岩藻多糖体外抗KRV活性初步研究

目的 为了研究岩藻多糖体外抗Kilham rat virus（KRV）病毒的活性以及抑制炎症因子IL-1、IL-6的表达。方法 CCK-8法测得岩藻多糖对大鼠肾细胞（NRK）的半数细胞毒性浓度（CC50）;通过细胞病变效应测定药物的抗病毒活性,计算药物的半数抑制浓度（IC50）以及治疗指数（SI）;建立KRV感染大鼠肾细胞（NRK）细胞模型,设置阴性对照、病毒感染组以及治疗实验组,通过实时荧光定量PCR检测病毒以及IL-1、IL-6的表达水平。结果 CCK-8法测得药物的CC50 > 2500μg/mL,岩藻多糖的IC50为114.8±8.1μg/mL,治疗指数 > 21.78;qPCR结果表明KRV的转录水平实验组较阳性对照组明显降低,且IL-1、IL-6的转录水平亦显著降低。结论 岩藻多糖具有较小的细胞毒性以及良好的抗KRV病毒的效果,并且能够减轻病毒诱导的炎症反应,为防治病毒感染导致的糖尿病提供理论基础。     

雷帕霉素对TGF-β1诱导的Treg细胞的体外影响

目的体外观察雷帕霉素（Rapa）对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的CD4^＋CD25^＋Treg细胞（i Treg）扩增的有效性及其相关性。方法以抗原提呈细胞（APC）、植物血凝素（PHA,10μg·L^-1）、TGF-β1（7.5 ng·L^-1）联合刺激诱导CD4^＋CD25^-T细胞转化为CD4^＋CD25^＋Treg细胞,培养第5日添加不同浓度Rapa刺激培养3d作为实验组,设阴性对照组（不加Rapa）和空白对照组（RPMI 1640培养基）,FCM检测各组中CD4^＋CD25^＋T细胞比例变化情况;MTT法测定各组诱导细胞的抑制功能。结果①阴性对照组CD4＋CD25＋T细胞比例较空白对照组增高（P〈0.01）,而实验组CD4^＋CD25^＋T细胞比例显著升高,Rapa（100 ng·mL^-1）增殖效应显著（P〈0.01）,CD4^＋CD25^＋T细胞增殖比例达到42.6%;②实验组i Treg细胞能够明显抑制同型CD4^＋CD25^-T细胞的增殖（P〈0.01）且不同浓度Rapa之间存在差异,100 ng.mL^-1Rapa抑制效应最明显（P〈0.01）。结论在体外条件下,Rapa可以促进TGF-β1诱导分化的Treg细胞增殖,且具有免疫抑制功能,这为体外回输Treg细胞治疗疾病开辟了新途径。     

CD4＋CD25＋Treg调节性T细胞及其细胞因子在大鼠动脉粥样硬化中改变的研究

目的 研究CD4＋ CD25＋ Treg调节性T细胞及其分泌的细胞因子在大鼠动脉粥样硬化中的改变.方法 制备动脉粥样硬化模型,取雄性SD大鼠30只,随机分为正常饮食组（A组）10只及高脂饮食组（B组）20只,高脂饮食组再分为对照组与干预组各10只,干预组高脂饲料喂养前腹腔注射抗CD25＋单克隆抗体250μg,A组及对照组腹腔注射大鼠IgG抗体（250μg）,高脂饮食组定期用维生素D腹腔注射.上述各组喂养3个月后,各组随机抽取6只大鼠通过流式细胞学技术检测CD4＋ CD25 ＋Treg细胞及Foxp3＋的表达、检测炎症因子IL-10,IL-1β水平,处死各组大鼠做病理切片.结果 3组中干预组CD4＋ CD25＋ Treg细胞及Foxp3＋表达下降最明显,IL-10水平明显下降,IL-1β水平明显升高,A组CD4＋ CD25＋ Treg细胞及Foxp3＋表达最高,IL-10水平亦最高,IL-1β水平最低.而对照组在干预组及A组之间.结论 动脉粥样硬化形成中CD4＋ CD25＋ Treg调节性T细胞及其分泌的细胞因子受到抑制,而不是CD4＋ CD25＋ Treg调节性T细胞分泌的因子却显著升高,考虑动脉粥样硬化的形成有免疫反应参与.     

