文冠果果柄的化学成分

目的首次研究文冠果果柄的化学成分。方法采用大孔树脂、硅胶柱色谱分离化学成分,IR1、H-NMR1、3C-NMR等方法进行结构鉴定。结果从文冠果果柄95%(φ)大孔树脂乙醇(φ=95%)洗脱物中分离鉴定了6个化合物,分别为β-谷甾醇(-βsitosterolⅠ)、α-菠甾醇(-αspinaste-rolⅡ)、白桦脂醇(betulinⅢ)、21-O-angeloyl-R1-barrigenolⅣ、21,22-O-di-angeloyl-R1-barri-genolⅤ、胡萝卜苷(daucosterolⅥ)。结论化合物Ⅲ首次从本属植物中分得。     

缺氧诱导因子1α表达与胃癌的关系

目的 探讨缺氧诱导因子1α(HIF-lα)在胃癌组织中的表达与胃癌发生、发展的关系.方法 应用组织芯片方法检测162例胃癌组织和32例癌旁组织中HIF-1α的表达;采用RT-PCR方法检测11例胃癌组织和12例胃正常组织中HIF-1α mRNA的表达水平.结果 HIF-1α在胃癌组织和癌旁组织中表达的阳性率分别为37.04％(60/162)和9.38％(3/32)(P＜0.05);HIF-1α的表达与TNM分期、浸润深度和淋巴结转移有关(P＜0.05).HIF-1α mRNA在胃癌组织和胃正常组织中的表达水平分别为(6.62±0.63)和(7.32±1.12)(P＜0.05).结论 HIF-1α在胃癌组织中高表达,并与胃癌的发生、发展及转移密切相关.     

乳腺癌组织中ING4、HIF-1α和HIF-2α表达及与肿瘤微血管新生的关系

目的 探讨乳腺癌组织中生长抑制因子4(ING4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)表达及与肿瘤微血管新生的关系.方法 选取择期行手术治疗的乳腺癌病人107例,利用实时荧光定量PCR技术检测乳腺癌和癌旁组织中HIF-1α、HIF-2α、ING4和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达,免疫组化染色检测乳腺癌和癌旁组织中微血管密度(MVD).结果 乳腺癌组织中HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA相对表达量均高于癌旁组织,而ING4 mRNA 相对表达量低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α mRNA相对表达量与淋巴结转移有关(P<0.05),HIF-2α mRNA相对表达量与肿瘤大小、淋巴结转移有关(P<0.05),ING4 mRNA相对表达量与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);乳腺癌组织中VEGF mRNA相对表达量和MVD计数均高于癌旁组织,均差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析显示,乳腺癌组织中HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA相对表达量均与VEGF mRNA相对表达量和MVD计数呈正相关(r=0.382、0.417和0.408、0.491,P<0.05),ING4 mRNA相对表达量均与VEGF mRNA相对表达量和MVD计数呈负相关(r=-0.395、-0.502,P<0.05).结论 乳腺癌组织中HIF-1α、HIF-2α基因表达升高,而ING4基因则被抑制,可能共同参与了乳腺癌组织中血管新生.     

