链脲佐菌素联合高脂高糖饲料诱导糖尿病大鼠模型的建立

目的探讨链脲佐菌素(STZ)联合高脂高糖饲料诱导Wistar大鼠糖尿病模型的方法。方法 Wistar雄性大鼠45只,均分为三组。A组为高脂高糖饲料联合STZ诱导组,B组为高脂高糖饲料喂养组,C组为正常饲料喂养组。高脂高糖饲料喂养4周后,在0.5h内将STZ缓冲液通过腹腔注射至A组大鼠,STZ的剂量为50mg/kg。观察三组大鼠血糖、体重及血胰岛素变化情况。结果A、B组大鼠血糖均升高,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05);A组较B组血糖升高更为明显[(20.5±0.5)mmol/L vs.(11.3±0.7)mmol/L](P<0.05)。A、B组大鼠体重及胰岛素水平较C组减低(P<0.05),A组较B组血胰岛素降低更为明显[(26.7±6.8)mmol/L vs.(30.3±11.3)mmol/L](P<0.05)。结论 STZ联合高脂高糖饲料能够成功诱导出糖尿病大鼠模型,方法简便。     

大鼠糖尿病肾病模型建立影响因素研究

目的采用高脂饲料喂养联合低剂量链脲菌素(STZ)制备糖尿病肾病(DN)大鼠模型,探讨高脂饲料喂养时间和STZ剂量对模型成模率和死亡率的影响,确定建立DN大鼠模型的最佳方案。方法雄性SD大鼠先给予高脂饲料喂养,诱发胰岛素抵抗,再给予不同剂量STZ腹腔注射,建立DN模型。结果高脂饲料4周+STZ 40 mg·kg-1和高脂6周+STZ 35 mg·kg-1制备的糖尿病大鼠模型,其血糖值、相对肾重、胶原蛋白和TGF-β1的表达和正常组比较都差异有显著性,但高脂饲料4周+STZ40 mg·kg-1的造模死亡率较高。结论高脂喂养6周后腹腔注射低剂量STZ 35 mg·kg-1制备的DN大鼠模型,成模率高,模型稳定。     

链脲菌素制备2型糖尿病大鼠模型的研究

目的优化建立操作简便、条件稳定、成模率高、造模周期短、具有胰岛素抵抗的2型糖尿病模型。方法 6周龄大鼠以高糖高脂饲料喂养4周后,禁水禁食18 h,一次性腹腔注射1%链脲菌素(STZ)溶液35mg·kg-1,注射后继续禁水禁食1 h;对照组腹腔注射相同剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。结果 STZ注射后14 d空腹血糖值稳定,口服葡萄糖耐量实验符合糖尿病标准,空腹胰岛素水平接近对照组,成模率93%,模型死亡率0%。结论成功制备了2型糖尿病模型,优化了2型糖尿病造模过程及提高了成模率。     

高脂高糖饮食联合链脲佐菌素构建巴马小型猪2型糖尿病模型稳定性研究

目的应用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素(STZ)构建巴马小型猪2型糖尿病(T2DM)模型,探讨STZ对巴马小型猪糖尿病成模的影响,为糖尿病相关研究提供安全稳定的动物模型。方法选用健康雄性巴马小型猪10只,随机分为2组:对照组5例,喂养普通饲料;糖尿病模型组5只,喂养高脂高糖饲料,上述2组共喂养10月。11月初糖尿病模型组腹腔注射STZ 100mg/kg,1周后重复1次;对照组腹腔注射等剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。观察2组小型猪体质量、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)水平,行胰腺组织病理学检查、胰岛B细胞免疫组织化学染色分析,同时计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果 1高脂高糖饲料喂养10月后,模型组小型猪体重、FBG、FINS及HOMA-IR高于对照组(P<0.01);2模型组STZ给药后(12月末试验结束时),与对照组相比,模型组的FPG进一步升高,FINS水平明显下降(P<0.01);3胰腺HE及免疫组织化学染色:成模组镜下胰岛整体形态萎缩,胰岛B细胞数目明显减少。结论采用高脂高糖饮食联合腹腔多次注射STZ可以成功构建巴马小型猪2型糖尿病模型,该方法操作简单、成模率高、稳定性较好。     

