大蒜新素对全身播散型人巨细胞病毒感染小鼠脏器病变的治疗作用

目的观察大蒜新素对巨细胞病毒全身播散感染小鼠肝脏、肺、肾脏、心肌组织病理变化的影响,探讨大蒜新素对巨细胞病毒全身播散感染小鼠的治疗效果。方法将60只 BALB/c 小鼠腹腔接种MCMV（Smith株）后随机分为实验组和对照组各30只,接种 MCMV,24 h后实验组给予大蒜新素25 mg·kg 1·d 1腹腔注射,qd;对照组给予等量0.9%氯化钠注射液,共120 d。给药后1,3,7,14,28,45,60,75,90和120 d两组各处死3只小鼠,显微镜下观察肝、肺、肾、心肌组织病理变化并进行评分。 结果两组肝、肺和心肌组织病理评分治疗后7 d达最高值,肾组织病理评分治疗后14 d达最高值,以后逐渐下降。与对照组比较,实验组脏器组织病变轻。两组肝脏HAI评分治疗14 d后差异有极显著性（P＜0.01）,以后差别逐渐增大;实验组肺组织Gloor评分给药28 d后与对照组比较差异有极显著性（P＜0.01）;肾组织与心肌组织病理评分治疗14 d后与对照组比较差异有显著性（均P＜0.05）,90 d差异更显著（P＜0.01）。此外,在给药后120 d,实验组肝、肺组织接近正常,肾脏和心肌仍有一定程度病理损伤。结论大蒜新素治疗2周后能够明显减轻模型小鼠肝、肺、肾脏和心肌病理损伤,对肝脏和肺的治疗效果尤其显著。     

大蒜新素对人巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞Caspase-3表达的影响

目的 观察大蒜新素对人巨细胞病毒（HCMV）感染的人胚肺成纤维细胞（HELs）Caspase-3表达的影响，从细胞凋亡角度探讨大蒜新素抗HCMV效应的部分作用机制。方法 用HCMV AD169毒株感染HELs，建立高感染复数（MOI）和低MOI感染细胞模型；设药物高、中、低剂量分别为9，6和3 μg·mL-1，采用蛋白印迹法检测病毒感染和（或）药物处理后72 h细胞Caspase-3的表达水平。结果 正常细胞仅见Caspase-3 P32表达；HCMV感染细胞P32表达显著增加，还出现活性片段P17条带，且高MOI组P17表达明显高于低MOI组；大蒜新素处理低MOI感染细胞P17表达呈上升趋势，P17/P32比值也明显增加；大蒜新素处理高MOI感染细胞P17表达下调，P17/P32比值也显著下降。结论 HCMV无论高或低MOI感染均可诱导细胞凋亡增多，且高MOI诱导作用更强。大蒜新素一方面使低MOI感染细胞凋亡增多，另一方面抑制高MOI感染细胞的凋亡。前者可能有利于细胞清除病毒，后者则可减少细胞损伤而发挥保护作用。大蒜新素对HCMV感染细胞凋亡的调控呈双向性。     

大蒜新素降低鼠巨细胞病毒播散性感染小鼠病毒DNA载量研究

目的用大蒜新素治疗鼠巨细胞病毒（murine cytomegalovirus, MCMV）播散性感染小鼠至慢性期,检测小鼠唾液腺、肝、脾和肾组织内MCMV DNA载量动态变化,在整体水平上观察大蒜新素抗MCMV的长期疗效。方法BALB/c幼鼠60只,腹腔接种MCMV Smith株建立MCMV播散性感染模型,随机分为大蒜新素治疗组和模拟治疗组各30只,接种病毒后24 h,两组分别腹腔注射大蒜新素25 mg•kg-1•d-1和0.9%氯化钠注射液0.2 mL,qd,共120 d。于治疗后1,3,7,14,28,45,60,75,90和120 d,每组随机选择小鼠3只,取唾液腺、肝、脾和肾组织,采用real time PCR法检测组织内MCMV DNA载量。结果模拟治疗组小鼠唾液腺内MCMV DNA载量最高,在治疗后14 d（感染后15 d）达高峰;肝、脾和肾内病毒DNA载量治疗后7 d达峰值;治疗28 d（感染29 d）后,各组织内病毒DNA载量明显减少,尤其是肝、脾和肾组织病毒DNA呈持续低水平（进入慢性期）。与模拟治疗组比较,大蒜新素治疗组治疗后7,14和28 d唾液腺、脾和肾内MCMV DNA 载量显著降低;治疗后7和14 d肝内病毒DNA载量明显降低。进入慢性期后,两组小鼠各脏器病毒DNA载量差异无显著性。结论大蒜新素长期治疗不能完全清除CMV,但在急性感染期（病毒增殖高峰期）能显著降低脏器内病毒DNA载量。     

