CIK细胞治疗晚期恶性肿瘤的临床研究

目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗晚期恶性肿瘤的临床疗效。方法收治42例无手术、放、化疗指征的晚期恶性肿瘤患者,将CIK细胞输注给患者,观察其近、远期疗效、不良反应,比较患者治疗前后外周血的T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD16+CD56+)分布、生活质量的变化。结果 42例患者均可评价疗效及不良反应。经CIK细胞治疗后客观缓解率为16.7%,CD3+、CD4+、CD8+、CD16+CD56+均有明显的升高,生活质量评分显著改善,中位无进展生存期(progression free survival,PFS)为8.1个月,中位生存期(overall survival,OS)为12.8个月,仅少数患者输注过程中出现发热,未见其他不良反应。结论应用CIK细胞输注治疗晚期恶性肿瘤可提高患者的细胞免疫功能,提高生活质量,延长生存期,且无明显不良反应,具有一定的临床使用价值。     

负载自体肿瘤抗原的树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞在乳腺癌的临床研究

目的：探讨负载自身肿瘤裂解物的树突状细胞（DC）与细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）共培养后，对CIK体外肿瘤细胞杀伤活性的影响，进一步观察负载自身肿瘤裂解物的DC联合CIK治疗乳腺癌患者的临床免疫学疗效、毒副反应。方法：选择20例乳腺癌患者，分离外周血单个核细胞，其中贴壁细胞经GM—CSF和IL-4诱导产生DC，并负载自体肿瘤细胞裂解物；悬浮细胞经IFN-γ、IL-2、抗CD3单抗、IL-1α体外诱导产生CIK细胞。将负载抗原的DC与CIK共培养，观察CIK在体外对自身肿瘤细胞和乳腺癌细胞株SKBR-3的杀伤活性。此外，20例患者在切除原发病灶后，接受Ag—DC＋CIK细胞的过继免疫治疗，观察临床免疫疗效。结果：①CIK细胞培养后可见CD3^＋、CD8^＋和CD3^＋CD56^＋细胞较培养前显著增加；②将负载自身肿瘤抗原的DC与CIK共培养后，CIK的体外特异性和非特异性杀瘤活性明显提高；③细胞治疗后患者外周淋巴细胞Ag—NORs的IS值明显增高；CD3^＋、CD8^＋、CD56^＋升高；PBMC对自身肿瘤细胞的杀伤活性增强（P〈0．05）；④除一过性发热、畏寒外未见其它不良反应。结论：负载自体肿瘤细胞裂解物的DC疫苗联合CIK细胞在体外能明显增强对乳腺癌细胞的杀伤作用，亦能增强乳腺癌患者的细胞免疫功能，取得较理想的临床免疫疗效。     

健脾益气中药联合CIK细胞治疗对恶性肿瘤患者免疫功能影响

目的：观察健脾益气中药联合CIK细胞生物治疗对恶性肿瘤患者免疫功能的作用及生活质量的改善情况。方法：采用回顾性分析100例恶性肿瘤患者,以CIK细胞治疗作为基础,设为对照组（给予CIK细胞治疗）34例、免疫组（CIK细胞治疗联合胸腺肽类药物）30例以及中药组（CIK细胞治疗联合益气中药）36例。用Spss13.0建立数据库进行筛选分析,观察3组T细胞亚群及生活质量评分变化情况。结果：对照组、免疫组及中药组治疗后CD4、CD4/CD8较治疗前明显升高,CD8降低,CD3无明显变化。对照组、免疫组、中药组治疗前后KPS评分均有增高,但无统计学差异,从增高幅度看中药组增高趋势明显。结论：健脾益气中药联合CIK细胞治疗能明显改善恶性肿瘤患者的细胞免疫功能,对患者生活质量有一定改善作用,对临床治疗有一定指导意义。     

