^99Tc^m-TP5-3 microSPECT/CT探测乳腺癌化疗后细胞凋亡的实验研究

目的 合成新型凋亡显像剂^99Tc^m-半胱氨酸-膜联蛋白V（TP5-3）,研究其在小鼠体内生物分布和药代动力学特点,探讨^99Tc^m-TP5-3 microSPECT/CT检测乳腺癌单次化疗后肿瘤早期细胞凋亡的可行性.方法 以直接还原法对TP5-3进行^99Tc^m标记,HPLC检测产物的标记率;进行正常小鼠体内^99Tc^m-TP5-3的生物分布及药代动力学研究.建立荷MDA-MB-231人乳腺癌裸鼠模型,取10只分为2组,化疗组单次腹腔内注射紫杉醇（每只40 mg/kg）,对照组注射等体积生理盐水,48 h后由尾静脉注射37 MBq ^99Tc^m-TP5-3,进行microSPECT/CT图像采集,显像后立即处死、取材,比较2组肿瘤的放射性摄取（％ID/g）、T/NT（NT取肌肉）;采用流式细胞术和病理学检测肿瘤凋亡细胞.采用单因素方差分析、两样本t检验和直线相关分析数据.结果^99Tc^m-TP5-3标记率＞95％,室温放置4h放化纯仍保持在（96.0±1.5）％,稳定性好.正常小鼠注射显像剂后30 min肾脏放射性摄取最高[（8.48±1.07） ％ID/g],其他脏器分布较少;血液清除快,注射后4h血液放射性摄取[（2.07±0.35） ％ID/g]较注射后5 min[（13.74±4.21） ％ID/g]减少了85％（F=11.310,P＜0.05）;显像剂主要浓聚于肾、肝和胃,经肾脏排泄.化疗后99^Tc^m-TP5-3 microSPECT/CT显像示化疗组T/NT为4.21±0.06,对照组T/NT仅1.57±0.67（f=12.820,P＜0.05）;化疗后生物分布实验示,化疗组肿瘤放射性摄取明显高于对照组,分别为（4.82±0.54） ％ID/g和（1.44±0.38） ％ID/g（t=0.679,P＜0.05）.肿瘤放射性摄取与流式细胞仪测定的凋亡细胞百分比呈正相关（r=0.985,P＜0.05）.HE染色示化疗后肿瘤组织有大量凋亡细胞,而对照组仅有少量.结论 ^99Tc^m-TP5-3标记方法简单,生物分布理想,具备优良的药代动力学特性;^99Tc^m-TP5-3 microSPECT/CT可用于早期检测荷乳腺癌裸鼠模型化疗后的肿瘤细胞凋亡水平.     

^99Tc^m-精氨酸-谷氨酸-苏氨酸在荷人肺癌H1299裸鼠体内分布和显像

目的通过研究^99Tc^m-精氨酸-谷氨酸-苏氨酸（RET）在荷人肺癌H1299裸鼠体内的分布及显像,探讨其用于肺癌显像的可行性。方法采用^99Tc^m-直接法标记RET,再行^99Tc^m-RET与NSCLC细胞H1299的结合实验。荷人肺癌H1299裸鼠尾静脉注射^99Tc^m-RET后,行不同时间（15、30min,1、2．4、8、24、48h组各4只鼠）体内分布实验,分别测定组织放射性摄取（％ID／g）;另取荷瘤鼠3只,注射4．81MBq^99Tc^m-RET后于0．5、1、2、4．5、5、6h行γ显像。结果^99Tc^m-直接标记RET的标记率为（93．15±2．02）％,与H1299细胞的最高结合率为（3．56±0．37）％。荷瘤裸鼠尾静脉注射^99Tc^m-RET后4h肿瘤放射性摄取达（4．96±1．05）％ID／g,肝脏、脾脏有较多放射性摄取[（15．89±1．84）％ID／g和（10．83±1．66）％ID／g];而心脏和血液的放射性摄取较少,相应的T／NT分别为5．70±0．21和12．40±0．11。注射^99Tc^m-RET后4．5～6．0h肿瘤显影清晰。结论^99Tc^m-RET具有亲肺癌的特性,有可能成为一种亲肺癌显像剂。     