冬虫夏草对小鼠巨细胞病毒感染的作用

目的：观察冬虫夏草多糖脂蛋白（Ⅰ）和Ⅰ＋黄芪（Ⅱ）对小鼠巨细胞病毒（ＭＣＭＮＶ）感染的作用。方法：将不同浓度Ⅰ、Ⅱ和淫羊藿（Ⅲ）接种在鼠胚成纤维细胞（ＭＥＦＣ）上,观察毒性作用;将Ⅰ、Ⅱ与ＭＣＭＶ等量混匀后,接种ＭＥＦＣ培养瓶,观察Ⅰ、Ⅱ对ＭＣＭＶ的作用;预先ｉｇⅠ和Ⅱ１５ｄ后,接种ＭＣＭＶ。ｄ６取唾液腺标本接种ＭＥＦＣ,培养后观察Ⅰ、Ⅱ以 液腺标本接种ＭＥＦＣ后的ＭＣＭＶ分离数目,结果：１除Ⅲ外     

脂多糖对巨细胞病毒感染小鼠耳聋的影响

目的 探讨脂多糖(LPS)在小鼠巨细胞病毒(MCMV)全身感染导致听力损伤发病机制中的作用.方法 40只小鼠随机均分为四组,每组10只:A组,腹腔注射MCMV联合脑内注射LPS;B组,腹腔注射MCMV联合脑内注射PBS;C组,腹腔注射PBS联合脑内注射LPS;D组,腹腔和脑内均注射PBS.2周后行听觉脑干诱发电位(ABSEP)检查,取出两侧听泡,分别用于MCMVPCR分析和病理学检查.结果 与B、C、D组相比,A组ABR I波潜伏期延长、波幅降低、阈值升高(P＜0.05),耳蜗内炎症变化明显.结论 LPS可诱导产生MCMV感染引起的听力损伤.     

灯盏花素对肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1及透明质酸含量的影响

目的研究灯盏花素对博莱霉素A5致肺纤维化大鼠肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)及细胞外基质透明质酸(HA)含量的影响。方法将72只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、灯盏花素对照组和灯盏花素治疗组。除正常组及灯盏花素对照组外,其余2组大鼠经气管注入博莱霉素A5复制肺纤维化大鼠模型,各组于造模后d1分组予以给药,于给药7、14、28d分批处死各组大鼠,每次每组6只。应用ELISA法检测肺组织中TGF-β1及HA的含量。结果与模型组比较,灯盏花素治疗组病理改变与模型组表现一致,但较模型组减轻;在不同时段灯盏花素治疗组TGF-β1及HA含量均较模型组明显降低,但仍高于对照组和灯盏花素对照组。结论灯盏花素可能通过降低TGF-β1和HA含量,减轻博莱霉素A5致大鼠肺纤维化作用。     

大蒜新素对实验性急性脑缺血的保护作用

大蒜新素对实验性急性脑缺血的保护作用马晓红１刘天培（南京医科大学药理学教研室，南京２１００２９）大蒜新素（ａｌｉｔｒｉｄｉ，Ａｌ）为葱科植物大蒜中的有效成分，已发现其有降压，降血脂，抗动脉粥样硬化，抗血小板聚集及抗心肌缺血等作用［１，２］．临床上有关...     