低氧状态下红景天苷经HIF-1α信号通路调节人成骨样MG-63细胞表型表达的研究

目的研究低氧状态下红景天苷对成骨细胞表型表达的调控作用及其作用机制。方法 MTT法检测细胞增殖能力;采用Annexin V/PI双染法分析低氧诱导的细胞凋亡情况;磷酸苯二钠法检测成骨细胞分化的早期标志性基因碱性磷酸酶(ALP)活性;RT-PCR技术检测低氧诱导因子(HIF)-1α、血管内皮生长因子(VEGF)、抑癌基因VHL蛋白(p VHL)、骨钙素(OC)、成骨细胞特异性转录因子Runx2及Osterix mRNA表达水平;采用ELISA法检测VEGF及OC的蛋白表达水平和I型胶原的含量;Western blot技术检测HIF-1α、p VHL、Osterix、Runx2的蛋白表达水平;免疫荧光共聚焦显微镜技术观察HIF-1α的核转位情况;荧光素酶报告基因检测技术检测HIF-1α的转录活性。结果低氧状态下红景天苷促进MG-63细胞增殖,抑制由低氧诱导的MG-63细胞凋亡,促进Osterix、Runx2表达及通过增加ALP活性、Ⅰ型胶原和OC含量促进成骨细胞分化成熟。进一步研究发现,低氧状态红景天苷可下调HIF-1α的表达及核转位,而上调其转录活性及下游靶基因VEGF的表达。结论低氧状态下红景天苷通过调节HIF-1α/VEGF信号通路促进成骨细胞增殖和分化,同时抑制由低氧诱导的成骨细胞凋亡。     

PAK1、HIF-1α在结肠癌组织中侵袭、转移中的表达研究

目的 探讨PAK1(p-21活化激酶1)、缺氧诱导因子1α (HIF-1α)在结肠癌组织中侵袭、转移中的表达.方法 分别采用免疫组化法和荧光原位杂交检测41例结肠癌组织和癌旁正常组织中的HIF-1α、PAK1表达,并分析HIF-1α、PAK1与临床病理的关系.结果 本组研究中,结肠癌组织HIF-1α mRNA、PAK1 mRNA阳性表达率和HIF-1α蛋白、PAK1蛋白阳性表达率均显著高于癌旁正常组织(P＜0.05).从蛋白水平上讲,HIF-1α、PAK1在淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ～Ⅵ期和Dukes分期为C、D期中阳性表达率显著高于无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、Dukes分期为A、B期患者,差异具有统计学意义(P＜0.05).Spearman等级相关性分析显示,在蛋白水平,HIF-1α、PAK1在结直肠癌表达中呈正相关关系.结论 HIF-1α、PAK1可能参与结肠转侵袭和转移中.     

银合欢叶的化学成分研究

目的 研究银合欢叶的化学成分.方法 利用硅胶柱层析分离、纯化银合欢叶的乙酸乙酯部位,并通过理化性质和TLC、UV、IR、1HNMR、13CNMR、MS等方法鉴定化合物的结构.结果 分离得到5个化合物,分别鉴定为三十一烷醇(Ⅰ)、十八烷酸(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖(Ⅳ)和胡萝卜苷(Ⅴ).结论 化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ均为首次从银合欢叶中分离出.     

仙人掌肉质茎的化学成分

目的研究仙人掌的化学成分。方法应用多种柱色谱方法进行分离和纯化,采用NMR和MS等波谱手段签定化学结构。结果从仙人掌肉质茎的乙醇提取物中分离出5个化合物,并分别鉴定为:1[6αD吡喃葡萄糖甲苷)]L(-)苹果酸甲酯(Ⅰ)、1(3乙基苯基)1,2乙二醇(Ⅱ)、(S)3羟基3甲基戊二酸甲酯(Ⅲ)、乙基αD呋喃阿拉伯糖苷(Ⅳ)、乙基βD吡喃果糖苷(Ⅴ)。结论化合物Ⅱ~Ⅴ均为首次从该属植物中分离得到,化合物I为新化合物,命名为仙人掌酯B。     

决明子降血脂有效部位的化学成分

目的 研究决明子降血脂有效部位的化学成分.方法 用色谱法分离有效部位,据理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构.结果 从决明子降血脂的有效部位分得6个单体化合物,分别鉴定为钝叶素(Ⅰ)、橙黄决明素(Ⅱ)、钝叶决明素苷(Ⅲ)、钝叶素苷(Ⅳ)、大豆苷(Ⅴ)和cassitoroside(Ⅵ).结论 化合物素Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ为首次从决明Cassia obtusifolia L.中分得.     

