131I标记17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素的制备及生物分布

目的 建立131I标记17-丙烯胺基-17.去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)的方法,并观察其在动物体内的生物分布.方法 采用过氧化氢法对17-AAG进行131I标记.测定131I.17.AAG注射后0.5,1,4,8和24 h在ICR健康小鼠体内的生物分布,通过显像动态观察131I-17-AAG在兔Vχ2肝癌模型中的分布.结果 建立了131I过氧化氢法标记17-AAG的最佳条件,131I-17-AAG标记率达85.65%,纯化后其乙酸乙酯相、生理盐水水溶液和4℃下放置5 d的生理盐水水溶液的放化纯分别为(96.51±0.80)%,(95.57±0.09)%和(90.96±1.29)%.尾静脉注射131I-17-AAG,健康ICR小鼠胆囊的摄取(每克组织百分注射剂量率,%ID/g)在0.5 h达到峰值(3.0963±1.3394)%ID/g,胃和小肠的摄取均在4 h达到高峰,24 h时肠道放射性明显减少,肝、肾摄取较少.瘤体给药后于2 h和4,6,14 d进行显像,可见131I-17-AAG在兔肿瘤中持续浓聚,肿瘤/非肿瘤组织放射性(T/NT)比值分别为10.36,3.62,4.32和3.50,其他脏器未见显影.结论 成功建立了131I-17-AAG标记方法,标记物保留了17-AAG生物学活性,体外稳定性好.兔肝肿瘤间质给药提示131I-17-AAG对肿瘤具有理想靶向性作用.     

131I-2F7抗体在荷小细胞肺癌裸鼠体内分布及其对肿瘤的生长抑制作用

目的 观察131I-2F7抗体对荷小细胞肺癌裸鼠模型的肿瘤生长抑制作用,并分析其在裸鼠体内的分布、靶向性和药代动力学.方法 用氯胺T法制备131I-2F7抗体,制备荷H128小细胞肺癌BALB/c裸鼠模型,15只荷瘤裸鼠尾静脉注射131I-2F7抗体7.4 MBq,分别在不同时间测量肿瘤组织及各器官的放射性,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g).将20只荷瘤裸鼠随机分成4组①生理盐水对照组,②单纯2F7抗体治疗组,③单纯131I治疗组和④131I-2F7抗体治疗组.尾静脉注射相应试剂后观察24 d,比较肿瘤的体积、质量,计算抑瘤率.结果 给药36 h肿瘤组织的放射性最强,为(6.45±0.33)%ID/g,此时肿瘤/血液放射性比值为2.63,肿瘤/肝放射性比值为4.13.给药24 d后,肿瘤体积和质量分别为①组(3.431±0.667)cm3,(6.441±1.234)g;②组(2.964±0.263)cm3,(5.876±0.620)g;③组(2.674±0.897)cm3,(5.689±1.605)g;④组(0.746±0.153)cm3,(1.602±0.194)g.131I-2F7抗体治疗组与其他各组间差异有显著性(P＜0.05).结论 131I-2F7抗体能有效抑制裸鼠小细胞肺癌的生长,对小细胞肺癌治疗有潜在的应用前景.     

131I-K237的制备及对荷人肺癌裸鼠靶向治疗实验

目的 探讨131I标记多肽K237的方法,观察131I-K237对荷人肺癌A549裸鼠肿瘤靶向治疗的疗效.方法 采用Iodogen法进行131I标记多肽K237,人奇静脉内皮细胞（HUVEC）增殖抑制实验和竞争抑制实验检测131I-K237的生物活性.建立荷人肺癌A549裸鼠模型25只,利用随机数字表法分成5组：对照组（注射生理盐水）、131I组（11.1 MBq）、K237组（40μg）、131I-K237静脉组（含K23740μg,11.1 MBq）和131I-K237瘤内注射组（含K237 40μg,11.1 MBq）.各实验鼠均于注药后15 d再次给药,剂量与前次相同.定期测量肿瘤体积.两样本均数比较用成组设计t检验,多组均数比较用单因素方差分析.结果 131I-K237的标记率为（60.16±1.21）%,经分离纯化后其放化纯为（96.87±0.82）%.HUVEC增殖抑制实验显示131I-K237与未标记K237的抑制率差异无统计学意义[（73.69±5.36）%和（62.68 ±3.83）%,t=1.67,P＞0.05].131I-K237静脉注入荷瘤裸鼠后肿瘤/对侧相应部位肌肉组织的放射性（T/N）比值随时间延长而逐渐升高,12 h达到最高,为4.31.治疗结束时,131I-K237静脉和瘤体内注射组、K237组及131I组的抑瘤率分别为75.01%、78.99%、31.15%、12.61%.131I-K237静脉和瘤体内注射组肿瘤平均体积较小,与对照组、K237组和131I组比较,差异均有统计学意义（F=15.233和13.611,P均＜0.01）.结论 131I-K237易于制备,具有较理想的动物体内动力学行为和对肿瘤的高亲和性,对荷人肺癌裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用,是一种具有潜在价值的新型靶向性肿瘤血管生成显像和治疗药物.     

