专利蓝Ⅴ号钠盐注射液细菌内毒素检查法的研究

目的：建立肿瘤检测用药物专利蓝Ⅴ号钠盐注射液细菌内毒素检查方法。方法：按《中国药典》2015年版细菌内毒素检查法,对不同批号的样品进行干扰试验和细菌内毒素检查。结果：高浓度专利蓝Ⅴ号钠盐注射液对鲎试剂与细菌内毒素的凝集反应有干扰作用,在稀释120倍时可排除干扰。结论：本试验建立的细菌内毒素检查方法可用于专利蓝Ⅴ号钠盐注射液的细菌内毒素检查,控制其产品质量。     

HS-SPME-GC-MS分析怀牛膝不同炮制品中的挥发性成分

摘 要 目的：对怀牛膝生品、盐制品和酒制品中挥发性成分进行分析和比较。方法: 采用顶空固相微萃取法(HS SPME)分别萃取怀牛膝生品、盐制品和酒制品中挥发性成分,并用气相色谱 质谱(GC MS)联用技术对怀牛膝生品及其盐制品和酒制品中的挥发性成分进行分析鉴定,利用峰面积归一化法测定各成分相对百分含量。结果: 共鉴定出38种化合物,从怀牛膝生品、盐制品和酒制品中分别鉴定出23、16和15种化合物,分别占其挥发性成分总含量的79.14%、49.80%和44.57%,三者含有共同挥发性成分4种。与怀牛膝生品相比,盐制品中新增了10种化合物、减少了17种化合物,而酒制品中新增了9种化合物、减少了17种化合物。结论: 不同炮制方法对怀牛膝中化学成分的种类及含量有一定影响。采用HS SPME GC MS联用技术能快速有效地分析怀牛膝不同炮制品中的挥发性成分,为怀牛膝炮制品的质量评价及应用提供科学指导。     

动态浊度法鲎试验用于检测人凝血因子Ⅷ制品中细菌内毒素的研究

目的 应用动态浊度法定量测定人凝血因子Ⅷ制品中细菌内毒素含量。方法 通过对样品中定量添加标准内毒素的干扰试验,检测其回收率应在50%~200%范围。结果 将样品进行1→100稀释可以有效地消除其对鲎试验的干扰。结论 应用动态浊度法定量测定人凝血因子Ⅷ制品中细菌内毒素含量是可行的,与热原检查法结果一致。     

微量动态显色法检测奥拉西坦注射液中细菌内毒素含量

目的： 应用微量动态显色法对奥拉西坦注射液进行细菌内毒素定量检测,并与凝胶法结果比较。方法： 采用微量动态显色法鲎试剂对奥拉西坦注射液进行干扰试验,采用凝胶法鲎试剂对奥拉西坦注射液进行细菌内毒素检查。结果： 本品在终浓度为40 mg·mL^-1及以下浓度时对微量动态显色法鲎试剂与细菌内毒素的凝集反应无干扰作用,回收率在50%~200%之间,检测结果与凝胶法一致。结论： 本品可采用微量动态显色法定量检测细菌内毒素含量,进行质量控制。     

中药川楝子炮制前后总三萜的含量变化研究

目的 采用紫外-可见分光光度法测定中药川楝子炮制前后总三萜的含量变化。方法 以川楝素为对照品,5%香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸显色后,在515 nm处测定其吸光度值。结果 川楝子生品中总三萜含量为9.223 mg·g^-1,3批炒制品中总三萜含量平均值为8.584mg·g^-1。结论 川楝子炮制品中总三萜含量较生品有所降低,此试验结果可为川楝子的炮制减毒机制提供理论参考。     

布罗佐喷钠细菌内毒素检查法的建立

摘 要 目的： 建立新型原料药布罗佐喷钠的细菌内毒素检查法。 方法: 根据《中国药典》2010年版二部附录的细菌内毒素检查法和相关标准及指导原则,用2个厂家的鲎试剂对3个批号的供试品进行干扰试验预试验及干扰试验,确定供试品的细菌内毒素检查的适用性及最大不干扰浓度,并对供试品进行细菌内毒素检查。 结果: 3个批次的布罗佐喷钠在浓度为2.5 mg·ml^-1及其以下浓度时对鲎试剂与内毒素的反应无干扰作用,细菌内毒素检查均符合规定。 结论:细菌内毒素检查法可用于布罗佐喷钠的质量控制。     

