冠心平片保护血管内皮细胞作用研究

目的观察冠心平片对内皮细胞损伤过程中丙二醛（MDA）与超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响,探讨冠心平片治疗冠心病的可能机制。方法体外培养内皮细胞ECV304,随机分成正常对照组,模型对照组,阳性药对照组和冠心平大、中、小剂量组。除正常对照组外,其他组用100 μmol•L 1过氧化氢（H2O2）制作内皮细胞损伤模型。血清药理学方法给药,继续培养后显微镜下观察各组细胞生长情况,检测MDA与SOD。结果100 μmol•L 1 H2O2对ECV304有损伤作用。冠心平能显著增加细胞SOD分泌,显著抑制H2O2诱导的MDA的产生。结论冠心平片可减轻H2O2对ECV304的损伤程度,机制可能与其抗氧化作用有关。     

白藜芦醇与白藜芦醇苷抗氧化活性比较

目的：比较白藜芦醇与白藜芦醇苷清除自由基的能力以及对H202造成人脐静脉血管内皮细胞ECV304损伤的保护作用。方法：以邻二氮菲．Fe2＋体系产生羟基自由基（·OH）的方法研究白藜芦醇与白藜芦醇苷清除自由基的能力;采用H2O2诱导人脐静脉血管内皮细胞（ECV304）氧化损伤模型,四甲基偶氮噻唑蓝（MTF）比色法检测两种药物对H202致氧化损伤细胞的保护作用。结果：白藜芦醇与白藜芦醇苷清除·OH的能力呈剂量依赖性,其中白藜芦醇苷的作用比白藜芦醇强,但均弱于维生素C;白藜芦醇对H2O2致氧化损伤的ECV304细胞的保护作用强于白藜芦醇苷。结论：白藜芦醇对H202损伤的ECV304细胞具有明显的保护作用。     

降糖复方对脂性肝细胞损伤与高脂血症的保护作用

目的：研究降糖复方对脂肪酸诱导的HepG2细胞脂性损伤与鹌鹑高脂血症的保护作用。方法：采用高脂饲料诱导鹌鹑实验性高脂血症模型以及采用棕榈酸与油酸混合脂肪酸诱导HepG2细胞发生脂肪损伤变性,结合含药血清学,检测细胞与血清中TG、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力,以及血清中高密度脂蛋白胆固醇（HLD-C）含量;油红O染色,观察细胞内脂质聚集情况;检查鹌鹑动脉内膜病理变化。结果：降糖复方明显减少高血脂鹌鹑动脉内膜粥样硬化斑块和抑制内膜病变程度,降低HepG2细胞内脂质堆积,降低细胞与血清中TG、MDA的含量,并调节SOD活性。结论：降糖复方显著抑制细胞的脂质蓄积,减轻鹌鹑高脂血症和动脉粥样斑块的形成。     

常春卫矛提取物对 H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

摘 要 目的：研究常春卫矛乙醇、乙酸乙酯和正丁醇提取物分别对血管内皮细胞ECV 304氧化损伤的保护作用。方法: 体外培养ECV 304细胞,以H2O2诱导ECV 304细胞氧化损伤为模型,分别将常春卫矛乙醇、乙酸乙酯和正丁醇提取物（终浓度为400,200,100,50,25 μg·ml^-1）作用于细胞24 h后,以MTT法检测细胞存活率;Hochest染色观察细胞凋亡情况;以测定超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合酶（NOS）和一氧化氮（NO）的含量评价药物对血管内皮细胞氧化应激的影响。结果: 常春卫矛乙醇、乙酸乙酯和正丁醇提取物在25～400 μg·ml^-1 浓度范围内,对ECV 304细胞均无细胞毒作用,其中乙酸乙酯提取物在400 μg·ml^-1浓度下,对细胞有一定增殖作用（P<0.05）;常春卫矛乙酸乙酯（浓度50～400 μg·ml^-1）、正丁醇（浓度100～400 μg·ml^-1）提取物对氧化损伤ECV 304细胞存活率有显著提高,OD值与模型组比较,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。常春卫矛乙醇、乙酸乙酯和正丁醇提取物能明显提高氧化损伤ECV 304细胞分泌SOD、NO水平（P<0.05或P<0.01）,对NOS水平无影响;常春卫矛乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物均能抑制氧化损伤细胞凋亡,细胞核形态改善,凋亡率与模型组比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论:常春卫矛提取物对H2O2诱导血管内皮细胞氧化损伤有一定保护作用。     