雷帕霉素诱导大鼠体内CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的增殖

目的 探讨雷帕霉素(RPM)对大鼠CD4+CD25+FoxP3调节性T细胞的影响.方法 大鼠20只随机均分为两组:实验组RPM 2 mg·kg-1·d-1灌胃2周;对照组用生理盐水替代.无菌件下下腔静脉采血,并分离脾脏及胸腺,制备单个核细胞悬液.采用流式细胞术检测大鼠外周血、脾脏及胸腺内CD4+CD25+T细胞的占单个核细胞的比例,实时定量-PCR检测脾脏细胞FoxP3 mRNA表达,ELISA检测外周血血清转化生长因子β(TGF-13)和白细胞介素10(IL-10)含量.结果 实验组外周血、脾脏和胸腺中CD4+CD25+T细胞的比例明显高于对照组(P＜0.05).实验组大鼠脾脏细胞FoxP3 mRNA表达为对照组的4.1倍.实验组TGF-β和IL-10显著高于对照组(P＜0.05).结论 RPM能诱导大鼠体内CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞增殖,且增加体内免疫抑制性细胞因子TGF-β和IL-10的分泌.     

大蒜新素对巨细胞病毒感染小鼠细胞因子TGF-β1的影响

目的 探讨大蒜新素对全身播散型小鼠巨细胞病毒（MCMV）感染模型鼠转化生长因子β1（TGF-β1）基因转录和蛋白表达的影响. 方法建立MCMV全身播散型感染BALB/c小鼠模型, 将60只模型鼠随机分为安慰药组和大蒜新素（25 mg•kg^-1•d^-1）治疗组, 并设60只同期模拟感染小鼠为对照, 随机分为模拟对照组和大蒜新素对照组, 每组30只. 于药物治疗后1, 3, 7, 14和28 d获取血清和脾细胞（体外培养刺激物为灭活MCMV抗原）. 用双抗体夹心ELISA法检测血清和脾细胞培养上清TGF-β1水平;用逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR）法检测脾细胞TGF-β1mRNA表达强度. 结果安慰药组在治疗后3 d血清TGF-β1水平即显著上升达高峰, 随后逐渐下降, 但至28 d仍明显高于模拟对照组;其脾细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达变化一致, 均在治疗后3 d明显增高, 7 d达高峰, 28 d回落到稍高于模拟对照组水平. 与安慰药组比较, 大蒜新素治疗组3 d后血清和脾细胞培养上清TGF-β1水平均有降低, 以治疗后3～7 d差异最为显著;而脾细胞TGF-β1mRNA表达与大蒜新素对照组相近. 结论MCMV在急性感染期可诱导免疫抑制因子TGF-β1基因转录和蛋白表达明显增高, 而大蒜新素治疗可完全阻遏病毒诱导的脾细胞TGF-β1基因转录, 并明显降低模型鼠血清和脾细胞TGF-β1表达水平.     

β_2微球蛋白和调节T细胞在非霍奇金淋巴瘤中的应用

目的探讨血清β2微球蛋白（β2-MG）和CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞（regulatoryTcells,Treg）在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的临床意义。方法对67例非霍奇金淋巴瘤患者按骨髓涂片检查结果分为淋巴瘤白血病组,有骨髓侵润组和无骨髓侵润组。40例健康体检者为对照组。用AU2700全自动生化分析仪分别对其血清进行β2-MG进行检测,同时用流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞表达百分率。结果①非霍奇金淋巴瘤患者的血清β2-MG水平明显高于对照组（P〈0.01）,其中淋巴瘤白血病组和有骨髓侵润组β2-MG水平高于无骨髓侵润组（P〈0.01）;淋巴瘤白血病组高于骨髓侵润组（P〈0.01）.3组非霍奇金淋巴瘤患者化疗后β2-MG水平均低于化疗前的水平（P〈0.05）。②非霍奇金淋巴瘤患者、健康对照组外周血CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞占CD4＋淋巴细胞的比例分别为6.73±1.79%、4.15±1.43%。非霍奇金淋巴瘤患者Treg细胞表达高于健康对照组,差异有显著性（P〈0.05）;淋巴瘤白血病组和有骨髓侵润组Treg细胞表达比例明显高于无骨髓侵润组（P〈0.05）,疾病越严重,Treg细胞表达水平越高;非霍奇金淋巴瘤患者化疗前外周血CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞水平升高,化疗后外周血Treg细胞水平降低,结论血清β2微球蛋白和CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞检测对非霍奇金淋巴瘤的诊断,疗效及预后的判断具有重要的临床价值。     

