NF-κB在大鼠颅脑损伤后表达水平与细胞凋亡的关系

目的 探讨颅脑损伤后不同阶段NF-κB及其下游炎症因子与神经元凋亡的共变关系及可能的机制. 方法采用随机数字表法将大鼠分为颅脑损伤组、颅脑损伤+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组和假手术对照组,并在处理后6,24,168 h分别用免疫组化、RT-PCR、TUNEL法测定脑组织NF-κB、TNF-α和神经元凋亡水平. 结果在颅脑损伤后急性、亚急性期,颅脑损伤组损伤灶周围脑组织中NF-κB、TNF-α较假手术对照组和PDTC组表达明显增高,与神经元凋亡指数呈正相关;在颅脑损伤晚期颅脑拟伤组损伤灶周围脑组织中NF-κB、TNF-α表达有所下降,但仍高于假手术对照组和PDTC组,与神经元凋亡指数呈负相关. 结论 NF-κB和下游炎症因子可能在颅脑损伤后急性、亚急性期有促进神经元凋亡作用,在慢性期有抑制神经元凋亡作用.     

转录因子NF-κB在肝纤维化中的作用

核因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)是近年来研究极为广泛的转录调控因子,作为一种转录刺激因子,最初是在1986年由Sen和Baltimore首先报道的.NF-κB可因一些细胞因子、氧化剂、蛋白激酶、脂多糖等的刺激而激活,而活化的NF-κB又可诱导细胞因子、趋化因子、免疫因子受体和转录因子等多种物质的表达,在炎症反应、肿瘤及血液性疾病的病理生理过程中发挥重要作用[1].目前对NF-κB在肝纤维化中的作用报道较少,为此,笔者就转录因子NF-κB在肝纤维化形成过程中的相关作用作一综述.     

NF-κB在脑损伤后脑损害和脑保护中的双重作用

核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在炎性及免疫反应中起着重要的作用,创伤性脑损伤后NF-κ表达已在实验动物及临床观察中得到肯定,但对伤后NF-κB的作用仍存在不同的争议.NF-κB活化的机制目前仍不十分清楚.笔者就近年来创伤性脑损伤后NF-κB的研究进行如下综述,着重阐明脑损伤后NF-κB活化的变化机制及其双重作用性.     

大鼠外伤性白内障晶体上皮细胞NF-κB mRNA表达的实验研究

目的 观察大鼠外伤性白内障形成过程中晶体上皮细胞NF-κB mRNA的表达,探讨NF-κB mRNA在外伤性白内障发病过程中的作用。方法 以大鼠晶体穿通伤建立外伤性白内障模型,用原位杂交方法检测晶体上皮细胞中NF-κB mRNA的表达,并进行相关的统计分析。结果 晶体损伤后3小时NF-κB mRNA的表达开始增强,24小时达到高峰,随后逐渐下降。结论 晶体损伤后晶体上皮细胞NF-κB mRNA的表达参与了外伤性白内障形成的病理环节。     

核因子κB降低小鼠胚胎成纤维细胞中Lmp2基因转录

目的 研究在小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)中,核因子κB(NF-κB)对Lmp2基因转录的影响.方法 利用NF-κB荧光素酶报告基因检测MEF和c-abl/arg缺失株(DKO)中内源性NF-κB活性;构建包含Lmp2启动子序列和NF-κB结合序列突变体的荧光素酶报告基因,通过双荧光素酶报告系统,研究NF-κB对Lmp2启动子转录活性的调控,并应用定量PCR、Western印迹比较Lmp2基因在MEF和DKO细胞中表达水平.结果 DKO细胞中内源性NF-κB活性上调;DKO细胞中Lmp2基因启动子的转录活性发生下调,并且NF-κB结合序列突变后,其转录活性升高;定量PCR和Western印迹结果表明,DKO细胞中Lmp2基因mRNA和蛋白表达水平比较MEF细胞均发生下调.结论 MEF中内源性NF-κB可负调控Lmp2基因转录,并降低其蛋白表达水平.     