甲壳低聚糖对饲高糖高脂大鼠血糖的调节作用

目的观察甲壳低聚糖(COS)对注射小剂量链脲佐菌素(STZ)及饲高糖高脂大鼠血糖的影响。方法大鼠随机分为2组:正常对照组10只,喂基础饲料;造模组40只,经腹腔注射小剂量STZ后,用基础饲料喂养2周,挑选葡萄糖耐量异常者20只又随机分为2组:高糖高脂对照组10只和COS干预组10只,两组均用高糖高脂饲料喂养,同时COS干预组用COS溶液灌胃给药。各组连续观察16周,定期测定体重、空腹血糖及胰岛素水平,实验结束前通过葡萄糖耐量试验来观察胰岛β-细胞功能变化。结果 COS干预组与高糖高脂组比较,体重、空腹血糖和胰岛素水平差异显著(P<0.05或0.01),葡萄糖耐量异常得到明显改善(P<0.05)。结论 COS有降低高糖高脂饲料大鼠血糖水平,增强糖耐量的作用。     

骨钙素对糖尿病大鼠血糖浓度的影响

目的观察骨钙素对2型糖尿病大鼠血糖的影响。方法选用雄性SD大鼠,高脂高糖饲料喂养4周后加小剂量链脲佐菌素注射建立2型糖尿病大鼠模型,大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、骨钙素(低、中、高剂量)糖尿病组,检测空腹血糖。结果注射链脲佐菌素3天后造模大鼠血糖均明显高于注射前(P<0.05)和正常对照组(P<0.05),与糖尿病模型组相比,骨钙素(低、中、高剂量)糖尿病组空腹血糖均明显降低(P<0.05)。但骨钙素(低、中、高剂量)糖尿病组空腹血糖两两相比较无明显差异性(P>0.05)。结论骨钙素有降糖的作用,但骨钙素的降糖效果无明显剂量差异。     

实验性糖尿病肾病大鼠模型建立的优化选择Ⅱ

目的比较几种不同因素组合对大鼠实验性糖尿病肾病(DN)模型建立中几种主要指标的影响,确定建立DN大鼠模型的最佳方案。方法SD大鼠30只,随机分为5组,每组6只,A组为正常对照组,B组为高糖高脂饲料组,C组为高糖高脂饲料+链脲佐菌素(STZ)组,D组为高糖高脂饲料+阿霉素+STZ组,E组为高糖高脂饲料+单肾切除+STZ组。造模12wk后处死大鼠,取血测血脂、糖化血红蛋白、肾功能、醛糖还原酶(AR)、肾小球滤过率(GFR)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)等各项指标。结果E组大鼠血脂明显升高,GFR及氧自由基水平不仅与正常组有显著差异,并且与其它几个模型组比较也都有显著性差异,尤以AR升高显著。结论以大鼠喂养高糖高脂饲料4wk后单肾切除,2wk后小剂量腹腔注射STZ的模型为最佳。     

成年SD大鼠糖尿病心肌病模型的建立

目的：探索成年SD大鼠糖尿病心肌病（DCM）模型建立的方法。方法20只健康SD成年大鼠作随机分为DCM组（n=10）、对照组（n=10）。对照组喂养普通饲料,DCM组高脂饲料喂养12周。DCM模型的建立：对照组以枸橼酸缓冲液腹腔注射,DCM组使用等量1%链脲菌素腹腔注射。通过病理组织学证实为DCM心肌病理学改变。结果与对照组比较,DCM组的血清FBG、TC、LDL-C、TG均明显增高（P〈0.05）,而对照组的血清HDL-C较DCM组高（P〈0.05）。与对照组比较,DCM组的大鼠心肌细胞排列紊乱,间质基质集聚与纤维化增多。第6周末,两组的空腹血糖差异无统计学意义（P〉0.05）,DCM组的IRI、胰岛素均高于对照组（P〈0.05）。结论高脂、高糖膳食并小剂量STZ腹腔注射建立DCM模型,其方法成功率高,简单易行。     

