HPLC法同时测定复方氯霉素滴眼液中醋酸泼尼松龙、氯霉素及其降解产物氯霉素二醇物的含量

目的:建立同时测定复方氯霉素滴眼液中氯霉素、醋酸泼尼松龙及其降解产物氯霉素二醇物含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Dionex Acclaim C_(18),流动相为0.1%庚烷磺酸钠溶液-冰乙酸-乙腈-甲醇(60∶0.2∶30∶10,V/V/V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为271 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:氯霉素、醋酸泼尼松龙、氯霉素二醇物检测质量浓度线性范围分别为11.73~703.71μg/mL(r=0.999 8)、12.40~744.06μg/mL(r=0.999 8)、1.03~62.03μg/mL(r=0.999 8);氯霉素二醇物的定量限为0.01μg/mL;精密度、稳定性试验的RSD<2.0%;氯霉素、醋酸泼尼松龙重复性试验的RSD<2.0%,氯霉素二醇物的RSD=4.5%;回收率分别为100.6%~102.7%(RSD=0.60%,n=9)、97.5%~100.3%(RSD=0.80%,n=9)、100.0%~103.2%(RSD=1.10%,n=9)。结论:该方法结果准确、操作简便,可用于复方氯霉素滴眼液中氯霉素、醋酸泼尼松龙及其降解产物氯霉素二醇物含量的同时测定。     

高效液相色谱法测定复方甘草酸单铵系列注射剂中乙二胺四乙酸二钠含量

目的 建立快速测定复方甘草酸单铵系列注射剂中乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法 色谱柱为Hypersil GOLD C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为50 mmol/L磷酸二氢钠溶液(含5 mmol/L四丁基溴化铵,用磷酸溶液调pH至4.5)-乙腈(90∶10,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为257 nm,柱温为40℃,进样量为10μL。结果 EDTA-2Na质量浓度在2～200μg/mL范围内与EDTA-Fe³⁺线性关系良好(R²=0.999 8,n=7);检测限为0.02μg/mL,定量限为0.06μg/mL;精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于2.0%;复方甘草酸铵注射液、复方甘草酸单铵注射液、复方甘草酸单铵S氯化钠注射液、甘草酸单铵半胱氨酸氯化钠注射液、注射用复方甘草酸单铵S的平均回收率分别为100.57%,100.90%,100.86%,100.95%,101.03%,RSD分别为0.21%,0.82%,0.60%,0.64%,0...     

HPLC法测定洛索洛芬银乳膏中洛索洛芬银的含量

目的:建立测定洛索洛芬银乳膏中洛索洛芬银含量的方法,为该制剂的质量控制提供参考。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C_(18),流动相为甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(55∶45∶0.1∶0.1,V/V/V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为223nm,柱温为30℃,进样量为20μL。结果:洛索洛芬银检测质量浓度线性范围为6.53~130.7μg/m L(r=0.999 9);定量限为0.253μg/m L,检测限为0.076μg/m L;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;加样回收率为96.79%~103.68%(RSD=2.23%,n=9)。结论:该方法操作方便、结果准确、重复性好,可用于洛索洛芬银乳膏中洛索洛芬银的含量测定。     

高效阳离子交换色谱法测定尿素[~(13)C]胶囊中尿素的含量

目的:采用高效阳离子交换色谱法测定尿素[~(13)C]胶囊中尿素的含量。方法:色谱柱为Zorbax 300 SCX,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(20∶80,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为200 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果:尿素检测质量浓度线性范围为0.003 9~1.003 0 mg/m L(r=0.999 7);定量限为3.918μg/m L,检测限为0.975μg/m L;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率为99.3%~101.0%(RSD=0.67%,n=9)。结论:该方法简便、快速、灵敏,适用于尿素[~(13)C]胶囊中尿素的含量测定。     