海水浸泡对大鼠小肠组织NF-κB,IκBα表达的影响

目的 观察海水浸泡并创伤大鼠小肠NF-κB,IκBα达的变化规律.方法 Wistar大鼠91只,随机分为3组:空白对照组7只,创伤组42只,海水浸泡并创伤组42只.创伤组采用腹部开放伤模型,海水浸泡并创伤组在腹部开放伤的基础上海水浸泡1 h.采用Western blotting方法测定3组小肠组织NF-κB,IκBα达量并进行统计分析和组间比较.结果 与创伤组相比,海水浸泡并创伤组伤后3 h小肠组织NF-κB的表达即出现明显增高,并一直持续到72 h(P<0.05),创伤组似较空白组略有降低,但差异无统计学意义(P>0.05);IκBα变化规律与NF-κB相反.结论 IκBα速而且持续地参与了海水浸泡并创伤大鼠的炎症反应过程,海水浸泡并创伤组大鼠伤情严重,损伤因素持续存在.在相当长一段时间内NF-κB负反馈机制并未得到建立.     

NF-κB和Stat3信号途径在胃癌组织和细胞系中的活化

目的研究NF-κB和Stat3信号通路在胃癌组织中的活化状态及其与胃癌发生、发展的关系。方法应用免疫组化、RT-PCR和W estern蛋白印迹等方法,在胃癌组织和细胞系中检测NF-κB和Stat3的活化状态。结果NF-κB和Stat3在胃癌组织中的表达明显高于癌前病变组织(P<0.01);并在胃癌细胞系中处于活化状态。结论NF-κB和Stat3信号通路在胃癌组织中呈活化状态,与胃癌发生、发展密切相关。     

转染金属蛋白酶抑制剂2基因对损伤血管平滑肌细胞核因子—κB和蛋白激酶C的影响

目的探讨血管平滑肌细胞(VSMC)损伤后金属蛋白酶(MMPs)和蛋白激酶C(PKC)、核因子-κB(NF-κB)表达的变化.方法采用脂质体对VSMC转染金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)基因进行基因转染,并用Western blot加以鉴定,分别用酶谱分析法、凝胶电泳迁移率分析技术(EMSA)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学检测该细胞克隆MMPs、NF-κB的活性变化和PKCα mRNA、蛋白的表达水平.结果体外损伤的VSMC金属蛋白酶显著增加.PKCα、NF-κB在正常VSMC中很少表达,但在损伤的VSMC中这种表达非常显著,对兔VSMC进行lIMP-2转染后,损伤的VSMC MMP-2,9活性受抑制,并且PKCα、NF-κB的表达下调(P＜0.05).结论PKCα和NF-κB在MMPs合成及损伤VSMC迁移中有重要价值,TIMP-2能通过抑制平滑肌细胞PKCα、NF-κB信号途径来防止血管再狭窄.     

抑制NF-κB激活的策略

NF-κB是一个广泛存在于哺乳动物细胞中的转录因子。它可以参与机体的炎症反应、免疫反应、细胞分化与凋亡及其他应激反应。NF-κB启动基因的表达涉及到IKK的激活、IκB磷酸化和泛素化、IκB裂解、NF-κB向核内的迁移、NF-κB与DNA的结合等过程。NF-κB的过度激活会引起一系列的疾病，如哮喘、类风湿性关节炎、肠炎等，利用药物或通过转基因方法来抑制以NF-κB为核心的信号转导途径可能会成为防治某些疾病的途径。     

