血小板激活因子刺激血小板在脑微血管内皮细胞上粘附及药物的阻断作用(英文)

目的:研究血小板激活因子(PAF)刺激脑微血管内皮细胞导致血小板在内皮细胞上粘附及WEB,DMPP和粉防己碱的抑制作用. 方法:用[~3H]腺嘌呤标记血小板探讨PAF导致血小板在脑微血管内皮细胞上粘附和药物的抑制作用. 结果:PAF 10—100 nmol L~(-1)显著增加血小板与脑微血管内皮细胞的粘附率,WEB,DMPP和粉防己碱抑制由PAF刺激而导致的血小板在脑微血管内皮细胞上的粘附. 结论:DMPP和粉防己碱能够抑制PAF对脑血管的损害作用.     

红花黄色素对培养人脐静脉血管内皮细胞作用的研究

目的　观察红花黄色素 (SY)对血管内皮细胞的毒性 ,探讨其对血小板活化因子 (PAF)损伤血管内皮细胞作用的影响。方法　将培养的人脐静脉血管内皮细胞 (HVEC)和EVC 30 4细胞系分别分为PAF、SY、SY +PAF、银杏内酯(ginkolide)和 ginkolide +PAF 5组 ,以光镜和结晶紫比色法观察细胞形态和生物活性变化。结果　HVEC与PAF(10 -11～ 10 -6mol·L-1)孵育 30min后 ,其形态由长梭状或多边形变为椭圆或圆形 ,细胞间隙加大 ,由紧密排列变为疏松的单个细胞 ;HVEC与SY +PAF孵育后 ,形态变化与PAF所致相似 ,生物活性亦见下降趋势 ;HVEC与SY (0 5 71g·L-1)孵育仅 30min即出现形态改变 ,生物活性也有下降趋势 ;EVC 30 4与SY(1 143g·L-1)培养 4h后可致形态改变和生物活性下降。结论　在培养条件下未见SY拮抗PAF损伤内皮细胞的作用 ,高浓度SY对内皮细胞有一定的毒性     

血小板激活因子在脑微血管内皮细胞上的产生及药物的抑制作用

在体外培养的脑微血管内皮细胞上研究血小板激活因子（PAF）的产生，结果表明，该细胞在卡西霉素的刺激下可产生大量PAF，粉防己碱和蝙蝠葛碱对PAF的产生具有抑制作用，而且粉防己碱能够抑制AF诱导的挽兔洗涤血小板的聚集和[H]tria-zolodiazepine与内皮细胞的结合，结果提示，粉防己碱能够抑制PAF的作用。     

灯盏花素对血小板活化因子致肺微血管内皮细胞损伤的影响

目的　探讨血小板活化因子 (PAF)诱导肺微血管内皮细胞损伤的机制及灯盏花素的干预作用。方法　观察PAF对体外培养大鼠肺微血管内皮细胞 (RPMVEC)的形态、单层通透性、F 肌动蛋白 (F actin)的影响和灯盏花素干预后的变化 ,F actin用流式细胞仪测定。结果　PAF浓度大于 0 1mg·L-1作用 4 8h内观察到细胞脱落和破裂。 10mg·L-1PAF 12 0min内可使RPMVEC单层通透性增高、F actin解聚 ,灯盏花素可抑制上述变化。结论　①PAF引起RPMVEC脱落和破裂呈时间和剂量依赖性。②PAF引起内皮单层通透性的增高的机制与F actin解聚密切相关。③灯盏花素可抑制PAF引起RPMVEC单层通透性的增高和F actin下降 ,对PAF引起的RPMVEC损伤有一定保护作用。     

银杏内酯B抑制高糖诱导内皮细胞TLR4及炎症蛋白表达

目的评价银杏内酯B对高糖诱导内皮细胞TLR4表达的影响以及分子机制。方法使用人原代脐静脉内皮细胞,用高糖刺激内皮细胞,用Western blot分析TLR4、炎症蛋白表达以及Akt磷酸化。免疫荧光检测NF-κB核转位。结果高糖(30 mmol·L-1)刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达明显增加,PAF受体抑制剂银杏内酯B(0.6 g·L-1)和CV3988(30μmol·L-1)分别抑制了TLR4及PAF受体表达。银杏内酯B有效地抑制了高糖刺激内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达。分子机制的研究表明,银杏内酯B明显抑制了高糖诱导的Akt磷酸化,以及NF-κB p65的核转位。结论高糖刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达增高,银杏内酯B能够抑制高糖刺激TLR4、PAF受体和炎症蛋白表达,分子机制与抑制Akt磷酸化以及NF-κB活化相关。     