HPLC法同时测定注射用三重霉素中普鲁卡因、二苄基乙二胺和青霉素的含量

目的:建立同时测定注射用三重霉素中普鲁卡因、二苄基乙二胺、青霉素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Sino Chrom C_(18),流动相为0.21 mol/L磷酸二氢钾溶液(含0.16%的三乙胺,氢氧化钾溶液调pH至5.6)-乙腈(81∶19,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为215 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果:普鲁卡因、二苄基乙二胺、青霉素检测质量浓度线性范围分别为0.011~0.64 mg/mL(r=0.999 9)、0.013~0.80 mg/mL(r=0.999 9)、0.075~4.50 mg/mL(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<0.70%;加样回收率分别为98.42%~101.51%(RSD=0.90%,n=9)、98.28%~101.50%(RSD=0.90%,n=9)、99.03%~101.11%(RSD=0.66%,n=9)。结论:该方法简便、准确,可用于注射用三重霉素中普鲁卡因、二苄基乙二胺和青霉素含量的同时测定。     

HPLC法测定注射用盐酸哌甲酯中的有关物质

目的:建立测定注射用盐酸哌甲酯中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Waters symmetry C_(18),流动相为甲醇-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(60∶40,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为210 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。结果:杂质A、杂质B检测质量浓度线性范围均为0.02~3.0μg/m L(r均为0.999 8);定量限分别为0.2、0.6 ng,检测限分别为0.06、0.2 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为98.2%~100.0%(RSD=0.56%,n=9)、98.0%~100.3%(RSD=0.70%,n=9)。结论:该方法操作简便、结果准确,适用于注射用盐酸哌甲酯中有关物质的测定。     

改进HPLC法测定阿那曲唑原料药中的有关物质

目的:改进高效液相色谱法测定阿那曲唑原料药中的有关物质。方法:色谱柱为Welch Materials XB C_(18),改进后的流动相为乙腈-水(35∶65,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为210 nm,柱温为25℃,进样量为20μL。结果:阿那曲唑原料药中仅检测出1个杂质(杂质A),检测质量浓度线性范围为0.1~1.6μg/m L(r=0.999 6);定量限为0.1μg/m L,检测限为0.02μg/m L;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率为98.95%~105.29%(RSD=1.78%,n=9)。结论:改进后的方法操作简便、结果准确,可用于测定阿那曲唑原料药中的有关物质。     

HPLC法同时测定市售滴眼液中4种抑菌剂的含量

目的:建立同时测定市售滴眼液中羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯和苯扎氯铵4种抑菌剂含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil GOLD C_(18),流动相为0.005 mol/L醋酸铵溶液(每1 L中含三乙胺10 mL,用冰醋酸调节p H为5.0±0.5)-乙腈(45∶55,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长分别为262 nm(羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯)、214 nm(苯扎氯铵),柱温为30℃,进样量为20μL。结果:羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯和苯扎氯铵检测质量浓度线性范围分别为1.235 0~15.438 0μg/mL(r=0.999 9)、1.317 0~16.383 6μg/mL(r=0.999 7)、1.207 2~15.089 4μg/mL(r=0.999 6)、17.776~222.0μg/mL(r=0.999 9);定量限分别为2.0、2.0、2.0、1.11μg,检测限分别为0.375、0.375、0.375、0.333μg;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为98.14%~102.48%(RSD=1.6%,n=9)、98.79%~102.42%(RSD=1.3%,n=9)、98.19%~102.49%(RSD=1.5%,n=9)和98.76%~100.53%(RSD=0.6%,n=9)。结论:该方法结果准确、重复性好、操作简单,适用于市售滴眼液中羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯和苯扎氯铵含量的同时测定。     