131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对人乳腺癌细胞生长的抑制作用

目的 探讨^131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-AAG）对人乳腺癌细胞生长的影响及其相关机制。方法 采用过氧化氢标记法制备^131I-17-AAG。细胞杀伤实验分为5组：二甲基亚砜（DMSO）对照（A）组，Na^131I370kBq（B）组，17-AAG2．5mg／L（C）组，^131I-17-AAG370kBq（D）组，^131I-17-AAG370kBq＋17-AAG2．5mg／L（E）组。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各种药物对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用，流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期变化，RT—PCR检测药物处理前后MCF-7细胞中Akt2基因的mRNA表达情况。结果 ^131I-17-AAG的标记率为83％，放化纯为96．6％，比活度为1．48×10^5MBq／μmol。各组药物对细胞的杀伤呈时间效应，随着时间的延长，细胞的抑制率都呈明显上升趋势，尤以E组趋势明显。A～E组药物作用48h后，通过亚G1峰检测MCF-7细胞凋亡率分别为（1．54±0．13）％，（5．72±1．05）％，（12．97±1．44）％，（20．65±1．36）％，（35．39±4．15）％，各组细胞凋亡率差异有统计学意义（P均〈0．05）。C组，D组及E组Akt2基因的mRNA表达均比A组降低，其中E组降低尤为明显。结论 ^131I-17AAG能够抑制MCF-7细胞的生长并促进其凋亡，且能有效抑制Akt2基因的mRNA表达，和17-AAG联合应用能够增强肿瘤细胞对放疗的敏感性。     

131I-RC-160对转染SSTR2基因的A549肺腺癌移植瘤的抗肿瘤效应

目的 研究131I-RC-160(伐普肽)对转染人生长抑素受体二型(SSTR2)的A549(A549-SSTR2)肺腺癌移植瘤的抑制作用.方法 建立A549-SSTR2肺腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,同时建立pcDNA3质粒转染组的A549(A549-pc3)肺腺癌移植瘤模型作对照,观察131I-RC-160、RC-160、Na131I对移植瘤的抑制作用,等量的生理盐水作空白对照.治疗结束后,计算抑瘤率,随后处死裸鼠,取肿瘤组织作HE染色和免疫荧光染色,观察瘤组织的病理变化.采用SPSS 11.0软件对数据进行统计学处理.结果 A549-SSTR2细胞致瘤组中,131I-RC.160组和RC-160组的移植瘤生长明显受抑[抑瘤率分别为(75.1±4.2)%和(45.2±3.7)%],且131I-RC-160的抗肿瘤增殖效应较RC-160明显提高,差异有统计学意义(t=-6.165,P＜0.01);HE染色显示131I-RC-160组的肿瘤组织大部分片状坏死,残留少量瘤细胞,RC-160组肿瘤组织也可见片状坏死,但不如131I-RC-160组明显;免疫荧光染色显示131I-RC-160组和RC-160组的坏死区域荧光强度明显减弱,未坏死区域与生理盐水对照组无明显差异,可见明亮的绿色荧光.A549-pc3细胞致瘤组中,131I-RC-160和RC-160对瘤体有较弱的抑制效应[抑瘤率分别为(18.4 ±3.9)%和(15.2±3.4)%],与生理盐水组差异均无统计学意义(t值分别为-0.261和-0.302,P＞0.1);HE染色显示可见点状坏死,未见明显片状坏死;免疫荧光染色各组均未见明显的绿色荧光.Na131I组对转染或未转染SSTR2的移植瘤抑制作用与生理盐水组差异无统计学意义.结论 将SSTR2转染至不表达SSTR2的肿瘤后,可以介导放射性核素对肿瘤进行靶向杀伤效应,提高对这类肿瘤的治疗效果,为外源性受体基因介导放射性核素靶向性内照射治疗肿瘤提供依据.     

