HPLC-MS/MS法测定人血浆中千金藤素的浓度

目的建立人血浆中千金藤素浓度的HPLC-MS/MS测定法。方法血浆样品1.0 mL经甲基叔丁基醚萃取后,以2.5 mmol/L醋酸铵(含0.05%甲酸)-甲醇(40∶60)为流动相,采用ZORBAX Eclipse XDB-C8(150 mm×4.6 mm,5μm)柱分离,采用电喷雾电离化(ESI)方式和多反应离子监测(MRM)模式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 607.2→365.1(千金藤素)和m/z 247.2→98.0(内标甲哌卡因)。结果千金藤素血药浓度线性范围为0.10～208.40 ng/mL,定量下限为0.10 ng/mL。低、中、高3个浓度提取回收率分别为72.3%、76.8%、79.5%。结论该法操作简便、快速、灵敏,适用于千金藤素在人体内的药代动力学研究。     

千金藤素调控肝癌细胞 HepG2增殖和凋亡的实验研究

目的探讨千金藤素对肝癌细胞 HepG2增殖、凋亡的影响和机制。方法 2020年 1—6月,从上海通派生物科技有限公司购入肝癌细胞 HepG2,用千金藤素( 20 μmol/L)处理肝癌细胞 HepG2,MTT方法测定增殖活性, PI单染法检测细胞周期, Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法( Western blotting)检测细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)、 p21、Bcl-2相关 X蛋白( Bax)、活化胱天蛋白酶 3(cleaved caspase-3)、核因子 κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。用 NF-κB信号激活剂和千金藤素联合处理肝癌细胞,检测细胞增殖、周期、凋亡变化。结果千金藤素处理后的肝癌细胞增殖活性下降,细胞 G0/G1期比例［(65.81±3.73)%比( 50.61±4.17)%］升高,细胞凋亡率［(13.47±1.58)%比( 2.18±0.12)%］升高,细胞中 p21、Bax、cleaved-caspase-3蛋白水平升高, cyclin D1蛋白水平下降, NF-κBp65蛋白水平( 0.19±0.02比 0.36±0.05)降低。 NF-κB信号激活剂处理可以提高千金藤素条件下肝癌细胞增殖活性( 0.46±0.03比 0.35±0.04)减少 G0/G1期比例,降低细胞凋亡率,降低细胞中 p21、Bax、cleavedcaspase-3蛋白表达水平,提高细胞中 cyclin D1和 NF-κBp65蛋,白水平。结论千金藤素抑制肝癌细胞增殖,阻滞细胞周期,诱     

妇科千金微丸质量标准研究

目的妇科千金微丸的质量标准研究。方法采用薄层色谱法鉴别当归、穿心莲、党参,用HPLC法测定穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯的含量。ODS柱(250×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水(55∶45);检测波长:224nm、250nm;流速:0.8m l.m in-1;柱温:30℃。结果能准确对当归、穿心莲、党参进行定性鉴别;穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯分别在0.0411~0.6172μg与0.0519~0.7785μg呈良好线性关系。结论本方法快速、简便、准确、重现性好。     

千金藤素防治白细胞减少症的作用

千金藤素(Cepharanthine)系从防已科植物千金藤(Stephania cepharantha Hayata)的根茎中分离而得一种双乌药硷型(Biscoclaurine)双苄基异喹啉类生物硷,我国赵燏黄氏于1948年亦曾获得同一生物硷。其游离硷熔点145～155℃,比旋度〔α〕_D~6+351°(氯仿)。千金藤素的生理作用是多方面的,它具有解毒,抗过敏,抗麻疯,抗结核杆菌等多种作用。在四十年代曾用千金藤素治疗结核病,并发现结核病患者,在服用千金藤素后,外周血液中有白细胞增多的现象,从而引起了千金藤素防治白细胞减少症的研究。实验研究:正常小鼠,连续七天给予千     

千金藤素在大鼠肠道内的吸收动力学

目的 考察千金藤素在大鼠肠道内的吸收动力学.方法 采用大鼠在体肠吸收方法, 用HPLC对循环液中的千金藤素进行分析.结果 千金藤素在大鼠肠道内无特定吸收部位,全肠道均有较好吸收.十二指肠、空肠、回肠、结肠的每小时吸收百分率(中浓度)分别为16.99%、17.09%、18.00%、15.4%.不同浓度千金藤素在大鼠肠道内的吸收速率常数ka经方差分析无显著性差异(P＞0.05),千金藤素吸收机理为被动扩散.结论 千金藤素在整个肠道内均有吸收,其口服制剂应以提高生物利用度为主要目标.     