UPLC法同时测定缬沙坦氢氯噻嗪片中缬沙坦和氢氯噻嗪的含量

目的:建立同时测定缬沙坦氢氯噻嗪片中缬沙坦和氢氯噻嗪含量的方法。方法:采用超高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex C_(18),流动相为[0.1%磷酸溶液-乙腈(95∶5,V/V)]-[0.1%磷酸溶液-乙腈(5∶95,V/V)](梯度洗脱),流速为0.25 mL/min,检测波长为272 nm,柱温为35℃,进样量为1.5μL。结果:缬沙坦和氢氯噻嗪检测质量浓度线性范围分别为8.1~324.2μg/mL(r=0.999 9)、1.2~50.1μg/mL(r=0.999 9);定量限分别为0.24、0.04 ng,检测限分别为0.06、0.01 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为97.69%~100.35%(RSD=1.03%,n=9)、98.27%~100.60%(RSD=0.83%,n=9)。结论:该方法操作简单、快速,结果准确,可用于缬沙坦氢氯噻嗪片中缬沙坦和氢氯噻嗪含量的同时测定。     

柱后衍生阳离子交换色谱法同时测定新疆产贝母中17种氨基酸的含量

目的:建立同时测定新疆产贝母中17种氨基酸含量的方法。方法:采用阳离子交换色谱柱分离17种氨基酸;采用柱后衍生阳离子交换色谱法测定药材中17种氨基酸的含量:色谱柱为LCAK 06/Na柱,流动相A为柠檬酸三钠11.9 g、柠檬酸6 g、苯酚1g,加水溶解,再加65 m L甲醇和6 m L浓盐酸,加水定容(调p H至3.4),流动相B为柠檬酸三钠11.9 g、氢氧化钠2.8 g、苯酚1 g、硼酸5.0 g,加水溶解并定容(调p H至10.8)(梯度洗脱),流速为0.45 m L/min(A泵)、0.25 m L/min(M泵),检测波长为440 nm(脯氨酸)、570 nm(其余氨基酸),进样量为50μL。结果:天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸和脯氨酸检测浓度线性范围均为20~400 nmol/m L(除胱氨酸10~200 nmol/m L)(r均大于0.989 0);精密度、重复性、稳定性试验的RSD<2.0%;检测限除胱氨酸外(0.08 nmol/m L)其余氨基酸均为0.16 nmol/m L;加样回收率为98.5%~99.5%(RSD为0.06%~0.21%,n=6)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于新疆产贝母中氨基酸含量的同时测定。     

HPLC法测定对乙酰氨基酚片中有关物质的含量

目的:建立测定对乙酰氨基酚片中有关物质含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent 5HC-C8,流动相A、B分别为甲醇-水-冰醋酸(50∶950∶1,V/V/V)和甲醇-水-冰醋酸(500∶500∶1,V/V/V)(梯度洗脱),流速为0.9 m L/min,检测波长为254 nm,柱温为40℃,进样量为5μL。结果:该色谱条件下,对乙酰氨基酚片中的主药(对乙酰氨基酚)、6个已知杂质(对氨基酚、对氯苯乙酰胺和杂质A、B、D、F)、3个制剂特定辅料(羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯)和1个未知杂质的分离度均大于1.5。6个已知杂质检测质量浓度的线性范围分别为0.539~1.617、0.026~0.384、0.237~17.799、0.257~19.271、0.239~17.955、0.246~18.462μg/mL(r≥0.9998),杂质A、B、D、F的校正因子分别为2.9、1.0、1.2、6.2;检测限分别为0.0096、0.0242、0.1640、0.0511、0.0559、0.4220 ng,定量限分别为0.0320、0.0806、0.5460、0.1700、0.1860、1.4060 ng;平均回收率为95.96%~111.09%(RSD为0.05%~2.42%);精密度试验的RSD均小于15%,且耐用性良好。3批样品均检出了对氨基酚(均为0.006%)、杂质B(0.016%~0.017%)、未知杂质(0.0020~0.0021%),未检出对氯苯乙酰胺和杂质A、D、F。结论:该方法专属性强、准确度高,可用于对乙酰氨基酚片有关物质的测定。     