犀角地黄汤合方含药血清调节ITP患者Teff/Treg分化及功能的研究#br#

目的　探究犀角地黄汤合方含药血清对免疫性血小板减少症（ITP）患者效应性T细胞（Teff）/调节性T细胞（Treg）分化的影响,并探讨磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路在其中的作用机制。方法　采用随机数字表法将20只大鼠分为含药血清组和空白血清组,每组10只,分别使用犀角地黄汤合方颗粒和蒸馏水连续灌胃3 d,收取2组大鼠全血制备含药血清和空白血清。收集健康志愿者和ITP患者外周血,提取外周血单个核细胞（PBMC）,磁珠分选CD4+ T细胞,抗CD3/CD28抗体培养体系活化后,分为对照组、模型组和实验组。对照组为健康志愿者CD4+ T细胞,模型组及实验组为ITP患者CD4+ T细胞,实验组采用含药血清干预72 h,对照组及模型组采用大鼠空白血清干预72 h。流式细胞术检测各组CD4+ T细胞中Teff/Treg比例;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组培养上清液中白细胞介素（IL）-2、干扰素（IFN）-γ、肿瘤坏死因子（TNF）-α、IL-6、IL-17及Treg细胞因子转化生长因子（TGF）-β、IL-10水平;Western blot检测PI3K、Akt、mTOR蛋白及磷酸化蛋白水平。结果　CD4阳性率为（99.44±0.01）%。与对照组相比,模型组CD4+ T细胞中Teff细胞比例明显升高,Treg比例明显降低,Teff/Treg比值增大,IL-2、IL-6、IL-17、IFN-γ、TNF-α水平以及PI3K、p-PI3K、mTOR、p-mTOR蛋白水平升高,TGF-β、IL-10、p-Akt蛋白水平降低（P＜0.05）;与模型组相比,实验组CD4+ T细胞中Teff细胞比例降低,Treg细胞比例升高,Teff/Treg比值减小,IL-2、IL-6、IL-17、IFN-γ、TNF-α水平以及PI3K、p-PI3K、mTOR、p-mTOR蛋白水平降低,TGF-β、IL-10水平升高（P＜0.05）。结论　犀角地黄汤合方含药血清能够调节ITP患者Teff/Treg的分化及细胞因子的分泌,可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路PI3K、mTOR蛋白表达及其磷酸化水平有关。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在晚期肺癌中的表达及临床意义

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg细胞）在晚期肺癌中的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术分析30例晚期肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达水平,与10例健康人比较。结果晚期肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量增加（17．9±6．1）％,表达高于正常人（6．81±0．4）％（P〈0．001）。肺癌患者外周血中Treg细胞数量与患者的病理类型无关（P〉0．05）,但与临床分期和组织学分化程度有关（P〈0．01）。结论Treg细胞在肺癌患者中比率明显升高,并与临床进展有关。     