碘标记血清淀粉样P成分在动物模型中的体内分布及显像研究

目的探讨^131I标记的人血清淀粉样P成分（SAP）诊断淀粉样变性的价值。方法用Iodogen法对SAP标准品进行^131I标记,测定标记率与放化纯,观察标记物的稳定性;对实验组小鼠用质量分数10％酪蛋白（Casein）0．5ml每日皮下注射,连续21d,制作继发性淀粉样变性小鼠动物模型,对照组连续注射21d0．5ml生理盐水;2组小鼠各4只,经尾静脉注射200μl（7．4MBq）^131I—SAP,分别于1,3,6,24,48和72h进行显像。实验组、对照组小鼠各30只,经尾静脉注射100μl（555kBq）^131I-SAP后,分别于1,3,6,24,48和72h处死小鼠（每个时相实验组与对照组各5只）,取心、肺、肝、脾、肾、肌肉、主动脉、血液等组织,测定放射性计数。两组间比较采用单因素独立样本t检验。结果^131I-SAP的标记率为70．6％,经分离纯化后,放化纯为（95．5±3．4）％,且稳定性好;^131I—SAP在淀粉样变性小鼠肝、脾与肾中的放射性摄取明显高于对照组,实验组24h单位质量放射性计数肝／血、脾／血、肾／血比值分别为2．201±0．301,2．139±0．223,4．797±0．615,对照组分别为0．657±0．126,1．014±0．063,0．607±0．028,t值分别为10．747,11．626和15．135,P均〈0．01。48h二者差异仍具有统计学意义（t值分别为15．128,4．558,16．960,P均〈0．01）;72h2组除脾／血比值外,其余2个比值差异有统计学意义,对应t值为3．022（P〉0．05）,7．8011,6．442（P均〈0．01）。显像结果示,注药后24h实验组小鼠腹部放射性摄取增加,而对照组无明显摄取。结论SAP易于进行^131I标记,且标记物稳定性好;^131I-SAP可以特异性结合于淀粉样变性脏器,生物分布与显像结果一致,提示^131I—SAP可以作为特异性的显像剂无创诊断淀粉样变性。     

131I标记17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素的制备及生物分布

目的 建立131I标记17-丙烯胺基-17.去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)的方法,并观察其在动物体内的生物分布.方法 采用过氧化氢法对17-AAG进行131I标记.测定131I.17.AAG注射后0.5,1,4,8和24 h在ICR健康小鼠体内的生物分布,通过显像动态观察131I-17-AAG在兔Vχ2肝癌模型中的分布.结果 建立了131I过氧化氢法标记17-AAG的最佳条件,131I-17-AAG标记率达85.65%,纯化后其乙酸乙酯相、生理盐水水溶液和4℃下放置5 d的生理盐水水溶液的放化纯分别为(96.51±0.80)%,(95.57±0.09)%和(90.96±1.29)%.尾静脉注射131I-17-AAG,健康ICR小鼠胆囊的摄取(每克组织百分注射剂量率,%ID/g)在0.5 h达到峰值(3.0963±1.3394)%ID/g,胃和小肠的摄取均在4 h达到高峰,24 h时肠道放射性明显减少,肝、肾摄取较少.瘤体给药后于2 h和4,6,14 d进行显像,可见131I-17-AAG在兔肿瘤中持续浓聚,肿瘤/非肿瘤组织放射性(T/NT)比值分别为10.36,3.62,4.32和3.50,其他脏器未见显影.结论 成功建立了131I-17-AAG标记方法,标记物保留了17-AAG生物学活性,体外稳定性好.兔肝肿瘤间质给药提示131I-17-AAG对肿瘤具有理想靶向性作用.     

