LC-MS法测定人血浆中丙戊酸钠的浓度

目的:建立测定人血浆中丙戊酸钠浓度的方法。方法:以霉酚酸为内标,血浆样品经乙腈直接沉淀蛋白后,采用液-质联用(LC-MS)法进样测定。色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18,流动相为0.05%乙酸铵-乙腈(40:60),流速为0.2mL·min-1,柱温为30℃;通过电喷雾离子源(ESI)正负离子同时检测,丙戊酸钠、内标霉酚酸的检测离子分别为m/z166→143、m/z320→321。结果:丙戊酸钠血药浓度在2.5～200μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9983),最低检测限为0.2μg·mL-1;高、中、低3种浓度的日内、日间RSD分别<3%、12%,方法回收率为105.5%～108.99%,绝对回收率均>70%。结论:本方法简便、快速、灵敏、准确,能够有效检测人血浆中丙戊酸钠的含量。     

血浆中丙戊酸钠浓度的体外稳定性实验

目的观察血浆中丙戊酸钠浓度的体外稳定性变化。方法取口服丙戊酸钠的癫痫患者的静脉血,采用荧光偏振免疫仪(TDXFLX)测定其血浆中丙戊酸钠的浓度。然后将血浆置于冰箱冷藏(2～8℃)放置,每周测定1次血浆中丙戊酸钠浓度,共4周。结果放置1周时,血浆中丙戊酸钠浓度变化无统计学差异;放置2,3和4周时,血浆中丙戊酸钠浓度变化有统计学差异。结论放置1周,血浆丙戊酸钠浓度稳定性良好;放置2,3和4周时,丙戊酸钠浓度的稳定性较差。     

高效液相色谱-质谱联用法快速测定人血浆中丙戊酸钠浓度

目的：建立有效测定人血浆中丙戊酸钠浓度的高效液相色谱-质谱连用（HPLC-MS/MS）的方法。方法：血浆样本经乙腈沉淀蛋白后,以替米沙坦为内标,采用Agilent ZORBAX300SB-C₁₈柱（2.1 mm×150 mm, 5 μm）色谱柱,乙腈-20 mmol·L^-1乙酸胺（55：45）为流动相,流速0.25 mL·min ^-1,以液相色谱分离,电喷雾离子化串联质谱进行检测,采用多反应监测（MRM）测定丙戊酸钠（m/z 143.0→m/z 143.0）和内标替米沙坦（m/z 513.5→ m/z 469.4）的浓度。结果：校准曲线线性浓度范围从0.2~100 μg·mL^-1,最低定量限为0.2 μg·mL^-1。3个不同浓度（低、中、高）丙戊酸钠提取回收率分别为90.46%,93.18%,95.31%。日内和日间精密度均小于10%和8%。结论：此法简单灵敏,重现性好。已成功应用于丙戊酸钠片在中国健康志愿者的药动学研究。     

柱前衍生高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠浓度

目的建立人血清丙戊酸钠浓度的测定方法.方法将血清酸化,用乙醚提取,α-溴苯乙酮衍生,环己烷羧酸为内标,采用高效液相色谱法测定丙戊酸钠的浓度.色谱柱:Shimadzu VP-ODS(150mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-水(75∶25),检测波长为248nm.结果血清内丙戊酸钠浓度在11.24～180.96μg?mL-1范围内,丙戊酸衍生物和内标衍生物的峰面积比与浓度呈现良好线性关系,平均回收率为101.00%,日内和日间RSD均<3.77%.结论该方法快速、简便、准确,适合于临床丙戊酸钠的血浓度监测.     