32P-磷酸铬-聚L-乳酸粒子植入对荷人前列腺癌裸鼠移植瘤的抑瘤效应和药物分布实验

目的 观察32P-磷酸铬-聚L-乳酸(CP-PLLA)粒子瘤体植入后对荷人前列腺癌裸鼠移植瘤的抑瘤效应和体内药物分布.方法 采用雄性BALB/c裸小鼠建立人前列腺癌PC-3M细胞株的裸鼠皮下移植瘤模型,按随机数字表法分为4组,每组8只,即空白对照组和低、中、高剂量组(各植入3.7、7.4和18.5 MBq粒子1枚).植入后第2天每组各处死3只小鼠,取瘤体标本,采用原位末端标记法(TUNEL)观察肿瘤细胞凋亡并计算凋亡率.另5只裸鼠每2天测量肿瘤体积.植入后1h、2h、1d、2d、4d和8d对裸鼠行放射性核素显像,观察32P-CP-PLLA粒子的放射性动态分布.植入后第14天处死小鼠,测量瘤体放射性活度和质量,计算放射性滞留率和抑瘤率,行常规病理检查观察瘤体和主要脏器病理变化,计算瘤细胞坏死率.免疫组织化学法检测肿瘤微血管密度(MVD)的表达.抑瘤率、瘤细胞坏死率和MVD组间差异采用单因素方差分析和SNK-q检验.结果 放射性核素显像示放射性高度浓聚在植入靶位,并且瘤内弥散.粒子植入后第14天,各活度组肿瘤体积差异有统计学意义(F=212.820,P＜0.01)；瘤体病理示坏死性改变,TUNEL检测示肿瘤细胞大量凋亡,凋亡率[第2天分别为(1.66±0.56)％、(34.51±6.68)％、(42.45±6.09)％和(57.01±3.13)％]、瘤细胞坏死率[(4.86±4.12)％、(65.43±8.06)％、(76.18±6.35)％、(85.85±3.05)％]和抑瘤率[(60.82±3.81)％、(73.17±4.55)％、(81.80±4.74)％]均随给药剂量增加而同步增高.低、中和高剂量组瘤体放射性滞留率分别为(34.36±5.78)％、(41.16±5.26)％和(44.70±3.83)％(F=6.311,P＜0.05)；空白对照组、低、中和高剂量组MVD分别为62.00 ±5.40、38.16±4.16、23.50±4.59和15.80 ±3.92(q=14.31、23.11、27.74、8.80、13.43和4.62,均P＜0.01).肝、脾等主要脏器未见明显病理学异常.结论 32P-CP-PLLA粒子植入后靶向浓聚,持续释放,具有杀伤、诱导凋亡和抑制肿瘤血管生成作用,且抑瘤效应和瘤内药物滞留率均存在一定的剂量-效应关系.     

核因子-κB抑制剂增强131I治疗甲状腺癌疗效的裸鼠实验研究

目的 通过小鼠活体研究,探讨核因子-κB抑制剂Bay 11-7082在131I治疗DTC中的协同作用.方法 通过裸鼠腹腔注射37 MBq131I,制备清除甲状腺裸鼠模型.将72只种植KTC-1癌细胞的清除甲状腺裸鼠随机分为4组:单独用131I组、单独用Bay 11-7082组、联合用药组和对照组.给药方法为:131I剂量37 MBq,于种植癌细胞第7周第1天腹腔注射;Bay 11-7082剂量按体质量10 mg/kg,于第7周第1、2和3天腹腔注射;联合用药组两药合用,剂量同上;对照组腹腔注射相同体积的生理盐水.成瘤后每周第7天测量癌结节大小,绘制癌结节体积变化曲线.裸鼠清除甲状腺前行99TcmO4-显像,131I清除甲状腺后和131I治疗种植瘤后3d行全身显像(单独用Bay 11-7082组未行治疗后显像).第7周第7天从每组中取6只裸鼠处死,对癌结节进行凋亡染色,计算凋亡指数(染色阳性细胞数/总细胞数×100％).用单因素方差分析和q检验进行数据比较.结果 裸鼠99TcmO4-显像可见甲状腺和胃显影;清除甲状腺时腹腔注射131I后显像可见甲状腺131I浓聚明显;131I治疗后荷裸鼠全身显像可见癌结节131I浓聚.从第8周末开始,3种治疗方案所致的癌结节体积改变差异有统计学意义(F=11.91 ～246.56,均P＜0.01),联合用药组癌结节体积明显小于单一用药组(q=3.36～ 14.99,均P＜0.01).对照组、131I治疗组、Bay 11-7082治疗组和联合用药组的凋亡指数分别为(0.28±0.15)％、(5.49±0.69)％、(6.82±0.72)％和(16.2l±1.57)％,差异有统计学意义(F =304.40,P＜0.01);其中联合用药组明显高于单独用药组(q=15.33和13.33,均P＜0.01).结论 裸鼠体内实验显示,通过Bay 11-7082对核因子-κB通路的抑制,可以增强131I治疗甲状腺癌的疗效,产生协同效应.     

