喉癌瘤内血管生成与颈淋巴结转移的关系

为了探讨肿瘤血管生成与喉癌颈淋巴结转移关系的意义,应用ＣＤ３４单克隆抗体,以免疫组织化学法,通过ＣＤ３４单克隆抗体标记血管内皮对５８例喉鳞状细胞癌组织中微血管计数。结果：３０例颈淋巴结转移组平均微血管密度为４１．４４±１６．９４个／２００×,２８例非转移平均微血管密度为１９．７４±１０．１１个／２００×,及９例正常喉组织平均微血管密度为９．１４±３．８７个／２００×。３组间有显著差异（Ｐ＜０．０１）,瘤内微血管密度与颈淋巴结转移有明显正相关性。认为喉鳞状细胞癌微血管定量与颈淋巴结转移有重要意义,可预测颈淋巴结转移的危险性,可作为喉鳞状细胞癌预后的一个重要指标。     

喉鳞癌微血管密度与颈淋巴结转移及病理临床分期的相关性研究

目的研究喉鳞癌微血管密度与颈淋巴结转移及病理临床分期的相关性。方法采用抗Ⅷ因子相关抗原的抗体标记肿瘤血管内皮细胞并测定喉鳞癌组织微血管密度。结果①颈淋巴结转移组喉鳞癌的微血管密度显著高于非转移组(32.1518±6.489∶18.0672±4.983,P<0.01);②喉鳞癌微血管密度大于均数组则颈淋巴结转移率显著增高(P<0.01);③病理临床分期晚期组喉鳞癌的微血管密度明显高于早期组(P<0.01)。结论喉鳞癌微血管密度可作为预测其颈淋巴结转移的一项指标。     

喉癌中血管内皮生长因子C和微淋巴管密度的关系

目的分析血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)、微淋巴管密度与颈淋巴结转移的关系,以及VEGF-C的表达与微淋巴管密度的相关性。方法采用免疫组化SP法,检测47例喉癌组织及15例声带息肉中的VEGF-C的表达;检测47例喉癌组织、癌旁组织中的微淋巴管密度。结果VEGF-C在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级病理分级的阳性率分别为55%、72.22%、88.89%,表达与肿瘤分化明显相关(P<0.05)。VEGF-C在淋巴结转移组和非转移组的阳性率分别为82.35%和60%,差异显著(P<0.05)。喉癌组织微淋巴管密度在淋巴结转移组与非转移组分别为15.38±5.68和10.41±4.23,差异非常显著(P<0.01)。结论VEGF-C的表达与喉癌组织微淋巴管密度及喉癌的淋巴结转移密切相关。     

喉癌nm23,Cath-D和CD44表达与预后的相关因素分析

目的:探讨影响喉癌预后的相关因素.方法:采用免疫组化检测96例喉鳞状细胞癌标本表达情况,并结合临床和病理资料分析喉癌预后因素.结果:nm23、Cath-D和CD44的阳性表达率分别为45.7%(43/94)、52.1%(50/96)和41.7%(40/96).喉癌部位、大小、分化程度、T分期及nm23表达与喉癌颈淋巴结转移有关(P＜0.05);喉癌的部位、大小、分化程度、分期及颈淋巴结转移与术后3年生存率有关(P＜0.05).结论:检测nm23在喉癌中表达情况,对预测喉癌颈淋巴结转移有一定的参考价值;喉癌部位、大小、分化程度、分期及颈淋巴结转移是影响术后生存率的主要因素.     

喉癌组织中CD146表达与微血管和淋巴管计数的关系

CDl46（anti—adhesion molecule）是一种单链跨膜糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族成员。近年近发现CD146表达水平与恶性肿瘤进展、肿瘤血管生成、转移发生及预后密切相关。肿瘤组织微血管（microvessel,MV）密度和淋巴管（lymph vessel,LV）密度是判断恶性肿瘤进展、转移或复发及预后的客观指标,其意义可能仅次于淋巴结转移。采用EnVision和SP免疫组化法研究喉鳞状细胞癌（简称喉癌）组织中CD146表达水平及MV和LV计数,探讨它们的临床病理意义及在喉癌中相互关系。     