丹参酮ⅡA 磺酸钠联合阿托伐他汀治疗冠心病心力衰竭的疗效及对患者血清 Treg、IL-10、TGF-β水平的影响

目的：观察丹参酮ⅡA 磺酸钠联合阿托伐他汀治疗冠心病心力衰竭的临床疗效及对患者血清 CD ＋4 CD ＋25调节性 T 细胞（Treg）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子（TGF-β）水平的影响。方法选取诊治的冠心病心力衰竭患者76例,随机分为对照组和观察组,每组38例,对照组在常规治疗基础上给予阿托伐他汀治疗,观察组在对照组基础上加用丹参酮ⅡA 磺酸钠注射液,疗程为30 d。比较2组临床疗效。观察2组治疗前后每搏输出量（CO）、心脏指数（CI）、左心室射血分数（LVEF）、左心室舒张末期内径（LVEDD）、心绞痛积分、室性心律失常发生率及血清Treg、IL-10、TGF-β水平。结果观察组总有效率（94.74％）显著高于对照组（73.68％）,差异有统计学意义（ P ＜0.05）。治疗后两组 CO、CI、LVEF、Treg、CD ＋4 T 淋巴细胞、Treg/ CD ＋4 T 淋巴细胞比值及 TGF-β水平均较治疗前升高,且观察组升高程度优于对照组（ P ＜0.05）。治疗后2组 LVEDD、心绞痛积分、心律失常发生率、IL-10均较治疗前降低,且观察组降低程度优于对照组,差异有统计学意义（ P ＜0.05）。结论丹参酮ⅡA 磺酸钠联合阿托伐他汀治疗冠心病心力衰竭疗效显著,能够有效改善患者心功能,其机制与调节 CD ＋4 CD ＋25调节性 T 细胞数量及其细胞因子表达有关。     

基于HPTT轴探讨补脾强力复方调节EAMG大鼠免疫系统平衡的机制

目的 基于下丘脑-垂体-甲状腺-胸腺（HPTT）轴探讨补脾强力复方调节实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）大鼠免疫系统平衡的机制。方法 将120只Lewis大鼠随机分为对照组,模型组,补脾强力复方低、中、高剂量组（4.75、7.12、9.49 g/kg）和西药组（泼尼松,5.4 mg/kg）,每组20只。实验期间观察大鼠行为学改变（体质量、Lennon评分）。实验结束后HE染色评估胸腺组织病理变化,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清乙酰胆碱受体抗体（AchR-Ab）、肿瘤坏死因子（TNF）-β、白细胞介素（IL）-4和IL-10含量;流式细胞术检测大鼠胸腺中CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg细胞比例,同时检测HPTT轴功能损伤指标[（三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、促甲状腺激素（TSH）、促甲状腺激素释放激素（TRH）、下丘脑T3受体（T3R）、去甲肾上腺素（NE）]水平。结果 建模后,与对照组相比,各建模组体质量下降,Lennon评分升高;给药后,补脾强力复方中、高剂量组和西药组体质量较模型组升高,Lennon评分下降（P<0.05）。HE染色可见模型组皮质区淋巴细胞变性坏死,髓质区胸腺小体消失,细胞数量减少;补脾强力复方低、中、高剂量组及西药组大鼠胸腺皮质区和髓质区细胞数量明显增多。与对照组相比,模型组胸腺CD4⁺CD25⁺ Treg、CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg细胞比例下降,CD4⁺CD25^-Foxp3⁺ Treg和CD4⁺CD25⁺Foxp3^- Treg细胞比例升高（P<0.05）,血清AchR-Ab、TNF-β、IL-4、IL-10、TSH和TRH水平明显升高,T3R和NE水平明显下降（P<0.05）。与模型组相比,补脾强力复方中、高剂量组及西药组胸腺CD4⁺CD25⁺ Treg、CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg细胞比例升高,CD4⁺CD25^-Foxp3⁺ Treg和CD4⁺CD25⁺Foxp3^- Treg细胞比例下降,血清AchR-Ab、TNF-β、IL-4、IL-10、TSH和TRH水平下降（P<0.05）;T3R和NE水平升高。结论 补脾强力复方可以通过调控HPTT轴及其相关因子,改善EAMG大鼠自身免疫平衡。     

丙二酸次氮酰胺对刀豆蛋白刺激的胶原性关节炎模型大鼠CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞体外分化的影响