姜黄素对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤的双重作用

目的研究姜黄素(Cur)对过氧化氢(H2O2)诱导的血管内皮细胞ECV304的作用及可能机制;方法胎盘兰计数法分组观察在不同的时间点加入姜黄素后对H2O2诱导的ECV304细胞氧化损伤的作用。流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡率的变化,试剂盒检测一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量及超歧化物氧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性的变化。结果姜黄素0~100μmol·L-1与H2O2500μmol·L-1同时作用5h,随姜黄素浓度升高细胞存活率升高;25~100μmol·L-1姜黄素预先作用1h,再换为H2O2500μmol·L-1作用4h,细胞存活率明显下降;H2O2500μmol·L-1作用4h,再加入25~100μmol·L-1姜黄素作用1h,细胞存活率也升高。姜黄素对H2O2诱导的细胞凋亡没有明显的影响,但同时作用组、H2O2先作用组S期细胞所占比例升高,姜黄素先作用组S期细胞所占比例下降。同时作用组、H2O2先作用组的SOD、NO、GR水平相对升高,MDA水平下降,姜黄素先作用组的SOD、NO、GR水平相对下降,MDA水平升高。结论姜黄素对H2O2诱导的血管内皮细胞ECV304有双重效应,即有保护效应也有细胞毒效应,与其作用时间点有关。     

扇贝裙边糖胺聚糖对血管内皮细胞的抗氧化活性

目的：探讨扇贝裙边糖胺聚糖（SS-GAG）的抗氧化活性。方法：用体外培养的人脐静脉内皮细胞株，建立过氧化氢（H2O2）诱导的血管内皮细胞损伤模型，用硫代巴比妥酸反应物法测定血管内皮细胞内氧化损伤产物丙二醛（MDA）的含量，用黄嘌呤氧化酶法测定细胞内的超氧化物歧化酶（SOD）的活性。结果：SS-GAG可明显减少MDA的生成，对细胞内的SOD活性有明显增强的作用。结论：SSGAG通过拮抗H2O2对血管内皮细胞的过氧化损伤，发挥其抗氧化活性。     

2种海参胶原蛋白多肽对血管内皮细胞保护作用的比较研究

目的 观察革皮氏海参和北极刺参胶原蛋白多肽对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤的血管内皮细胞的保护作用,探讨其保护内皮细胞的作用机制。方法 采用ox-LDL处理血管内皮细胞(ECV304)建立氧化应激损伤模型,以MTT法测定ECV304的增殖活性,硫代巴比妥酸法测定细胞内的丙二醛(MDA)含量,比色法测定一氧化氮合酶(NOS)活力和一氧化氮(NO)释放量,Hoechst33258染色法检测细胞的凋亡,Western blotting法检测caspase-3蛋白的表达。结果 经2种海参胶原蛋白多肽预处理后,ECV304细胞的增殖率显著升高 (P<0.05,P<0.01),细胞凋亡比率和MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),细胞NOS活力和NO释放量均显著提高 (P<0.05,P<0.01),凋亡蛋白caspase-3的表达量显著降低。结论 2种海参胶原蛋白多肽均能有效保护脂质过氧化物损伤的血管内皮细胞,其中北极刺参胶原蛋白多肽在抑制细胞凋亡和提高NOS活性方面效果更突出,可能与其氨基酸组成有关。     

