多抗甲素抗肿瘤转移作用及其机理

多抗甲素(PAA)在100mg·kg^-1·d^-1剂量下,给药18d,显著抑制B₁₆-F₁₀黑色素瘤人工肺转移,肺转移结节数由137个下降到95个。同位素参入法测定PAA对正常及荷瘤小鼠脾细胞有促增殖作用,并使小鼠脾细胞对PHA刺激的反应性不因荷瘤而降低;PAA且能增强正常及荷瘤小鼠脾脏NK细胞活性,拮抗环磷酰胺对NK细胞活性的抑制作用;PAA体外能不同程度地抑制B₁₆-F₁₀黑色素瘤细胞DNA,RNA和蛋白质合成。放射免疫测定法表明PAA对小鼠血浆TXA₂/PGI₂比值影响较小。PAA抗肿瘤转移作用主要与促进荷瘤机体抗肿瘤免疫反应和直接抑制肿瘤细胞有关。     

银耳孢糖对小鼠体内移植性肿瘤及免疫功能的影响

目的研究银耳孢糖(Tremella fuciformis spores polysaccharide,TSP)对小鼠移植性肿瘤及免疫功能的影响。方法利用小鼠肝癌H22及小鼠肉瘤S180的体内移植性肿瘤模型,腹腔连续给予TSP12d,称小鼠体重及肿瘤、脾脏和胸腺重量,测定脾淋巴细胞转化率及NK细胞杀伤活性。同时观察TSP对正常小鼠免疫器官重量和碳粒廓清的影响。结果TSP25,50,100mg·kg^-1对小鼠肝癌H22及小鼠肉瘤S₁₈₀有一定的抑制作用,抑瘤率分别为17.8%,27.6%,34.9%;32.8%,36.1%,44.0%;TSP50,100mg·kg^-1能提高荷瘤小鼠脾NK细胞杀伤活性及淋巴细胞转化率(P<0.05)。此外,TSP50,100mg·kg^-1亦能明显提高正常小鼠脾脏和胸腺的重量及网状内皮系统吞噬功能(P<0.05)。结论TSP对小鼠移植性肿瘤有一定的对抗作用,其抗肿瘤作用可能与增强机体免疫能力有关。     

对羟基苯乙基-α-Ｄ-葡萄糖甙对小鼠天然杀伤细胞的体外影响

本文用［³H］TdR靶细胞释放法，观察了对羟基苯乙基-α-D-葡萄糖甙在体外对小鼠脾天然杀伤细胞(NK)活性的影响.结果表明， 对羟基苯乙基-α-D-葡萄糖甙能提高正常鼠的脾NK杀伤活性，显著提高环磷酰胺给药后的NK杀伤活性，减轻由地塞米松引起的NK活性低下，协同白细胞介素-2明显增强鼠脾细胞的NK活性，而且剂量与作用呈正比. 结果提示对羟基苯乙基-α-D-葡萄糖甙为中药女贞子中具有免疫活性的水溶性成分之一.     

商陆多糖Ⅰ联合白细胞介素2对小鼠脾细胞杀瘤活性的影响

商陆多糖Ⅰ(PAP-I),0.3～3μg·ml^-1和小鼠脾细胞培养3～5d可显著增强其杀伤P815肿瘤细胞活性及IL-2(250～500IU·ml^-1)诱导的LAK细胞活性,最适浓度为1μg·ml^-1。PAP-I及IL-2和脾细胞培养的上清液对P815肿瘤细胞无细胞毒作用,但能增强脾细胞及LAK细胞杀瘤活性。PAP-I,5,10及50mg·kg-1,ip可增强脾细胞杀伤P₈₁₅和L₉₂₉细胞的活性及IL-2诱导的LAK细胞活性。     