目的:研究来氟米特活性代谢物丙二酸次氮酰胺(A771726)对刀豆蛋白(ConA)刺激的胶原性关节炎(CIA)模型大鼠CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(CD4+CD25+Tregs)体外分化的影响及其治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:取大鼠分为正常对照组和CIA模型组,建模后制备脾淋巴细胞悬液,再分为正常组、模型组和A771726低、中、高剂量(0.1、1、10μmol·L-1)组,各组加入ConA刺激和相应药物培养液培养48h后,以MTT法检测各组脾淋巴细胞增殖情况,流式细胞术检测各组CD4+CD25+Tregs占CD4+T淋巴细胞的比例;反转录-聚合酶链式反应检测各组CD4+CD25+Tregs特异性标志物Foxp3和转化生长因子β(TGF-β)mRNA表达情况;酶联免疫吸附测定法检测各组TGF-β浓度。结果:与正常组比较,模型组脾淋巴细胞增殖明显升高(P<0.01),CD4+CD25+Tregs占CD4+T淋巴细胞的比例、Foxp3和TGF-βmRNA表达、TGF-β浓度均明显降低(P<0.05);与模型组比较,A7717263个剂量组脾淋巴细胞增殖明显降低(P<0.05或P<0.01),A771726高剂量组CD4+CD25+Tregs占CD4+T淋巴细胞的比例明显升高,A771726中、高剂量组Foxp3和TGF-βmRNA表达、TGF-β浓度均明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:A771726可抑制CIA模型大鼠脾淋巴细胞增殖,诱导CD4+CD25+Tregs的分化,其机制可能与上调TGF-β的表达和分泌有关。     

不同剂量雷帕霉素对小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞的影响

目的研究不同剂量雷帕霉素对小鼠体内Treg细胞的影响。方法将SPF级昆明系小鼠60只随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D),B、C、D三组分别灌胃雷帕霉素1、2、3 mg.kg-1,A组每天予以无菌水灌胃,共3周。3周后,无菌条件下心脏采血,EDTA抗凝,分离脾脏,制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞水平(CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分比)。结果实验组(B、C、D)小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞水平分别为(9.62±1.43)%(、13.76±1.97)%(、15.41±2.45)%和(12.23±4.56)%(、23.03±6.18)%(、25.17±6.42)%,对照组(A)小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞水平分别为(3.52±0.65)%和(6.53±3.01)%,无论是在外周血还是脾细胞中,B、C、D组CD4+CD25+Treg细胞水平明显高于A组(P0.05),C、D组与B组之间CD4+CD25+Treg细胞水平也有明显差异性(P0.05),C组和D组之间CD4+CD25+Treg细胞水平无明显差异性(P0.05)。结论雷帕霉素能够诱导昆明系小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞增殖,其使用剂量可以影响CD4+CD25+Treg细胞的增殖程度。     

原发性肝癌患者手术前后外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞变化的临床意义

目的：探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋regulatory T cell,CD4＋CD25＋Treg）在原发性肝癌患者手术前、后外周血中的变化特性,分析CD4＋CD25＋Treg细胞在肝癌细胞免疫中的作用机制。方法选取本院50例原发性肝癌患者作为实验组,分别采集术前7d、术后14d外周血,同时采集本院50例健康体检人群外周血作为对照组,经过流式细胞仪检测,统计分析各组外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞、CD4＋T细胞和CD8＋T细胞比率。结果（1）术前外周血中CD4＋CD25＋Treg比率显著高于对照组, CD8＋T细胞比率显著低于对照组,两组差异有显著性意义;CD4＋T细胞比率比较,差异无统计学意义。（2）术后外周血中CD4＋CD25＋Treg,CD4＋T细胞,CD8＋T细胞比率与对照组比较,差异无统计学意义。（3）术前与术后外周血中CD4＋CD25＋Treg、CD8＋T细胞比率比较,两组差异有显著性意义;CD4＋T细胞比率比较,差异无统计学意义。结论原发性肝癌患者手术前、后外周血CD4＋CD25＋Treg变化在肿瘤细胞免疫及临床治疗中具有重要意义。     

塞来昔布减轻糖尿病大鼠心肌细胞纤维化的实验研究

目的 探讨塞来昔布对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞纤维化的影响.方法 将Wistar大鼠30只随机分为对照组（A组）、糖尿病心肌病组（B组）和糖尿病心肌病塞来昔布治疗组（C组）各10只.取大鼠心肌组织,经常规石蜡切片、染色后测定胶原纤维面的密度值;采用RT-PCR法测定TGF-β1 mRNA表达情况.结果与A组相比,B组大鼠心肌组织的胶原纤维密度值、TGF-β1 mRNA表达明显升高（P〈0.05）.C组大鼠的胶原纤维、TGF-β1 mRNA表达明显低于A组和B组（均P〈0.05）.结论塞来昔布可能通过抑制TGF-β1减轻糖尿病大鼠心肌纤维化.     