补骨脂生品及不同炮制品水提物小鼠急性毒性试验

目的 比较补骨脂生品及不同炮制品水提物的急性毒性特点及差异。方法 将昆明小鼠分为补骨脂生品组、清炒组、盐炙组、雷公组及酒浸组等不同浓度组和对照组共36组,各组小鼠以0.04 mL·g^-1单次灌胃给药并观察14 d,检测小鼠体质量、血清生化、死亡率,计算LD₅₀值等,研究补骨脂生品及不同炮制品的毒性差异。结果 不同方法给药前小鼠体质量无统计学差异,给药组第1天部分小鼠体质量有一定的下降;生品组、清炒组、盐炙组、雷公组、酒浸组LD₅₀值分别为含生药63.20,56.92,51.95,88.61,59.02 g·kg^-1。与对照组相比,雄性小鼠生品组血清ALT、TBA水平显著增加;清炒组血清ALT、AST、TBA显著增加,ALP水平无统计学差异;盐炙组、雷公组和酒浸组血清ALP、ALT、AST、TBA水平显著升高。与对照组相比,雌性小鼠生品组、盐炙组、雷公组和酒浸组血清ALP、ALT、AST、TBA水平显著增加;清炒组血清ALT、AST及TBA水平显著升高;所有组TP水平显著降低。病理学结果显示,对照组小鼠肝脏均未见异常;生品组、清炒组、盐炙组、雷公组及酒浸组小鼠肝脏出现肝细胞空泡样变,伴有肝细胞糖原变性、肝细胞胞浆疏松,部分出现小叶中央型肝细胞肥大等病理性改变;生品组与其他炮制组相比致小鼠肝脏损伤程度：生品组>酒浸组>清炒组>盐炙组>雷公组,其中酒浸法致肝脏病变程度最大,而雷公法最小。结论 补骨脂通过不同方法炮制后其毒性有所不同,以LD₅₀判断,雷公法炮制品毒性明显降低。     

雄黄及其炮制品中二硫化二砷和可溶性砷含量变化研究

摘 要 目的：比较不同来源雄黄经不同方法炮制后As2S2和As2O3含量变化。方法: 分别采用水飞法、高能球磨法对10批雄黄生品进行炮制,制备水飞品和纳米雄黄（NRP）;利用酸水飞法对NRP进行炮制制备纳米雄黄酸飞品（NRPP）。用激光散射法测定NRP和NRPP粒径;直接碘滴定法及二乙基二硫代氨基甲酸银（Ag DDC）法分别测定不同炮制品及生品中As2S2和As2O3含量。结果: 不同来源雄黄中As2S2含量均符合中国药典2015年版要求。各炮制品中As2S2含量为：水飞品>生品>NRPP>NRP;As2O3含量为：NRP>NRPP>生品>水飞品。各批次生品与水飞品和NRPP的As2S2和As2O3含量均存在显著性差异（P＜0.05）。结论: 通过对不同来源雄黄及其炮制品中As2S2和As2O3含量的比较研究,可为雄黄的质量研究、品质评价等提供理论依据。     