人参超微粉对正常和免疫力低下小鼠免疫功能的影响

目的 探讨人参超微粉化后是否仍具有增强免疫的作用。方法 实验主要分为2个部分,第一部分：将96只Balb/c小鼠随机分成2个免疫组（免疫Ⅰ组、免疫Ⅱ组）,每个免疫组按体质量随机分为空白组、人参超微粉3个剂量组（166.7,333.3,500.0 mg·kg^-1）。灌胃32 d,免疫Ⅰ组进行脾淋巴细胞增殖实验和NK细胞活性实验,测定脏器（脾、胸腺）指数、刺激指数和NK细胞活性;免疫Ⅱ组进行迟发型超敏反应（DTH）和血清溶血素实验,测定小鼠足跖肿胀度和抗体积数;第二部分：将60只ICR小鼠按体质量随机分为空白组、模型组、人参超微粉3个剂量组（166.7,333.3,500.0 mg·kg^-1）,连续灌胃13 d,于第5天开始,除空白组外,连续3 d腹腔注射环磷酰胺40 mg·kg^-1,建立免疫力低下模型。测定其白细胞数目,脏器（脾、胸腺）指数,血清IL-2、IL-4、IgG、IgM水平及脾匀浆LDH、ACP活性。结果 第一部分：人参超微粉3个剂量组小鼠胸腺指数升高;人参超微粉333.3,500.0 mg·kg^-1组小鼠抗体积数及注射绵羊红细胞24 h后足跖肿胀度显著高于空白组,同时能增强NK细胞活性。第二部分：人参超微粉333.3,500.0 mg·kg^-1组小鼠白细胞数目明显增加,血清中IL-2、IL-4、IgG、IgM水平升高及脾匀浆LDH、ACP活性增强。结论 一定剂量的人参超微粉对正常和免疫力低下小鼠具有免疫调节作用,提示将人参超微粉化后仍具有增强免疫的作用,这为人参超微粉的进一步开发利用提供了实验依据。     

人参皂苷-Ro促进小鼠脾细胞增殖及调节小鼠脾细胞Th1/Th2细胞因子的产生

目的研究人参皂苷-Ro对小鼠脾细胞增殖及细胞因子产生的影响。方法［³H］ TdR参入法检测人参皂苷-Ro对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响；酶联免疫吸附法检测人参皂苷-Ro对小鼠脾淋巴细胞产生细胞因子白介素-2、干扰素-γ和白介素-4的影响；逆转录聚合酶链式反应分析法研究人参皂苷-Ro对小鼠脾淋巴细胞中干扰素-γ、白介素-4 mRNA表达的影响。结果人参皂苷-Ro在1-10 μmol·L^-1显著促进Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖及小鼠脾淋巴细胞白介素-2的产生；在2-10 μmol·L^-1促进Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞产生和表达Th2细胞因子白介素-4, 而降低Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞产生和表达Th1细胞因子干扰素-γ。结论人参皂苷-Ro通过调节脾细胞内Th1型和Th2型细胞因子的转录和表达发挥免疫调节作用。     

几种药物对肺主动脉平滑肌细胞增殖作用影响的比较研究

目的研究钙拮抗剂硝苯地平(Nif)、地尔硫(Dil)、ACEI类卡托普利(Cap)、依那普利(Ena)抑制肺主动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的作用,比较两类药物对抑制肺主动脉平滑肌细胞增殖作用的影响。方法培养大鼠肺主动脉血管平滑肌细胞并观察钙拮抗剂、ACEI类及药物合用对细胞增殖作用的影响。结果Nif,Dil,Cap,Ena在10^-4,10^-5,10^-6,10^-7mol/L浓度下,对15%胎牛血清(FBS)所致的PASMC增殖均有明显抑制,且呈剂量依赖性的关系(P<0.05,与对照组相比);Nif+Cap及Dil+Ena合用,在10^-10mol/L药物浓度下,能明显抑制15%FBS所致的PASMC增殖(P<0.05,与对照组相比);Dil与Nif,Cap,Ena相比较,对15%FBS所致的PASMC增殖作用的影响更明显(P<0.01,与对照组相比);结论钙拮抗剂Nif,Dil,ACEI类Cap,Ena能够浓度依赖性地抑制PASMC的增殖且作用显著。与其他药物相比,Dil抑制PASMC增殖的作用非常显著。Nif+Cap,Dil+Ena合用,在较低药物浓度下具有抑制PASMC增殖的协同作用。     

去氢表雄酮抗促癌作用及其机理

目的　探讨去氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)抗促癌作用及机理。方法　用激光聚焦显微镜、流式细胞术、免疫荧光染色及小鼠耳部急性炎症等方法。结果　DHEA可明显抑制促癌剂巴豆油引起的小鼠急性耳肿胀;DHEA对巴豆油诱发的表皮细胞ODC活性升高也有显著的抑制作用。10^-7mol·L^-1 DHEA预处理可阻断佛波酯(TPA)刺激引起的S期细胞增加,并且对[Ca²⁺]i和pH升高均有明显抑制作用。此外DHEA预处理可有效抑制蛋白激酶C-α(PKC-α)的活化。结论　DHEA有明显的抗促癌活性,可能与其对ODC活性和Ca²⁺-PKC-DG信号传导通路的抑制有关     