CD_4~+CD_(25)~+Treg和Foxp3mRNA表达对妊娠期糖尿病母亲婴儿的意义

目的探讨妊娠期糖尿病母亲婴儿CD_4~+CD_(25)~+Treg及Foxp3mRNA的表达及意义。方法将60例足月新生儿分为两组。30例实验组为妊娠期糖尿病母亲婴儿,30例对照组为健康新生儿。检测两组Treg比例及Foxp3mRNA表达水平。结果实验组Treg比例(3.7507±1.24942)%,对照组Treg比例(2.9713±1.53691)%,P=0.035 <0.05,两组差异有统计学意义;对照组Foxp3 mRNA平均秩次21.22,实验组Foxp3 mRNA平均秩次39.78,P=0.000<0.05,二者差异有统计学意义;对照组CD_4~+CD_(25)~+Treg与Foxp3 mRNA,相关系数0.564,P=0.001<0.01,二者正相关,实验组CD_4~+CD_(25)~+Treg与Foxp3 mRNA,相关系数0.775,P=0.000<0.01,二者正相关。结论妊娠期糖尿病母亲婴儿CD_4~+CD_(25)~+Treg及Foxp3mRNA高表达,可导致免疫失衡。     

肾茶提取物含药血清对大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1表达的影响

目的 探讨肾茶两种不同化学提取物对大鼠肾小球系膜细胞（MCs）增殖与TGF-β1分泌、TGF-β1 mRNA表达的影响.方法 对肾茶提取分离得到乙酸乙酯、正丁醇两种不同化学提取物,分别给大鼠灌胃后,采血制备含药血清.以肾茶提取物含药血清为干预因素,体外培养的肾小球系膜细胞（MCs）为研究对象,采用CCK-8、ELISA、RT-PCR技术,探讨其对脂多糖（LPS）诱导的系膜细胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1 mRNA表达的影响.结果 不同剂量的肾茶正丁醇与乙酸乙酯提取物的含药血清均明显抑制LPS刺激的大鼠MCs增殖及TGF-β1分泌（P＜0.01或P＜0.05）;肾茶正丁醇提取物高、低剂量组与乙酸乙酯提取物高剂量组的含药血清可明显抑制LPS刺激的大鼠MCs TGF-β1 mRNA表达（P＜0.01或P＜0.05）.其中,肾茶正丁醇提取物抑制作用明显优于乙酸乙酯提取物,二者同剂量比较差异有统计学意义（P＜0.01）,且抑制作用呈一定的剂量相关性（P＜0.01）.结论 体外实验表明,肾茶二种提取物含药血清可抑制MCs的异常增生及TGF-β1的过度表达,其中正丁醇提取物作用优于乙酸乙酯提取物,为肾茶开发新制剂治疗肾小球疾病提供参考.     

哮喘患儿单个核细胞FOXP3 mRNA表达应用实时荧光定量RT-PCR检测的临床意义

目的探讨哮喘患儿单个核细胞FOXP3 mRNA表达应用实时荧光定量RT-PCR检测的临床意义。方法选取来本院就诊的29例哮喘患儿和24例正常健康儿童作为对照,对两组病例应用流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+CD25+Treg的比例,并鉴定PCR产物特异性。结果哮喘患儿组CD4+CD25+Treg检测结果为(8.26±2.04)%,显著低于对照组(12.71±2.53)%,差异有统计学意义(P0.01)。哮喘患儿组FOXP3/β-actin的2-△Ct值为(0.49±0.15),对照组为(0.62±0.18),两者比较,有显著性差异(P0.05)。外周血单个核细胞中FOXP3mRNA表达与淋巴细胞中CD4+CD25+Treg比例呈正相关(r=0.679,P0.05)。经融解曲线分析显示FOXP3和β-actin均仅有单一扩增产物。结论对于哮喘患儿单个核细胞FOXP3mRNA表达水平应用实时荧光定量RT-PCR检测,方法简便,结果稳定、可靠。     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与慢性乙型肝炎病毒感染的关系