附子新型炮制品中乌头类生物碱测定及其强心作用研究

目的 比较附子新型炮制品与传统炮制品中乌头碱类水平及强心作用,为附子炮制工艺改进提供药理学依据。方法 采用高效液相(HPLC)色谱法测定生附子及黑顺片、高温片、高压片、微波片4种附子炮制品及其煎煮液中6种乌头类生物碱水平;应用Langendorff大鼠离体心脏灌流法,测定附子4种炮制品对心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、舒张末压(LVEDP)、左心室内压变化速率(±dp/dt_max)的影响,分析其强心作用。结果 与生附子比较,附子经炮制后,毒性成分双酯型生物碱减低,单酯型生物碱逐渐增加;与黑顺片比较,高压片中生物碱得到最大限度保留,单酯型生物碱水平高于黑顺片,双酯型生物碱水平较低,说明附子高压炮制是一种“低毒高效”的工艺;而高温片和微波片中单、双酯型生物碱水平均有所降低,其成分有一定的流失;4种炮制品煎煮液中6种生物碱溶出率与炮制品中生物碱水平呈正相关。与对照组比较,4种炮制品均能够显著升高离体大鼠心脏的HR、LVSP、±dp/dt_max,降低LVEDP,且呈一定剂量相关性;与黑顺片组比较,3种新型炮制品HR、LVSP、LVEDP、±dp/dt_max均差异不显著;在相同剂量下,高压片中HR、LVSP、±dp/dt_max值最高,LVEDP值较低。结论 附子高压炮制工艺是一种“高效低毒”炮制工艺,且强心作用效果较好。     

注射用奥扎格雷钠细菌内毒素检查方法研究

目的：探讨注射用奥扎格雷钠细菌内毒素检查方法替代家兔热原检查法的可行性。方法：采用2个不同厂家的鲎试剂,用凝胶法进行干扰预试验及干扰试验;用灵敏度为0.5EU·mL^-1鲎试剂和0.8mg·mL-1的奥扎格雷钠溶液进行细菌内毒素检查。结果：注射用奥扎格雷钠稀释到0.8mg·mL^-1时,对鲎试剂与内毒素的凝集反应无干扰作用;样品的细菌内毒素限值确定为0.625EU·mL^-1。结论：注射用奥扎格雷钠可用细菌内毒素检查法替代原有的家兔热原检查法。     

葛根、葛花、枳椇子混合物对小鼠急性酒精中毒醒酒作用的研究

目的 探讨中药葛根、葛花、枳椇子混合物对小鼠急性酒精中毒的醒酒效果。方法 采用酒精灌胃法建立小鼠急性酒精中毒模型,观察混合物不同配比对小鼠的醒酒效果,选择最佳配比;按最佳配比将小鼠分为低剂量组和高剂量组,通过测定小鼠的耐受时间、醉酒时间、血液中的乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶的活性观察葛根、葛花、枳椇子混合物的醒酒效果。结果 葛根、葛花、枳椇子混合物能够增加小鼠对酒精的耐受时间,同时缩短小鼠的醉酒时间,降低血液中的乙醇浓度,提高肝中乙醇脱氢酶的活性。结论 葛根、葛花、枳椇子混合物对小鼠急性酒精中毒具有醒酒作用。     

海桐种子醇提物中挥发性成分的GC-MS分析及抗内毒素活性测定

目的：研究海桐种子乙醇总提取物(简称EESPTA)的挥发性成分及相对含量,考察其抗内毒素活性。方法：以水蒸气蒸馏法提取EESPTA的挥发性成分,用气-质联用技术分析鉴定,并用峰面积归一化法测定各成分相对含量,采用终点基质显色法鲎实验检测其对细菌内毒素的清除效果,考察其抗内毒素活性。结果：气-质联用技术共检测鉴定出32个色谱峰,占该挥发性成分总量的99.82% 。在EESPTA的挥发性成分中,1R,4S,7S,11R-2,2,4,8-四甲基三环[5.3.1.0(4,11)]十一碳-8-烯含量高达54.78%,其它含量较高的成分有2-亚甲基-胆甾烷-3-醇(7.27%)、蛇麻烷-1,6-二烯-3-醇(6.23 %)、4-甲基-5-癸醇(4.11%)、绿花白千层醇(3. 86%)、别香橙烯(3. 80%)、反式-2,3-二甲基丙烯酸(3. 50%)、二氢-噻喃-3,5-二醇-四氢-4-甲基-4-氮-二乙酸乙酯(2. 04 %)等成分。结论：EESPTA具有较明显的清除细菌内毒素作用,并呈浓度依赖关系。为进一步开发利用海桐药用价值提供了科学依据。     