131I标记抗NRP-1单克隆抗体A6在荷瘤裸鼠体内分布和显像研究

目的制备131I标记的抗神经纤毛蛋白-1（NRP-1）单克隆抗体A6（131I-A6）,探讨其作为NRP-1靶向显像新型分子探针的可行性。方法（1）采用Iodogen法对A6进行131I标记,检测其标记率、放化纯和体外稳定性。（2）以人胶质瘤细胞株U87MG为实验细胞进行体外实验,测定131I—A6生物学活性、结合率及其与受体的亲和力。（3）将荷U87MG胶质瘤模型裸鼠采用随机抽样法分为5组,每组5只,分别于注射1．2MBq 131I-A6后24、48、72、96和120h处死,计算各脏器放射性摄取（％ID／g）、肿瘤／血液（T／B）和肿瘤／肌肉（T／M）比值。（4）取6只荷瘤裸鼠,以随机抽样法分为未阻断组和竞争阻断组,前组注射3．7MBq 131I-A6;后组注射3．7MBq 131I-A6和未标记的700仙gA6,均分别于注射后24、48、72、96和120h行SPECT／CT显像。采用两样本t检验对实验数据进行统计学分析。结果（1）131I—A6标记率为（95．46±3．34）％,放化纯〉95％;131I—A6在室温下PBS溶液中放置至96h,其放化纯仍〉85％。（2） 131I-A6与U87MG胶质瘤细胞特异性结合率1h达到最高值,为（15．80±1．30）％,在加入未标记的抗体A6时,U87MG细胞对131I-A6明显受抑制（t=2．862,P〈0．05）;与细胞表面抗原的亲和力（kd）为（1．67±0．14）nmol／L。（3）24h时131I—A6在荷瘤裸鼠血液放射性最高,为（8．00±1．42）％ID／g;其次是肝脏和肿瘤组织,分别为（7．68±1．56）和（6．00±1．24）％ID／g;脑、骨、肌肉组织放射性计数较低。给药后24h,T／B和T／M分别为0．78±0．10和3．20±0．30,随时间延长比值逐渐增高,在120h达到最高,分别为1．87±0．50和7．13±0．24。（4）体内显像示,注射 131I-A6后24h肿瘤略显影,随时间延长变清晰,120h显影为最清晰,阻断后未见肿瘤显影。结论 131I-A6的标记方法简单易行,标记率高,产物稳定性好,?     

^131I-Herceptin在荷人乳腺癌裸鼠模型中的生物分布及抗肿瘤活性研究

目的探讨^131I-Herceptin在荷人乳腺癌裸鼠模型中的生物分布及其对人表皮生长因子2（HER2）高表达乳腺癌的放射免疫治疗疗效。方法^131I-Herceptin采用Iodogen法制备。15只HER2高表达乳腺癌裸鼠模型分为3组：^131I-Herceptin组、Herceptin组与空白对照组,每组5只。以肌肉为参照,注射后第3,6,9天显像观察肿瘤等组织的放射性摄取并计算肿瘤／肌肉（T／M）比值。注射后1～9d,测量肿瘤大小并计算肿瘤抑制率。第9天处死裸鼠,剥离肿瘤,计算肿瘤的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）值并以Western—Blot法、反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测肿瘤组织HER2及癌胚抗原（CEA）蛋白及基因表达水平的变化。肿瘤T／M比值与其他脏器的差别、HER2及CEA基因表达水平、蛋白表达水平在各治疗组间的差异采用One—way ANOVA检验;^131I-Herceptin组和Herceptin组肿瘤抑制率的差异采用t检验。结果^131I-Herceptin的放化纯为94％,比活度约为37kBq／μg,在注射后第9天,T／M比值达4．11,显著高于其他组织（F=12．370,P〈0．05）;肿瘤摄取分数为（16．1±1．7）％ID／g,高于其他组织、器官（F=166．150,P〈0．01）。至治疗后9d,^131I-Herceptin组抑瘤率显著高于Herceptin组[（42．0±6．9）％与（23．2±3．8）％,t=5．321,P〈0．001]。^131I-Herceptin组HER2蛋白表达（0．435±0．087与0．557±0．043,t=2．811,P〈0．05）与基因表达（0．256±0．073与0．350±0．029,t=2．678,P〈0．05）均显著低于Herceptin组。^131I-Herceptin组CEA蛋白表达（0．537±0．048与0．607±0．029,t=2．800,P〈0．05）与基因表达（0．362±0．048与0．607±0．079,t=5．932,P〈0．001）均显著低于Herceptin组。结论^131I-Herceptin对HER2高表达的乳腺癌具有很高的靶向特性,能比Herceptin更有效地抑制乳腺癌细胞分裂、增殖、分化、存活,控制肿瘤生长。     