氨基酸分析法测定复方骨肽注射液中多肽含量

目的建立复方骨肽注射液中多肽含量的氨基酸分析法。方法氨基酸水解方法:6mol.L-1盐酸110℃水解22h;氨基酸衍生方法:异硫氰酸苯酯(PITC)法;HPLC条件:Agilent Eclipse AAA色谱柱;流动相A:0.1mol.L-1乙酸钠(用冰醋酸调至pH 6.5)-乙腈(97∶3);流动相B:乙腈-水(4∶1);流速:1.0mL.min-1;检测波长:254nm。结果 18种氨基酸的线性、精密度及稳定性良好;除水解样品中的胱氨酸与色氨酸外,其他氨基酸的回收率均达到定量要求。结论方法准确、专属性强,可作为复方骨肽注射液中多肽的定量分析方法。     

HPLC法测定贝林司他中有关物质的含量

目的:建立贝林司他中有关物质的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法检测并以加校正因子的主成分自身对照法进行计算。以ODS-AM为色谱柱,以1.02%磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调节pH值至3.5)-乙腈(85∶15,V/V)为流动相A、1.02%磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调节pH值至3.5)-乙腈(30∶70,V/V)为流动相B进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为220 nm,进样量为10μL。结果:贝林司他及杂质A、D、F、G、H的线性范围分别为0.113~1.693、0.050~1.496、0.117~1.750、0.098~1.471、0.120~1.799、0.100~1.506μg/mL(r≥0.9997),后5个杂质的校正因子分别为1.0、1.0、1.2、1.5、1.0;检测限分别为0.250、0.590、0.490、0.600、0.500 ng,定量限分别为0.500、1.170、0.980、1.200、1.000 ng,回收率为90.18%~111.48%(RSD为1.52%~4.78%,n=9),稳定性(100 h)、精密度试验的RSD均不大于16%,耐用性良好。3批贝林司他原料药中检测出杂质A、D、H,含量分别为0.030%~0.038%、0.019%~0.022%、0.012%~0.013%,其他最大单体杂质含量为0.012%~0.013%,总杂质含量为0.075%~0.084%,未检出杂质B、C、F、G。结论:成功建立了测定贝林司他中有关物质含量的方法,且方法准确、专属性好。     

高效液相色谱法同时测定复方酚咖伪麻胶囊中5种成分溶出度

目的建立同时测定复方酚咖伪麻胶囊5种成分溶出度的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱为WatersXTerraC₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液-三乙胺(100∶0.02,V/V)、流动相B为甲醇(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为215 nm;采用篮法,转速为100 r/min,溶出介质为0.1 mol/L盐酸溶液500 mL。结果盐酸伪麻黄碱、对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏和盐酸氯哌丁质量浓度分别在6.14~61.42μg/mL,60.62~606.23μg/mL,5.28~52.80μg/mL,0.52~5.21μg/mL,2.47~24.68μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.9998),精密度和稳定性试验的RSD均小于2.0%(n=6),平均加样回收率分别为100.09%,99.65%,99.67%,99.83%,99.17%,RSD分别为1.07%,1.29%,1.16%,0.98%,1.28%(n=9)。结论该方法操作简便,结果准确可靠,专属性强、可用于复方酚咖伪麻胶囊的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定海珠喘息定片中槲皮素和山柰酚含量

目的建立同时测定海珠喘息定片中主药胡颓子叶的指标性成分槲皮素和山柰酚含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为ShimadzuShim-packGIST-C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(50∶50,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为360 nm,进样量为20μL。结果槲皮素和山柰酚的质量浓度分别在0.43~8.59μg/mL(R²=0.9997,n=9),0.30~5.91μg/mL(R²=0.9997,n=9)范围内与峰面积线性关系良好;检测限分别为0.43 ng和0.59 ng,定量限分别为1.29 ng和1.77 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%;平均加样回收率分别为101.67%和101.36%,RSD分别为1.54%和1.99%(n=9)。结论该方法操作简便,结果准确,专属性强,重复性和稳定性均良好,可用于同时测定海珠喘息定片中槲皮素和山柰酚的含量。     

