTZ组和VAP组大鼠腹腔注射阈下剂量的PTZ 35mg/(kg·d),直至达到点燃标准.点燃后,VAP组大鼠经腹腔注入VAP15mg/(kg·d),PTZ组大鼠经腹腔注入生理盐水,30min后,再腹腔注射PTZ诱发癫痫发作.应用免疫组化法检测大鼠海马神经元Fas、Caspase-3和Survivin的表达.结果 PTZ组大鼠海马神经元Fas、Caspase-3阳性细胞数和光密度明显高于VAP组和NC组(均P<0.01),Survivin阳性细胞数和光密度明显低于VAP组(P<0.01),但高于NC组(P<0.05);VAP组大鼠海马神经元Fas、Caspase-3阳性细胞数和光密度明显高于NC组(均P<0.05),Survivin阳性细胞数和光密度明显高于NC组(P<0.01).结论 癫痫发作可以导致大鼠海马神经元的凋亡,而丙戊酸钠有对抗癫痫发作导致细胞凋亡的作用,主要通过促进Survivin的表达和抑制Fas和Caspase-3的表达发挥作用.     

抗癫痫药物对大鼠记忆和学习功能影响的研究

目的探讨抗癫痫药物对大鼠认知功能的影响。方法健康雄性性成熟SD大鼠70只,随机分为正常对照组(NS组)、癫痫对照组(PTZ组)、卡马西平(CBZ)组、苯妥英钠(PHT)组、丙戊酸钠(VPA)组、妥泰(TPM)组及拉莫三嗪(LTG)组,每组10只。除NS组外其他6组用PTZ点燃。抗癫痫治疗2周后用Morris水迷宫测试认知功能。采用方差分析进行统计学处理。结果PTZ组学习成绩提高快(P<0.05,P<0.01)。卡马西平组、丙戊酸钠组、拉莫三嗪组测试成绩捉高很快(P<0.01),优于NS组。苯妥英钠组测试成绩提高较慢(P<0.05),与NS组比较无明显差异。妥泰组测试成绩提高慢,各次、各天之间差异无显著性(P>0.05),较NS组差。在寻找平台象限和在平台象限逗留时间的测试中,妥泰寻找时间最长,逗留时间最短,两项成绩均低于其他组(P<0.05,P<0.01);其他各组之间差异无显著性。结论PHT可能损害大鼠的学习、判断功能,TPM还可损害大鼠的记忆功能。     

托吡酯对癫痫大鼠海马神经元超微结构及bcl-2表达的影响

目的观察托吡酯对癫痫大鼠海马神经元超微结构及bcl-2表达的影响,以探讨托吡酯可能的神经保护机制。方法将大鼠随机分为正常对照组、海人酸组(KA)和托吡酯预处理组(TPM)。采用海人酸腹膜腔注射制作癫痫持续状态(SE)模型。在SE模型制作前,TPM组大鼠用TPM(18mg/(kg·d))灌胃15d,同时用等量生理盐水给KA组大鼠灌胃。正常对照组大鼠不作任何处理。在痫性发作终止后6、24、48h取海马,电镜观察神经元的超微结构,免疫组化方法检测bcl-2的表达。结果KA组神经元呈凋亡特征。TPM组神经元结构大致正常,但出现核仁边聚和细胞器增多现象,亦观察到少量凋亡神经元。KA组于SE后6h观察到bcl-2表达增高(与对照组相比,P<0.05),于24h开始减弱,48h仅有微弱表达。TPM组在24h点有bcl-2的强表达(P<0.001),并持续至48h。结论托吡酯预处理能减轻癫痫大鼠神经元的损伤,其神经保护作用可能与bcl-2蛋白的表达上调有关。     

A型钾通道Kv4.1在戊四唑致痫大鼠海马区的表达

目的通过检测A型钾通道Kv4.1在戊四唑(PTZ)致痫大鼠海马CA1、CA3及齿状回区的表达变化,探讨A型钾通道在癫痫发病机制中的作用。方法 SD大鼠40只,随机分为正常组、致痫后1 h、24 h、72 h组。腹腔注射PTZ制备大鼠癫痫模型,应用免疫组化及Western Blot技术检测Kv4.1在各时间段海马CA1、CA3及齿状回区的蛋白表达情况。结果致痫组大鼠海马区Kv4.1蛋白表达水平在致痫后1 h、24 h、72 h三个时间段均明显高于正常组(P<0.05);各致痫组之间Kv4.1蛋白表达水平无明显差异(P>0.05)。结论大鼠癫痫模型海马区A型钾通道Kv4.1蛋白表达增多,Kv4.1的表达上调可能在癫痫的发生中起作用。     

Protective effect of naringin on pentylenetetrazole (PTZ)-induced kindling; possible mechanisms of antikindling,memory improvement,and neuroprotection

The present study investigated the effects of Naringin on seizure severity, progress of kindling, memory impairment, oxidative stress, neurochemicals, and neural damage in Pentylenetetrazole (PTZ)-induced kindling. Alternate intra-peritoneal injections of PTZ induced kindling at 22 injections of PTZ. In comparison with the PTZ group, pretreatment with Naringin 30 min prior to PTZ administration and on a PTZ-free day was found to lead to a decreased seizure score, a mitigated progress of kindling, decreased transfer latency, and increased total number of arm entries, % alternation behavior in Y maze, and % conditioned avoidance response in a pole climbing apparatus. Biochemical analysis of the frontal and temporal cortexes and the hippocampus of the brain showed that Naringin attenuated the level of lipid peroxidation (MDA) and augmented the reduced glutathione, superoxide dismutase, catalase, and total thiol results in decreased oxidative stress compared with the PTZ group and control group. Investigation of neurochemicals revealed a minute change in gamma amino butyric acid (GABA), glutamate and dopamine, and decreased AChE in the three regions. Increased CA1 neuronal density in the hippocampus and increased cell density in the frontal and temporal regions indicate the potential of naringin to act against PTZ-induced kindling, memory impairment, oxidative stress, neurochemical changes, and histological aberrations.     

Topiramate attenuates withdrawal signs after chronic intermittent ethanol in rats

Topiramate, a novel anticonvulsant drug, has CNS depressant activity including enhancement of GABAergic inhibitory synaptic transmission. Drugs of this pharmacological spectrum might have utility in assuaging drug addiction. This study analyzes the ability of TPM to reduce withdrawal signs in the kindling model of ethanol dependence: chronic intermittent ethanol (CIE) rats. After CIE, persistent withdrawal signs are shown by an increased seizure susceptibility to the convulsant drug pentylenetetrazol and increased anxiety measured on the elevated plus-maze. Topiramate increased significantly the PTZ seizure threshold in CIE but not in control rats. On the elevated plus-maze, Topiramate was markedly more effective in CIE rats than in controls. Topiramate may have a therapeutic efficacy in treating alcohol withdrawal symptoms.