柱前衍生高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠浓度

目的建立人血清中丙戊酸钠浓度测定方法。方法将血清酸化,用乙醚提取,ω-溴苯乙酮衍生,采用高效液相色谱法测定,色谱柱:Hypersil ODS C18柱(250 mm×4.0 mm,5μm),流动相:甲醇-水(68∶32),检测波长:262 nm。结果丙戊酸钠浓度在9.2~183.1μg.mL-1苯甲酰甲基丙戊酸和苯甲酰甲基环己烷羧酸的峰面积比与丙戊酸钠浓度呈现良好线性关系,r=0.999 3,平均回收率>98.11%,日内和日间RSD<5.8%。结论该方法快速、简便、准确,适合于临床血药浓度监测。     

比阿培南对丙戊酸钠在大鼠红细胞内、外分布的影响研究

目的:研究比阿培南对丙戊酸钠在大鼠红细胞内、外分布的影响。方法:取大鼠随机分为对照组(丙戊酸钠50mg·kg-1)和实验组(比阿培南15mg·kg-1+丙戊酸钠50mg·kg-1),每组6只,禁食12h,麻醉固定后分别在股静脉和动脉行套管插入术,经股静脉给予相应药物,给药前注射肝素,采用荧光偏振免疫分析法考察给药后180min内各组大鼠血浆和全血中丙戊酸钠的浓度,并用非房室模型法估算药动学参数。结果:与对照组比较,实验组大鼠全血中丙戊酸钠浓度无明显变化,血浆中浓度有所降低,由此推算试验组大鼠红细胞内的丙戊酸钠浓度有所增加。实验组与对照组血浆中丙戊酸钠的AUC0～3h分别为(134.89±18.88)、(189.35±34.76)μg.h.mL-1,t1/2分别为(0.95±0.04)、(1.13±0.16)h,2组间AUC0～3h和t1/2均存在显著性差异(P<0.05)。结论:比阿培南能够明显增加丙戊酸钠在大鼠红细胞内的分布,同时降低大鼠血浆中丙戊酸钠的浓度。     

HPLC法测定丙戊酸钠血药浓度的衍生化影响因素考察

目的:考察制备血清样品时丙戊酸钠衍生化影响因素,以建立一种稳定的测定丙戊酸钠血药浓度的高效液相色谱(HPLC)法。方法:以内标(环己烷羧酸)、丙戊酸钠衍生物HPLC吸收峰峰高及峰高比值的RSD为标准,考察制备样品时衍生化温度、时间、使用气体及气体流量对结果的影响。结果:63℃衍生化10min、氮气流量2L·min-1下蒸干为较佳衍生化条件,丙戊酸钠检测浓度在18.80～150.40μg·mL-1范围内,丙戊酸钠峰高与内标峰高比值与其浓度呈良好的线性关系(r=0.9988);平均回收率>95%,日内、日间RSD均<5%。结论:按本方法对血清样品进行处理,检测结果稳定、准确。     

高效液相色谱-荧光检测法测定人血清中丙戊酸钠浓度

目的 :建立测定人血清中丙戊酸钠浓度的检测方法 ,并研究国产和进口复方丙戊酸钠缓释片稳态谷浓度 (Cssmin)的等效性。方法 :20名健康男性志愿者两周期随机交叉多次口服国产和进口复方丙戊酸钠缓释片 ,采用高效液相色谱 -荧光检测法测定血清中丙戊酸钠的谷浓度 ,并用3p97程序对试验数据进行处理。结果 :口服国产及进口复方丙戊酸钠缓释片3d后 ,血药浓度达稳态 ,Cssmin分别为 (38 17±9 36)、(35 48±9 44)mg/L ,且单次和多次服用两种制剂Cssmin等效。结论 :本检测方法快速、灵敏、经济 ,可用于监测人血清中丙戊酸钠的浓度。     