当归对小鼠放射性肺损伤中NF-κB的影响

目的 研究小鼠放射性肺损伤中NF-κB活性的变化趋势,并探究当归对其干预及防治肺损伤的作用。方法 实验小鼠分为生理盐水对照组、当归对照组、单纯照射组和当归干预组4组,于1、24、72 h、1、2、4、8、16和24周9个时间点分别取肺组织检测。用HE和Masson染色评价组织病理变化和纤维化;用免疫组化判断NF-κB P65蛋白的定位和相对含量;用TransAM^TM ELISA方法测定NF-κB活性。结果 小鼠模型的组织病理符合经典改变,4周起出现较明显间质性肺炎,8周最严重, 16周开始肺间质内胶原纤维沉积并渐加重。NF-κB活性在照射后24 h和8周呈现出双相的高峰。预防应用当归后,各时间点当归干预组肺组织的病理改变较同时间点单纯照射组明显要轻,"潜伏期"延长。结论 在小鼠放射性肺损伤发展进程中,NF-κB活性呈现双相的升高,预防应用当归能下调这种升高并表现出明显的改善作用。     

当归对放射性肺损伤中NF-κB的影响

目的 研究放射性肺损伤中NF-κB活性的变化趋势,并探究当归对其干预及防治肺损伤的作用。方法 实验动物随机分为生理盐水对照组、当归对照组、单纯照射组和当归干预组4组,于1、24、72 h、1、2、4、8、16和24周9个时间点分别取肺组织检测。用HE和Masson染色评价组织病理变化和纤维化;用免疫组化判断NF-κB P65蛋白的定位和相对含量;用TransAM^TM ELISA方法测定NF-κB活性。结果 动物模型的组织病理符合经典改变,4周起出现较明显间质性肺炎,8周最严重, 16周开始肺间质内胶原纤维沉积并渐加重。NF-κB活性在照射后24 h和8周呈现出双相的高峰。预防应用当归后,各时间点当归干预组肺组织的病理改变较同时间点单纯照射组明显要轻,"潜伏期"延长。结论 在放射性肺损伤发展进程中,NF-κB活性呈现双相的升高,预防应用当归能下调这种升高并表现出明显的改善作用。     

大鼠放射性脑损伤模型中核转录因子-κB表达的动态变化规律

目的 探讨放射性脑损伤发生过程中核转录因子-κB(NF-κB)的表达变化。方法 健康SD大鼠82只,按随机数字表法分为健康对照组(32只,给予相同的麻醉但不照射)和照射组(50只,单次全脑照射20 Gy建立放射性脑损伤模型),分别于照射后1、3、7、14、28 d处死,断头取脑。通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应(QRT-PCR)检测NF-κB mRNA表达变化,用ELISA及Western blot检测NF-κB蛋白质表达情况,免疫组织化学染色观察NF-κB蛋白在海马区域的定位表达情况。结果 照射组NF-κB mRNA水平在照后开始升高,第3天达到表达高峰,其中第3、7天表达量与健康对照组相比,差异有统计学意义(t=37.79、35.30,P<0.05)。NF-κB蛋白的表达在照后第1天即达最高峰,随后开始逐渐下降,至照后第28天恢复正常水平。ELISA结果显示,与健康对照组相比,受照后第1、3、7、14天蛋白表达差异有统计学意义(t=30.94、14.87、27.17、13.27,P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,在受照后第1、3、7天海马区域的NF-κB染色强度增强,阳性表达细胞数量增多,与健康对照组相比,差异有统计学意义(t=-8.49、-4.47、-3.46,P<0.05)。结论 NF-κB的基因及蛋白水平表达趋势均先升高后降低,促进了放射性脑损伤的发生发展。     

模拟失重对大鼠肺组织NF-κB表达的影响

目的研究模拟失重条件下健康大鼠肺组织中核因子-κB（NF-κB）的表达变化及其意义。方法采用尾悬吊模拟失重大鼠模型，分为悬吊7天、21天组及相应对照组，每组10只健康雄性Wistar大鼠。免疫组织化学法检测肺组织中NF-κB的表达水平。结果悬吊7天及21天组大鼠肺组织NF-κB表达水平与相应对照组比较均显著升高（P〈0．01，P〈0．05）。悬吊21天组大鼠肺组织中NF-κB表达水平较悬吊7天组减弱（P〈0．05）。结论尾悬吊模拟失重大鼠肺组织NF-κB表达水平明显上调，考虑与肺组织损伤有关。     