埃他卡林对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织HIF-1α mRNA和蛋白表达的影响

目的 研究新型ATP敏感性钾通道开放剂(KATP CO)埃他卡林(IPT)对大鼠肺组织中低氧诱导凶子1α(HIF-1α)表达的影响.方法 36只清洁级SD大鼠随机分成对照组、低氧性肺动脉高压(HPH)模型组和IPT处理组,每组12只.HPH模型组及IPT处理组于(10.0±0.5)%氧浓度的常压低氧舱内饲养,每天8 h,每周6 d,共4周.IPT处理组给予IPT 1.5 mg·kg-1·d-1灌胃;对照组及HPH模型组给予0.9%氯化钠5 ml·kg-1·d-1灌胃.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织HIF-1α mRNA表达,用Western blot方法检测肺组织HIF-1α白的表达.结果 HPH模型组大鼠肺动脉平均压、右室/(左室+室间隔)重量比和HIF-1α mRNA和蛋白表达均高于对照组和IPT处理组(P＜0.01).IPT处理组与对照组的HIF-1α mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 IPT降低肺动脉压可能与抑制HPH大鼠肺组织中的HIT-1α表达有关.     

大花红景天的化学成分研究

目的研究景天科大花红景天的根和根茎中的化学成分。方法采用柱色谱法分离纯化,通过光谱数据鉴定其结构。结果从大花红景天的根和根茎乙醇提取物的石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位中分离得到12个化合物,分别鉴定为大花红天素(Ⅰ)、胡萝卜甾醇(Ⅱ)、草质素-7-氧-α-L-吡喃鼠李糖苷(Ⅲ)、阿魏酸二十八烷醇酯(Ⅳ)、酪醇(Ⅴ)、红景天苷(Ⅵ)、没食子酸(Ⅶ)、β-谷甾醇(Ⅷ)、正二十六烷酸(Ⅸ)、正二十六烷醇(Ⅹ)、正十八烷酸(Ⅺ)和十九烷(Ⅻ)。结论化合物Ⅱ、Ⅳ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ为首次从该植物中分离得到。     

缺氧诱导因子-1α与血管内皮生长因子-C在宫颈癌组织中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在宫颈癌组织中的表达,分析两者与患者年龄、临床分期和预后间的关系.方法:原位杂交组织化学法(ISHH)检测42例官颈癌组织中HIF-1α mRNA水平,用免疫组化法检测VEGF-C水平.结果:0～Ⅰ期患者HIF-1α mRNA的表达低于Ⅱ～Ⅳ期患者(χ2=12.017,P<0.05),HIF-1α mRNA的表达随着临床分期的增高表达增强,而与年龄无关(χ2=0.001,P0.05),与预后相关(Zc=2.378,P<0.05).VEGF-C表达与患者年龄(χ2=1.117)、临床分期(χ2=1.840)、预后(Zc=1.187)均无关(均P0.05).VEGF-C、HIF-1α mRNA表达阳性组微血管密度均高于阴性组(Zc分别为4.74和4.40,P<0.01),HIF-1α mRNA表达与VEGF-C表达呈正相关(rs=0.321,P<0.05).结论:VEGF-C、HIF-1α mRNA在宫颈癌进展过程中可能通过调节肿瘤相关的血管生成起协同作用.     