^99Tc^m标记RGD环肽在荷肺腺癌裸鼠中的显像研究

目的制备^99Tc^m标记的含RGD序列的^99Tc^m-联肼尼克酰胺（HYNIC）-c（RGDfK）环肽单体,评价其在整合素表达阳性的肺腺癌严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠肿瘤模型中的生物学分布,并进行显像研究。方法（1）以HYNIC为双功能螯合剂,以三羟甲基甘氨酸（tricine）和乙二胺二乙酸为协同配体,采用二步法制备^99Tc^m标记HYNIC—c（RGDfK）,进行细胞结合实验,测定标记物生物学活性;（2）将荷A549肺腺癌模型小鼠分为7组[第7组作为竞争性抑制组,注射显像剂前0．5h先注射HYNIC-c（CRDGfk）100μg],每组5只,经尾静脉注射7．4MBq的^99Tc^m-HYNIC-c（RGDfK）,于注射后0．5,1,2,4,8,12h处死,计算荷A549肺腺癌小鼠模型各脏器％ID／g,同时采用ROI技术研究^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）在小鼠体内的生物学分布,计算不同时间点的T／NT比值（NT选取肌肉）;（3）取6只荷瘤裸鼠,其中3只为竞争性抑制组,经尾静脉注射7．4MBq的^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）,于注射后0．5,1,2,4,8,12h进行静态1显像。结果^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）的标记率〉90％,放化纯〉95％。^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）与A549肺腺癌细胞特异性结合率最高为36．14％,体内分布实验显示^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）在肾的摄取率始终高于20％ID／g,注射后0．5h肿瘤％ID／g为10．52±1．48,8h为17．26±2．81,12h为8．93±0．90,竞争性抑制组注射后0．5h为2．29±0．85。通过ROI技术测得T／NT在8h达6．87。注射后1h肿瘤可显影,4～8h显影更清晰。结论^99Tc^m标记HYNIC—c（RGDfK）易于制备,具有良好的靶向性。     

^99Tc^m—hTERT mRNA反义分子探针荷MCF-7乳腺癌裸鼠显像

目的制备^99Tc^m-人端粒酶催化亚单位（hTERT）mRNA反义寡核苷酸（ASON）显像分子探针并验证其在荷MCF-7乳腺癌裸鼠早期诊断中的价值。方法采用双功能螯合剂法制备^99Tc^m-hTERT mRNA无义寡核苷酸（SON）、ASON探针。建立荷MCF-7乳腺癌裸鼠模型,运用阳离子脂质体介导法进行活体显像。采用SPSS12．0软件进行单因素方差分析。结果^99Tc^m-hTERT mRNA ASON标记率达到（76±5）％,放化纯〉96％,比活度达到1850kBq／μg。室温放置和健康人血清孵育24h后的放化纯均〉93％。SON与ASON的标记率基本一致。注射后4h反义组荷瘤裸鼠右上肢接种肿瘤部位可见放射性摄取,6～8h后显影清晰;无义组始终未见肿瘤部位放射性浓聚。反义组有和无脂质体介导的肿瘤／非肿瘤组织放射性（T／NT）比值分别为8．02±0．03和7．55±0．12,差异无统计学意义（t=-1．99,P〉0．05）;无义组有和无脂质体介导的T／NT比值分别为1．23±0．06和1．33±0．15,差异无统计学意义（t=0．42,P〉0．05）。但是分别比较反义组与无义组、脂质体介导组与无介导组间差异均有统计学意义（t=26．30和28．71,P均〈0．001）。结论^99Tc^m-hTERT mRNA ASON在荷瘤裸鼠活体内可与高表达hTERT基因的人乳腺癌MCF－7肿瘤组织特异靶向结合,在肿瘤分子功能显像中具有潜在应用价值。     

131I-angiostatin 在荷瘤小鼠体内的分布及放射受体显像

本实验研究^131I-angiostatin在荷Lewis肺癌C-57小鼠体内的分布，并进行放射笥受体显像，为临床应用提供依据。Aangiostatin用氯胺-T法行^131I标记后，尾静脉注入荷肺癌C-57小鼠体内，24、48、96、144H后进行放射受体显像，并于48、96、144h分批处死实验小鼠，测定心脏等11种脏器和肿瘤组织的单位重量放射性比值（T/NT），各组织摄取百分数（%ID/g）。结果发现，^131I-angiostatin尾静脉注射后，48h内以全身分布为主，96h后肿瘤部位显像，并呈高度特异性浓集，γ显像结果与体内分结果一致，SPECT图像质量与与T/NT值有关。本研究证实^131I-angiostatin可以待异地与肺癌组织内血管内皮细胞上的受体结合，具有导向肺癌组织的作用。     