沿海地区冠心病患者冠状动脉病变与核因子κB蛋白表达的相关性分析

目的 通过分析核因子-κB（nucler factor-κB,NF-κB）蛋白表达与冠状动脉病变程度的相关性,了解NF-κB与冠状动脉病变的关系。方法 收集2009年1月至2010年12月沿海地区行冠状动脉旁路移植术患者62例作为研究组,应用改良的Gensini冠状动脉病变积分方法和冠脉病变支数评价冠状动脉病变程度。所有患者均于冠状动脉旁路移植术中取一块升主动脉壁全层组织,行免疫组织化学检测NF-κB蛋白表达;选取40例肾脏移植供体者的正常腹主动脉壁组织作为对照组,同样行免疫组织化学测定NF-κB蛋白表达。结果 研究组标本均可见NF-κB在细胞核中的表达,表达量为(42.20+2.75)％,对照组标本无NF-κB表达或仅在细胞浆内有少量的NF-κB蛋白表达,表达量为(1.03+0.20)％,2组比较差异有统计学意义(P＜0.01);冠状动脉病变积分、冠脉病变支数与NF-κB蛋白表达量呈正相关(P＜0.05)。结论 研究组所有标本的阳性结果证实,在动脉粥样硬化病变中有NF-κB蛋白表达;NF-κB蛋白表达与冠状动脉狭窄程度有显著相关性(P＜0.05)。     

Bortezomib对非小细胞肺癌细胞系增殖、细胞周期及核转录因子活性的影响

目的探讨Bortezomib对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞周期、增殖、凋亡及核转录因子(NF-κB)的影响。方法采用MTT法检测Bortezomib对细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析Bortezomib对细胞周期及凋亡的影响,Western blotting检测Borte-zomib对NF-κB、IκB和Bcl-2表达的影响。结果随着作用时间和药物浓度的增加,Bortezomib对NSCLC细胞的生长抑制作用越明显。25nmol/L的Bortezomib作用48h可以使细胞周期阻滞在G2/M期。6种NSCLC细胞中均有NF-κB的基础性表达,且胞核中NF-κB的表达水平与胞质IκB的表达水平呈反比。Bortezomib对细胞中NF-κB的基础表达水平没有影响,但能明显抑制TNF-α诱导的NF-κB的核转位,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2的水平,且这种抑制作用呈时间和剂量依赖趋势。结论Bortezomib能够抑制NSCLC细胞增殖,并诱导凋亡发生,可能是通过NF-κB通路发挥作用。     

NF-κB和环氧化酶-2在口腔癌中的表达及其与组织分化和淋巴转移的关系

目的：探讨核转录因子κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）和环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）在口腔癌中的表达及其与分化程度和淋巴转移的关系。方法随机选取重庆市大足区人民医院2013年1月—2014年12月收治的50例经病理诊断为口腔癌的患者为研究对象,分别取50例患者口腔癌癌变组织和正常口腔组织,采用免疫组化法分别检测NF-κB和COX-2的表达情况,并分析其与分化程度与淋巴转移的关系。结果正常口腔组织未见NF-κB和COX-2表达,而口腔癌组织中NF-κB和COX-2呈现高表达（P＜0.05）。中低分化口腔癌中NF-κB和COX-2阳性表达率均明显高于高分化口腔癌（P＜0.05）。有淋巴转移口腔癌中NF-κB和COX-2阳性表达率均明显高于无淋巴转移口腔癌（P＜0.05）。NF-κB和COX-2的表达与口腔癌呈正相关。结论NF-κB和COX-22种蛋白的表达与口腔癌的发生、组织分化和淋巴转移相关。     