链霉素及H7对机械牵张离体心肌HIF-1α、VEGF的影响及机制探讨

目的研究链霉素及H7对机械牵张大鼠心肌组织低氧诱导分子-1α和血管内皮细胞生长因子表达的影响,并探讨二者在其中的作用机制。方法采用大鼠离体灌流心脏模型,膨胀左心室30min,RT-PCR法检测左室心肌细胞HIF-1α、VEGF mRNA的表达,免疫组化观察二者在心肌细胞中定位,Western blot检测HIF-1α蛋白的表达,利用链霉素作为牵张敏感离子通道(SACs)阻断剂研究SACs和PKC抑制剂H7在其中的可能作用。结果与不牵张组HIF-1α和VEGF mRNA无表达的比较,牵张可以明显增加HIF-1α和VEGF mRNA的表达(P<0·05或P<0·01);而链霉素、H7可以明显减少HIF-1α和VEGF mRNA的表达(P<0·05);但是二者不能完全抑制急性牵张刺激激活的HIF-1α和VEGF mRNA水平升高(P<0·05),HIF-1α和VEGF在胞质和胞核中均有表达,并检测到HIF-1α蛋白表达。结论链霉素、H7对膨胀左室致HIF-1α、VEGF表达有明显抑制作用,提示心室膨胀经SACs-PKC-激活胞内信号诱导HIF-1α、VEGF表达。同时链霉素并不能完全抑制HIF-1α、VEGF表达,提示膨胀心室致HIF-1α、VEGF表达进而引起心室肥厚尚有其他传导途径,仍需进一步研究。     

蓝玉簪龙胆的化学成分研究

目的 分离鉴定藏药材蓝玉簪龙胆Gentiana veitchiorum的化学成分.方法 利用正反硅胶柱色谱进行分离纯化,根据波谱分析确定化学结构.结果 共分离鉴定出7个化合物,其结构分别为乌索酸(Ⅰ)、2а-羟基-乌索酸(Ⅱ)、胡萝卜苷(Ⅲ)、polygalacerebroside(IV)、异牡荆苷(Ⅴ)、异金雀花素(Ⅵ)和异荭草苷(Ⅶ).结论 化合物Ⅰ～Ⅳ均为首次从蓝玉簪龙胆中分离得到,化合物Ⅱ和Ⅳ是首次从龙胆属植物中分离得到.     

HIF-2α和Tie2在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 研究低氧诱导因子2α(HIF-2α)、血管生成素受体(Tie2)、微血管密度(MVD)在乳腺癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化法检测41例乳腺癌组织(A组)及22例乳腺正常组织(B组)中HIF-2α、Tie2及MVD表达,RT-PCR方法检测HIF-2α mRNA和Tie2 mRNA表达水平,分析HIF-2α、Tie2表达与乳腺癌临床指标的关系.结果 与B组相比,A组HIF-2α、Tie2、MVD表达明显增加(P＜0.05).A组中HIF-2α mRNA、MVD表达均与Tie2 mRNA表达呈正相关(r=0.881、0.832,P＜0.05).HIF-2α、Tie2蛋白表达与肿瘤大小、淋巴结转移密切相关.结论 HIF-2α、Tie2在乳腺癌血管生成过程中起到了重要的作用,可作为判断肿瘤生物学行为指标之一.     

梅叶冬青根的化学成分研究

目的研究梅叶冬青根的化学成分。方法采用硅胶柱层析、凝胶柱层析和反相硅胶柱层析等方法分离纯化梅叶冬青根的化学成分,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从梅叶冬青根的甲醇提取物中分离得到9个化合物,分别鉴定为3β-O-乙酰熊果醇(Ⅰ)、3β-O-乙酰熊果酸(Ⅱ)、泰国树脂酸(Ⅲ)、齐墩果酸(Ⅳ)、咖啡酸(Ⅴ)、乌索酸(Ⅵ)、2α,3β,19α-三羟基乌索-12-烯-23,28-二羧酸(Ⅶ)、β-谷甾醇(Ⅷ)和胡萝卜苷(Ⅸ)。结论化合物Ⅰ～Ⅴ为首次从该植物中分离得到。     

日香桂花的化学成分研究

目的 研究木犀科木犀属植物日香桂干燥花的化学成分.方法 采用柱色谱法分离纯化单体化合物,通过波谱鉴定其结构.结果 分离并鉴定出9个化合物为类叶升麻苷(Ⅰ),Ligustroside(Ⅱ),10-acetoxyligustroside(Ⅲ),齐敦果酸(Ⅳa),乌苏酸(Ⅳb),ursolaldehyde(Ⅴ),dammara-23-en-3β,25一diol(Ⅵ),olean-12-en-3β,27-diol(Ⅶ)和α-O-十六碳烷酰基-B-O-(9Z-十八碳烯酰基)-α-O-十六碳烷酰基甘油酯(Ⅷ).结论 所有化合物均为首次从该植物中得到;化合物Ⅴ-Ⅷ为首次从该属植物中分离得到.     