单克隆抗体4E5的131I标记及131I-4E5对B细胞淋巴瘤细胞的杀伤效应

目的 研究CD80单克隆抗体4E5的131I标记及标记产物131I-4E5对B细胞淋巴瘤细胞的杀伤作用,为B细胞淋巴瘤的放射免疫导向治疗提供实验依据.方法 采用Iodogen法对4E5进行131I标记,以三氯醋酸法测定标记率和放化纯,并对131I-4E5的免疫活性及稳定性进行分析.以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察131I-4E5和4E5对B细胞淋巴瘤Raji细胞的杀伤效应.采用SPSS13.0软件对数据进行单因素方差分析和t检验.结果 131I-4E5的标记率为(78.3±2.4)％,放化纯为(95.7±1.8)％,比活度为0.58 MBq/μg,放射性浓度为3.90×1010 Bq/L.131I-4E5加入血清中放置3d后,放化纯仍＞90％.131I-4E5与Raji细胞的最大结合率为(36.06±2.63)％;131I-4E5对Raji细胞的杀伤作用呈剂量依赖性,高剂量组的细胞杀伤效应明显强于低剂量组:放射性浓度为1.48×1010、7.40×109、3.70×109、1.85×109和9.25×108 Bq/L时,细胞抑制率分别为(52.98±5.19)％、(46.29±2.80)％、(41.05±4.83)％、(33.68±3.79)％和(17.89±2.78)％,F=33.882,P＜0.001;4E5组(质量浓度为20.0、10.0、5.0、2.5和1.25 mg/L)的细胞抑制率分别为(32.98±3.99)％、(30.88±3.98)％、(27.14±2.05)％、(20.35±4.38)％和(8.42±1.05)％,131I-4E5组显著高于4E5组(t=5.290、5.489、4.596、3.986和5.515,P均＜0.05).结论 Iodogen法131I标记4E5标记率和放化纯高,标记物稳定性好;131I-4 E5可与Raji细胞特异性结合并发挥杀伤效应,为以B细胞淋巴瘤CD80为靶点的放射免疫显像及治疗提供了可能性.     

131I-Angiostatin对小鼠Lewis肺癌移植瘤NF-kBP65和CD34表达的影响

目的观察131碘标记的血管抑素(131I-Angiostatin,131I-AS) 对小鼠Lewis 肺癌移植瘤的抑制作用及其对NF-kB P65和 CD34表达的影响.方法30只荷Lewis 肺癌的小鼠随机分成4组,分别腹腔注射131I-AS(含131I 11.1 MBq,AS 12.5 mg/kg)、AS(12.5 mg/kg)、131I(11.1 MBq)和生理盐水各0.3 ml,每周1次,治疗2次,观察14 d内肿瘤体积变化并用免疫组化法检测各组肿瘤中CD34和NF-kB P65的表达.结果131I-AS、131I 、AS对小鼠Lewis 肺癌移植瘤的抑瘤率分别为73.3%、29.0%、46.4%(与生理盐水组比,P<0.05);免疫组化法检测显示,131I-AS治疗组中,CD34和NF-kB P65的表达明显低于生理盐水组(P<0.01).结论131I-AS能明显抑制小鼠Lewis 肺癌移植瘤的生长,降低肿瘤中CD34和NF-kB P65的表达,131I-AS在实体瘤治疗中有潜在的应用前景.     

hNIS基因转染介导Hela细胞移植瘤放射性核素显像和治疗的实验研究

目的 利用131I对转染hNIS基因的宫颈癌Hela-NIS（＋）细胞移植瘤进行显像及治疗实验研究,评价hNIS基因转染介导131I治疗宫颈癌的可行性.方法 （1）利用Hela-NIS（＋）细胞和未转染hNIS的Hela细胞分别建立荷宫颈癌裸鼠模型,进行131I及99TcmO4-显像,观察移植瘤的显影情况,并计算移植瘤部位与对侧相同部位的T/B比值.（2）通过腹腔注射法观察比较74,111和148 MBq131I对荷Hela-NIS（＋）宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用,另设不行任何治疗的对照组.用SPSS 13.0软件,样本均数间差异行t检验.结果 （1）成功构建荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤与荷Hela裸鼠移植瘤模型.131I显像示荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤部位明显放射性浓聚,注射后8 h T/B比值最高达17.34,而未转染hNIS基因的荷Hela裸鼠移植瘤部位始终未见明显的放射性浓聚.99TcmO4-显像示荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤部位在注射后25 h内持续放射性浓聚.（2）经不同剂量的131I治疗后2～3周起,各治疗组荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤生长开始受到抑制,移植瘤体积有不同程度缩小.111MBq组和148 MBq组的移植瘤抑制率差异无统计学意义（t=0.13～2.17,P＞0.05）,但二者均明显高于74 MBq组的移植瘤抑制率（t=2.74～5.75,P＜0.05）.对照组荷Hela-NIS（＋）裸鼠移植瘤持续生长.结论 荷Hela-NIS（＋）宫颈癌裸鼠移植瘤可明显聚集131I及99TcmO4-,且在较长时间内持续清晰显影;131I体内治疗效果显著.     