188Re-DTPA-DG的制备和荷瘤裸鼠实验研究

目的建立^188Re标记DTPA-脱氧葡萄糖（DG）的方法，观察其在荷瘤裸鼠体内分布和治疗效果。方法DTPA—DG的^188Re标记体系有氯化亚锡、葡萄糖酸钠，pH值5．5，反应体系温度为37％，反应3h，用纸层析法以生理盐水和丙酮作展开剂，测定标记物的放化纯及其在体外的稳定性。将标记物经荷乳腺癌MCF-7裸鼠尾静脉注射，于注射后1，4，8，12，24h显像。经尾静脉注射0．1ml 92．5GBq／L的^188Re—DTPA—DG，21d后观察疗效。结果^188Re—DTPA—DG的放化纯可达到95．0％。^188Re—DTPA—DG荷瘤裸鼠显像示肿瘤组织摄取高，病灶／健侧后肢对应部位放射性计数（T／NT）比值在12和24h分别为5．9和7．8。^188Re-DTPA-DG组裸鼠治疗21d后肿瘤体积[（823．6±50．58）mm^3]明显比生理盐水组[（1162．7±73．08）mm^3]小，2组间差异有统计学意义（P〈0．01），抑瘤率为29．2％。结论^188Re—DTPA—DG经荷瘤裸鼠尾静脉注射后可被肿瘤组织高选择性摄取，其对肿瘤生长抑制作用明显，可能成为肿瘤内照射治疗药物。     

131I-抗ProGRP（31-98）单克隆抗体E-B5放射免疫显像及放射免疫治疗实验研究

目的了解131I标记的胃泌素释放肽前体（ProGRP）单克隆抗体E-B5在荷小细胞肺癌裸鼠的体内分布及放射免疫显像情况,观察131I—E—B5对荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法（1）分别建立荷小细胞肺癌、荷肺腺癌及荷大肠癌裸鼠模型。（2）自荷小细胞肺癌裸鼠尾静脉注射131I—E-B5后1,12,24,48,72和96h处死裸鼠并取各主要脏器组织,计算各时间点的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）和肿瘤／非肿瘤放射性（T／NT）比值。（3）分别对荷小细胞肺癌、荷肺腺癌和荷大肠癌裸鼠模型进行131I—E—B5放射免疫显像,观察移植瘤的显影情况,并计算移植瘤体／对侧相同部位的放射性（T／B）比值。（4）以未经任何治疗处理组为对照,采用瘤内注射法观察比较3．7,7．4,14．8和22．2MBq131I-E—B5和Na131I对荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用。采用SPSS13．0软件处理数据,行两样本均数t检验。结果（1）体内分布研究示：注射后72h,荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤体的放射性摄取达到最高值,为（14．1±2．9）％ID／g,高于其他脏器及组织（t=4．11～8．58,P均〈0．05）,瘤体与各脏器组织的T／NT比值随时间延长而逐渐升高,72h时瘤体与肌肉组织的T／NT比值高达4．67±0．66。（2）放射免疫显像发现：注射131I—E—B5后24h荷小细胞肺癌裸鼠移植瘤部位放射性明显聚集,随时间延长放射性浓聚程度逐渐增强,72至96h时最为清晰。荷肺腺癌裸鼠移植瘤局部无明显的放射性浓聚。荷大肠癌裸鼠移植瘤模型显像结果与荷小细胞肺癌裸鼠模型显像结果类似,但其T／B比值低于荷小细胞肺癌裸鼠模型（t=4．29,P〈0．01）。注射后72h,荷小细胞肺癌、荷大肠癌及荷肺腺癌裸鼠的T／B比值分别为5．27±0．97,2．28±0．72和1．26±0．65。（3）131I—E-B5对荷小细胞肺癌移植瘤的生长抑制作用明显大于Na131I（t=2．88～17．77,P均〈0．05）。结论131I—E—B5对小细胞肺癌有较好的靶向作用,可以抑制小细胞肺癌移植的生长并破坏肿瘤组织,有望成为一种较为理想的小细胞肺癌放射免疫显像及放射免疫治疗药物,值得进一步深入研究。     