2型糖尿病大鼠脂联素受体基因表达的相关性研究

目的研究2型糖尿病大鼠骨骼肌和肝脏脂联素受体的表达变化。方法将20只健康雄性SD大鼠随机分为糖尿病组(DM组)和对照组(NC组),每组10只,分别饲以高脂饲料和普通饲料。第13周末DM组大鼠一次性腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ)溶液(STZ 25mg/kg,以0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液配制,pH=4.4),NC组腹腔注射等体积的无菌柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。第14周末进行葡萄糖耐量试验(OGTT)筛选成模大鼠,第25周末处死所有大鼠,取血检测空腹血糖、甘油三酯、胆固醇、脂联素、胰岛素水平,并计算胰岛素敏感指数(ISI),使用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分别检测2组大鼠骨骼肌和肝脏组织中脂联素受体(AR)mRNA表达水平。结果 DM组大鼠空腹血糖、甘油三酯、胆固醇、胰岛素水平高于NC组,脂联素水平和ISI低于NC组(P<0.05);DM组大鼠骨骼肌中AR1mRNA和肝脏组织中AR2mRNA的表达水平低于NC组(0.64±0.25与1.36±0.30,0.93±0.18与1.52±0.21;P<0.05),AR1和AR2表达水平分别与空腹血糖、甘油三酯、胆固醇、胰岛素、脂联素、ISI相关。结论 2型糖尿病大鼠AR mRNA的表达水平显著降低,与胰岛素敏感性密切相关。     

糖尿病大鼠早期骨组织中BMP-2基因表达初探

目的:观察糖尿病大鼠早期骨密度、骨组织中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因的表达。方法:清洁级健康成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为3组(每组10只)。A组以普通饲料喂养4周,腹腔注射柠檬酸盐缓冲液;B组以高脂饲料喂养4周,以STZ按30mg/kg体质量腹腔内注射;C组以普通饲料喂养4周,STZ按50mg/kg体质量腹腔内注射。腹腔注射1周后采静脉血测定血生化指标。腹腔注射8周后,分别测定各组大鼠骨密度并采用原位杂交技术检测骨组织中BMP2-mRNA的表达。结果:与A组比较,B、C组空腹血糖(FBG)显著升高(P<0.01);C组空腹胰岛素(FINS)明显减少(P<0.05),B组明显升高(P<0.05);胰岛素敏感指数(ISI)绝对值B、C组均明显高于A组(P<0.05);B、C组糖化血红蛋白(HbA1c)均高于A组(P<0.05)。与A组相比,腰椎骨密度(BMD)在B、C组大鼠显著降低(P<0.05);股骨、胫骨BMD仅C组大鼠显著降低(P<0.05)。与A组相比,B组大鼠椎骨、胫骨上段BMP2-mRNA表达染色平均光密度显著升高(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠早期,已存在不同程度的骨量的丢失;高胰岛素血症可引起骨组织中BMP2-mRNA表达增加。     

高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠模型稳定性观察

目的建立一种简便的2型糖尿病模型并观察该模型的长期稳定性。方法①高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素(STZ,45mg·kg-1)诱导2型糖尿病的方法,测定STZ注射后72hSD大鼠的血清空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)和胰岛素(INS)含量,并用HOMA法计算胰岛素敏感指数(ISI),将72hFBG≥10·0mmol·L-1及ISI≤正常动物均值的大鼠定为糖尿病模型大鼠;同时监测不同时间点大鼠的非空腹血糖(NFBG)、体重、饮食及饮水日摄取量的变化;②连续给予糖尿病模型大鼠灌胃(ig)苯乙双胍(75mg·kg-1)3d,研究该模型的有效性。结果①与正常对照组相比,高脂喂养4wk的大鼠饮食、饮水日摄取量没有明显差异;体重增加,差异无统计学意义。STZ注射后72h时91·7%的大鼠达到成模标准;②该糖尿病动物模型在STZ注射后的12wk内NFBG水平一直较高(>20·0mmol·L-1);③苯乙双胍能降低该2型糖尿病动物模型的NFBG。结论该实验建立的2型糖尿病动物模型造模方法简单、易行,且模型长期稳定。     

2型糖尿病大鼠模型的建立与评价

目的：建立具有胰岛素抵抗特征、发病过程近似于人类2型糖尿病的动物模型。方法：雄性Wistar大鼠喂以富含不饱和脂肪酸的特殊高脂肪膳食5周，诱发出胰岛素抵抗．继之以小剂量链脲佐菌素（STZ，25mg／kg，腹腔注射）导致胰岛素代偿性分泌障碍，诱发高血糖症。应用正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术评价大鼠的胰岛素敏感性。结果：与常规饲料喂养大鼠相比，高脂膳食组的葡萄糖输注率显著降低，空腹血浆胰岛素显著升高。STZ注射后1周高脂膳食组大鼠血糖中度升高，血胰岛素下降，但仍高于普通饲料喂养组，且高脂血症和胰岛素抵抗继续存在。高脂饲料喂养组及高脂饲料＋小剂量STZ注射组大鼠的葡萄糖输注率显著低于正常对照组。结论：通过高脂膳食结合小剂量STZ注射成功复制出了实验性2型糖尿病动物模型，它是研究2型糖尿病发病机制、药物研究和胰岛素抵抗相关疾病的理想动物模型．     