^131I-酪氨酸-奥曲肽对荷人非小细胞肺癌小鼠的抑瘤效果

目的探讨^131I标记酪氨酸一奥曲肽（^131I-Tyr-octreotide）对荷人非小细胞肺癌（NSCLC）小鼠的抑瘤效果。方法经氯胺T法标记Tyr-octreotide,测其放化纯及其在小鼠体内的生物分布;建立荷人NSCLC小鼠模型,分为尾静脉注射^131I-Tyr-octreotide组、肿瘤间质注射^131I-Tyr-octreotide组、肿瘤间质单纯注射^131I组和间质注射生理盐水组,观察肿瘤部位的放射性摄取,勾画感兴趣区（ROI）,计算肿瘤与对侧正常组织（T／NT）放射性比值,并对肿瘤进行细胞周期检测和免疫组织化学检测,观察癌细胞的凋亡。采用SPSS 11.0软件进行统计学处理,组间两两比较行单因素方差分析。结果标记产物放化纯为（95．23±1．67）％,比活度为3．5×10^6 Bq／μg。小鼠体内放射性分布示肾摄取最高,肝、脾摄取较少;荷瘤鼠显像示：间质注射^131I-Tyr-octreotide组肿瘤放射性浓聚较尾静脉注射和间质单纯注射^131I明显,放射性滞留较久;其24h的T／NT比值最高,为52．74±0．13,明显高于其他2组（8．90±0．23,6．42±0．02,q=628．81和664．33,P均〈0．05）;流式细胞检测可见经间质给药组较尾静脉给药组和单纯注射^131I组G．期细胞阻滞明显[各组G1期肿瘤细胞占总细胞的百分比分别为（83．17±6．86）％、（57．02±18．81）％、（49．29±7．80）％,q=1．56～6．86,P均〈0．05],免疫组织化学检查结果示肿瘤细胞大量凋亡,可见凋亡小体形成。结论^131I-Tyr-octreotide易于标记且与生长抑素受体（SSTR）表达阳性的NSCLC有较高的亲和力,对肿瘤组织有较强的促凋亡和抑瘤作用。     

分子探针131I-ch4E5的制备及其动物实验研究

目的 探讨靶向B细胞淋巴瘤的分子探针131I-ch4E5的制备方法及其对荷人B细胞淋巴瘤裸鼠的抑瘤作用。 方法 采用Iodogen法用131I标记抗CD80的人-鼠嵌合抗体ch4E5,采用放射性薄层色谱扫描法测定标记率和放射化学纯度。（1）体外实验:在含细胞数为1×108、1×109、1×1010、5×1010、1×1011个/L的人B细胞淋巴瘤Raji细胞的离心管中分别加入131I-ch4E5溶液,同时设置非特异结合对照管,测量每管沉淀的放射性计数,计算Raji细胞与131I-ch4E5的特异性结合率。（2）体内实验: 3只荷瘤裸鼠尾静脉注射7.4 MBq的131I-ch4E5,72 h后处死,分别取肿瘤、血等14种脏器或组织,分别计算肿瘤与正常组织的放射性比值（T/NT）;将15只荷瘤裸鼠按随机数字表法分为3组,分别经尾静脉注射131I-ch4E5（131I-ch4E5组）、未标记的ch4E5（ch4E5组）及生理盐水（对照组）,观察3组荷瘤裸鼠的肿瘤生长情况,给药后第15天计算肿瘤生长抑制率;之后处死荷瘤裸鼠取肿瘤组织,采用苏木精-伊红染色法做组织病理学检查。2组间的比较采用两独立样本t检验。 结果 131I-ch4E5的标记率为（84.2±2.4）%、放射化学纯度为（97.1±1.1）%。（1）体外实验:131I-ch4E5与Raji细胞的结合率随细胞数量的增加而升高,最大结合率为（38.2±2.3）%。（2）体内实验:131I-ch4E5在荷人B细胞淋巴瘤裸鼠体内的分布具有靶向性,肿瘤与肌肉的T/NT最大为7.30;与ch4E5组、对照组比较,131I-ch4E5组肿瘤生长减慢,差异均有统计学意义（t=2.889 、6.516,均P<0.05）;给药后第15天,131I-ch4E5组肿瘤抑制率为71.7%、ch4E5组为43.4 %。组织病理学检查结果同样显示131I-ch4E5的治疗效果更明显。 结论 自制分子探针131I-ch4E5的标记率及放射化学纯度高,且对荷人B细胞淋巴瘤裸鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,为进一步研究131I-ch4E5在放射免疫治疗中的应用提供了实验依据。     