反相高效液相色谱法测定千金藤啶碱片的含量

目的 :建立反相高效液相色谱测定千金藤啶碱片含量的方法。方法 :采用C18 柱 ,流动相为甲醇 -乙腈 -三乙胺溶液 (60∶20∶20) ,流速为1 0ml/min ,检测波长为284nm ,地西泮为内标物。结果 :对照品在40～160μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为 :Y=6 65X—0 996 ,r=0 9999 ,平均回收率为99 56 %～100 7 % ,RSD<0 35 % (n=5)。日内RSD<0 25 % (n=6) ,日间RSD<0 60 % (n=5)。结论 :本法简便、可靠、快速、准确 ,可用于测定千金藤啶碱片的含量。     

千金藤碱治疗尘肺

目的 :观察千金藤碱治疗尘肺的疗效。方法 :82例尘肺病人 (煤工尘肺 39例 ,矽肺 31例 ,其他尘肺 12例 )应用千金藤碱 ,2 4 0mg·d- 1,po ,分 3次服 ,每周服 6d ,1a为一个疗程 ,共用 1～ 4疗程。结果 :临床及X线胸片评定有效率分别为 88%和85% ,对 0 +和I +I+尘肺优于Ⅲ +Ⅲ +尘肺 (P <0 .0 5)。不良反应轻微。结论 :千金藤碱治疗尘肺安全、有效。     

白药子质量标准研究

目的：建立白药子的质量标准。方法：采用显微鉴别法、薄层色谱法鉴别白药子;以《中国药典》规定的方法测定水分、总灰分和浸出物;用HPLC法测定千金藤素含量。结果：初步建立了白药子显微鉴别法、薄层色谱法及HPLC法测定含量。结论：为提高白药子标准提供参考。     

千金藤属植物中的生物碱

本文主要叙述千金藤属(Stephania)植物所含生物碱成份的结构类型,及其在该属植物中的分布情况。并述及一些植物在民间的治疗效用,以及部份生物碱成分的生理活性。     

HPLC法测定依维莫司原料药中依维莫司

目的建立HPLC法测定依维莫司原料药中依维莫司。方法采用Hypersil-ODS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–水(70∶30);检测波长:276 nm;柱温:50℃;体积流量:0.8 m L/min;进样量:10μL。结果依维莫司在63~1 008μg/m L线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为100.45%,RSD值为0.64%(n=9)。结论所建立的操作简便,专属性强,可用于依维莫司原料药的质量控制。     

HPLC-ELSD法测定白果中银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C

目的建立HPLC-ELSD法同时测定白果药材中银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C 3个萜杏内酯成分。方法采用Agilent 5TC C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇–四氢呋喃–水(25∶10∶65)为流动相,体积流量1 m L/min,柱温30℃,蒸发光散射检测器检测,对照品进样量为10、20μL,供试品溶液进样量为5~20μL。结果银杏内酯A在0.37~5.92μg、银杏内酯B在2.8~44.8μg、银杏内酯C在0.65~10.4μg时线性关系良好。银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C平均回收率分别为92.40%、95.03%、91.29%,RSD值分别为2.75%、2.06%、2.88%。结论本法操作简单,重复性好,为白果药材的质量控制提供了依据。     

蒙药材飞廉的定性及定量研究

目的建立飞廉药材的定性及定量方法。方法分别采用化学法和薄层色谱法对飞廉药材中的黄酮类成分和绿原酸进行定性鉴别,并采用高效液相色谱法测定绿原酸的含量。色谱柱为Hypersil ODS2柱（4．6mm×250mm,5μm）;流动相为甲醇．0．5％醋酸（15：85）;流速为1．0mL·min-1;柱温为25℃;检测波长为32513131。结果定性鉴别试验特征明显,绿原酸在0．088～1．76μg内呈良好的线性关系,平均回收率为100．3％（RSD为1．52％）。结论该方法简便、快速,重复性好,准确度高,可有效控制飞廉药材的质量。     

HPLC测定降脂宁调脂抗氧化有效部位中槲皮素含量

目的建立降脂宁调脂抗氧化有效部位中槲皮素的HPLC含量测定方法。方法采用SunFire C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（30︰70）,流速1.0 mL.min-1,检测波长370 nm,柱温30℃。结果槲皮素在0.052 2-0.313 2μg内线性关系良好,回归方程为Y=3 231 057.74X-4 753.64（r=0.999 5）,平均回收率为99.36%,RSD=1.73%（n=6）。结论 3批样品测定结果表明,该方法简便、准确,可用于降脂宁有效部位中槲皮素的含量测定。     

瑞格非尼片在健康志愿者体内的药动学研究

目的利用固相萃取–高效液相色谱,建立测定人血浆中瑞格非尼及其代谢产物N-氧化瑞格非尼和去甲-N-氧化瑞格非尼的方法,研究其人体药动力学。方法采用固相萃取–高效液相色谱法进行检测,以索拉非尼为内标,Oasis HLB型固相萃取柱(200 mg×6 m L);流动相:0.5%磷酸二氢钾溶液–乙腈(30∶70);检测波长:260 nm;体积流量:0.5 m L/min;柱温:30℃;进样量:5μL。健康志愿者空腹条件下用50 m L温水送服40、160 mg/片瑞格非尼片。利用DAS 2.1.1软件对药–时数据进行统计学分析,并得到主要药动学数据。结果瑞格非尼及其代谢产物N-氧化瑞格非尼和去甲-N-氧化瑞格非尼在10~10 000 ng/m L线性关系良好;检测限(LOD)分别为0.67、0.72、0.57 ng/m L;定量限(LOQ)分别为1.98、2.32、1.61 ng/m L;得到瑞格非尼及其代谢产物N-氧化瑞格非尼和去甲-N-氧化瑞格非尼药–时曲线和主要药动学数据。40、160mg/片规格瑞格非尼片中瑞格非尼的Cmax、AUClast、AUCmf、t1/2分别为(2 215.7±216.9)、(5 721.2±672.1)ng/m L,(13 772.9±10 231.1)、(51 182.3±43 219.2)ng·h/m L,(12 858.3±12 510.2)、(66 531.8±51 093.1)ng·h/m L,(6.58±1.31)、(13.12±4.23)h。结论采用固相萃取–高效液相色谱法考察瑞格非尼片在健康志愿者体内的药动学研究具有操作简便、可靠性高等优点,对该药的应用具有重要意义。     