五味子酚对氧自由基损伤小鼠脾淋巴细胞的保护作用

研究了五味子酚(Sal)对氧自由基损伤小鼠脾淋巴细胞的影响。体外实验结果表明,Sal在5×10^-6mol·L^-1时对Fe²⁺-VitC引起的脾淋巴细胞GSH含量降低有明显的抑制作用,且能阻抑Fe²⁺-Cys引起的MDA生成增加,改善细胞膜的流动性。用扫描电镜观察到Sal在5×10^-4mol·L^-1时可逆转Fe²⁺-VitC引起的脾淋巴细胞表面微绒毛皱折减少、细胞变形等病理改变。体内高氧分压应激损伤小鼠实验表明,igSal20mg·kg^-1×8d可逆转脾淋巴细胞SOD活性代偿性增高,并提高脾淋巴细胞内GSH含量。以上结果提示Sal对氧自由基损伤脾淋巴细胞有保护作用。     

虫草多糖对荷瘤小鼠T淋巴细胞及其亚群数量与功能的影响

目的 研究虫草多糖对荷瘤小鼠T淋巴细胞功能的影响。方法 除正常对照组外,其余小鼠右前肢腋窝皮下注射S180肉瘤细胞悬液建立小鼠荷瘤模型。荷瘤小鼠随机分为荷瘤对照(等容生理盐水)组、香菇多糖(1 mg·kg^-1)组、虫草多糖高、中、低剂量(200,100,50 mg·kg^-1)组,腹腔注射,每天1次,连续13 d后,检测虫草多糖对荷瘤小鼠的抑瘤作用以及荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞及其亚群数量、Th1/Th2类细胞因子水平和脾淋巴细胞转化功能。结果 虫草多糖高、中剂量组可明显抑制S180肉瘤生长,提高荷瘤小鼠脾脏重量和脾脏系数;提高外周血CD3⁺细胞(总T淋巴细胞)、CD4⁺CD8^-亚群数量及CD4⁺CD8^-/CD4^-CD8⁺比值,提高Th1淋巴细胞分泌的细胞因子TNF-α和IL-2水平,并显著促进脾脏T淋巴细胞增殖转化能力。结论 虫草多糖具有明显的抗肿瘤活性,其机制可能与调节机体T淋巴细胞及其亚群的数量与分泌功能有关。     

谷氨酸脱羧酶抑制剂L-苹果酸对小鼠学习记忆的影响

跳台法和Y迷宫法试验表明,小鼠po L-苹果酸600mg·kg^-1连续5d后对记忆的获得、巩固和再现均有明显的改善作用,并能促进空间辨别学习能力;L-苹果酸改善记忆的作用能被NMDA受体拮抗剂氯胺酮所拮抗。脑内游离氨基酸测定显示,L-苹果酸可明显降低小鼠脑内GABA水平,提高Glu/GABA比值。实验结果表明,脑内GABA水平下降,Glu/GABA比值升高对学习记忆有正性调节作用。     

有机锡化合物抗肿瘤生物活性研究

有机锡(IV)化合物能明显地抑制大鼠脑组织中PKC活性和肿瘤细胞增殖，且两者之间存在着相关性。抗肿瘤活性的构效关系是：(1)有机基团R决定整个化合物的生物活性，Ph>Et>n-Bu；(2)卤素的电负性影响化合物活性的大小。抗肿瘤活性可能通过[snR₂]²⁺实现。并能部分地阻断HL-60细胞周期中的G_I期向S期的移行。[SnPh₂F₂]，[SnPh₂(CysOS)]H₂O和[SnPh₂Cl2·phen(CH₃)₂]对PKC的IC₅₀值分别为25，15和20 umol·L^-1，对HL-60细胞的IC₅₀值分别为0．5，4．0和0．3umol·L^-1。但它们无诱导分化HL-60和K562细胞的作用。     

妥卡尼对豚鼠心室肌细胞钙电流和钾电流的抑制作用

利用酶分散的成年豚鼠心室肌细胞和全细胞电压钳技术,研究了妥卡尼(tocainide)对心室肌细胞钙电流(I_ca)、延迟整流钾电流(I_k)和ATP敏感性钾电流(Ik,ATP)的作用。结果表明,妥卡尼对I_ca和I_k均显示浓度相关的抑制作用,妥卡尼50umol·L^-1对I_ca和I_k的抑制率分别为16%和3%。这可能是妥卡尼有效抑制室上性心动过速和缩短心肌动作电位平台期的重要机制。     