维生素A酸对小鼠囊胚TGF-β1蛋白表达的影响

目的:探讨TGF-β1细胞因子对着床前胚胎发育的作用,从而探讨ATRA对着床前期胚胎发育毒性作用,为其致畸机理提供实验依据。方法:通过促超排卵,获取妊娠3.5d小鼠囊胚,随机分成三组,即对照组(空白)、实验1组(含1μmol/L的ATRA)和实验2组(含10μmol/L的ATRA),分别培养在含0、1μmol/L和10μmol/L的ATRA的M199培养基中,培养24h,然后再吸出囊胚。用免疫组织化学S-P法,分别检测不同剂量组ATRA对小鼠囊胚TGF—β1蛋白表达的状况,利用HPIAS-2000图像分析系统测定TGF-β1蛋白在以上三组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:TGF-β1蛋白在囊胚细胞中的表达,实验1组与对照组囊胚TGF-β1蛋白表达的阳性面积率及平均光密度有显著性差异(P<0.01);实验2组与空白组和实验1组相比均存在显著性差异(P<0.01)。结论:细胞因子TGF-β1在胚胎发育的调节中发挥了重要作用。     

五苓散对慢性心力衰竭患者血清TGF-β_1的影响

目的观察五苓散对慢性心力衰竭患者血清TGF-β1的影响。方法将患者分成治疗组和对照组,对照组采用强心、利尿、扩血管的方法,治疗组在西医基础上给予五苓散为主加减治疗,疗程3个月,两组治疗前后均检测TGF-β1的含量。结果治疗组68例,显效34例(50.0%),有效30例(44.1%),无效4例(5.9%);对照组62例,显效17例(27.4%),有效37例(59.7%),无效8例(12.9%)。两组差异有统计学意义(P<0.05),治疗前后血清TGF-β1水平有明显差异(P<0.05)。结论 TGF-β1可预测心血管疾病的危险,可作为预测CHF患者预后指标之一;五苓散为主加减治疗可降低TGF-β1水平,防止心室重塑、改善CHF患者的预后。     

大蒜新素对大鼠软脑膜微循环的作用

目的　观察大蒜新素 (allitridi,All)对大鼠软脑膜微循环的影响。方法　用颅骨开窗技术 ,运用微循环图像处理(MCIP)系统 ,实时记录测量大鼠软脑膜血管管径。结果　表面给药All1μmol·L-1～ 10 0 μmol·L-1可使软脑膜微动脉(pialarteriole,PA)扩张 5 %～ 2 8%。在四动脉结扎造成大鼠全脑缺血模型上 ,结扎两侧颈总动脉 2 0min后 ,表面给予All 1μmol·L-1～ 10 0 μmol·L-1可使PA扩张 12 %～ 5 4%。另外 ,缺血前 15min给予All 1 5 ,3 0 ,6 0mg·kg-1iv可改善四动脉结扎所致全脑缺血大鼠的软脑膜微循环 ,扩张软脑膜血管管径。结论　大蒜新素可改善因缺血造成的脑微循环障碍 ,减少因缺血引起的脑组织损伤作用。     

木犀草素对实验性肺纤维化大鼠组织中TGF-β1mRNA表达的影响

目的研究木犀草素对肺纤维化大鼠肺组织中转化生长因子β(TGFβ1)mRNA的表达的影响。方法大鼠气管内灌注博来霉素致大鼠肺纤维化病变,同时ig给予40mg·kg-1的木犀草素连续14d,观察肺重量指数和羟脯氨酸含量的变化;用RTPCR测定肺组织中TGFβ1mRNA表达水平。结果木犀草素可降低重量指数和羟脯氨酸含量,延缓肺纤维化进程,并抑制TGFβ1mRNA的表达。结论木犀草素抗肺纤维化作用与其抑制肺组织中TGFβ1mRNA表达有关。     

小鼠巨细胞病毒感染内耳的病理变化

目的 研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染内耳的病理变化,并观察更昔洛韦(GCV)对MCMV感染所致内耳炎症反应的疗效.方法 72只小鼠随机均分为生理盐水(NS)10μl组(A组)、MCMV 10μl组(B组)、MCMV 10 IA+GCV 60 mg·kg-1·d-1(C组),每组均根据脑内、腹腔、耳内(仅左耳接种)注射部位不同进一步分组,每小组各8只.2周后耳蜗取材.结果 B组脑内、耳内感染方式下左耳耳蜗前庭膜增厚伴淋巴细胞浸润、蜗管顶部分泌表皮层纤维化改变;而B组腹腔、耳内感染方式下右耳及C组脑内、耳内感染方式下左耳耳蜗均未见上述病理变化.结论 脑内感染MCMV较腹腔、耳内(左耳)感染更易引起双耳前庭膜和蜗管的炎症反应.应用GCV干预对MCMV感染所引起的内耳炎症反应有一定的治疗作用.     