99Tcm-Annexin Ⅴ衍生物的制备及其生物分布和凋亡显像

目的 探讨^99Tc^m直接标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白V（Annexin V）衍生物的可行性，研究其在健康小鼠体内的分布和肺癌裸鼠模型凋亡显像。方法 直接标记法制备^99Tc^m-Annexin V衍生物，并测产物放化纯、胶体含量及健康小鼠体内不同时间点（5，30min和1，2,4，6，12，24h）的生物分布，DAS2．0软件拟合计算药代动力学参数。建立荷H460非小细胞肺癌裸鼠模型，分为紫杉醇诱导化疗组（5只）和未治疗对照组（5只）。紫杉醇诱导化疗后48h，于裸鼠尾静脉注射^99Tc^mAnnexinV衍生物18．5MBq，2和4h时进行凋亡显像，勾画ROI并计算肿瘤与对侧正常组织（T／NT）放射性比值。结果放化纯达（98．01±1．67）％，3h后放化纯仍可达（95．45±1．34）％，胶体含量为（3．31±1．37）％。健康小鼠体内分布实验表明肾脏对该示踪剂摄取最高，肝、脾摄取较少。DAS2．0软件拟合得到时间-放射性曲线符合二室模型特征，分布相半衰期（T1/2α）为（21．18±5．95）min，清除相半衰期（T1/2β）为（69．32±0．10）min。荷瘤鼠显像示，给药后2h即可获得清晰的图像，紫杉醇诱导化疗组2和4h的T／NT比值为3．85±1．10和4．63±0．97，明显高于对照组（1．60±0．29和1．71±0．43，P〈0．01）。结论 该AnnexinV衍生物易于^99Tc^m直接标记，方法简便，标记物在血液中清除迅速，肝、脾摄取少，易得到高清晰图像。     

^68Ga—DOTA—cNGR的制备及对荷肺腺癌裸鼠的显像研究

目的制备^68Ga-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸-环状NGR（DOTA-cNGR）,并评价其在正常小鼠体内的生物分布及对荷肺腺癌裸鼠的靶向显像能力。方法以羟乙基哌嗪乙硫磺酸（HEPES）为缓冲体系（pH值5．0）,水浴合成^68Ga—DOTA—cNGR,HPLC测定标记率及放化纯,观察其在人血清中的稳定性。进行^68Ga—DOTA—cNGR的正常小鼠体内生物分布和荷肺腺癌裸鼠活体microPET显像,对荷肺腺癌裸鼠的瘤组织进行病理及氨肽酶N（APN）的免疫组织化学分析。采用两样本t检验分析数据。结果^68Ga—DOTA—cNGR标记率为（99．8±0．1）％,性状稳定,在人血清中37℃保温2h后放化纯仍〉95％。正常小鼠体内生物分布结果表明,^68Ga—DOTA-cNGR主要经肾排泄,血液清除迅速,肝、胃肠道摄取较少;1h肾、血液、肝、胃、肠的放射性摄取分别为（1．61±0．22）、（0．19±0．07）、（0．25±0．24）、（0．16±0．04）、（0．12±0．05）％ID／g。荷肺腺癌裸鼠microPET显像可见肿瘤部位有放射性浓聚影,1h肿瘤与对侧正常肌肉T／NT高达7．61±0．47,经DOTA—cNGR特异性阻断后降至1．83±0．25,阻断前后差异有统计学意义（t=18．80,P〈0．05）。免疫组织化学检查证实APN特异性聚集于肿瘤新生血管表面。结论^68Ga-DOTA—cNGR易于制备,标记率和放化纯高,在人血清中的稳定性好,具有良好的代谢及肺腺瘤靶向特性,有望用于肺癌显像。     

131I-Herceptin在昆明小鼠及荷人卵巢癌裸鼠模型中的生物分布和显像

目的 研究131 I标记抗人表皮生长因子受体-2蛋白（HER-2/neu）单克隆抗体Herceptin在正常昆明小鼠和荷人卵巢癌裸鼠体内的生物分布及荷人卵巢癌裸鼠的放射免疫显像特点.方法 （1）Iodogen法131I标记Herceptin,测定其标记率、放化纯、稳定性及免疫活性.（2）流式细胞仪和免疫组织化学法分别检测人卵巢癌SKOV-3、HO-8910细胞株及瘤组织HER-2/neu表达情况.（3）计算131I-Herceptin经昆明小鼠尾静脉注射后5,15,30 min和1,2,4,12,24,48,72 h及荷瘤裸鼠尾静脉注射后4,12,24和48h的每克组织百分注射剂量率（%ID/g）和肿瘤/非肿瘤组织放射性（T/NT）比值.（4）行131I-Herceptin荷卵巢癌裸鼠模型显像,观察注射后1,2,4,8,12,24,48,72,96和120h显像情况并确定最佳显像时间.结果 （1）131I-Herceptin标记率为89.8%,放化纯为98.4%,24 h后仍大于80%,标记物免疫活性较好.（2）SKOV-3细胞株HER-2/neu高表达,表达率92.67% 而HO-8910细胞株表达很低,表达率仅9.59%.（3）131I-Herceptin在昆明小鼠体内主要经肝、脾及肾代谢,血液快相半排期为0.27 h,慢相半排期为51.96h.在荷人SKOV-3移植瘤部位,24 h时放射性摄取值达到18.08%ID/g,显著高于其他脏器组织 T/NT比值随时间延长逐渐增高,72 h时肿瘤/脑放射性比值高达27.27.（4）SKOV-3荷瘤裸鼠在尾静脉注射131I-Herceptin后2 h即可见移植瘤放射性浓聚,48 h后与周围组织对比更为明显,至120 h时仍见移植瘤部位放射性明显浓聚,与对侧感兴趣区比值高达11.44.而HO-8910荷瘤裸鼠各时间点移植瘤几乎未见放射性浓聚.结论 131I-Herceptin对荷人SKOV-3移植瘤具有良好的靶向作用,有望用于高表达HER-2/neu的人卵巢癌患者放射免疫显像及其复发转移灶的靶向治疗.     