HPLC法测定粉背雷公藤中雷公藤甲素的含量

目的：建立高效液相色谱法测定广西产粉背雷公藤中不同部位雷公藤甲素的含量方法。方法：采用C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-水（45：55）,检测波长217nm,流速1mL／min,柱温24℃,进样量为20μL。结果：雷公藤甲素在0．5～10μg／mL范围内呈良好的线性关系;平均加样回收率为99．61％,RSD为1．69％（n=5）;粉背雷公藤根部和茎枝中雷公藤甲素的平均含量分别为14．98和3．64μg/g。结论：本方法简便可行、定量准确、重现性好,可用于粉背雷公藤中雷公藤甲素的质量控制。     

UPLC-MS/MS同时测定不同产地石仙桃中30种酚类成分的含量

目的建立超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定石仙桃中30种酚类成分含量的方法,并对不同产地的石仙桃药材进行质量评价。方法采用Welch Xtimate UHPLC C 18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2 mL·min-1,柱温45℃;质谱采用电喷雾离子源正负离子切换模式扫描,在多反应监测模式下进行定量分析;采用SPSS软件对含量测定结果进行聚类分析。结果30种成分在各自线性范围内均呈良好的线性关系(r≥0.9986),平均加样回收率为95.18%~104.97%(RSD≤5.04%),其精密度、重复性、稳定性的RSD均小于5.19%。聚类分析将13批不同产地药材分为2类,浙江、福建、广东、广西产地(S1~S3、S5~S11、S13)为Ⅰ类,四川、云南产地(S4、S12)为Ⅱ类。结论该方法能快速实现对石仙桃中30种酚类成分的定性定量分析,可用于石仙桃药材的质量评价。     

百部生药学研究——Ⅸ.中国百部属植物块根中总生物碱的测定与评估

An acid-dye colorimetric method was reported for the determination oftotal alkaloids in 53 samples of Baibu drugs from their growing destricts in 14 provincesand municipalities and its average recovery and its linear range were 96. 1% ( CV <4%)and 20～150μg respectively. The relationship between the total alkaloid content, geogra-phical origins and morphology were discussed. The results showed that: 1. the content of totalalkaloids of stemona was 0.26～3. 1 %; 2. that of Stemona sessilifolia was 0.26～2.17%with the highest content of the sample from Nanyang country in Henan Province; 3.that of S. japonica was 0.83～1.43%; 4. that of S. tuberosa was 0.53～3.1% with thehighest content of sample from Hengyang in Hunan Province; 5.that of S.parviflora was 0.22～0.74% with the highest content of sample from Qongzhong in Hainan Province;and 6.thatof more yellow, solider and stronger samples was higher than that of any other samples.Howerver, that of all bigger samples in shape was not higher than that of smaller ones.     

不同采收期龙胆中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷和獐牙菜苷的变化研究

目的研究不同采收期龙胆中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷的变化规律。方法采用Welchrom C_(18)色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–水(25∶75);检测波长:270(龙胆苦苷)、240 nm(獐芽菜苦苷和獐牙菜苷);体积流量:1.0 m L/min;柱温:25℃;进样量为10μL。分别采收9、10月上、中、下旬的龙胆,考察其中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷的变化。结果在9—10月,龙胆中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷和獐牙菜苷的量基本呈现同步上升、同步下降趋势。在9月中旬最高,9月下旬最低。与9月下旬比较,10月上旬的量有所回升,而10月下旬的量再次呈下降趋势。结论龙胆药材最佳采收季节为9月中旬,此时龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和獐牙菜苷的量最高。     

HPLC同时测定穿心莲药材及其注射液中3种内酯类成分的含量

目的利用HPLC同时测定穿心莲药材及其注射液中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯和新穿心莲内酯的含量。方法色谱柱为Shimadzu Shim-pack VP-ODS柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇-水(53∶47)洗脱,流速:1 mL.min?1,柱温:25℃,检测波长225 nm处检测穿心莲内酯,检测波长205 nm处检测脱水穿心莲内酯与新穿心莲内酯。结果穿心莲药材及其注射液中3种内酯类成分能达到很好分离,线性关系良好(r≥0.999 5);平均加样回收率为99.6%~101.2%,RSD<3%。结论本方法灵敏、准确、可靠、重复性好,可用于穿心莲药材及其注射液的质量评价与3种内酯类成分的快速测定。