丹酚酸A对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的研究丹酚酸A对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的保护作用。方法采用过氧化氢(H2O2)诱导的HUVECs氧化损伤模型,观察丹酚酸A(10,20和40μg·mL-1)对血管内皮细胞损伤的保护作用,MTT法检测细胞存活率,试剂盒检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO),比色法测定Caspase-3的活性。结果丹酚酸A可抑制H2O2诱导的血管内皮细胞的凋亡,同时增加SOD的活性,降低MDA的水平,减少LDH的漏出量,增加NO的释放,降低Caspase-3的活性。且丹酚酸A的上述作用均呈质量浓度依赖性。结论丹酚酸A可以有效保护内皮细胞免受氧化损伤。     

红景天苷对小牛胸主动脉内皮细胞的保护作用

目的:探讨红景天苷对小牛胸主动脉内皮细胞过氧化损伤﹑缺氧/复氧损伤的作用及其机制.方法:体外培养原代小牛胸主动脉内皮细胞,观察红景天苷对正常细胞增殖的作用及cNOS活性;用H2O2和Na2S2O4分别复制过氧化损伤模型和复制缺氧/复氧损伤模型,测定细胞活性(MTT法),并测量LDH、NO、SOD和MDA含量.结果:红景天苷明显促进正常内皮细胞增殖,给药后24小时作用明显,增加细胞裂解液中cNOS活性;在氧化损伤模型和缺氧/复氧损伤模型中,红景天苷明显提高细胞存活率,增加胞内SOD活性和NO的释放,降低培养液中LDH释放量和胞内MDA含量.结论:红景天苷能促进正常内皮细胞增殖,对缺氧/复氧损伤、过氧化损伤内皮细胞均有一定的保护作用.     

D-聚甘酯对血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 用 H_2O_2(200μmol·L~(-1))诱导人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化损伤,研究D-聚甘酯(DPS)对血管内皮细胞损伤的保护作用。方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,采用试剂盒测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。同时采用流式细胞仪检测损伤后细胞内Ca~(2+)含量,并观察DPS对H_2O_2导致的内皮细胞内钙离子浓度的影响和细胞凋亡的作用。结果DPS 0.1,1,10μg·L~(-1)对损伤后ECV304具有促进增殖作用。DPS 0.1,1μg·L~(-1)使细胞培养液中SOD水平升高并降低细胞内MDA含量,4个剂量的DPS均能使细胞培养液中LDH释放减少。流式细胞术检测结果显示DPS能降低H_2O_2导致的细胞内Ca~(2+)含量的升高,并抑制细胞凋亡。结论 DPS具有保护H_2O_2致血管内皮细胞损伤的作用,其机理可能与其抗脂质过氧化作用,降低损伤后细胞内Ca~(2+)含量并抑制细胞凋亡有关。     

丹酚酸B镁盐对缺氧复氧内皮细胞内钙和一氧化氮的影响

目的:研究丹酚酸B镁盐对缺氧复氧引起的内皮细胞内钙升高和一氧化氮释放增加的影响.方法:培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)暴露在95％ N_2 5％CO_2条件下缺氧30分钟,后在含5％CO_2的空气中复氧30分钟.内皮细胞的损伤用染料排除实验、SOD的活性和MDA的生成来评价.胞内游离钙浓度用钙荧光探针Fura 2-AM测定.一氧化氮含量用一氧化氮试剂盒测定.内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测.结果:缺氧复氧引起内皮细胞的活力由正常条件下(93.1±1.2)％降至(88±3)％(P<0.01),SOD的活性也由(0.24±0.07)kNU/L下降到(0.18±0.03)kNU/L(P>0.05),但其使内皮细胞MDA的生成由(1.12±0.06)mmol/L增至(3.78±0.03)mmol/L(P<0.01).丹酚酸B镁盐2.5,5,10 mg/L能明显降低缺氧复氧引起的内皮细胞MDA生成量的增加,并且显著提高细胞活力和SOD的活性.同时,缺氧复氧还增加内皮细胞的胞内游离钙浓度(F_(340)/F_(380)由 1.65±0.16增至 1.89±0.28)和一氧化氮释放[由(7.5±1.3)μmol/L增至(16±5)μmol/L],并上调其eNOS mRNA的表达,但降低iNOS mRNA的表达(P<0.05).但在无钙的条件下,缺氧复氧对内皮细胞的胞内游离钙浓度、一氧化氮含量、eNOSnRNA和iNOS mRNA表达     

