小鼠巨细胞病毒感染鼠胚胎成纤维细胞对共培养调节性T细胞增殖和活化的影响

目的 研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对共培养体系中调节性T细胞(Treg)的诱导作用和Treg在抗病毒免疫中的调节作用.方法 建立小鼠T淋巴细胞与感染CMV的同系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)体外共培养的细胞模型.蚀斑法检测共培养上清液中MCMV负荷量;细胞计数法分析体系中T淋巴细胞的扩增;流式细胞术检测共培养体系中CD4+ CD25+ Treg细胞比例,Western印迹法检测T淋巴细胞中Foxp3蛋白表达强度;RT-PCR法检测MEF中转化生长因子(TGF)-β mRNA表达水平;双抗体夹心ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β蛋白表达水平.组间差异采用单因素方差分析.结果 T淋巴细胞与MCMV感染的MEF共培养1 d和3 d后,培养上清液中病毒负荷量较对照组显著减少;但是共培养6 d后,T淋巴细胞的免疫保护作用消失,病毒量为(5.58±0.67)×105 PFU/mL,与感染对照组的(6.05±0.34)×105 PFU/mL比较,差异无统计学意义.CMV感染3 d后,T淋巴细胞数由感染前的(2.02±0.05)×106 /mL 增至(2.25±0.13)×106 /mL (P＜0.05);但继续培养至6 d时,T淋巴细胞数为(2.08±0.14)× 106/mL,与3 d时比较,差异无统计学意义.CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞比例和Foxp3蛋白表达变化相似,均随MCMV感染时间延长而增加,在感染后6 d分别增至对照组的2倍和3倍;TGF-β在MEF中的基因转录水平(A值)由感染前的1.09±0.13增至感染3 d后的3.15±0.54,共培养上清液中的蛋白表达强度在感染后3 d增至(3.85±0.32)μg/L,与感染前的(1.74±0.14)μg/L比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论随感染时间延长,MCMV可能通过促进TGF-β表达等多种途径诱导Treg增殖活化.     

小鼠巨细胞病毒感染神经干细胞的体外研究

目的研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)对体外培养的神经干细胞(NSC)增殖和分化的影响,为研究先天性巨细胞病毒感染致脑发育异常的机制奠定理论基础。方法体外分离、培养和鉴定BABL/c胎鼠NSC,用含LacZ报告基因的重组小鼠巨细胞病毒RM461感染NSC,X-gal染色监测感染过程,透射电镜观察超微结构改变,PCR检测受染细胞及培养上清中病毒DNA及观察培养上清接种到小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的细胞病变效应,了解RM461对NSC的感染情况。通过绘制生长曲线、流式细胞术检测分化细胞比率,研究RM461对NSC增殖和分化的影响。结果RM461感染NSC48h后细胞出现肿胀、体积增大、神经球边缘的细胞发生脱落和死亡,细胞形态的改变随感染复数(MOI)的增加而更加明显;X-gal染色,24h受染细胞即可出现阳性改变,48h达高峰;RM461感染72h时,受染细胞及培养上清中病毒DNA呈阳性,培养上清接种到MEF后可出现明显的细胞病变效应,电镜下受染细胞胞浆中存在病毒颗粒,细胞器肿胀明显;RM461可明显抑制NSC的增殖和分化,当MOI为1时,分化培养2d,感染组胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇酶(NSE)阳性细胞的比例分别为(37.4±1.6)%和(8.9±0.8)%,远较未感染组[分别为(50.3±1.8)%和(23.4±1.3)%]低(P<0.01),且GFAP和NSE阳性细胞比率随MOI的增加降低更加明显。结论RM461可感染体外培养的NSC,并能形成产毒性感染;RM461可明显抑制NSC细胞的增殖和分化并导致干细胞死亡,这可能与先天性巨细胞病毒感染致脑发育异常有关。     

十二指肠液胆红素定量测定对婴儿持续性黄疸的临床评价

早期婴儿持续性黄痘病因十分复杂，其中婴儿肝炎综合征与先天性胆道闭锁二者的早期鉴别极为重要，前者多为自限性疾病，而后者则需早期手术治疗。据Kasai报道，胆道闭锁患几年龄超过60天以后，每延迟10天手术成功率即减低一半。反之，新生儿旰炎或婴儿肝炎若接受剖腹探查，必加重病情，死亡率增加。因此，十二指肠液胆红素定量测定能了解胆道是否通畅及胆汁分泌量，从而迅速作出二者的鉴别诊断。本文报告20例持续性高胆红素血症婴儿十二指肠液胆红素定量结果。     

十二指肠液胆红素定量测定对婴儿持续性黄疸的临床评价

早期婴儿持续性黄痘病因十分复杂，其中婴儿肝炎综合征与先天性胆道闭锁二者的早期鉴别极为重要，前者多为自限性疾病，而后者则需早期手术治疗。据Kasai报道，胆道闭锁患几年龄超过60天以后，每延迟10天手术成功率即减低一半。反之，新生儿旰炎或婴儿肝炎若接受剖腹探查，必加重病情，死亡率增加。因此，十二指肠液胆红素定量测定能了解胆道是否通畅及胆汁分泌量，从而迅速作出二者的鉴别诊断。本文报告20例持续性高胆红素血症婴儿十二指肠液胆红素定量结果。     