超快速液相色谱-串联质谱法测定人血浆中的丙戊酸

摘 要 目的： 建立超快速液相色谱 串联质谱（UFLC-MS/MS）法测定人血浆中丙戊酸浓度。方法: 以双氯芬酸钠为内标,血浆样品用甲醇沉淀蛋白后进样分析。色谱柱为Shim-pack XR-ODS II C18柱（2.0 mm×75 mm,2.2 μm）,以乙腈和5 mmol·L^-1醋酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3ml·min^-1。质谱采用多反应监测( MRM) 扫描模式,以电喷雾离子源( ESI) 在负离子电离模式下进行测定,丙戊酸和双氯芬酸钠的定量分析离子分别为m/z 142.8→142.8和m/z 294.0→249.8。结果: 血浆中丙戊酸在8.4～168.0 μg·mL^-1内线性关系良好（r=0.997 5）,日内及日间RSD均小于15%,稳定性考察结果良好。选取已用EMIT法检测的丙戊酸血浆样品30例应用本试验所建方法测定,所得结果与EMIT法测定结果进行比较（独立样本t检验）,结果表明本试验所建方法的测定结果与EMIT法测定结果的差别无统计学意义。结论: 该方法快速、灵敏、专属性强,可用于人血浆中丙戊酸浓度的测定。     

高效液相色谱法测定布洛芬与人血浆蛋白的结合率

目的:建立人血浆中布洛芬浓度的测定方法,测定布洛芬在人血浆中的蛋白结合率,并计算相关参数。方法:用平衡透析法以高效液相色谱法为检测手段测定血浆蛋白结合率。结果:布洛芬与人标准血浆的蛋白结合率为(95.4±0.3)%。结论:布洛芬与人血浆蛋白为高强度结合。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中卡巴他赛与血浆蛋白的结合率

目的建立并应用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定人血浆中卡巴他赛与血浆蛋白的结合率。方法以拉洛他赛为内标,样品经叔丁基甲醚液液萃取,采用ACQUITY BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相:2 mmol·L-1醋酸铵水溶液-乙腈;流速:0.2 mL·min-1;进样量:5μL;柱温:35℃;采用ESI正离子源,定量分析离子反应分别为m/z 836.36→m/z 555.26(卡巴他赛)和m/z 832.25→m/z 551.08(内标拉洛他赛)。结合平衡透析法,测定了卡巴他赛的人血浆蛋白结合率。结果卡巴他赛浓度在5¹ 000 ng·mL-1范围内线性关系良好,定量下限为5 ng·mL-1,日内和日间精密度均小于15.0%,提取回收率为70.0%1 000 ng·mL-1范围内线性关系良好,定量下限为5 ng·mL-1,日内和日间精密度均小于15.0%,提取回收率为70.0%⁹1.4%,基质效应为87.4%91.4%,基质效应为87.4%¹00.9%,可用于卡巴他赛的血浆蛋白结合率研究。卡巴他赛在低、中、高三个浓度下的人血浆蛋白结合率为(87.8±4.0)%、(76.4±0.8)%和(73.5±6.4)%。结论本方法简单、快速、灵敏,能满足分析要求。卡巴他赛与人血浆蛋白结合率较高,与血浆蛋白结合能力在考察的浓度范围内无浓度依赖性。     

患儿口服丙戊酸钠后血药浓度与临床疗效分析

目的:监测服用丙戊酸钠患儿的血浆中丙戊酸钠浓度,根据的血药浓度数据,分析其与临床疗效的关系。方法:采用HPLC法测定丙戊酸钠血浆药物浓度,色谱柱为Dimosail-C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(80∶20),检测波长为254nm;依据癫痫病的疗效评价标准对丙戊酸钠的疗效进行评定;分析血药浓度、每日剂量(mg.kg-1.d-1)、日总剂量(mg.d-1)与临床疗效关系。结果:丙戊酸钠的血药浓度在40.0~100.0mg.L-1范围时,疗效较好。结论:临床用药时宜控制丙戊酸钠的血药浓度最佳治疗范围为40.0~100.0mg.L-1,在每日1次服用缓释制剂500mg时,临床疗效最佳。     

阿比朵尔人血浆蛋白结合率的测定

目的:建立测定阿比朵尔血浆药物浓度的高效液相色谱法(HPLC),并考察阿比朵尔的人血浆蛋白结合率。方法:采用平衡透析法结合HPLC,对阿比朵尔的人血浆蛋白结合率进行测定。结果:低、中、高3种浓度下,阿比朵尔的血浆蛋白结合率分别为90．1％,91．1％和89．8％。结论:本方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能满足药品分析要求。阿比朵尔与血浆蛋白具有较强的结合。     