降糖复方对亚急性衰老模型小鼠的抗氧化作用

目的：研究由葛根、鱼腥草、鬼箭羽三味中药组成的复方对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的抗氧化作用。方法：采用D．半乳糖诱导小鼠衰老模型,以其体重变化、血清与组织中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）与谷胱甘肽过氧物酶（GSH—Px）活力为指标,考察药物对衰老小鼠的抗氧化作用。结果：降糖复方（14、7g／kg,i．g．）能对抗D-半乳糖所致衰老模型小鼠血清与组织中MDA含量的升高,提高其中SOD与GSH．Px活力,并能抑制小鼠体重的下降。结论：降糖复方能有效地对抗D．半乳糖所致小鼠的氧化损伤,具有一定的抗氧化作用。     

大豆异黄酮对大鼠血脂的影响及其体内外抗氧化作用研究

目的：观察大豆异黄酮（SI）对高脂饮食大鼠血脂、血液及肝脏丙二醛（MDA）、超氧化物岐化酶（SOD）及肝脏脂肪病变的影响,以及其主要成分之一金雀异黄素对过氧化氢损伤的ECV304内皮细胞有无保护作用。方法：根据血清总胆固醇（TC）水平,50只雄性Wistar大鼠分为5组：正常对照、高脂饮食对照组和3个SI治疗组。3个SI治疗组分别每日灌胃给予SI30、60、120mg/kg,对照组则给予相应的溶媒,持续9周。治疗第2、4、9周末,测定血清TC、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）。治疗结束时,测定红细胞和肝匀浆SOD活力,血清和肝匀浆MDA含量,并观察肝脏病理变化。以MTT法观察与不同浓度的金雀异黄素体外孵育一定时间后的ECV304内皮细胞对抗过氧化氢氧化损伤的能力。结果：SI30、60、120mg/kg无改善血清TC、LDL、TG、HDL的作用,肝脏病理结果也与血脂结果相似。但是与高脂饮食对照组相比,大鼠红细胞及肝脏的SOD活力明显升高,而血清及肝脏MDA含量也有一定程度降低（P〈0.01,P〈0.05）。对于过氧化氢引起ECV304细胞损伤,金雀异黄素25、50、100μmol/L有剂量依赖性保护作用。结论：大豆异黄酮不能改善高脂饮食大鼠的血脂,不能抑制其肝脏脂肪病变。但其有一定体内外抗氧化作用。     

金雀异黄素对正常的和过氧化氢损伤的内皮细胞的影响(英文)

目的 :观察金雀异黄素 (genistein)对体外培养的血管内皮细胞 (ECV 3 0 4)生长的影响和对过氧化氢引起ECV 3 0 4细胞损伤的保护作用。方法 :将ECV 3 0 4细胞与金雀异黄素 0 .1～ 1 0 0 μmol·L-1共同孵育 2 4～ 96h ,通过MTT法测定细胞存活率。为了观察金雀异黄素对过氧化氢引起ECV 3 0 4细胞损伤的保护作用 ,将细胞分成 3组 ,分别为对照组、过氧化氢损伤模型组和金雀异黄素治疗组 ,治疗组ECV 3 0 4细胞先与金雀异黄素 6.2 5～ 1 0 0 μmol·L-1共同孵育 3 0min ,然后模型组和治疗组ECV3 0 4细胞均加入过氧化氢 1 0mmol·L-1孵育 ,3 0min后以MTT法测定OD值 ,以此反映各组ECV 3 0 4的生存情况。结果 :金雀异黄素对于正常ECV 3 0 4细胞生长的作用与浓度和作用时间有关 ,浓度为1 0 0 μmol·L-1时 ,作用 2 4,48h能明显促进ECV3 0 4生长 (P <0 .0 1 ) ,而作用 96h则表现为明显的抑制作用 (P <0 .0 5 ) ;浓度为 1 0 μmol·L-1时 ,作用48,72h对ECV 3 0 4细胞生长也有促进作用 (P <0 .0 5 ) ;而当金雀异黄素浓度降低为 0 .1 ,1 μmol·L-1时 ,对ECV 3 0 4细胞生长无明显影响。过氧化氢 1 0mmol·L-1可使ECV 3 0 4的存活率明显下降(P <0 .0 5 ) ;预先给予金雀异黄素 2 5 ,5 0 ,1 0 0 μmol·L-1能浓度依赖性地     