自体CIK细胞治疗晚期恶性肿瘤的临床研究

目的:观察自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)治疗晚期恶性肿瘤的临床疗效?方法:从50例晚期恶性肿瘤患者外周血分离单个核细胞,体外经IFN-γ?IL-2?CD3单抗和 IL-1α体外诱导产生CIK细胞?观察CIK细胞增殖,流式细胞术检测50例肿瘤患者CIK细胞治疗前?后免疫表型的变化,3H-TdR释放法检测杀伤活性的变化,观察CIK细胞治疗晚期恶性肿瘤的临床疗效?结果:CIK细胞的数量和杀伤活性10~16天达到高峰,培养第13天时CIK细胞比例达到30.2%±5.6%,CIK细胞的杀伤活性为62.5%±8.9%?CIK治疗后,CD3+?CD4+细胞百分率上升,CD8+细胞百分率下调,CD4+/CD8+比值上升,NK细胞百分率明显升高(P < 0.05),杀伤活性22.2%±4.8%明显升高达17.5%(P < 0.01)?可评价38例患者中,无完全缓解(CR),6例部分缓解(PR),缓解率为15.8%(6/38),疾病稳定率52.6%(20/38),疾病控制率68.4%,进展12例?Karnofsky评分提高率76%?不良反应轻微?结论:自体CIK细胞治疗能明显提高肿瘤患者细胞免疫功能,治疗晚期恶性肿瘤是一种安全?有效的治疗方法?     

CIK细胞治疗泌尿系统肿瘤的临床疗效分析

目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）体外细胞毒活性,并观察CIK细胞治疗泌尿系统肿瘤的近期临床疗效、免疫学活性及副反应.方法 2007年7月至2010年3月共收录10例泌尿系统肿瘤患者进行CIK细胞治疗,经标准治疗方案治疗的患者,取外周血分离单个核细胞（PBMC）,体外诱导出CIK细胞培养后,观察CIK细胞表型,用MTT法测体外细胞毒活性.结果当效靶比为16：1、8：1时,CIK细胞体外细胞毒活性杀伤率分别（93.59±6.69）%和（76.78±14.23）%.前列腺癌2例,病情有较好的缓解,其中1例前列腺特异抗原和游离抗原治疗后均下降;4例肾癌完全缓解,1例SF,AFP和CEA在CIK治疗3个疗程后降至正常值.膀胱癌4例,部分缓解3例;与CIK细胞回输前相比,患者CD3＋、CD4＋、CD8＋均有显著升高（P〈0.05）,这表示可以诱导患者产生特异性的免疫反应.10例患者在输注CIK过程中未出现不良反应.结论 CIK细胞在泌尿系统肿瘤免疫治疗中能诱导机体产生特异性的免疫反应,亦是新的杀伤肿瘤细胞的效应细胞,有较好的临床疗效.     

健康直系亲体靶向DC-CIK细胞的制备及在恶性肿瘤免疫治疗中的应用

目的:探讨健康直系亲体负载肿瘤干细胞抗原的靶向DC-CIK细胞的制备方法及对恶性肿瘤患者的治疗价值。方法:43例恶性肿瘤患者,用智能单采机采集健康直系亲体的外周血单个核细胞,其中贴壁细胞经体外诱导产生树突状细胞(DC),悬浮细胞经体外诱导产生CIK,DC负载不同肿瘤干细胞抗原制备靶向DC细胞,将靶向DC与CIK细胞共培养制备靶向DC-CIK,检测靶向DC-CIK细胞表面分子的表达及细胞增殖情况,并将靶向DC-CIK分6次回输给43例患者,治疗3个疗程后,结合影像学等检查综合评价临床治疗的疗效,同时观察不良反应。结果:靶向DC细胞与CIK细胞共培养后,可明显刺激CIK细胞的增殖,同时CD3~+CD8~+细胞,CD56~+及CD3~+CD56~+细胞的含量明显增加,43例恶性肿瘤患者接受健康直系亲体靶向DC-CIK细胞输注,PR17例,SD 25例,PD 1例,临床疗效明显,无不良反应。结论:健康直系亲体靶向DC-CIK细胞应用于恶性肿瘤患者效果确切、无明显不良反应。     