HPLC-MS/MS测定人血清中丙戊酸钠和万古霉素的浓度

目的 建立同时测定人血清中丙戊酸钠和万古霉素浓度的高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）。方法 以丙戊酸-d₆和卡那霉素B分别作为丙戊酸钠和万古霉素的内标,用乙腈沉淀蛋白法处理血清样品,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 ml/min,柱温25 ℃,进样量4 μl,总分析时间12 min。采用电喷雾离子源进行正负离子模式监测,多反应监测模式进行定量分析。考察该方法的专属性、标准曲线、定量下限、精密度、回收率、基质效应以及稳定性。结果 丙戊酸钠和万古霉素分别在1~200 μg/ml和0.5~100 μg/ml范围内具有良好的线性关系,定量下限分别为1 μg/ml和0.5 μg/ml,提取回收率均达到70%以上,批间、批内精密度RSD值均小于10%,稳定性良好,无明显基质效应。结论 该方法操作简便、快捷、专属性好、灵敏度高、结果准确,可用于临床对两者同时进行血药浓度监测。     

丙戊酸钠血药浓度监测及其治疗儿童癫痫224例疗效分析

目的:为合理使用丙戊酸钠治疗儿童癫痫提供参考。方法:采用荧光偏振免疫分析法(FPIA)测定224例癫痫患儿血清丙戊酸浓度。结果:丙戊酸钠血药浓度<50、50～100、>100 mg/L的病例数及比例分别为43例(26.22%)、106例(64.64%)和15例(9.15%),控制癫痫发作的显效率分别为37.21%、78.30%和53.33%。结论:卡马西平和苯巴比妥可使丙戊酸钠的血药浓度降低。血清丙戊酸钠浓度与剂量相关性差,个体差异大,临床上在使用丙戊酸钠治疗癫痫患儿时,应监测血药浓度并实行个体化给药。     

丙戊酸钠血药浓度测定衍生因素分析

目的：分析丙戊酸钠血药浓度测定衍生时的影响因素,保证临床测定的准确性。方法：丙戊酸钠血药浓度用高效液相色谱（HPLC）法测定。血浆样品用2-溴-对硝基苯乙酮为衍生试剂,以丙戊酸钠衍生物产率为指标,用单因素考察法考察衍生试剂浓度、三乙胺体积分数、反应温度、反应时间对丙戊酸钠衍生产率的影响。结果：衍生试剂2-溴-对硝基苯乙酮浓度为1.5~2.0 mg·mL^-1,催化剂三乙胺体积分数为20%,衍生温度和衍生时间分别为60 ℃,10 min时,丙戊酸衍生完全,血药浓度在10~200 μg·mL^-1范围内,线性较好（R² =0.999 5）,回收率为95.00%~100.59%,日内与日间RSD≤5%,符合《中国药典》中对生物样本药物浓度检测的规定。结论：影响丙戊酸血药浓度测定的因素较多,如衍生试剂浓度和三乙胺体积分数、衍生时间、衍生温度等。在日常血药浓度监测过程中,我们应注意这些差异,尽量将误差控制在允许范围之内,保证丙戊酸钠治疗药物监测结果的准确性。     