99Tcm-His10-Annexin Ⅴ探测非小细胞肺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨99Tcm标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白Ⅴ(His10-Annexin Ⅴ)探测荷非小细胞肺癌(NSCLC)裸小鼠模型化疗后肿瘤细胞凋亡的可行性.方法 用99Tcm直接标记His10-Annexin Ⅴ.荷H460 NSCLC肿瘤裸小鼠模型20只,按体表面积以100 mg/m2剂量紫杉醇化疗诱导,分成未治疗(对照)、化疗诱导后24,48,72 h共4组.99Tcm-His10-Annexin Ⅴ显像探测化疗前后肿瘤组织细胞凋亡,计算肿瘤/对侧正常肌肉组织放射性比值(T/NT),测定每克组织百分注射剂量率(%ID/g).以99Tcm-IgG显像为对照,确定肿瘤的非特异性摄取.用流式细胞术(FCM)测定肿瘤组织活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3),光学显微镜HE及原位末端标记法(TUNEL)染色测定凋亡指数.采用SPSS 12.0软件进行统计学处理,运用单因素方差分析和直线相关分析(Pearson).结果 99Tcm-His10-Annexin V放化纯为(98.01±1.67)%.注射99Tcm-His10-Annexin V后2 h即可得到清晰图像,化疗诱导组肿瘤部位可见明显的放射性浓聚,化疗后24,48,72 h组的T/NT值分别为2.63±0.76,3.41±0.90,3.85±0.62;对照组T/NT值为1.42±0.19,F值分别为12.064,23.322,70.177,P均<0.01.未治疗组肿瘤仅有少量放射性摄取,为(1.09±0.18)%ID/g,化疗后肿瘤摄取明显增加,24,48,72 h肿瘤摄取分别为(2.55±0.73)、(3.60±1.09)、(3.73±0.97)%ID/g,明显高于未治疗组(F值分别为18.733,20.624,35.626,P均<0.01).99Tcm-IgG显像化疗组及对照组肿瘤均未见明显放射性浓聚.未治疗组活化Caspase-3为(3.70±0.74)%,化疗后24,48,72 h分别为(23.46±2.23)%、(62.85±6.13)%、(70.44±6.09)%,3个化疗诱导组和未治疗组相比差异均有统计学意义(F值分别为354.610,459.438,591.052,P均<0.01).光学显微镜HE及TUNEL染色法发现,未治疗组细胞凋亡指数为(3.31±0.61)%,化疗后24,48,72 h细胞凋亡指数分别为(32.90±6.64)%、<70.42±7.54)%、(83.23±9.71)%,化疗诱导组与对照组细胞凋亡指数差异均有统计学意义(F值分别为98.627,393.215,337.386,P均<0.01).T/NT值、肿瘤组织放射性摄取与活化Caspase-3及细胞凋亡指数均有很好的相关性(r=0.847,0.833,0.774,0.850,P均<0.01).结论 99Tcm-His10-Annexin V显像可早期探测NSCLC化疗后细胞凋亡,进而早期预测和评价肿瘤治疗疗效.     