胸苷磷酸化酶、中期因子及CD105在喉癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨胸苷磷酸化酶(TP)、中期因子(MK)和CD105在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学方法检测43例喉鳞状细胞癌组织中TP、MK的表达和CD105标记的微血管密度(MVD)情况.结果:TP的阳性表达率为67.4%,MK的阳性表达率为60.5%,CD105标记的MVD值为6.01±1.78.TP和MK均为阳性时CD105标记的MVD值(7.07±3.26)明显高于TP和MK均为阴性时的MVD值(4.03±1.90)(P＜0.05).三者表达均与临床分期、淋巴结转移有关.单因素分析显示TP、MK表达和高MVD(≥6)均影响喉癌患者的生存期,但通过多因素分析显示只有淋巴结转移和MVD是影响喉癌患者生存期的预后因素.结论:TP、MK表达与喉癌血管生成关系密切,是喉癌肿瘤血管生成的重要因子,三者与喉癌进展、淋巴结转移密切相关.淋巴结转移和CD105标记的MVD是影响喉癌预后的因素;TP、MK可能通过促肿瘤血管生成作用对喉癌预后产生影响;TP、MK及CD105可作为一组有价值的肿瘤标记和预后指标.     

喉癌组织中微血管密度与预后的关系

目的 :探讨喉癌微血管密度与喉癌预后的关系。方法 :应用 F8相关抗体以 SABC法对 31例手术切除的喉癌微血管进行定量检测。结果 :微血管在喉癌组织学分级及分型中差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ,而微血管在 2年后的淋巴结转移组 (10 .2 3± 0 .78)与无淋巴结转移组 (6 .38± 0 .33)中差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :喉癌间质内微血管生成与淋巴结转移和患者的预后有关。     

喉鳞癌中NO、iNOS的测定及其临床意义

目的 :探讨一氧化氮 (NO)、诱生型一氧化氮合酶 (i NOS)在喉鳞癌中的表达及其临床意义。方法 :采用硝酸还原酶法测定健康人和喉癌患者血清 NO3和 NO- 2 之和 ;采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)技术检测 4 0例不同病理分化程度、临床分期的喉鳞癌组织、癌旁组织及 10例喉乳头状瘤、7例正常喉粘膜中诱生型一氧化氮合酶 (i NOS) m RNA的表达。结果 :喉鳞癌患者血清 NO含量显著高于正常对照组 ,喉癌组织 i NOS m RNA阳性表达率为 85 .0 0 % ,较对照组癌旁组织 (2 0 .0 0 % )、良性肿瘤组 (40 .0 0 % )、正常人组 (0 / 7)明显增高 (P <0 .0 0 0 1,P <0 .0 0 5 ,P <0 .0 0 0 1) ,有淋巴结转移组 (19/ 19)显著高于无淋巴结转移组 (71.4 2 % ) (P<0 .0 5 ) ,i NOS m RNA阳性表达与肿瘤原发部位及 T分级无关 ,与细胞分化程度呈负相关。结论 :喉鳞癌组织中存在 i NOS,它可能通过合成一氧化氮 (NO)在分子水平参与了喉癌的发生、发展     

喉癌组织中CD105标记的微血管密度VEGF及p53蛋白的相关性研究

目的:评价微血管密度(MVD)的临床意义,比较分析CD105、VEGF、p53蛋白之间的相关性,探讨三者在喉癌肿瘤血管生成中的相互关系及临床病理意义。方法:采用免疫组织化学技术检测以CD105标记的MVD(CD105-MVD)、VEGF、p53蛋白在喉癌组织中的表达。结果:40例喉癌组织CD105-MVD为14.90±7.40,明显高于对照组织(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ期喉癌组织的MVD高于Ⅰ、Ⅱ期,颈淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,其差异有统计学意义;VEGF阳性率77.5%。p53蛋白阳性率67.5%。VEGF表达与肿瘤的TNM分期及病理分化有显著相关性(P<0.05)。p53蛋白表达与淋巴结转移呈显著相关(P<0.05)。CD105-MVD与VEGF、p53蛋白之间呈明显正相关(r=0.641,P<0.01;r=0.534,P<0.01)。结论:CD105与肿瘤活性血管生成有密切联系,是肿瘤新生血管的标志;喉癌组织CD105标记MVD的测定可作为预测喉癌患者复发转移及评估预后的重要独立指标;喉癌中VEGF的表达、p53蛋白表达与CD105-MVD呈正相关,三者联合可作为判断喉癌侵袭转移及预后的重要指标。     