维甲酸联合曲古抑素诱导及治疗荷人甲状腺滤泡状癌裸鼠的实验研究

目的探讨全反式维甲酸（ATRA）和曲古抑素（TSA）对人甲状腺滤泡状癌细胞株（FTC-133）和荷人甲状腺滤泡状癌裸鼠（NMB—hFTC）肿瘤模型摄碘能力的影响。方法不同量ATRA、TSA诱导VFC-133细胞：ARTA 1．0×10^-6mo／L（A低组）、1．0×10^-4mol／L（A高组）、TSA1．65×10^-7mol／L（T组）、A低＋T组、A高＋T组和无水乙醇（对照组）,96h后行HE染色,测定FTC-133细胞摄碘率;制备NMB—hFTC,成瘤后分组：ATRA组（2mg／kg灌胃）、TSA组（10mg／kg腹腔注射）、联合组（ATRA＋TSA,用量同前）、对照组（生理盐水灌胃＋腹腔注射,均为10ml／kg）,剂量均按鼠体质量给予。给药22d后,腹腔注射37MBq ^131I,分别于注射后4,6,12和24h行γ显像,测定体内生物分布;显像后取肿瘤组织行HE染色观察细胞形态。实验结果采用SPSS13．0软件进行单因素方差分析。结果FTC-133细胞摄碘率A低＋T组、A高＋T组分别为（23885±616．0）和（13849±728．2）计数·min^-1·10^-6细胞,其他各组在（985±84．2）～（17600±782．7）计数·min^-1·10^-6细胞范围内,各组间比较差异有统计学意义（F=600．879,P〈0．001）。^131I注射后6,12和24h联合组裸鼠种植瘤％ID／g分别为6．17±0．46,9．34±0．61,11．19±0．98,其余各组保持在（1．97±0．34）～（5．14±0．65）之间;肿瘤质量各组间比较差异有统计学意义（F=3．723,P〈0．05）。结论ATRA联合TSA,可增强FTC-133细胞和NMB—hFTC病灶的分化、摄碘能力,达到增强^131I杀死甲状腺癌病灶的协同作用。     

131I-抗ProGRP（31-98）单克隆抗体E-B5放射免疫显像及放射免疫治疗实验研究

目的了解131I标记的胃泌素释放肽前体（ProGRP）单克隆抗体E-B5在荷小细胞肺癌裸鼠的体内分布及放射免疫显像情况,观察131I—E—B5对荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法（1）分别建立荷小细胞肺癌、荷肺腺癌及荷大肠癌裸鼠模型。（2）自荷小细胞肺癌裸鼠尾静脉注射131I—E-B5后1,12,24,48,72和96h处死裸鼠并取各主要脏器组织,计算各时间点的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）和肿瘤／非肿瘤放射性（T／NT）比值。（3）分别对荷小细胞肺癌、荷肺腺癌和荷大肠癌裸鼠模型进行131I—E—B5放射免疫显像,观察移植瘤的显影情况,并计算移植瘤体／对侧相同部位的放射性（T／B）比值。（4）以未经任何治疗处理组为对照,采用瘤内注射法观察比较3．7,7．4,14．8和22．2MBq131I-E—B5和Na131I对荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用。采用SPSS13．0软件处理数据,行两样本均数t检验。结果（1）体内分布研究示：注射后72h,荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤体的放射性摄取达到最高值,为（14．1±2．9）％ID／g,高于其他脏器及组织（t=4．11～8．58,P均〈0．05）,瘤体与各脏器组织的T／NT比值随时间延长而逐渐升高,72h时瘤体与肌肉组织的T／NT比值高达4．67±0．66。（2）放射免疫显像发现：注射131I—E—B5后24h荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤部位放射性明显聚集,随时间延长放射性浓聚程度逐渐增强,72至96h时最为清晰。荷肺腺癌裸鼠移植瘤局部无明显的放射性浓聚。荷大肠癌裸鼠移植瘤模型显像结果与荷小细胞肺癌裸鼠模型显像结果类似,但其T／B比值低于荷小细胞肺癌裸鼠模型（t=4．29,P〈0．01）。注射后72h,荷小细胞肺癌、荷大肠癌及荷肺腺癌裸鼠的T／B比值分别为5．27±0．97,2．28±0．72和1．26±0．65。（3）131I—E-B5对荷小细胞肺癌移植瘤的生长抑制作用明显大于Na131I（t=2．88～17．77,P均〈0．05）。结论131I—E—B5对小细胞肺癌有较好的靶向作用,可以抑制小细胞肺癌移植的生长并破坏肿瘤组织,有望成为一种较为理想的小细胞肺癌放射免疫显像及放射免疫治疗药物,值得进一步深入研究。     