真菌产生的新核苷转运抑制剂增强药物的抗肿瘤活性

从南极土壤中分离的一株真菌所产生的抗生素C3368-B(CB)有较强的核苷转运抑制活性。CB显著抑制艾氏腹水癌(EAC)细胞的胸苷和尿苷转运,IC₅₀分别为7.5和9.6μmol·L^-1。用克隆生成法测定,CB在本身无明显细胞毒性剂量下,能显著增强氨甲蝶呤(MTX)、5-氟脲嘧啶(5FU)和丝裂霉素C(MMC)等抗癌药物对人口腔鳞癌KB细胞和人肝癌BEL-7402细胞的杀伤。生长抑制法结果显示,CB还能部分逆转小鼠白血病L1210/MDR细胞对长春新碱(VCR)和放线菌素D(ACD)的抗药性。结果提示新核苷转运抑制剂CB可能应用于肿瘤联合化疗的前景。     

人参皂甙Rb1降低细胞内Ca2+作用的机制

使用荧光探针Fura-2/AM,采用双波长荧光分光光度法观察到,人参皂甙Rb₁(10,50,100μmol·L^-1)能剂量依赖性减少新生鼠脑细胞内钙浓度,并能增加由硫酸亚铁及半胱氨酸所降低的膜流动性,Rb₁(10μmol·L^-1)能使离体大鼠尾动脉去甲肾上腺素量—效曲线右移,最大效应降低;Rb₁(10,100μmol·L^-1)能降低离体鼠基底动脉5-HT所引起的收缩。使用全细胞膜片钳技术发现人参皂甙Rb₁(50,100μmol·L^-1)对钙电流无明显影响;Rb₁在低剂量能增加大鼠突触体Na⁺-K⁺ATPase及Ca²⁺-Mg²⁺ATPase活性。从而揭示Rb₁降低胞内钙含量可能通过增加ATP酶活性而产生。     

赛庚啶对大鼠心肌细胞膜[3H]-d-cis-硫氮卓酮结合部位的影响

苯并噻嗪类钙通道阻滞剂[³H]-d-cis-硫氮酮能以一种特异和可饱和的方式与离体大鼠心肌细胞膜结合,其K_D值和B_max分别为84nmol·L^-1和0.279pmol·mgprotein^-1。非标记的硫氮酮和赛庚啶均能完全抑制这种结合,其Ki值分别为102nmolL^-1和5.5umol·L^-1。上述结果证实在大鼠心肌细胞膜上也存有[³H]-硫氮酮受体,同时还提示赛马庚啶对心肌细胞膜的钙通道阻滞作用可能与作用于心肌细胞膜[³H]硫氮酮受体有关。     

牛磺酸对次氯酸诱导的大鼠肝细胞核核苷三磷酸酶损伤的保护作用

目的探讨牛磺酸对次氯酸(hypochlorous acid,HOCl)诱导的大鼠肝细胞核核苷三磷酸酶(NTPase)损伤的保护作用。方法体外分离大鼠肝细胞核,用HOCl单独或与牛磺酸共同孵育,分别以ATP和GTP作底物检测核NTPase的活性。结果ATP和GTP作底物时,HOCl(1×10^-9～5×10^-6 mol·L^-1)以浓度依赖的方式抑制NTPase活性。牛磺酸(1×10^-6～1×10^-4 mol·L^-1)可显著拮抗HOCl(1×10^-6 mol·L^-1)导致的NTPase活性降低。另外,牛磺酸(1×10^-6～1×10^-4 mol·L^-1)单独孵育肝细胞核,对NTPase有轻度刺激作用。结论牛磺酸可浓度依赖地拮抗HOCl诱导的肝细胞核NTPase活性下降,此作用可能是其保护机制之一。     

一氧化氮对一叶萩碱诱导的突触传递长时程增强的作用

目的研究一叶萩碱对麻醉大鼠突触可塑性形成中一氧化氮(nitric oxide,NO)的作用。方法以在体记录突触传递长时程增强(long-term potentiation,LTP)的电生理学方法,记录大鼠海马齿状回颗粒细胞层群峰电位(population spike,PS);以硝酸还原酶法测定NO含量。结果在侧脑室给予0.2 nmol·L^-1一叶萩碱(securinine,5 μL)前给予1 μmol·L^-1 7-硝基吲唑可抑制LTP的诱导。给药前ip L-精氨酸250 mg·kg^-1可逆转这种抑制作用。取脑进行NO含量测定,与一叶萩碱对照组相比,7-硝基吲唑+一叶萩碱给药组的NO含量明显下降。结论选择性一氧化氮合酶(nNOS)抑制剂7-硝基吲唑抑制一叶萩碱对LTP的诱导;由nNOS催化产生的NO参与了一叶萩碱诱导LTP的过程。     