喉癌组织内微血管密度的测定及其临床意义

目的 :探讨喉癌组织内微血管的形成情况及其临床意义。方法 :采用第 因子相关抗原免疫组化法定量观察 38例喉癌组织内微血管的形态和分布并计算微血管密度 (MVD)。结果 :1喉癌组织内血管形态不规则 ,血管分布具有异质性 ,在癌巢实质内存在几无血管的“空白区”。 2癌组织中的 MVD显著高于癌周正常组织 (P <0 .0 1)。 3颈部淋巴结转移组喉癌组织 MVD高于非转移组 (P <0 .0 1) ; 、 期喉癌组织 MVD高于 、 期 (P <0 .0 1)。 4声门上型喉癌组织 MVD与声门型相比较差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。 5喉癌组织内 MVD在高分化、中分化、低分化三组中分别为 (2 4.70± 6 .36 )、(2 8.6 4± 11.5 4)、(2 9.0 7± 7.84)个 / HPF。其差异无显著性意义。结论 :1喉癌组织内存在血管增生现象 ,增生血管主要位于肿瘤间质 ,分布具有异质性。 2喉癌组织内MVD与喉癌分型及组织学分级无明显关系。 3肿瘤血管的形成有利于肿瘤的侵袭转移 ,喉癌组织 MVD的测定可望作为评估预后的又一重要指标。     

CD44和转移抑制基因在声门上型喉癌及下咽癌原发灶及转移淋巴结的表达

目的比较声门上型喉癌及下咽癌原发灶与淋巴结转移癌细胞CD44和nm23-H1蛋白表达情况,进一步了解其转移特性。方法应用免疫组织化学方法和流式细胞检测方法观察了22例无淋巴转移的非转移组和41例病理证实有淋巴转移的声门上型喉癌、下咽癌患者的原发灶与淋巴转移灶中的CD44和nm23-H1表达情况。结果喉癌淋巴转移组CD44蛋白表达高于非转移组,nm23-H1,蛋白表达低于非转移组(P值均<0.05)。CD44、nm23-H1蛋白表达与声门上型喉癌、下咽癌的临床分期有关,和病理分级无关。原发灶肿瘤与淋巴转移灶肿瘤CD44和nm23-H1的表达阳性率分别为75.6%(31/41)、85.4%(35/41)和34.1%(14/41)、26.8%(11/41),差异无统计学意义(P>0.05)。原发灶肿瘤与淋巴转移灶肿瘤CD44和nm23-H1的平均荧光指数分别为(x-±s)1.27±0.18、1.33±0.16和1.11±0.19、1.08±0.15,差异无统计学意义(P>0.05)。结论声门上型喉癌及下咽癌原发灶与其转移淋巴结CD44、nm23-H1蛋白表达无明显差异,未能证明原发灶与其淋巴结转移灶肿瘤细胞转移潜能的差异,原发灶及其转移淋巴结的转移潜能比较还应从多靶点深入探讨。     

喉鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子和碱性成纤维生长因子及微血管密度的检测及临床意义

目的:探讨喉鳞状细胞癌组织中微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法对42例喉鳞状细胞癌组织及10例癌旁正常组织常规石蜡切片染色,分别检测VEGF、bFGF和CD31。结果:①在喉鳞状细胞癌中,VEGF、bFGF主要分布在肿瘤细胞的胞质内,其阳性率分别为69.04%(29/42)、61.9%(26/42)。②VEGF、bFGF表达与TNM分期、颈淋巴结转移有关(P<0.05)。③声门上型组、颈淋巴结转移组、中、晚期喉癌组组织内的MVD明显高于声门型组、无颈淋巴结转移组及早期喉癌组(P<0.05)。结论:VEGF和bFGF在喉癌的血管生成中起着重要作用,二者与肿瘤的浸润、转移和复发密切相关。     