血小板激活因子的生物学效应及在疾病中的作用

血小板激活因子(platclet activating factor,PAF)是一种具有广泛生物学活性的内源性脂质因子,最初发现于家兔嗜碱粒细胞中,因能激活血小板引起组胺释放而命名,其化学结构为1-0-烷基-2-乙酰基-Sn-甘油-3-磷脂酰胆碱。PAF作用于多种组织细胞和器官,参与机体病理生理过程,在炎症、休克、哮喘、溃疡等疾病的发生中起重要作用,并参与雄性生殖与妊娠。 1 PAF的来源、生成及生物学效应     

香椿果多酚对补体致内皮细胞活化和损伤的保护作用

目的评价香椿果多酚类化合物XCG-7对补体致内皮细胞活化和损伤的保护作用。方法采用能特异性激活补体替代途径的眼镜蛇毒因子激活血清补体,将激活的血清作用于血管内皮细胞,诱导其活化和损伤。通过测定内皮细胞P-selectin、E-selectin和IL-8的表达以及乳酸脱氢酶释放和Caspase-3/7活化的变化,评价XCG-7对补体刺激内皮细胞活化和损伤的抑制作用。结果 XCG-7能明显抑制补体刺激内皮细胞P-selectin、E-selectin和IL-8的表达上调,减少补体损伤内皮细胞导致乳酸脱氢酶的释放和Caspase-3/7的活化。结论香椿果多酚化合物XCG-7对补体导致内皮细胞活化和损伤具有明显的保护作用。     

血小板激活因子和银杏内酯B对洗涤兔血小板中cAMP含量的影响

研究了血小板激活因子(PAF)和PAF拮抗剂银杏内酯B对洗涤兔血小板中cAMP含量的作用. 结果表明PAF(0.1-1.0 μmol·L^-1)对血小板的基础cAMP水平无影响, 但对前列腺素E₁(PGE₁) 2 μmol·L^-1及4,5-二氢-6-［4-(1H-咪唑-1)苯基］-5-甲基-3-(2H)-哒嗪酮(CI-930) 20 μmol·L^-1引起的cAMP升高有显著的抑制作用. 银杏内酯B能完全拮抗PAF抑制PGE₁和CI-930升高cAMP的作用, IC₅₀分别为4.7和12.5 μmol·L^-1. 合用磷酸肌酸/磷酸肌酸激酶和阿司匹林对PAF和银杏内酯B的作用均无影响. 提示PAF对磷酸二酯酶的激活作用及腺苷酸环化酶的抑制作用是PAF的直接作用，与其同PAF受体结合有关.     

蛋白激酶C抑制剂对血小板激活因子活性的抑制作用

本文观察了蛋白激酶C（PKC）抑制1－（5－异喹啉磺酰基）－2－甲基哌嗪（H－7）和槲皮素对血小板激活因子（PAF）体内作用的影响，结果发现：特异性PAF受体拮抗剂WEB2086可有效抑制内毒素（LPS）的致死毒性，进一步说明PAF是内毒素休克的重要介质；ivPAF可诱导小鼠腹腔毛细血管通透性增高（1．0μg／Kg）或死亡（25μg／Kg），PKC抑制剂H－7、槲皮素对二者都具有显著的抑制作用，且显著相关，提示H－7刊槲皮素抑制PAF毒性与保护内皮细胞有关；PAF在体内对小鼠的毒性和对微血管的损伤．可能与PKC有关。     

三氧化二砷对人脐静脉内皮细胞作用的研究

目的以人脐静脉内皮细胞作为血管新生内皮细胞的模拟物,通过研究As2O3对人脐静脉内皮细胞的影响,探讨As2O3的抗血管新生作用机制。方法分离和培养人脐静脉内皮细胞,以不同浓度和时间的As2O3和VEGF作用于脐静脉内皮细胞,应用流式细胞技术测定As2O3和VEGF对脐静脉内皮细胞增殖、细胞凋亡和癌基因bcl-2表达的影响。结果As2O3以时间和剂量依赖的方式抑制内皮细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制癌基因bcl-2表达,而VEGF可拮抗As2O3的部分作用。结论As2O3可以通过直接作用于内皮细胞而抑制血管新生。     