肿瘤的CIK细胞过继免疫治疗观察及实验研究

目的：应用CIK细胞治疗462例中晚期恶性肿瘤患者，并进行了系统的随访，旨在观察CIK细胞治疗中晚期恶性肿瘤的疗效和实验室的试验研究。方法：用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞，在体外用多种细胞因子（CD、MCAb、IL-2、IFN-γ、IL-1α等）共同培养后获得的CIK细胞，分次回输给患者，随访观察患者治疗前后瘤体变化，临床症状改善，生活质量，卡氏评分及体重变化等，同时记录生存期一结果：总缓解率为78．57％：临床症状治疗前后对比有明显改善，x^2=79．8，P＜0．01，有统计学意义。生存质量卡氏评分提高率为80．3％。结论：CIK细胞能抑制肿瘤细胞生长，具有较强的杀伤活性。CIK细胞治疗安全有效，无明显副作用，是治疗肿瘤较为理想的方法。     

CIK细胞治疗妇科肿瘤的临床研究

目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）体外细胞毒活性,并观察CIK细胞治疗妇科肿瘤的近期临床疗效、免疫学活性及副反应.方法共收录2007年7月至2010年3月22例妇科肿瘤患者进行CIK细胞治疗,其中卵巢癌11例,子宫癌11例.经标准治疗方案治疗的患者,取外周血分离单个核细胞（PBMC）,体外诱导出CIK细胞培养后,观察CIK细胞表型,用MTT法测体外细胞毒活性.所有患者均接受一定剂量的CIK细胞过继免疫治疗,观察其近期临床疗效、免疫反应、不良反应.结果当效靶比为16：1、8：1时,CIK细胞体外细胞毒活性杀伤率分别（82.33±9.35）%和（61.59±13.59）%.卵巢癌11例,近期疗效评价中,部分缓解4例,近期有效率为66.67%,疾病控制率为66.67%.子宫癌11例,近期疗效评价中,部分缓解6例,近期有效率为100%,无肿瘤进展时间为4～26个月,中位无肿瘤进展时间为13个月.与CIK细胞回输前相比,患者CD3＋、CD4＋、CD8＋均有明显的升高（P〈0.05）,这表示可以诱导患者产生特异性的免疫反应.22例患者在输注CIK过程中未出现不良反应.结论 CIK细胞对妇科肿瘤有较好的临床疗效.     

细胞因子诱导的杀伤细胞治疗妇科恶性肿瘤的近期疗效观察

目的 观察回输体外培养的自体细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cells, CIK）治疗妇科恶性肿瘤的近期临床疗效。方法 取8例妇科恶性肿瘤患者外周血,体外培养诱导出CIK细胞,将CIK细胞回输给患者,对比其回输前及回输后2个月的免疫功能、血清CA-125值、卡氏评分及临床症状变化,评价其近期临床疗效。 结果 回输后,外周血CD4+/CD8+比值增加(P<0.05), CD3-CD16+CD56+ 细胞所占百分比增加(P<0.05), CD4+CD25+细胞所占百分比降低(P<0.05);5例患者血清CA-125值下降;1例患者卡氏评分上升;5例患者自觉有临床症状缓解;无一例出现回输不良反应。结论 回输自体CIK细胞对治疗妇科恶性肿瘤有一定的近期疗效。     

自体CIK细胞免疫疗法治疗中晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的观察自体CIK细胞过继性免疫疗法对中晚期非小细胞肺癌患者的临床疗效。方法体外利用抗CD3单抗、IL-2、IFN-γ等细胞因子从患者外周血单个核细胞（PBMC）中诱导扩增CIK细胞,培养11-14d后,分3个疗程回输患者体内,观察患者临床症状改善及生活质量改善状况,并用流式细胞仪检测回输前后患者T细胞亚群和NK细胞变化。结果86例接受自体CIK细胞治疗患者中,PR＋MR为72例,总缓解率为83．72％。治疗前、后肿瘤患者临床症状有明显改善,有显著性差异（P〈0．01）。CIK细胞经培养后细胞总数和CD3、CD56T效应细胞均获得大量增殖,自体回输免疫治疗后,CD3、CD4T细胞和NK细胞比例均显著提高（P〈0．01）。结论从中晚期非小细胞肺癌患者外周血PBMC中可高效扩增CIK细胞,自体回输能显著提高患者免疫功能,改善临床症状,提高生存质量,延长患者生存期。     