声门上型喉癌组织中肿瘤相关巨噬细胞浸润与微淋巴管生成关系

目的 研究声门上型喉肿瘤癌内及癌周肿瘤相关巨噬细胞(TAM)计数与微淋巴管生成的关系。方法 通过免疫组化法测定84例声门上型喉癌癌内及癌周标本微淋巴管密度（LMVD)及TAM的表达,并分析癌内及癌周LMVD、TAM计数与声门上型喉癌临床病理学因素及生存率的关系。结果 TAM浸润与肿瘤微淋巴管生成呈正相关,癌内(r=0.253, P=0.02),癌周(r=0.270, P=0.013)。癌内TAM浸润随肿瘤T分期上升而增加,癌内TAM浸润越多肿瘤预后越差,淋巴结转移组的癌周TAMs显著高于淋巴结无转移组,发生远处转移组的癌内及癌周LMVD显著高于未发生远处转移组,癌周LMVD越高肿瘤预后越差。Kaplan-Meier生存分析显示癌内高密度TAM及高密度微淋巴管组5年生存率(47.6% )显著低于低密度组(86.4%）,癌周高密度TAM及高密度微淋巴管组5年生存率(50.7% )显著低于低密度组(81.0%)(P＜0.05)。结论 TAM和微淋巴管生成与声门上型喉癌转移和不良预后密切相关。     

喉、喉咽癌患者外周血播散肿瘤细胞检测的初步研究

目的探讨RT-PCR以CK19mRNA作为标记物在检测喉癌、喉咽癌患者外周血播散肿瘤细胞(disseminatedtumorcell,DTC)的意义。方法采用套式RT-PCR,以CK19mRNA为指标,检测32例喉癌、喉咽癌患者外周血中的DTC。结果CK19mRNA总阳性率为46.9%(15/32);其中喉癌阳性率为40%(10/25);喉咽癌阳性率为71.4%(5/7)。20例正常对照组全部阴性。淋巴结转移组阳性率75%(9/12),非淋巴结转移组阳性率30%(6/20),两者之间有显著性差异(P<0.05)。阳性组患者的无瘤生存期(20.29±5.16月)比阴性组(37.13±3.23月)明显缩短,经Log-rank检验有统计学差异(P=0.046,<0.05),阳性组的复发率(66.7%)比阴性组(18.8%)增高(P<0.05)。并且做了生存分析,有统计学差异(P=0.015,<0.05)。结论以CK19mRNA肿瘤标记物,用精确设计的RT-PCR技术对外周血DTC的检测有助于喉癌、喉咽癌转移的早期发现;随访初步发现用DTC的检测有望作为肿瘤复发和远处转移的早期预示手段。     

MMP-9和TIMP-2在喉癌中的表达及其临床意义

目的 :探讨基质金属蛋白酶 (matrix metalloproteinase,MMP)中的 MMP- 9及其组织抑制因子 - 2 (tissue in-hibitor of metalloproteinase,TIMP)在喉癌中的表达及其临床意义。方法 :采用免疫组织化学方法检测 2 9例喉癌石蜡包埋组织中的 MMP- 9和 TIMP- 2的表达。结果 :MMP- 9在喉癌组织中阳性表达率为 79.3% ,TIMP- 2阳性表达率为89.6 % ,MMP- 9与 TIMP- 2强阳性表达率差异明显 (P<0 .0 5 ) ,MMP- 9在晚期喉癌中表达增高 ,T1 ,T2 与 T3,T4 期喉癌强阳性表达率差异显著 (P<0 .0 5 ) ,但弱阳性表达率与临床分期无关 ,而 TIMP- 2在喉癌组织中的强阳性表达率与弱阳性表达率均与临床分期有关。MMP- 9在淋巴结转移组的强阳性表达率明显高于非淋巴结转移组 (P<0 .0 5 ) ,而TIMP- 2淋巴结转移组强阳性表达率则低于非淋巴结转移组。结论 :MMP- 9与 TIMP- 2与喉癌的浸润和淋巴结转移有关 ,MMP- 9与 TIMP- 2两者关系密切。二者平衡的破坏是喉癌侵袭与转移的重要因素。     

喉癌中p53蛋白与VEGF表达的相关性研究

目的检测、比较分析喉癌中p53蛋白与VEGF的表达及平均瘤内血管密度的相关性.方法采用S-P免疫组织化学的方法检测62例喉癌术后标本中p53蛋白和VEGF的表达,并计算其平均瘤内血管密度;同时采用SPSS统计软件分析p53蛋白与VEGF的表达及瘤内血管密度的相关性.结果 62例喉癌中,33例p53蛋白阳性,38例VEGF阳性,平均瘤内血管密度为(34.58±11.23)mv;p53蛋白阳性的33例中,25例VEGF表达阳性,平均瘤内血管密度为(39.65±10.66)mv;29例p53蛋白阴性的病例中,13例VEGF表达阳性,平均瘤内血管密度为(30.45±11.76)mv;统计学处理发现p53蛋白阳性的病例中,VEGF表达的阳性率高于p53阴性的病例,平均瘤内血管密度高于p53阴性的病例.结论喉癌中VEGF的表达、平均瘤内血管密度与p53蛋白的表达呈正相关,mut-p53基因可能具有促进喉癌中VEGF表达、促进喉癌中微血管形成,进而促进喉癌细胞的侵袭与转移的作用.     