雷帕霉素抑制mTOR活性诱导细胞的生长和下调EBV+人鼻咽癌细胞HIF-1α介导的VEGF表达

目的 观察雷帕霉素(Rap)体外对人鼻咽癌HNE-1EBV+和CNE-1EEBV-细胞乏氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及生长抑制作用.方法 采用MTT法检测Rap作用72 h IC50;用RT-PCR和ELISA分别测定Rap作用24 h后,细胞HIF-1α mRNA和培养上清液中VEGF的表达水平.结果 Rap呈剂量依赖性地抑制HNE-1EBV+和CNE-1EBV-细胞的生长,IC50分别为43.9、41.7 μmol·L-1;Rap使HNE-1EBV+细胞HIF-1α mRNA和VEGF表达水平分别下调了24％、55％,但对CNE-1EBV-细胞无明显影响.结论 Rap对两株鼻咽癌细胞具有相当的生长抑制作用,可显著下调HNE-1EBV+细胞HIF-1α介导的VEGF表达,提示Rap对于改善EBV+鼻咽癌的治疗预后具有潜在的作用.     

阿托伐他汀对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的探讨阿托伐他汀保护心肌细胞缺氧/复氧损伤的机制,为临床防治缺血再灌注损伤寻找新思路。方法分离SD乳鼠(出生1～3d)心肌细胞进行原代培养,建立H/R模型,取培养第3d的心肌细胞随机分成3组:正常对照组(CON组)、H/R组、H/R+ATV组。应用MTS法检测心肌细胞的存活率;化学发光免疫分析法检测心肌细胞特异性损伤指标肌钙蛋白I(cTnI)的含量;采用SYBR GREEN荧光定量PCR检测各组HIF-1α、VEGF mRNA表达水平。结果与CON组比较,H/R组心肌细胞存活率明显降低(P<0.05),血清肌钙蛋白I明显升高(P<0.05),HIF-1α和VEGF mRNA表达水平显著升高(P<0.05);用阿托伐他汀预处理后心肌细胞存活率明显升高(P<0.05),血清肌钙蛋白I明显降低(P<0.05),HIF-1α和VEGF mRNA表达水平进一步升高(P<0.05)。结论阿托伐他汀可能通过上调HIF-1α及VEGF的表达水平进而保护缺氧/复氧损伤的心肌细胞。     

蒲黄的化学成分研究

目的 研究蒲黄的化学成分.方法 通过硅胶层析分离得到5个化合物并用各种波谱方法鉴定了结构.结果 5个化合物分别是二十烷酸(Ⅰ)、十八烷酸(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、香草酸(Ⅳ)、嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(Ⅴ).结论 化合物Ⅴ是首次从该属植物中分得的化合物.     

Effect and possible mechanism of desferrioxamine on microvascular formation of ischemic myocardium in rats

目的 探讨去铁胺(DFO)对大鼠缺血心肌微血管形成的作用及可能机制.方法 48只SD大鼠随机均分为正常对照组(A组)、假手术组(B组)、结扎组(C组)和DFO 200mg/kg组(D组).术后7d,处死大鼠,免疫组化法检测微血管密度(MVD)及低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达,RT-FCR检测HIF-1α mRNA表达.结果 与A、B组相比,C、D组MVD、HIF-1α蛋白和mRNA表达均增加(P＜0.05或P＜0.01),其中D组各指标增加更为显著(P＜0.01).结论 DFO 可以促进大鼠缺血心肌组织微血管形成;其作用机制可能与上调HIF-1α的表达有关.