金雀异黄酮的抗血小板聚集作用及机制

目的观察金雀异黄酮对血小板聚集的影响,并初步探讨其作用机制。方法制备家兔富血小板血浆和贫血小板血浆,并通过加入不同浓度的金雀异黄酮,测定其对凝血酶和血小板活化因子(PAF)诱导的血小板聚集的抑制作用;并测定其对凝血酶的抑制率及PAF诱导聚集下的血栓素(TXB2)、6-酮-前列腺-F1α(6-Keto-PGF1α)的水平。结果金雀异黄酮能明显抑制由凝血酶和PAF诱导的血小板聚集,且金雀异黄酮与凝血酶有一定的亲和力,在PAF诱导的血小板聚集中,金雀异黄酮能明显降低TXB2水平,升高6-Keto-PGF1α水平。结论金雀异黄酮能够明显抑制由凝血酶和PAF诱导的血小板聚集,其作用与抑制凝血酶有一定关系外,可能与其通过调节PAF诱导聚集TXA2和PGI2的释放有关。     

三种化学小分子对补体旁路激活致内皮细胞黏附分子表达的干预及机制研究

目的研究白藜芦醇(Res)、PDTC和AG490 3种化学小分子对补体旁路激活致人微血管内皮细胞炎症反应相关黏附分子表达的干预作用和可能的作用机制。方法采用补体旁路激活产物作用于人微血管内皮细胞(HMEC)。TBA法检测细胞培养上清中丙二醛(MDA)的浓度,ELISA方法检测细胞培养上清中可溶性黏附分子ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的表达,并采用多个浓度的Res、NF-κB信号通路抑制剂PDTC和JAK2信号通路抑制剂AG490预处理内皮细胞,研究3种抑制剂对细胞氧化水平和黏附分子表达的干预作用。利用Western blot检测补体旁路激活产物作用于内皮细胞对NF-κB p65磷酸化的影响及3种抑制剂的干预作用。结果 HMEC受补体旁路激活产物刺激后,导致细胞培养上清中MDA浓度升高,NF-κB p65磷酸化和黏附分子ICAM-1、VCAM-1和E-selectin的表达上调。Res可降低细胞培养上清中MDA的浓度。Res、PDTC和AG490能抑制NF-κB p65的磷酸化。Res与PDTC能抑制内皮细胞黏附分子ICAM-1和VCAM-1的表达,对E-selectin的表达有一定的抑制作用,而AG490能够明显抑制上述3种黏附分子的表达。结论 Res、PDTC和AG490对补体旁路激活产物致内皮细胞黏附分子表达上调有不同程度的抑制作用,其作用机制与NF-κB信号通路的活化有关,而JAK2可能是一个更重要的调控位点。     

新生儿缺氧缺血性脑病PAF和脑血流动力学的变化

目的探讨血小板活化因子(PAF)在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)发病机制中的作用.方法采用放射免疫法测定50例新生儿HIE外周血中PAF的含量,并与15例正常新生儿进行对照;同时采用经颅彩色多普勒仪(TCD)同期检测患儿脑血流动力学的变化.结果HIE患儿急性期PAF水平较正常新生儿显著升高(P＜0.01),且患儿脑血流动力学紊乱.结论PAF参与了新生儿 HIE的发病过程,其含量与病情严重程度呈正相关.PAF直接或间接影响脑血管的调节机制,脑血流动力学能快速、敏感地反映脑动脉的血流变化.     

人脑动静脉畸形及贝伐单抗相关作用研究进展

人脑动静脉畸形是由供血动脉、异常血管、引流静脉构成的畸形血管团,与血管的异常增殖、新生有关.研究证实,VEGF、Notch4、EphrinB2与人脑动静脉畸形血管的发生、进展关系密切.其通路导致VEGF升高,影响血管内皮细胞增殖、迁移能力,进而使畸形血管进一步增生,或致血管发生破裂出血.目前对于其治疗有显微手术治疗、血管内栓塞治疗、立体定向放射治疗.三种方法各有利弊,具体选择哪种还需要综合考虑多方因素.我们考虑药物治疗,研究贝伐单抗对血管畸形的作用.贝伐单抗是VEGF的单克隆抗体,可阻断VEGF作用于内皮细胞,从而影响畸形血管的产生和进展.有报道称能部分正常化这些BAVM.因而有可能是一种BAVM的治疗手段.本文就VEGF、Notch4、EphrinB2通路与内皮细胞增殖迁移的作用机制和贝伐单抗的药物作用进行综述.     

羟基红花黄色素A对血小板活化因子的拮抗作用

目的观察羟基红花黄色素A(HSYA)对血小板活化因子(PAF)的拮抗作用.方法以放射受体结合试验观察HSYA抑制[3H]PAF与家兔洗涤血小板(WRP)特异性结合的作用,以比浊法观察HSYA抑制PAF介导的WRP及兔多型核白细胞(PMNs)聚集的作用.结果 HSYA可浓度依赖地抑制1,2及4 nmol·^L-1 [³H]PAF与WRP受体的结合;HSYA抑制PAF介导的WRP及兔PMNs聚集,均具明显的量效关系,其IC₅₀分别为0.99及0.70 mmol·L^-1.结论 HSYA有PAF受体拮抗作用.     