瑶药止痛散质量标准研究

目的建立瑶药止痛散的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对瑶药止痛散中毛两面针、洋金花、草乌进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法测定瑶药止痛散中氯化两面针碱的含量,色谱柱为Waters XBridge Phengl C18柱(150 mm×2.1 mm,3.5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液-三乙胺(20∶80∶1,V/V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为271 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果瑶药止痛散中毛两面针、洋金花、草乌的TLC图斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰。氯化两面针碱质量浓度在1.25~12.50μg/m L范围内与峰面积线性关系良好;精密度、重复性、稳定性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率为100.28%,RSD为1.75%(n=9)。结论该研究所建立的标准可用于瑶药止痛散的质量控制。     

HPLC法测定人血浆中瑞格列奈浓度

目的:以往测定人血浆中瑞格列奈多采用LC-MS法和LC-MS/MS法,方法灵敏度高,但是由于试验成本较高无法普及,故研究建立人血浆中瑞格列奈浓度测定的HPLC方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Zorbax C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-醋酸铵缓冲液(10mmol/mL,pH4.0)(78:22,V/V);流速1mL/min,检测波长245nm,柱温34℃,进样量20μL。结果:血浆中杂质不干扰样品的测定;瑞格列奈血药浓度在2.0～100ng/mL范围内线性关系良好,定量下限为2.0ng/mL;高、中、低3种浓度的日内、日间RSD均<10%;绝对回收率为83.8%~93.2%,相对回收率92.7%~105.3%。结论:本方法快速、简便、重现性好,可用于瑞格列奈的临床药动学和药效学研究。     

LC-MS/MS法测定肿瘤患者恶性腹水中紫杉醇的含量

目的:建立测定肿瘤患者恶性腹水中紫杉醇含量的方法。方法:采用液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术,以文多灵为内标,测定肿瘤患者给予紫杉醇后恶性腹水中紫杉醇的含量,色谱柱为Zorbax SB-C18,流动相为水溶液(含0.1%甲酸和10 mmol/L醋酸铵)-乙腈溶液(40∶60,V/V),流速为0.25 m L/min,柱温为30℃,进样量为5μL,离子源为电喷雾离子源,检测模式为多重反应离子监测正离子模式,干燥气温度为350℃,干燥气流速为10 L/min,毛细管电压为4 000 V,紫杉醇和内标在正离子模式下质荷比(m/z)分别为876.5→308.0、457.3→188.1,碎片电压分别为250、150 V,碰撞电压分别为30、20 eV。结果:紫杉醇检测质量浓度的线性范围为25~2 500 ng/mL(r^2=0.996 5,n=7);定量下限为25 ng/mL;日内、日间精密度试验的RSD为0.61%~3.62%(n=5、3);准确度为95.34%~98.76%(n=5、3);提取回收率的RSD为3.19%~3.72%(n=3);基质效应的CV为1.52%~2.93%(n=3);稳定性试验的RE均小于3%(n=3)。结论:该方法简便、准确,可用于测定肿瘤患者恶性腹水中紫杉醇的含量。     

复方小儿退热栓中对乙酰氨基酚含量测定及其均匀度研究

目的建立测定复方小儿退热栓中对乙酰氨基酚含量的高效液相色谱法,并研究其均匀度。方法色谱柱采用Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(20∶80,V/V),流速1.0 m L/min,检测波长244 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果对乙酰氨基酚进样量在0.0819~1.639μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 5);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于1.0%;平均加样回收率为101.25%,RSD为0.87%(n=9);17批样品的平均含量为99.35%~107.37%,含量均匀度(A+2.2 S)为2.92~9.38。结论该方法简便准确,重复性好,专属性强,可用于复方小儿退热栓的质量控制。     

黄芪三七合剂质量标准研究

目的建立黄芪三七合剂的质量标准。方法采用薄层色谱法对制剂中黄芪、三七、当归进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1含量,色谱柱为Shimadzu C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(19∶81,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为203 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。结果黄芪、三七、当归薄层色谱图中,斑点清晰,阴性对照无干扰。人参皂苷Rg1质量浓度在0.178~0.890μg/m L范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%;平均加样回收率为99.30%,RSD为1.10%(n=6)。结论所建立的定性、定量方法专属性强,操作简单,重复性好,可用于黄芪三七合剂的质量控制。