115例癫痫患者丙戊酸钠血药质量浓度的监测与分析

目的分析丙戊酸钠治疗癫痫患者的血药质量浓度检测结果,探讨丙戊酸钠的合理用药。方法采用高效液相色谱法检测丙戊酸钠的血药质量浓度,统计分析丙戊酸钠的血药质量浓度与癫痫控制疗效、药物不良反应和联用药物等因素的影响。结果在115例癫痫患者中,丙戊酸钠血药质量浓度在50~100μg·mL~(-1)范围内有74例(64.35%);低于50μg·mL~(-1)有31例(26.95%);高于100μg·mL~(-1)有10例(8.70%),丙戊酸钠有效治疗血药质量浓度为50~100μg·mL~(-1),在此质量浓度范围内抗癫痫的效果优于不足此质量浓度抗癫痫的效果,但丙戊酸钠血药质量浓度高于此范围,其不良反应亦增加。卡马西平和苯妥英钠可能降低丙戊酸钠的血药质量浓度从而影响疗效。结论丙戊酸钠血药质量浓度个体差异大,且受药物间相互作用等多种因素影响,临床为实现个体化用药,应常规监测血药质量浓度。     

改进的柱前衍生-高效液相色谱法测定人血中丙戊酸钠

目的:建立高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠浓度的方法.方法:血样用正戊烷提取,以环己烷羧酸为内标,d-溴苯乙酮为衍生化试剂,用高效液相色谱法测定丙戊酸钠血药浓度.采用Kromasil C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(72:28),检测波长为266 nm,流速1.2 mL·min.结果:血清中丙戊酸钠线性范围为15～200mg·L-1,平均回收率为101.0%,日内、日间RSD＜5%.结论:本法快速、简便、准确,适用于临床常规监测需要.     

酶放大免疫分析法与高效液相色谱法检测人血浆中丙戊酸浓度比较

目的分析评价酶放大免疫分析法(EMIT)和高效液相色谱法(HPLC)测定人血浆中丙戊酸(VPA)浓度的相关性,为临床监测丙戊酸血药浓度及个体化用药提供参考。方法采用EMIT法和HPLC法同时测定109份血样中丙戊酸的浓度,对测定结果采用双侧配对t检验比较差异,并绘制散点图和Bland-Altman偏差图,考察两种测定结果的相关性。结果以HPLC法测定结果(X_1)与EMIT法测定结果(Y_1)作线性回归方程如下:Y_1=1.016 6X_1+3.082 7(r_1=0.942,n=109),2种检测方法测定丙戊酸血药浓度相关性良好,当样本浓度<100 mg·L~(-1)时,两者差异有显著意义(P=0.024):当样本浓度>100 mg·L~(-1)时,两者差异无显著意义(P=0.596)。Bland-Altman偏差图显示EMIT法测血浆中丙戊酸的浓度较HPLC法偏高。结论 HPLC法和EMIT法测定人血浆中丙戊酸的浓度具有较高的相关性,但均可能存在系统偏差,临床监测丙戊酸的浓度时应予以关注并作相应调整。     

丙戊酸钠对胶质瘤细胞系U251中Nanog及GFAP表达的影响

目的:研究丙戊酸钠对胶质瘤细胞系U251中转录因子Nanog及角质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法:取对数生长期的U251细胞,采用MTT法检测0、0.5、1.0、2.0mmol/L丙戊酸钠对U251细胞增殖的影响(n=7);免疫细胞化学技术和逆转录聚合酶链式反应检测试验组(1.0mmol/L丙戊酸钠)和对照组(完全培养基)细胞内GFAP、Nanog蛋白的表达和NanogmRNA的表达。结果:0、0.5、1.0、2.0mmol/L丙戊酸钠诱导U251细胞后的活细胞吸光度分别为(0.7571±0.0086)、(0.7034±0.0098)、(0.6277±0.0199)、(0.6033±0.0101),表明丙戊酸钠能明显抑制U251细胞的增殖(P<0.01),且具有浓度依赖性;与对照组比较,试验组细胞内GFAP蛋白[阳性细胞率:(39.23±0.71)%vs.(78.09±0.44)%]表达明显增强(P<0.01),NanogmRNA[灰度值:(0.6516±0.0444)vs.(0.3331±0.0540)]及其蛋白[阳性细胞率:(85.23±0.59)%vs.(52.23±0.61)%]表达明显降低(P<0.01)。结论:丙戊酸钠能明显抑制U251细胞的增殖,可能与降低细胞中Nanog的表达、增强GFAP蛋白表达有关。