绿原酸、咖啡酸和阿魏酸对补体旁路激活致内皮细胞炎症相关分子表达的干预

目的研究绿原酸及其代谢产物咖啡酸和阿魏酸对补体旁路激活导致人微血管内皮细胞炎症反应相关分子表达的干预作用。方法采用眼镜蛇毒因子激活人血清补体旁路,将补体旁路激活产物作用于人微血管内皮细胞,分别取不同时间点的细胞培养上清,采用ELISA方法检测ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的含量;采用不同浓度的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸预处理内皮细胞,然后将细胞暴露于补体旁路激活产物,检测不同时间点细胞培养上清中ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的含量变化。结果补体旁路激活产物作用于人微血管内皮细胞后,引起ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的表达上调。50、100、250μmol·L~(-1)的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸对ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的上调表达均有干预作用,其中对ICAM-1和IL-8的干预作用最明显。咖啡酸表现出最好的干预作用,其次为阿魏酸。结论一定浓度的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸能有效抑制补体旁路激活引起的人微血管内皮细胞表达ICAM-1、IL-6、IL-8、t-PA、PAI-1的上调,提示绿原酸、咖啡酸、阿魏酸对微血管内皮细胞的炎症反应有一定的干预作用。     

血管内皮细胞生长因子对心肌缺血的实验研究进展

血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是于1989年从牛垂体滤泡星状细胞的条件培养基中纯化,是一种与血管生长有关的特异性生长因子.研究表明VEGF是血管内皮细胞的有丝分裂原,在生理和病理情况下均可表达,能够特异性地作用于血管内皮细胞上的特异性受体,使内皮细胞发生迁移、增殖.对多种组织缺血性疾病(包括肢体、心肌、脑缺血等)均具有促进内皮增生、增强血管通透性、促进侧支循环建立、加速新生血管形成的作用[1,2],因而在心血管疾病的治疗上受到研究者的瞩目.     

低分子肝素钠对体外培养胰腺癌细胞刺激的人淋巴内皮细胞增殖的影响

目的探讨低分子肝素钠对胰腺癌细胞培养上清液诱导的人淋巴内皮细胞增殖的影响。方法胰腺癌细胞培养上清液同人淋巴内皮细胞混合培养,经噻唑蓝（MTT）测比较低分子肝素钠作用于胰腺癌细胞株诱导的人淋巴内皮细胞增殖差异。结果人淋巴内皮细胞同胰腺癌细胞上清液共同培养后,其MTT检测吸光度（A）值达到（0．41±0．04）,与单纯内皮淋巴细胞A值（0．26±0．02）比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。同时低浓度低分子肝素钠能抑制胰腺癌细胞株上清液刺激的人淋巴内皮细胞增殖。结论体外培养的胰腺癌细胞株上清液能刺激人淋巴内皮细胞增殖。低分子肝素钠可以抑制胰腺癌细胞株培养上清液诱导人淋巴内皮细胞的增殖作用。     

血小板激活因子对大鼠脑血管通透性的影响及药物的保护作用

颈内动脉注射血小板激活因子(PAF),再给伊文思蓝,可见脑实质染色程度加深,而颈内动脉只注射伊文思蓝,脑实质未见染色。而我们合成的新药SZ-1可剂量依赖性地抑制PAF诱导的脑实质伊文思蓝染色程度的加深。在体外培养的脑微血管平滑肌细胞上,PAF能显著刺激~(14)-花生四烯酸的释放,而SZ-1能剂量依赖性地抑制这种释放,提示PAF在脑内产生的损害除与其他因素相关外,还与其刺激花生四烯酸释放有密切关系,SZ-1对PAF引起的脑部损害有保护作用。     

粉防己碱对兔血小板聚集和血小板活化因子生成的影响(英文)

目的:探讨粉防己碱(Tet)对兔血小板聚集和PAF生成的影响.方法:卡西霉素(Cal)和PAF诱导血小板聚集的聚集率和Tet对血小板聚集的抑制率被测定;给予或未给予Tet处理之血小板用Cal刺激释放PAF的量也被测定.结果:在4—64 μmol·L~(-1)浓度范围,Tet明显抑制Cal和PAF诱导的血小板聚集.IC_(50)值分别为8.6μmol·L~(-1)和14.0μmol·L~(-1).Tet也浓度依赖性的抑制Cal诱导血小板释放PAF,IC_(50)值为21.0μmol·L~(-1).结论:Tet抑制血小板聚集作用与抑制内源性PAF生成有关.