用β-escin穿孔膜片技术研究粉防己碱对豚鼠心室肌钙电流的作用

目的用β-escin穿孔膜片(PPR)技术研究粉防己碱(tetrandrine,Tet)对I_Ca,L和I_Ca,T的作用。方法用PPR和全细胞记录(WCR)模式记录心室肌细胞I_Ca,L和I_Ca,T。结果25 μmol·L^-1 β-escin可在心室肌细胞形成稳定的PPR模式,用此模式记录的I_Ca,L衰减明显减慢。在PPR模式下1～300 μmol·L^-1 Tet浓度依赖性地减小I_Ca,L幅值。3,30和300 μmol·L^-1 Tet对I_Ca,T的抑制率分别为(16±5)%,(40±7)%和(75±11)%。结论用25 μmol·L^-1 β-escin在豚鼠心室肌细胞能得到较稳定的PPR模式,在此模式下Tet浓度依赖性地抑制I_Ca,L和I_Ca,T。     

雷公藤甲素对小鼠睾丸支持细胞人白细胞分化抗原36蛋白表达及脂质代谢水平的影响

目的 研究雷公藤甲素影响睾丸支持细胞的人白细胞分化抗原36（CD36）蛋白表达及脂质代谢的作用与分子机制。方法 体外培养小鼠睾丸支持细胞系TM4细胞,CCK-8法检测雷公藤甲素（40、80、160、320、640 nmol·L^-1）作用24 h细胞存活率;流式细胞术测定雷公藤甲素（80、160、320 nmol·L^-1）作用24 h细胞凋亡率;氟硼二吡咯化合物（BODIPY）染色和油红O染色检测雷公藤甲素（80、160、320 nmol·L^-1）作用24 h细胞内脂滴聚积情况;试剂盒法检测雷公藤甲素（80、160、320 nmol·L^-1）作用24 h细胞内三酰甘油（TG）水平;TM4细胞经0.1 mmol·L^-1三磷酸腺苷（ATP）预处理3 h后,再与160 nmol·L^-1雷公藤甲素共处理24 h,用CCK-8法检测TM4细胞的存活率;Western blotting法检测雷公藤甲素（40、80、160、320 nmol·L^-1）作用24 h、或160 nmol·L^-1雷公藤甲素作用6、12、24、36、48 h后TM4细胞中CD36蛋白表达量;Western blotting法检测雷公藤甲素（40、80、160、320 nmol·L^-1）作用24 h蛋白激酶1（PKD1）及其磷酸化蛋白、组蛋白去乙酰化酶7（HDAC7）和叉头框蛋白O1（FOXO1）的蛋白表达水平。结果 与对照组比较,雷公藤甲素80、160、320、640 nmol·L^-1浓度组TM4细胞存活率显著下降（P<0.05、0.01）,半数抑制浓度（IC₅₀）为214.1 nmol·L^-1; 80、160、320 nmol·L^-1雷公藤甲素的细胞凋亡率分别为11.89%、23.17%、32.12%,与对照组比较差异显著（P<0.05、0.01）。BODIPY染色结果显示,与对照组比较,雷公藤甲素组细胞内的红色荧光强度显著下降（P<0.01）,油红O染色也显示,雷公藤甲素160 nmol·L^-1组细胞内脂滴数量明显低于对照组;与对照组比较,雷公藤甲素组TM4细胞内TG水平显著下降（P<0.01）。与雷公藤甲素组比较,使用ATP协同给药显著减轻了雷公藤甲素对TM4细胞存活率的抑制（P<0.01）。与对照组比较,80、160、320 nmol·L^-1的雷公藤甲素作用24 h后,TM4细胞的CD36蛋白表达量显著上升（P<0.01）,160 nmol·L^-1雷公藤甲素作用于TM4细胞6、12、24、36、48 h,CD36的表达水平随时间的延长先升高后降低,在24 h达到峰值（P<0.05）。与对照组比较,雷公藤甲素组TM4细胞中PKD1及其丝氨酸744-748位点磷酸化水平、HDAC7和FOXO1的蛋白表达均受到显著抑制（P<0.05、0.01）。结论 雷公藤甲素对睾丸支持细胞具有明显的损伤作用,损伤机制与其诱导的脂质代谢紊乱和ATP缺乏相关。CD36在损伤过程中表达量先升高后降低,其初期代偿性上升可能是一种细胞的应激性保护机制,PKD1/HDAC7/FOXO1信号通路的抑制介导了CD36表达的调控。