生川乌配伍白蔹、白及反药组合在大鼠血中移行成分的研究

目的鉴定生川乌配伍白蔹、白及的入血成分,比较配伍前后血中移行成分的变化特征。方法大鼠ig给予生川乌配伍白蔹、白及提取物,收集血浆样品并采用UPLC-QTOF/MS法鉴定入血成分,由半定量分析比较配伍前后血中移行成分的变化。结果检测配伍组20个成分,均为来自于生川乌的原形成分,配伍组中双酯型生物碱的相对质量分数均显著降低,单酯型生物碱中苯甲酰乌头原碱的相对质量分数显著降低,醇胺型生物碱中宋果灵的相对质量分数显著降低,其他没有显著性变化。结论生川乌配伍白蔹、白及能够改变其血中移行成分的体内过程。     

CYP2C19基因多态性对PCI术后患者氯吡格雷血药浓度、血小板抑制率和安全性的影响

目的 探讨CYP2C19基因多态性对氯吡格雷血药浓度、血小板抑制率和安全性的影响。方法 根据纳入和排除标准,筛选我院使用氯吡格雷的经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后患者,收集氯吡格雷用药后第6天的血样,采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定氯吡格雷血药浓度,非扩增免疫杂交技术检测患者CYP2C19基因型,并通过血栓弹力图来评估血小板抑制率。应用SPSS 20.0对数据进行统计分析。结果 共纳入87例患者,男性46例,女性41例;其中34例为快代谢型,38例中代谢型,15例慢代谢型;结果显示,快、中代谢型的药物浓度无显著性差异（P=0.667）,而慢代谢型与快、中代谢型药物浓度有显著性差异(P<0.05);方差分析和卡方检验显示CYP2C19基因多态性对氯吡格雷的血小板抑制率和安全性的影响有显著性差异(P<0.05）。结论 仅根据CYP2C19基因型指导氯吡格雷临床用药并不一定达到较好的治疗效果,可联合CYP2C19基因型检测与血药浓度监测来指导氯吡格雷的临床个体化给药。     

2种藏紫草体外抗氧化及抗菌活性比较

目的 比较长花滇紫草和团花滇紫草75%乙醇提取物的体外抗氧化及抗菌活性。方法 采用ABTS法、FRAP法、邻苯三酚自氧化法测定体外抗氧化能力，并采用肉汤连续稀释法初步考察了2种藏紫草体提取物体外对15种不同菌株的抗菌作用。结果 不同浓度藏紫草的75%乙醇提取物对ABTS自由基和超氧阴离子都有较强的清除能力，与BHT阳性药相当或略高于BHT；总还原力随取物浓度增加而增强；2种藏紫草的提取物对革兰阳性菌有一定的抗菌活性，但对肠杆菌科菌株及铜绿假单胞菌均未见抗菌作用。结论 2种来源的藏紫草均具有一定的体外抗氧化和抗菌作用。     

泻白散及其主药体外抗氧化活性研究

目的 建立泻白散和方中3味主药甘草、地骨皮、桑白皮的体外抗氧化活性测定方法,并对31批药材和10批泻白散煎液的抗氧化活性进行测定。方法 采用紫外可见分光光度法检测一定浓度的药材提取液引起DPPH溶液吸光度（A）值降低,考察波长为517 nm,分别探索3味药材抗氧化活性成分的提取条件;并进行不同溶剂的吸收考察、专属性考察、DPPH线性考察、药材提取液线性考察、精密度试验、重复性试验、耐用性考察等方法学验证;以清除DPPH自由基的半抑制浓度（IC₅₀）作为评价指标,对泻白散和方中3味药材的体外抗氧化活性进行考察。结果 地骨皮、甘草、桑白皮和泻白散提取液的IC₅₀均值为0.31、1.24、1.49和0.91 g/L,泻白散提取工艺对方中药物抗氧化活性的保留均值为56%。结论 建立的抗氧化活性测定方法可用于泻白散及方中主药的抗氧化活性测定,为多维度评价中药和中药材质量提供新思路。     