目的 探讨调节性T细胞（Treg）在慢性乙型肝炎病毒感染中的免疫调节作用。方法 采用流式细胞术检测慢性活动性肝炎患者、乙型肝炎病毒携带者、乙型肝炎恢复者及健康对照者外周血CIN^＋T细胞中的CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例。采用免疫组织化学法检测肝组织中Foxp3的表达。统计分析外周血中CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例数与血清HBeAg和HBVDNA含量的关系。结果 外周血CIN^＋T细胞中CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例数在慢性活动型肝炎组和乙型肝炎病毒携带组均高于健康对照组（P〈0．05），乙型肝炎病毒携带者组高于乙型肝炎恢复组（P〈0．05）。Foxp3在慢性活动型肝炎组肝组织中的阳性率和阳性细胞数均高于乙型肝炎病毒携带者组（P〈0．05）。外周血HBeAg（＋）患者Treg的比例数高于血清HBeAg（-）患者Treg的比例数（t=1．67．P〈0．05）。患者外周血CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg的比例数与血清HBV DNA含量呈正相关（r=0．56，P〈0．01）。结论 CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞可能与乙型肝炎病毒感染慢性化及乙型肝炎病毒的清除有关。     

慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞水平对阿德福韦酯抗病毒远期疗效的预测价值

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者接受阿德福韦酯抗病毒治疗前外周血CD4±、CD25±调节性T细胞（Treg细胞）水平与抗病毒远期临床疗效的关系。方法选取具有抗病毒治疗适应证、核苷类似物初治的CHB患者为病例组（92例）,另选取性别、年龄相匹配的10例健康者为对照组。采用流式细胞技术检测入选对象外周血Treg细胞水平。病例组给予阿德福韦酯10mg／d抗病毒治疗,定期检测乙型肝炎病毒标志物、HBVDNA及肝功能等。结果治疗48周时,完全应答、部分应答和无应答者分别为11、69、12例。治疗前病例组外周血Treg细胞水明显高于对照组[（8．2±5．2）％比（3．0±0．7）％,P〈0．05]。无应答组外周血Treg细胞水明显高于部分应答组、完全应答组和对照组[（11．6±1．6）％比（5．6±1.3）％、（3．6±0．8）％、（3．0±0．7）％,P〈0．01];部分应答组外周血Treg细胞水明显高于完全应答组和对照组（均P〈0．01）;完全应答组和对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CHB患者阿德福韦酯抗病毒治疗前外周血Treg细胞水平对阿德福韦酯抗病毒的远期疗效可能有一定的预测价值。     

Th17细胞和Treg细胞在尘肺病中的变化及其意义

目的：检测尘肺病患者外周血中Th17和Treg细胞比例的变化。方法收集2013年1-8月,江西省职业病防治研究院收治的尘肺病患者60例,其中尘肺病Ⅰ期、Ⅱ期组和Ⅲ期患者各20例,另取健康体检者20例作为对照组。用流式细胞仪检测Th17和Treg细胞的表达百分比。结果对照组、Ⅰ期组、Ⅱ期组和Ⅲ期组CD4＋IL17＋Th17细胞的比例分别为（1.31±0.42）％、（5.65±1.33）％、（8.86±2.88）％和（10.56±1.58）％;CD4＋CD25＋Treg细胞的比例分别为（3.57±1.32）％、（1.87±0.76）％、（0.82±0.53）％和（0.67±0.49）％。各组间差异经统计学分析均具有显著性差异。 Th17/Treg比值分别为（0.36±0.13）％、（3.02±0.95）％、（10.8±2.36）％和（15.76±1.23）％,各组间差异均具有统计学意义。相关性分析显示,Th17细胞比例与Treg细胞呈负相关（r＝-0.437,P〈0.05）。结论尘肺病患者中存在Th17细胞的升高和Treg细胞的降低,调控Th17/Treg细胞的失衡,可以成为尘肺病治疗的新思路。