Effect of metformin on the formation of hepatic fibrosis in type 2 diabetic rats

The aim of this study is to investigate the effects of the metformin on the formation of hepatic fibrosis in type 2 diabetic rats and discuss its mechanism of liver-protecting activity. After SD rats were fed with high-fat and high-sucrose diet for four weeks, low-dose streptozotocin (STZ) was injected intraperitoneally to make the animal mode of type 2 diabetes. Then, all diabetic rats was fed with the high-fat diet and metformin (ig, 100 mg x kg(-1)) was given orally to metformin group for four months. After the last administration, fasting blood glucose was determined. The livers were removed to calculate the hepatic coefficient and to make HE and Picro acid-Sirius red staining, immunohistochemistry (alpha-SMA and TGFbeta1) and TUNEL staining in order to evaluate the effect of metformin on the hepatic fibrosis. The animal model of type 2 diabetes with hepatic fibrosis was successfully made. Metformin can significantly alleviate the lesions of hepatic steatosis and fibrosis, markedly reduce the expressions of alpha-SMA and TGFbeta1 in liver tissue of type 2 diabetic rats. However, TUNEL staining result suggested that metformin could not reduce apoptosis of hepatocytes. The results suggest that metformin can inhibit the formation of hepatic fibrosis in type 2 diabetes.     

T2DM 小型猪模型骨骼肌、 肝脏及胰腺组织蛋白激酶 B 表达及磷酸化的变化

摘要： 目的 研究高脂高糖饮食联合链脲佐菌素 （STZ） 构建巴马小型猪 2 型糖尿病 （T2DM） 模型的可行性, 并观 察小型猪模型骨骼肌、 肝脏及胰腺组织蛋白激酶 B（PKB）表达及磷酸化变化。方法 将健康雄性巴马小型猪 10 只 随机分为 2 组： 对照组 5 只, 喂养普通饲料; 糖尿病模型组 5 只, 高脂高糖饮食联合 STZ 构建巴马小型猪 T2DM 模 型。检测 2 组小型猪空腹血糖、 空腹胰岛素水平, 并计算胰岛素抵抗指数 （HOMA-IR）。采用 Western blot 法检测骨 骼肌、 肝脏及胰腺组织中 PKB 蛋白表达及磷酸化水平。结果 （1） 高脂高糖饲料喂养 10 个月后, 与对照组比较, 模 型组体质量、 空腹血糖、 空腹胰岛素水平及 HOMA-IR 明显升高 （P＜0.01）。（2） 与对照组相比, 模型组 STZ 给药后空 腹血糖水平进一步升高, 空腹胰岛素水平明显下降 （P＜0.01）。（3） 与对照组比较, 模型组骨骼肌、 肝脏及胰腺组织中 PKB 蛋白表达及磷酸化水平明显降低 （P＜0.05）。结论 高脂高糖饮食联合 STZ 多次腹腔注射可以成功构建 T2DM 小型猪模型, 模型组小型猪骨骼肌、 肝脏及胰腺组织 PKB 蛋白表达及磷酸化水平明显降低     

糖尿病大鼠肝纤维化组织中MMP-1和TIMP-1的表达变化及意义

目的研究MMP-1、TIMP-1在糖尿病大鼠肝纤维化组织的表达变化及意义。方法将SD大鼠随机分为正常对照组（NG组）和实验组,分别以普通饲料和高糖高脂饲料喂养,实验予组链脲佐菌素（STZ）腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型。取肝脏组织,行常规HE染色、Masson染色和MMP-1及TIMP-1免疫组化染色并将实验组中肝组织纤维增生者列入糖尿病肝纤维化组（HF组）。于实验开始、STZ诱导2周后和实验结束时检测肝功能（ALT、AST）。结果NG组和HF组大鼠间ALT、AST差异无统计学意义（P〉O．05）。HF组大鼠：肝细胞光镜下脂肪变性、细胞水肿、肝窦纤维轻度增生;肝组织TIMP-1表达明显增强,周病理图象分析仪测TIMP-1平均光密度明显高于NG组（P〈0．05）且与其胶原纤维表达量呈正相关（r=0．654,P〈0．05）;而MMP-1平均光密度2组间差异无统计学意义（P〉0．05）,与Masson染色结果无相关性（P〉0．05）。结论TIMP-1表达增高导致的MMP-1／TIMP-1系统失衡在糖尿病早期肝纤维化的发生、发展中有重要作用。     