125I粒子不同分布组织间植入对荷人胃癌裸鼠移植瘤疗效的影响

目的 探讨125I粒子总活度相同时,不同分布的组织间植入对荷人胃癌裸鼠移植瘤疗效的影响.方法 建立人胃低分化腺癌BGC-823细胞裸鼠皮下移植瘤模型32只,按随机数字表法分为实验组和对照组.实验组植入总活度33.30 MBq125I粒子,按照植入单枚活度及分布不同分为高活度组(33.30 MBq×1枚)、中活度组(16.65 MBq×2枚)、低活度组(11.10 MBq×3枚);对照组植入空源粒子.每组8只裸鼠模型.比较实验和对照组及125I粒子不同分布状态下对移植瘤体积的抑制率、组织病理学改变、局部皮肤反应、裸鼠体质量和存活率.采用方差分析和秩和检验对数据进行统计学处理.结果 各组存活率均为100%.125I粒子植入第30天裸鼠体质量各组比较,差异无统计学意义[高、中、低活度及对照组分别为(26.44±1.07)、(26.58±0.51)、(27.15±1.37)和(26.92±0.60)g,F=2.23,P>0.05].第30天各实验组125I粒子对肿瘤体积抑制率分别为92.47%,97.15%和89.01%;平均体积各实验组[高、中、低活度组分别为(138.85±16.45)、(52.52±30.54)、(202.72±126.97)mm3]与对照组[(1843.99±447.63)mm3]比较,差异均有统计学意义(t值分别为3.092,3.376,3.269,P均<0.05),中活度组和低活度组组间比较差异有统计学意义(t=2.308,P<0.05),高活度组分别和中活度组、低活度组组间比较差异均无统计学意义(t值分别为1.300,1.007,P均>0.05).高活度组与中活度组组织病理学分级按直肠癌消退分级标准(RCRG)均为RCRG 1级;低活度组3只为RCRG 3级,4只为RCRG 2级,1只为RCRG 1级.中、低活度组均未出现放射性损伤,高活度组中4只裸鼠于125I粒子植入后9～12 d出现放射治疗肿瘤学组织(RTOG)1～2级放射性损伤.结论 125I粒子植入治疗中单源活度的选择和分布方式可直接影响疗效和放射性损伤的程度.     

外照射联合瘤内注射~(131)I-chTNT对荷Lewis瘤小鼠肿瘤的治疗作用

目的 研究外照射联合瘤内注射~(131)I-肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体(chTNT)对荷瘤小鼠肿瘤生长和体内放射性分布的影响.方法 建立C57BL近交系荷Lewis瘤小鼠模型64只,当肿瘤直径达6.0 mm时,用随机数字法分组进行荷瘤小鼠体内分布实验(18只)及~(131)I-chTNT显像(6只),均分为单药组和外照射联合组(小鼠分配9只×2和3只×2),观察给药后1,3和5 d肿瘤组织及血液、对侧大腿肌肉、胃、肝、肾、心、肺的放射性,用每克组织百分注射剂量率(%ID/g)表示;肿瘤生长效应实验设4个组(每组10只):对照组、单药组、外照射组和联合组,观察指标为肿瘤生长延迟时间.采用SPSS 11.5软件,组间比较行t检验.结果 荷瘤小鼠体内分布实验中联合组肿瘤组织放射性在1[(11.95±1.33)%ID/g]和3 d[(9.38±1.25)%ID/g]均高于单药组[(7.86±0.94)和(6.57±0.71)%ID/g],2组间差异有统计学意义(t值分别为4.326,3.555,P均<0.05).2组中正常组织的放射性差异均无统计学意义(t值0.118～1.445,P>0.05).~(131)I-chTNT显像结果 示外照射可增加荷瘤小鼠瘤内~(131)I-chTNT的滞留量,并延长其滞留时间;生长效应实验示:单药组、外照射组的绝对延迟时间分别为(3.3±1.75)和(6.0 4±2.02)d,联合组的绝对延迟时间为(9.5±1.93)d,标准化延迟时间为6.2 d,~(131)I-chTNT对放射治疗的增效因子为1.03.结论 外照射联合瘤内注射~(131)I-chTNT可增加瘤内~(131)I-chTNT的滞留量,并延长其滞留时间,二者联合应用可提高对荷瘤小鼠肿瘤的治疗效果.     