婴儿肝胆疾病的现状和进展

1　从肝胆的解剖生理来看婴儿肝胆疾病的多发性　　肝胆疾病是婴儿时期的常见疾病之一。然而,由于肝胆疾病除黄疸外,往往症状不明显,不易察觉。又因肝脏再生能力较强,且有两套供血系统(肝动脉和门静脉),很少发生肝功能衰竭,危重病例不多,不易引起临床重视。实际上,婴儿时期的肝胆疾病较多见,这是由于以下一些原因。1.1　肝胆在胚胎发育过程中,如果受到先天或外来的有害因素影响时,可造成肝脏和胆道的发育障碍或发生各种肿瘤。如肝实质中见到的局限性结节性增生、结节增生性增生症、血管内皮瘤、畸胎瘤、肝母细胞瘤、先天性肝纤维化;和肝内胆…     

急性中耳炎--一种需要加深认识的常见病

去过美国的同道们，一定会注意到，在那里的儿科医师们常随身携 窥耳镜，遇到发热的小儿，必对其检查双侧耳道，以发现有无生中耳炎(acute otitis media,AOM）存在。笔者认为，他们这样做到少有２个原因：（１）因为在美国，过去的２０年中，因中耳炎就诊儿科的人数从１９７５年的９９０万例次升至１９９０年的２４５０万例次，ＡＯＭ发生率很高，近乎２／３的３岁以前小儿至少患过１次ＡＯＭ，５０％的儿童患过２次或更多次，（２）ＡＯＭ可有各种不同的并发症，以丧失听力最常见，幼小儿可因此而影响认知，语言和情感的正常发育^[1]。我国儿科医师不备窥耳镜，除已具明显症状和耳道流脓的ＡＯＭ患儿可以发现外，很难知晓ＡＯＭ在我国的发病情况，是我国发病率低，还是我们重视不够？值得予以加深认识，兹就国外有关ＡＯＭ的病原和发病机制，诊断和治疗等方面资料结合我国资料的介绍如下，以供我国儿科和耳科同道们参考。     

小儿病毒感染及抗病毒治疗小儿常见病毒感染的实验室诊断及评价

1病毒感染与病毒性疾病 病毒侵入人体的组织细胞内,借助宿主的细胞环境进行复制增殖,产生子代病毒,是谓病毒感染(viral infection).从病毒学来看,病毒在宿主细胞内完成复制过程,产生子代病毒,此时病毒处于活动状态,称作产毒性感染(productiveinfection);病毒在复制过程中,中途停止,成为不完整的病毒颗粒、或仅有病毒的DNA存在于细胞内、或与宿主细胞的DNA整合在一起,称为潜伏性或非产毒性感染(latent or non-productive infection).再从临床学来看,病毒侵犯宿主组织细胞,引起病变,临床上见到相应的症状、体征和功能损害的实验室依据,称为病毒性疾病,否则只能称作病毒感染.     

急性散发性脑炎患儿脑脊液免疫球蛋白G指数及相关指标变化

目的探讨散发性脑炎患者脑脊液(CSF)IgG、IgA、IgM、IgG指数和血脑脊液屏障(BBB)变化及临床特征、MRI异常与IgG指数的关系及其病因。方法选择确诊急性散发性脑炎患者37例,急性期取脑脊液,采用速率散射比浊法测脑脊液(CSF)IgG、IgA、IgM和Alb,同时测血清中的相同指标,根据公式计算脑脊液IgG指数。28例行头颅MRI检测。取10例非脑炎的神经疾病患儿作为对照。结果散发性脑炎患儿CSF中IgG指数显著高于对照组(P=0.017);但CSFIgG、Igh、IgM和清蛋白比值相比无显著差异(P>0.05);散发性脑炎中高IgG组MRI脱髓鞘变6例(33.3%),低IgG组MRI脱髓鞘变1例(5.6%),两者较有显著差异(P=0.003),但高、低IgG指数组临床特征相比无显著差异(昏迷除外)。结论多数散发性脑炎患儿的BBB无明显破坏,而鞘内免疫反应比较明确,IgG合成增加,提示某些散发性脑炎不是病毒直接感染.而是一种免疫学反应性脱髓鞘脑病,MRI提示有白质脱髓鞘者当更明确。     

婴儿肝炎综合征患儿外周血白细胞巨细胞病毒早,晚期抗原检测…

对１５例婴儿肝炎综合征患儿外血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞分别进行了巨细胞病毒（ＣＭＶ）早期抗原（ＥＡ）、晚期抗原（ＬＡ）检测。结果９例白细胞ＥＡ阳性，５例ＬＡ阳性，各类白细胞感染无明显选择性。５例ＣＭＶ抗原阳性者恢复期复查，仅２例阳性。与抗ＣＭＶ ＩｇＭ、尿ＣＭＶ分离、抗ＣＭＶ ＩｇＧ双份血清检测等方法对比，９例阳性中８例被 此３项检查证实为ＣＭＶ感染，６例阴性中此３项检查亦阴性，其阳性率明显高于     

消化道电子胃镜检查对儿童消化性溃疡的诊断意义

我院1994年1月～1996年1月,对临床疑有消化性溃疡的214例儿童行电子胃镜检查,确诊了53例儿童消化性溃疡病,现就其电子胃镜检查特征和临床表现分析如下.1 临床资料1.1 一般资料53例确诊儿童中,男44例,女9例,年龄4～14岁.腹痛最为常见,53例中腹痛51例(96.2%),其