高糖、高脂诱导大鼠肝脏胰岛素抵抗评价

目的:比较高糖、高脂等不同饮食诱导大鼠肝脏胰岛素抵抗模型的差异.方法:SD大鼠分成4组,分别给予普通、高糖、高脂、高糖高脂饲料,12周后检测各组空腹血糖水平、葡萄糖耐量、空腹血清胰岛素水平(FI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、肝糖原含量及肝脏葡萄糖转运体2(GLUT2)、葡萄糖转运体4(GLUT4)表达水平.结果:口服糖耐量试验中,高脂组、高糖高脂组血糖曲线下面积分别为(91.6±5.5)和(106.1±4.6)mmol·min·L-1,较对照组明显增大(P<0.05或0.001).高脂组的FI与HOMA-IR分别为(20.2±0.9) μIU·L-1和(5.1±0.3),高糖高脂组则分别为(31.4±2.0) μIU·L-1 和(8.2±0.7),均较对照组显著升高(P<0.05或0.001).高糖高脂组的肝糖原含量为(1.3±0.0) mg·g-1,也较对照组显著增多(P<0.01).高脂组和高糖高脂组的GLUT2表达分别为(75.8±4.0)%和(60.0±4.5)%,均比对照组明显降低(P<0.05或0.001);高糖、高脂、高糖高脂组的GLUT4表达分别为(60.6±5.2)%,(72.3±3.8)%,(57.1±2.9)%,同样较对照组显著降低(P<0.001).结论:高糖结合高脂饮食更适合胰岛素抵抗模型的制备.     

Sirt3/Sod2信号通路介导的补骨脂酚抗糖尿病大鼠主动脉凋亡的机制研究

目的 探讨补骨脂酚在糖尿病主动脉组织中的保护作用及其机制,明确Sirt3/Sod2信号通路在此过程中的作用。方法 将SD大鼠随机分成对照组、糖尿病组和糖尿病+补骨脂酚组,将内皮细胞分为高脂高糖组、高脂高糖+3-TYP组、高脂高糖+补骨脂酚组和高脂高糖+补骨脂酚+3-TYP组。采用OGTT试验检测大鼠的空腹血糖。采用HE染色观察主动脉壁病理变化。采用荧光染色观察主动脉Sirt3表达变化。采用Western blotting检测主动脉组织及内皮细胞Sirt3、Ac-Sod2、Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。并用Sirt3的抑制剂3-TYP来研究补骨脂酚抗糖尿病大鼠主动脉凋亡的作用机制。结果 糖尿病大鼠主动脉壁组织排列紊乱,细胞减少,Sirt3及Bcl-2蛋白表达水平明显降低,Ac-sod2、Cleaved caspase-3及Bax蛋白表达水平明显升高。补骨脂酚可显著改善高血糖引起的主动脉壁组织排列紊乱情况,升高Sirt3及Bcl-2蛋白的表达水平,降低Ac-sod2、Cleaved caspase-3及Bax蛋白的表达水平。在高脂高糖损伤内皮细胞试验...     

PSS对2型糖尿病大鼠肾小球基底膜改变的影响

目的观察藻酸双酯钠(PSS)对2型糖尿病大鼠肾小球毛细血管基底膜(GBM)改变的影响。方法高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ)20mg·kg-1制作2型糖尿病动物模型,将实验动物分为正常对照组、糖尿病非干预组、PSS治疗组、洛伐他汀对照组,给药8wk后检测各组大鼠的血糖,肌酐清除率(Ccr),尿白蛋白排泄率(UAER)及肾脏肥大指数的变化,免疫组化检测肾小球内TGF-β1、Ⅳ型胶原(CⅣ)表达水平,电镜下观察GBM厚度的改变。结果病程8wk时各组糖尿病鼠UAER明显增加,肾小球TGF-β1、CⅣ表达增多,肾脏肥大指数、GBM厚度均增加。PSS治疗组的血糖值较糖尿病非干预组有所降低(P<0.01),TGF-β1、CⅣ表达降低(P<0.01),GBM增厚程度明显改善(P<0.05),UAER降低(P<0.05),而两组的Ccr并无明显区别,肾脏肥大指数轻微改变无统计学意义。结论早期应用PSS对糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其作用机制可能是通过降低血糖,调节肾小球TGF-β1、CⅣ表达,抑制GBM增厚,从而改善DM模型大鼠肾脏超微结构,保护肾小球滤过屏障功能。