自体CIK细胞过继免疫治疗恶性肿瘤的实验研究

目的 :观察细胞因子活化的杀伤细胞 (CIK细胞 )治疗恶性实体瘤的疗效。方法 :分离患者自体外周血单核细胞 (PBMC) ,用γ IFN、抗CD3单克隆抗体、IL 2、IL 1等细胞因子诱导激活 ,并大量扩增培养。制备成细胞因子活化的杀伤细胞 (cytokininducedkiller即CIK) ,应用该细胞治疗中晚期恶性肿瘤患者 2 3例。结果 :3例患者完全缓解 ,5例患者部分缓解 ,7例好转 ,7例病情稳定 ,1例进展 ,治疗总有效率为 34.8%。 2 3例患者治疗后生命质量明显提高。治疗过程中除 2例患者出现发热外 (体温 38.5℃左右 ) ,其他无任何不良反应。结论 :CIK细胞过继免疫治疗恶性肿瘤疗效确切 ,副作用小 ,并能有效改善和提高患者的机体免疫功能。     

CIK细胞在肿瘤免疫治疗中的作用

目的研究细胞因子诱导的杀伤细胞（CIKcells）的体外扩增特性及其在抗肿瘤免疫治疗中的作用。方法通过提取健康供血者的PBMNC,培养诱导CIK细胞,显微镜下观察其扩增倍数、增殖速率,流式细胞仪分析细胞免疫表型,用MTT法观察其对K562细胞的体外杀伤效应,并通过流式细胞仪进一步分析30例实体瘤患者CIK细胞输注前后外周血免疫活性细胞表型的改变。结果经2周培养,CIK细胞平均增加了30倍,总数达（4.8～5.0）×109,活性细胞比例〉90%;体外杀伤率约50%,表型检测效应细胞CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD3＋CD56＋亚群比例显著升高,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。实体瘤患者CIK细胞输注后外周血中免疫活性细胞比例也明显升高,差异也有统计学意义（P〈0.05）。结论CIK细胞在体内外能明显抑制肿瘤生长,有效改善患者的免疫功能,为晚期肿瘤治疗提供了新的方法。     

自体CIK细胞治疗恶性肿瘤免疫表型和杀伤活性变化

目的观察自体CIK细胞治疗恶性肿瘤前后免疫袁型和杀伤活性变化。方法采用流式细胞术检测50例肿瘤患者CIK细胞治疗前、后免疫表型的变化,采用3H—TdR释放法检测杀伤活性的变化。结果CIK治疗后,CD3^＋、CD4^＋细胞百分率上升,CD8^＋细胞百分率下调,CD4^＋／CD8^＋比值上升,CD19细胞百分率下降,与治疗前比较差异有统计学意义（P〈0．05）,但CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞绝对值未达到健康者水平（P〉0．05）。治疗后NK细胞百分率明显升高（P〈0．05）,达到健康者水平（P〉0．05）。在杀伤活性的研究中,与CIK细胞治疗前（19±6）％相比,治疗后杀伤活性百分率（22±5）％明显升高,达17．5％（P〈0．01）,但未达到健康者水平（P〈0．05）。结论自体CIK细胞治疗能明显提高肿瘤患者细胞免疫功能。     

健康人和肿瘤患者CIK细胞的生物学特性

目的 比较健康人和肿瘤患者CIK（Cytokine—induced kiuer）细胞的体外扩增速度、细胞表型和杀伤活性,以期为临床应用中效应细胞的选择提供提供实验数据。方法健康人和肿瘤患者外周血各10例,经密度梯度离心获得单个核细胞（PBMC）,以干扰素-γ、CD3MAb、IL-2和IL-1为诱导剂制备CIK细胞,直接活细胞计数法比较两者的扩增速度。流式细胞杈检测比较两者细胞表型,MTT法比较两者对K562和LOVO细胞株的杀伤活性。结果健康人外周血CIK细胞的扩增速度、对K562和LOVO细胞株杀伤活性均显著高于肿瘤患者外周血CIK细胞,（P〈0．01）;流式细胞仪检测显示健康人外周血CIK细胞CD3^＋CD56^＋百分比显著高于肿瘤患者外周血CIK细胞,（P〈0．01）。结论健康人较肿瘤患者外周血CIK细胞体外扩增快,CD3^＋CD56^＋比例高,杀伤活性强。为临床应用CIK细胞进行过继性免疫治疗提供了实验依据。     