An experimental study on the antitumor effect of 131I-17-AAG in vitro and in vivo

Objective  To observe the antitumor effect of ¹³¹I-17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin (¹³¹I-17-AAG) in vitro/in vivo and explore its antitumor mechanism with a view to its potential therapeutic application. Methods   ¹³¹I-17-AAG was prepared by the reaction of 17-AAG with Na [¹³¹I] in the presence of hydrogen peroxide. The effects of ¹³¹17-AAG on cell growth inhibition and cell cycle distribution in vitro were studied in BEL-7402 cells lines. Following BEL-7402 tumor implantation by subcutaneous xenografts into nude mice, the reagents were injected through the tail vein, and the tumor volume was measured and analyzed. At the end of the experiment, tumor specimens were processed for histopathological analysis. Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) was used to investigate apoptosis. The expression change of Akt2 was tested by Western-blot analysis. Results  Methyl-thiazolyl-tetrazolium assay showed inhibition rates of 27.7 ± 5.3%, 57.3 ± 4.3%, and 63.7 ± 3.1%, in Na¹³¹I group, 17-AAG group, and ¹³¹I-17-AAG group, respectively. The inhibition rate in the ¹³¹I-17-AAG group differed significantly between N^a131I group and 17-AAG group (F = 229.49, P < 0.001). Following 48 h of treatment with the drug in each group, flow cytometry analysis indicated that detected sub-G peaks (black) were 1.54 ± 0.13%, 5.72 ± 1.05%, 12.97 ± 1.44%, and 20.65 ± 1.36%, in dimethyl sulfoxide (DMSO) group, Na¹³¹I group, 17-AAG group, and ¹³¹I-17-AAG group, respectively. Following infusion for 32 days, the tumor volumes in the ¹³¹I-17-AAG group were significantly smaller than those in the DMSO group (F = 24.18, P < 0.001) or the ¹³¹I group (F = 20.68, P < 0.001). Histopathological and TUNEL analyses showed that ¹³¹I-17-AAG inhibited the proliferation of tumor cells and induced apoptosis. The expression of Akt2 in ¹³¹I-17-AAG was significantly lower than that in the DMSO group or ¹³¹I group. Conclusions   ¹³¹I-17-AAG can effectively inhibit the growth of BEL-7402 tumor cells in vitro and in vivo. ¹³¹I-17-AAG is a promising agent for the treatment of BEL-7402 cell tumor.     

188Re—k—ras—AGPNA诱导胰腺癌细胞凋亡及在荷瘤裸鼠体内的生物分布

目的研究胰腺癌k-ras点突变基因的反基因肽核酸（AGPNA）生物活性和”。Re—k—ras—AGPNA诱导人胰腺癌细胞凋亡及在荷瘤裸鼠体内的生物分布。方法（1）用RT—PCR检测转染k—ras．AGPNA后胰腺癌细胞k-ras癌基因的mRNA表达水平。（2）用流式细胞仪检测转染后胰腺癌细胞的k-ras蛋白表达水平。（3）给予188Re-k-ras-AGPNA和188ReO4-3～5d后,用流式细胞仪检测胰腺癌细胞凋亡率。（4）58只荷人胰腺癌裸鼠分为188Re—k—ras—AGPNA和188ReO4-2组,采取瘤内注射给药方式,在不同时间点（2组分别为15min,1h,4h,1d,3d,5d,7d与15min,1h,2h,4h,24h）显像后处死裸鼠,计算各组织的％ID／g,并计算各组织的吸收剂量（mGy／MBq）。对数据行单因素方差分析。结果（1）转染1nmol／mlk-ras—AGPNA组细胞的k-ras突变基因mRNA的灰度比和k-ras蛋白表达率分别为1．00±0．39和（15．05±5．07）％,比未给药的肿瘤细胞对照组[分别为1．86±0．07和（24．38±5．40）％]低（F=2．545,5．329,P均〈0．05）。（2）给药后4,5d,188Re-k-ras-AGPNA组漂浮细胞的凋亡率分别为（26．30±7．45）％和（27．90±10．38）％,比188ReO4组[分别为（8．75±3．11）％和（16．87±5．85）％]高（F=9．376,P均〈0．05）。（3）瘤内注射188Re—k—ra8-AGPNA后1h和1,7d肿瘤内放射性摄取分别为（37．47＋21．31）、（35．96±7．80）和（15．46±4．93）％ID／g。肿瘤内吸收剂量为15569mGy／MBq。结论k-ras．AGPNA能抑制k-ras基因在mRNA和蛋白水平的表达。188Re—k—ra,s—AGPNA能诱导胰腺癌细胞凋亡且瘤内注射后肿瘤部位摄取高、滞留时间长。