创伤性脑损伤后脑组织核因子-κB和基质金属蛋白酶-9的表达

目的 研究创伤性脑损伤（TBI）后损伤区脑组织核因子κB（NF-κB）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达，探讨其在继发性脑损害中的作用机制。方法 采用自由落体撞击法造成大鼠右侧顶叶脑挫裂伤，Wistar大鼠随机分为对照组、伤后3、12、24、72小时和7天组。采用EMSA测定NF-κB的活性，免疫组化测定MMP-9的表达。结果 TBI后NF-κB的活性和MMP-9的表达逐渐增强，至伤后72小时达高峰，伤后7大仍保持任较高水平。NF-κB和MMP-9任表达时相和强度上呈正相关关系。MMP-9表达阳性细胞包括血管内皮细胞、神经胶质细胞和少数神经元细胞及侵入的中性粒细胞。结论 TBI可引起损伤区脑组织NF-κB活性和MMP-9的表达明显增强，可能在脑组织的继发性损害中起重要作用。     

猪腹部火器伤肠管穿透后NF-κB在心脏中的表达及其意义

目的探讨NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后心脏中的变化及意义。方法健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1、2、4、8、12 h和24 h组,实验组建立腹部火器伤肠管穿透模型后,用免疫组化图像分析法测定各组心肌组织NF-κB活性,同时测定血清中LDH、CK-MB水平,在光镜下观察各组心脏组织学变化,电镜下观察心脏超微结构改变。结果伤后各组心脏NF-κB表达明显高于对照组。伤后各组血清LDH、CK-MB水平均高于对照组。伤后8、12、24 h组光镜下出现逐渐加重的心肌细胞水肿、变性;电镜下4、8、12、24 h组出现逐渐的线粒体肿胀、溶解;对照组光、电镜下未见明显的损伤性变化。相关分析表明,伤后心肌组织NF-κB表达与血清LDH、CK-MB水平均呈正相关(r值分别为0.968、0.957,P<0.05)。结论腹部火器伤肠管穿透后心肌组织内NF-κB活性增强;NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后继发性心脏损伤中具有重要意义。     

核因子-κB在乙型肝炎病毒相关性肾炎中的核转位表达及其意义

目的:了解乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBVGN)肾组织中核因子-KappaB(NF-κB)核转位表达并探讨其在HBVGN肾病发生中的作用。方法:采用微波免疫组织化学染色的方法,对30例HBVGN和5例正常肾组织中的NF-κB亚基p65表达进行检测。结果:在HBVGN病例中,有80%(24/30)的肾组织表现为不典型膜性肾病;NF-κB的核转位表达较正常肾组织显著升高(P<0.05),位于肾小球上皮细胞、内皮细胞及系膜细胞和肾小管上皮细胞的胞核内。结论:肾组织内NF-κB的核转位表达增多可能与HBV的感染有关,NF-κB可能参与了HBV引发HBVGN的发生过程。     

CPNE5对NF-κB转录调控活性的影响

目的:研究CPNE5对TNF-α诱导的NF-κB转录激活活性的影响,并探讨其作用机制.方法:用10 ng/mlTNF-α处理转染了pcDNA3.1或pcDNA3.1-CPNE5的HEK293细胞,用双荧光素酶报告基因实验检测不同转染组NF-κB的转录激活活性;Western印迹和细胞免疫荧光技术检测CPNE5表达上调对NF-κB入核的影响;凝胶阻滞实验研究CPNE5表达上调对NF-κB DNA结合能力的影响.结果:CPNE5可以显著抑制TNF-α对NF-κB的转录激活活性(P<0.0001);CPNE5不影响TNF-α诱导的NF-κB(P65)入核;CPEN5过表达降低了TNF-α诱导的NF-κB与DNA结合的能力.结论:CPNE5通过抑制NF-κB的DNA结合活性抑制TNF-α诱导的NF-κB转录激活活性.