自体CIK细胞治疗中晚期消化道恶性肿瘤临床疗效评估

目的评估自体细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）回输治疗中晚期消化道恶性肿瘤效果。方法选择2012年6月～2013年1月合肥凤凰肿瘤医院生物免疫治疗中心治疗的中晚期消化道恶性肿瘤患者118例,采用自体单个核细胞制备CIK细胞,培养2～3周后给予静脉输注治疗。通过荧光活化细胞分选法（FACS）测定患者治疗前后的免疫状态、生存质量（Karnofsky评分）、疾病控制率（DCR）,观察毒副作用。结果经培养后,CIK细胞扩增较好,达到预期质量标准。患者治疗后CD4＋、CD8＋细胞比率较治疗前增加,差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗后CD3＋、CD4/CD8＋,CIK细胞（CD3＋/CD56＋）高于治疗前,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。Kamofsky评分升高〉20分者27例,10～〈20分者29例,〈10分者36例;下降〈10分者26例。食管癌、胃癌、结肠癌DCR分别为55.26%（21/38）、64.91%（327/57）、65.22%（15/23）。无心、肝、肺、肾脏中毒反应。结论 CIK治疗恶性消化道肿瘤安全可靠,副作用小,疗效确切,并能有效改善患者细胞免疫状态,提高患者的生存质量,抑制肿瘤增长,提高治疗效果。     

应用自体肿瘤免疫细胞治疗中晚期肿瘤的意义

目的探讨树突状细胞（dendriticcells,DCs）和细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokineinducedkil—let,CIK）联合化疗治疗晚期实体瘤的临床意义。方法采用自体肿瘤免疫细胞治疗晚期实体瘤患者130例。分离外周血单个核细胞,其中贴壁细胞用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、肿瘤坏死因子及白细胞介素4等诱导产生DCs,并用自体肿瘤细胞或外源性肿瘤细胞抗原致敏,获得Ag．DCs;悬浮细胞经干扰素-γ,IL2和CD3单克隆抗体（CD3 monoclonal antibody,CD3mAb）等诱导产生CIK细胞,将DCs与CIK细胞共同培养;采用FCM法检测DCs及CIK细胞表型,一次回输患者。结果130例中晚期肿瘤自体肿瘤免疫细胞联合化疗治疗后,完全缓解（CR）5例,部分缓解（PR）19例,稳定（SD）87例,疾病进展（PD）13例,6例晚期肿瘤进展死亡,疾病控制率85．38％。结论DCs—CIK细胞联合化疗治疗中晚期恶性实体瘤安全有效,具有重要的临床意义和应用前景。     

恶性肿瘤患者自体CIK细胞的诱导培养及表型鉴定

目的观察恶性肿瘤患者外周血来源的细胞因子诱导杀伤（CIK）细胞体外培养形态及免疫表型变化。方法采用费森尤斯CEM.TEC血细胞分离机采集恶性肿瘤患者自体外周血单个核细胞,经rhIFN-、rhIL-2及CD3McAb联合诱导培养后,显微镜下观察诱导细胞形态,流式细胞术分析其免疫表型。结果连续诱导培养10 d后CIK细胞呈团样生长;至13 d时,CD3＋、CD3＋CD8＋和CD3＋CD56＋细胞比例分别从诱导前的（44.8±11.3）%、（21.1±8.5）%和（3.4±10.7）%增加至（72.1±13.8）%、（51.1±17.9）%及（10.7±4.4）%（〈0.05）;而CD3＋CD4＋细胞比例为（19.2±8.0）%,明显低于诱导前（28.7±6.4）%（〈0.05）。结论来自恶性肿瘤患者的自体外周血单个核细胞可成功诱导为富含CIK细胞的肿瘤杀伤细胞。