槲皮素对过氧化氢诱导的血管内皮细胞周期及NO水平的影响

目的研究槲皮素对人脐静脉血管内皮细胞增殖周期及细胞内一氧化氮产生的影响。方法用过氧化氢诱导血管内皮细胞损伤,采用ＭＴＴ比色法、流式细胞仪观察槲皮素对血管内皮细胞作用及周期的影响;用硝酸还原酶法测定细胞培养液中ＮＯ水平。结果过氧化氢对血管内皮细胞具有损伤作用,槲皮素剂量依赖性促进过氧化氢诱导血管内皮细胞的增殖,而且主要是Ｓ期和Ｇ２Ｍ期细胞比率增加;槲皮素可减少过氧化氢诱导的血管内皮细胞释放乳酸脱氢酶及促进过氧化氢诱导血管内皮细胞内ＮＯ水平的增加。结论槲皮素可保护过氧化氢诱导血管内皮细胞的损伤及修复,其作用可能与ＮＯ的水平有关。     

桂哌齐特拮抗氧化低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞的损伤

目的研究桂哌齐特对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤人脐静脉内皮细胞系ECV304的保护作用。方法传代培养ECV304细胞,随机分为空白对照组、模型组、桂哌齐特(200mg·L~(-1)和400mg·L~(-1))组,与ox-LDL共同孵育24h制模,观察培养上清液中一氧化氮(NO)与丙二醛(MDA)含量的变化,测定Fura-2/AM负载后的内皮细胞的游离静息钙浓度([Ca~(2+)]_i)。结果 ox-LDL诱导的模型组上清液中NO的浓度明显降低,MDA含量显著升高(均P<0.01)。桂哌齐特组NO浓度增加(P<0.01),MDA含量降低均(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组的[Ca~(2+)]_i显著升高,桂哌齐特组能降低损伤导致的[Ca~(2+)]_i升高(均P<0.01)。结论桂哌齐特能拮抗ox-LDL对人脐静脉内皮细胞的损伤作用。     

日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原蛋白多肽对血管内皮细胞的保护作用

目的研究日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原多肽对血管内皮细胞的保护作用。方法采用ox-LDL建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304)损伤模型。MTT法测定血管内皮细胞的增殖活性;硝酸还原酶法测定血管内皮细胞一氧化氮合酶(NOS)活力和NO释放量;TBA法测定细胞内MDA含量;DNA-Ladder法检测血管内皮细胞的凋亡。结果不同浓度的酸性粘多糖、胶原蛋白多肽和低浓度的皂苷能明显抑制ox-LDL对血管内皮细胞的损伤,促进血管内皮细胞增殖(P<0.05,P<0.01);降低细胞内MDA含量(P<0.05,P<0.01);拮抗ox-LDL引起的血管内皮细胞凋亡。酸性粘多糖和胶原蛋白多肽还能明显促进血管内皮细胞NO释放量(P<0.05,P<0.01),提高细胞NOS活力(P<0.05,P<0.01)。结论日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原蛋白多肽对血管内皮细胞的脂质过氧化物损伤均具有明显的保护作用。