喉鳞状细胞癌血管生成和凋亡的表达及其相关性研究

目的:探讨血管生成与喉鳞状细胞癌自发性细胞凋亡及临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学SABC方法及原位组织尿嘧啶脱氧核糖核苷酸末断转移酶介导的缺口末断标记(TUNEL)技术检测34例喉鳞状细胞癌中瘤内微血管密度(IMVD)、细胞凋亡指数(AI)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:34例喉鳞状细胞癌中平均IMVD为21.50±8.87,AI中位数为1.15%。有、无颈淋巴结转移组平均IMVD分别为26.33±9.70、17.68±6.06,其差异有统计学意义(P<0.01);组织学分级高、中、低分化组平均IMVD差异有统计学意义(P<0.01),两两比较,高、中分化组差异有统计学意义(P<0.05);VEGF表达与IMVD呈显著正相关(r=0.51,P<0.01);IMVD与AI呈显著负相关(r=-0.53,P<0.01);IMVD与喉癌T分期无关。结论:IM-VD可作为预测喉癌颈淋巴结转移的重要指标;VEGF是一个重要的血管生成因子,可促进喉癌血管生成;血管生成可抑制喉癌自发性细胞凋亡,从而促进喉癌的恶性进展。     

鼻咽癌组织中Shh与微血管密度的表达及其 和肿瘤转移的关系

目的分析鼻咽癌组织中Shh蛋白的表达以及与微血管密度分布的关系,探讨其与肿瘤淋巴结转移的关系。方法应用免疫组化Elivision PIus二步法,检测50例鼻咽癌和26例炎性鼻咽部黏膜组织间质微血管密度(micro vascular density,MVD)的分布,并检测Shh的表达。结果①Shh在鼻咽癌组织中较鼻咽慢性炎症组织明显呈高表达(P<0.05);②鼻咽癌中Shh阳性组MVD均值26.441±6.239,高于Shh阴性组15.667±4.899,两者之间差异有显著性(P<0.01);肿瘤细胞Shh表达与MVD相关,即MVD值随着Shh表达而增高;③鼻咽癌组织中Shh蛋白表达率与MVD均与临床分期,颈淋巴结转移有密切关系(P<0.05)。结论Shh可能促进鼻咽癌间质血管生成,促进肿瘤的侵袭和转移,Shh和MVD有可能成为判定鼻咽癌生物学行为和预后的重要指标。     

喉癌患者血清可溶性白细胞介素-2受体和肿瘤坏死因子水平的研究

应用单克隆、多克隆双抗体夹心ELISA检测了35例喉鳞癌患者的血清可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)和肿瘤坏死因子(7NF-α)水平。结果显示:喉癌患者sIL-2R水平较良性组或正常人显著升高(P<0.001),与喉癌临床分期、临床分型及淋巴结转移密切相关;喉癌患者7NF-α水平只有Ⅳ期显著高于良性组或正常人(P<0.05).提示:血清sIL-2R水平检测可作为喉癌诊断的一项辅助指标,并有助于了解喉癌的临床进程及生物学行为(如淋巴结转移等);TNF-α在介导喉癌的恶病质方面起重要作用。本文还探讨了血清sIL-2R水平在喉癌中升高的机理。     

瘤内微血管密度与喉癌下咽癌颈淋巴结转移的相关性研究

为探讨瘤内血管密度与喉癌，下咽癌淋巴转移的关系，应用免疫组化方法对６１例喉癌、下咽癌组织行血管内皮细胞染色观察，进行颈部淋巴结转移的相关性研究。结果发现：喉癌、下咽癌瘤内血管密度较良性对照组明显升高，且差异有显著性（Ｐ〈０．０５）；有淋巴结转移组较无淋巴结转移组也明显升高（Ｐ〈０．０５），提示：瘤内微血管密度不仅与喉、下咽肿瘤的良恶性有关，且和有无淋巴结转移有关。表明：（１）瘤内微血管密度的高低可