外照射后肿瘤摄取99Tcm-MIBI与其死亡和增殖的关系

目的 探讨^99Tc^m－甲氧基异丁基异腈（MIBI）显像监测肿瘤放疗后细胞活力变化的可行性。方法 105只荷Ehrlich癌的雌性昆明小鼠按不同剂量（0、5、10、15、20Gy）行^60Co单次照射，并于照射前6h及照射后24、72和144h分别进行①^99Tc^m－MIBI显像及测量肿瘤组织放射性计数，计算肿瘤微分摄取率（DUR）及肿瘤与对侧正常组织的放射性比值（T／NT）；②测定肿瘤凋亡指数（AI）、肿瘤坏死面积百分比（PNA）和增殖细胞核抗原（PCNA）免疫组化染色积分吸光度（PCNA－IA）结果 照射后DUR、T／NT随剂量、时间的增加而逐渐减少。24h DUR、T／NT分别与增高的AI、PNA呈负相关，与减低的PCNA－IA呈正相关，r分别为－0．849、－0．829；－0．883、－0．855；0．789、0．742（n =33,P＜0．01）。     

99Tcm标记双半胱氨酸-脱氧葡萄糖的小鼠实验研究

目的研究^99Tc^m标记双半胱氨酸一脱氧葡萄糖(EGDG)在正常小鼠及荷S180肉瘤小鼠体内的分布规律。方法正常小鼠及荷S180肉瘤小鼠各铝只，分8组，实验前禁食。尾静脉注射^99Tc^m-EC-DG后计算不同时间在小鼠体内的分布及肿瘤与血液、肌肉、肺、肝的放射性比值。同时，取荷瘤小鼠5只，在注射后不同时间进行显像，计算T／NT比值。结果肿瘤组织与血液、肌肉、肺的放射性比值随时间延长逐渐上升，在4h都超过1．0。显像示随时间延长瘤体周围组织放射性逐渐下降，瘤体在4h时显影清晰。结论^99Tc^m-EC-DG可用于肿瘤的葡萄糖代谢显像。     

^131I标记人源抗HBs Fab瘤内注射荷人肝癌裸鼠的实验研究

目的： 探讨^131I标记人源抗肝表面抗原单克隆抗体Fab片段（抗HBs Fab)瘤内给药治疗荷人肝癌裸鼠移植瘤的合理性。方法 荷瘤裸鼠分为5组,分别经瘤内注射^131I-抗HBs Fab,^131I-无关Fab,^131I,PBS及腹腔注射^131I-抗HBs Fab。5d后每组各取2只作组织分布测定,其余观察3周,计算各组肿瘤生长抑制率。结果 瘤内注射^131I-抗HBs Fab组放射性计数瘤／肝比值是腹腔注射组的9倍,3周后前者肿瘤生长抑制率高于后者,分别为62．3％和46．7％。结论 采用瘤内注射^131I标记人源抗HBs Fab导向治疗肝癌,具有低毒高效的治疗作用,临床实用价值大。     

大肠癌荷瘤鼠放免显像SA-gal促清除作用的实验研究

目的 研究半乳糖化链霉亲和素（SA-gal)在大肠癌预定位放免显像中对血中^131I标记生物素化单抗（^131I-Bt-McAb)的“促清除”作用。方法 从荷瘤鼠的尾静脉内注射^131I-Bt-McAb,预定位于肿瘤靶位,24h后给予SA－gal促清除,0．5h和6h后分别进行体内分布测定和显像;对照组未给予SA－gal。结果 给予SA－gal促清除后,血液本底水平明显降低,促清除前、促清除0．5h和6h的肿瘤／血比值分别为0．32、1．44、5．23,促清除6h的肿瘤/血比值明显高于单纯给予^131I-Bt-McAb和30h值（对照2组肿瘤／血比值为0．14）,且肿瘤显像清晰。SA-gal促清除0.5h,在血中放射性水平明显降低的同时,肝内放射性水平明显增高。结论 SA－gal是一种良好的促清除剂,用于大肠癌预定位放免显像能使肿瘤／非肿瘤比值明显增高。     

Aβ斑块显像剂11C-苯并呋喃衍生物的研究

目的合成新的^11C标记小分子苯并呋喃衍生物并研究其生物学性质。方法合成前体5-溴2-（4-胺基苯）苯并呋喃，用改良的^11CH3I法标记，生成5-溴-2-（4-N-^11C-甲胺基苯）-苯并呋喃，以柱色层法测标记率。正常小鼠尾静脉注射5-溴-2-（4-N-^11C-甲胺基苯）-苯并呋喃后不同时间处死，测每克组织百分注射剂量率（％ID／g）。结果改良^11CH，I法标记率为45％，放化纯大于95％。小鼠尾静脉注射药物后，放射性主要分布于肝和肾内，药物能迅速被脑摄取，2min达到3．2％ID／g，正常脑对其清除快于对碘的取代物，2与30min放射性摄取比值为1．34。结论^11C标记小分子溴取代苯并呋喃衍生物，可作为β-淀粉样蛋白（Aβ）显像剂，其生物学性质明显优于碘的取代物。