大蒜新素对分离大鼠脑细胞内游离Ca^2＋的影响

观察大蒜新素对不同刺激剂所致分离大鼠脑细胞内游离钙的影响。方法：以Ｆｕｒａ２－ＡＭ为细胞内游离钙的荧光指示剂,用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子测定系统,直接测定了分离新生大鼠脑细胞内游离钙值,观察了大蒜新素的影响。结果;大蒜新素对脑细胞静息「Ｃａ＾２＋」ｉ无明显影响,大蒜新素１－１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１能剂量依赖性地抑制高Ｋ＾＋和谷氨酸引起的「Ｃａ＾２＋」ｉ升高,其中ＩＣ５０分别为５９．７和６９．９μｍ     

灯盏花素对糖尿病大鼠血TGF-β1及肾脏结构影响的实验研究

目的探讨灯盏花素对糖尿病大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）表达和肾功能的影响。方法选健康雄性昆明种SD大鼠70只,随机分为正常对照组（N）20只、糖尿病组（DM）和灯盏花治疗组（EB）各25只,后两组用链脲菌素（streptozotocin,STZ）诱导建立糖尿病肾病大鼠模型,EB组行灯盏花素20mg·k^g-1·d^-1腹腔内注射,N组和DM组行等量生理盐水腹腔内注射,三组给药后2w和6w宰杀,收集标本检测尿肌酐、血糖、血肌酐、尿素氮和血清TGF-β1,观察各组肾小球平均面积（AC）和体积（VC）的变化。结果①TGF-β1比较：糖尿病组〉灯盏花组〉正常组;②灯盏花组及糖尿病组与正常组相比体重下降,肾指数、肾小球面积、体积升高,且灯盏花组较糖尿病组体重增加,肾指数、肾小球面积、体积下降（P〈0.05）;③血尿素氮、肌酐比较：糖尿病组〉灯盏花组〉正常组,灯盏花组较糖尿病组降低,且肌酐降低以2w组更明显（P〈0.01）。结论灯盏花素能够抑制糖尿病大鼠血清TGF-β1的表达和肾脏肥大。     

巨细胞病毒感染诊治进展

人巨细胞病毒（Human cytomegalovirus,HCMV）归属于人疱疹病毒科、β疱疹病毒亚科,为双链DNA病毒,是人类疱疹病毒中基因组最大的DNA病毒。HCMV通过密切接触感染者的体液（尤其是尿液、唾液、血液和生殖器分泌物）在人群中传播,人对HCMV普遍易感。     

TGF-β_1诱导肺切片纤维化模型的建立

目的建立转化生长因子β1(transforming growth fac-tor-β1,TGF-β1)诱导肺切片纤维化模型,为肺纤维化病理机制和治疗药物的研究提供实验基础。方法0·4%的琼脂糖充盈肺组织,切片,于肺切片培养的1、3、5、7、9d以LDH漏出值和MTT比色法观察肺切片存活情况。以羟脯氨酸(HYP)为指标从时效和量效两个方面确定TGF-β1诱导肺切片纤维化的亚适时间点和亚适剂量。肺组织进行HE和Masson染色以确定肺纤维化是否形成。结果在本实验条件下,培养的肺切片可存活9d。通过HYP和组织学检查确定TGF-β1诱导肺切片纤维化的亚适时间点和亚适剂量分别为7d和2·5μg·L-1。另外,氢化可的松对TGF-β1诱导肺切片纤维化无明显影响。结论TGF-β1(2·5μg·L-1,×7d)可诱导肺切片纤维化,氢化可的松对此无明显影响。     