紫草素钠脂质体的制备及性能研究

目的 研究紫草素钠脂质体的制备工艺并考察其性质,旨在开发一种安全高效的紫草新型制剂。方法 利用碱溶酸提法纯化紫草提取物,并采用乙醇注入法制备紫草素钠脂质体,测定其形貌、粒径和Zeta电位。利用高效液相建立左旋紫草素含量测定方法,并考察了脂质体包封率和体外释放性能。结果 紫草素钠脂质体平均粒径为104.2 nm左右,且大小均一,成正态分布;Zeta电位为-14.8 mV;左旋紫草素在5~50 mg/L范围与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.999 9;紫草素钠脂质体的包封率为43.67%,药物累积释放量为65.82%。结论 成功制备了紫草素钠脂质体,具有较高的包封率和体外释放率。     

灰树花多糖体外抑菌及抗氧化活性研究

目的 研究灰树花多糖的抑菌及抗氧化活性。方法 采用紫外分光光度法,以D-无水葡萄糖为对照品,测定灰树花提取物中多糖含量;采用纸片扩散法,以头孢哌酮为阳性对照,测量不同浓度灰树花多糖提取物金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径;采用DPPH法和T-AOC试剂盒法,以清除率为指标,研究灰树花多糖的抗氧化活性。结果 灰树花提取物中多糖含量为53.49%;灰树花提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑菌作用,抑菌圈直径分别为13,11,10 mm;灰树花多糖浓度为0.05~10 mg·mL^-1时,对DPPH自由基具有一定的清除能力,当浓度高于0.5 mg·mL^-1时,开始显示出总抗氧化能力。结论 灰树花多糖具有一定的抑菌和抗氧化能力。     

半枝莲和白花蛇舌草药对中总黄酮的提取及纯化工艺研究

目的 筛选出半枝莲和白花蛇舌草药对中总黄酮提取及纯化的最佳工艺条件。方法 以总黄酮提取率和浸膏量为评价指标,选择两者配比、乙醇体积分数、料液比、提取时间4个因素作为考察对象,L₉（3⁴）正交试验优选总黄酮提取工艺。然后结合静态和动态实验方法,以吸附率、解吸率为指标,确定聚酰胺树脂纯化的工艺条件及参数。结果 确定药对中总黄酮提取的工艺条件：半枝莲与白花蛇舌草药对的配比为4：1,25倍量体积分数为70%的乙醇,提取3次,每次2 h。聚酰胺树脂纯化药对中总黄酮的工艺条件：上样液中总黄酮浓度为63.14 mg/ml,pH为4.0,以1.5 ml/min的流速上样,先用流速为3 ml/min的3.1床容积（BV）的水洗脱,再用流速为3 ml/min的9.3 BV体积分数为65%的乙醇洗脱,收集洗脱液,测得总黄酮纯度为40.39%,转移率为81.57%。结论 优化的提取工艺条件稳定、可行,黄酮提取率较高。聚酰胺树脂纯化的工艺条件简便,效果良好。     

KCNJ11 rs5219基因多态性对新发2型糖尿病患者二甲双胍及格列齐特联用疗效的研究

目的 探讨ATM(rs11212617)、KCNJ11(rs5219)、CYP2C9(rs1799853、rs1057910)、TCF7L2(rs12255372、rs290487)及IRS1(rs1801278)位点对二甲双胍及格列齐特联用治疗新诊断2型糖尿病患者疗效的影响。方法 在浙江中医药大学附属嘉兴中医院内分泌科标准化代谢性疾病管理中心门诊就诊,并使用盐酸二甲双胍片和格列齐特缓释片联合治疗的81例新诊断2型糖尿病患者被纳为研究对象,使用MassARRAY技术对上述位点进行分型,并进行为期3个月的随访,对比治疗前后空腹血糖、糖化血红蛋白及空腹胰岛素的变化。结果 上述单核苷酸多态性位点的基因频率符合Hardy-Weinberg遗传平衡,样本代表性良好。rs1799853、rs1057910、rs12255372与rs1801278位点突变频率较低,临床意义欠佳。rs5219C等位基因纯合患者在治疗后的空腹血糖达标率、空腹胰岛素上升量及糖化血红蛋白下降量上的获益均强于T等位基因携带患者(P<0.05)。而rs11212617和rs290487位点各基因型间并未显示出治疗效果的差...