TGF-β1、LMO1在胃癌组织中的表达及意义

目的 观察转化生长因子β1(TGF-β1)、LMO1在胃癌组织的表达及二者的相关性,探讨TGF-β1、LMO1在胃癌发生发展中的作用.方法 选取60例胃癌和50例正常胃组织,采用Real time-PCR和Western Blot检测TGF-β1、LMO1 mRNA和蛋白表达水平.采用免疫组织化学SP法检测TGF-β1、LMO1蛋白表达,分析TGF-β1、LMO1表达与胃癌临床病理特征的关系.结果 胃癌组织TGF-β1、LMO1基因的mRNA和蛋白表达水平均比正常胃黏膜组织明显增强(P＜0.05).TGF-β1、LMO1蛋白在胃癌组织中阳性表达率明显高于正常胃黏膜组织(P＜0.05).TGF-β1、LMO1表达与年龄、性别、发病部位无关(P＞0.05),而与肿瘤浸润深度、分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移有关(P＜0.05).TGF-β1、LMO1表达呈正相关(r=0.875,P=0.001).结论 胃癌组织TGF-β1、LMO1表达异常增高,可能参与了胃癌发生发展.TGF-β1、LMO1可作为反映胃癌恶性生物学行为及治疗的分子指标之一.     

TGF-β1与uPA在乳腺癌中的表达及其相关性的研究

目的检测转移生长因子-β1（TGF-β1）及尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）在乳腺癌组织及乳腺良性疾病中表达情况及其与乳腺癌浸润转移的相关性。方法采用免疫组织化学（SABC）法检测138例乳腺癌组织、30例乳腺良性疾病组织（阴性对照组）中TGF-β1及uPA蛋白的表达情况。结果138例乳腺癌中TGF-β1及uPA蛋白的总阳性率分别为53．2％、56．4％TGF-β1蛋白和uPA蛋白在乳腺良性病、乳腺导管内癌（0期）、乳腺浸润性导管癌Ⅰ／Ⅱ期、Ⅲ／Ⅳ期的阳性表达率分别为10．0％／10．0%,4、32．0％／36．0％、46．7％／53．3％、82．9％／82．9％,各组间比较均具有显著性差异;TGF-β1与uPA在乳腺癌组织中的表达相关分析结果表明二者呈正相关（r=0．842,P〈0．01）。结论TGF-β1、uPA蛋白在乳腺癌中的表达明显高于良性病,且在乳腺癌中期别越晚表达越高,表明二者可能与乳腺癌的浸润、转移过程有关,有可能成为评估乳腺癌预后的实验指标;TGF-β1和uPA蛋白在乳腺癌组织中的表达呈正相关,表明二者在乳腺癌的浸润、转移过程中可能起到协同作用。     

巨细胞病毒感染对染色体畸变率的影响

用 CMV 包涵体法确定个体 CMV 感染,分别在人类生命期的三个不同阶段设CMV 感染阳性和阴性比较组,胚胎期以胚胎绒毛组织滋养层细胞染色体为观察指标;新生儿期和成年人期以外周血淋巴细胞染色体为观察指标,发现胚胎绒毛组织染色体 CA 率在CMV 感染阳性组显著高于阴性组(P<0.01),而在新生儿期和成年人期的外周血染色体 CA率检测中,CMV 阳性组和阴性组比较未发现显著差异。     

苦参碱对巨细胞病毒感染小鼠肝、肺病毒载量的影响

目的:探讨苦参碱对巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)感染小鼠重要脏器肝、肺组织中鼠巨细胞病毒(MCMV)-DNA载量的影响。方法:建立全身播散性CMV感染小鼠模型,随机分为模型对照组、苦参碱治疗组和更昔洛韦治疗组,另设正常对照组,每组32只。采用荧光定量PCR方法检测各组小鼠肝、肺组织中MCMV-DNA载量并比较其变化。结果:正常对照组小鼠肝、肺组织中MCMV-DNA检测呈阴性,其余三组于接种病毒后第3天可以检测到较高水平MCMV-DNA,第7天达高峰。第14天肝组织病毒载量比较,更昔洛韦治疗组<苦参碱治疗组<模型对照组,差异有统计学意义(F=63.10,P<0.01);肺组织病毒载量变化趋势同肝组织病毒载量,第14天肺组织病毒载量比较,更昔洛韦治疗组<苦参碱治疗组<模型对照组,差异有统计学意义(F=194.88,P<0.01)。结论:苦参碱可以降低CMV感染小鼠肝、肺组织MCMV-DNA载量,具有抗MCMV作用。