有丝分裂相关蛋白TPX2、Aurora-A、FBXW7在食管癌发生机制中的作用及预后研究

目的:探讨有丝分裂相关蛋白TPX2、Aurora-A、FBXW7在食管癌发生发展中的作用及预后机制.方法:选取127例食管癌患者的癌组织与癌旁组织标本为癌组织组及癌旁组织组;另选取60例食管高级别上皮内瘤变组织标本为对照组.运用免疫组化检测三组TPX2、Aurora-A、FBXW7蛋白表达情况;分析TPX2、Aurora-A、FBXW7表达与食管癌患者各项临床病理特征的相关性;通过Kaplan-Meier生存分析法分析患者5年生存率与TPX2、Aurora-A、FBXW7表达的关系.结果:癌组织组TPX2、Aurora-A、FBXW7蛋白阳性率高于癌旁组织组及对照组(P<0.05);Aurora-A蛋白表达水平与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关(P<0.05);FBXW7在癌组织组中的表达水平低于癌旁组织组和对照组(P<0.05),其与食管癌患者各项病理特征均无明显相关性(P>0.05);Aurora-A与TPX2表达呈正相关(P<0.05),与FBXW7表达呈负相关(P<0.05);TPX2与FBXW7的表达无明显相关性(P>0.05).生存分析示,TPX2与食管癌患者5年生存率相关(P<0.05);Aurora-A与FBXW7与患者预后无明显相关性(P>0.05).结论:食管癌发生发展中,有丝分裂相关蛋白TPX2、Aurora-A、FBXW7均有参与,而在其预后判断中,TPX2具有更高的应用价值.     

survivin基因检测在胃癌辅助诊断中的应用

目的:探讨survivin基因检测在胃癌辅助诊断中的应用价值.方法:收集49例胃癌组织及相应的癌旁非瘤胃组织标本,分别采用RT-PCR和IHC两种方法检测胃癌和癌旁组织中survivin mRNA和survivin蛋白的表达.结果:65.3%(32例)的胃癌组织survivin mRNA和63.3%(31例)的胃癌组织survivin蛋白表达阳性,而癌旁非瘤胃组织内survivin mRNA和survivin蛋白均无阳性表达;运用RT-PCR法较IHC法检测survivin表达的阳性率略高,但其差异无统计学意义(P＞0.05).结论:survivin在胃癌组织中表达上调,免疫组化和RT-PCR检测胃癌组织survivin基因的表达有望成为一种新的胃癌辅助诊断指标.     

CBP基因在非小细胞肺癌中的表达及其生物学意义

目的:研究CBP(CSK-binding protein)基因表达下降与人肺癌临床病理生理特征的关系,探讨CBP基因表达与肺癌肿瘤细胞发生、侵袭的相关性.方法:对50例非小细胞肺癌(NSCLC)标本(含癌旁组织)和10例肺良性病变组织应用单克隆抗体、免疫组化SP法检测CBP基因的蛋白表达情况.应用RT-PCR方法检测NSCLC中CBP的mRNA表达水平.结果:肺癌肿瘤组织中CBP基因表达水平显著低于癌旁组织和肺良性病变组织(P＜0.05).肺癌组织中CBP基因表达水平降低与肿瘤分期、淋巴结转移程度存在相关性(P＜0.05),与肺癌组织学类型、细胞分化程度以及患者的性别、年龄无关.结论:CBP基因可能参与了对肺癌肿瘤细胞Src家族成员激酶活性的负反馈调节,其表达下降可能与肺癌的发生、发展过程有关.     

肝癌中PTEN基因及蛋白表达的意义

目的:研究肝癌中PTEN基因mRNA和蛋白的表达与肝癌病理之间的关系。方法:应用RT-PCR法检测28例肝癌组织和对应的癌旁组织中PTEN基因mRNA表达,并通过电泳凝胶图像系统分析其相对表达量。同时采用免疫组化方法检验51例肝癌石蜡切片中PTEN蛋白表达(其中包括与28例新鲜组织相对应的标本)。结果:RT-PCR检测PTENmRNA表达率肝癌中为35.71%,癌旁组织中为71.43%,PTEN基因在肝癌细胞中表达显著低于癌旁肝组织。免疫组化检测肝癌中PTEN蛋白的检出率为66.7%,PTEN蛋白表达与肝癌的病理分级和癌栓形成呈负相关。结论:PTEN基因缺失和肝癌的分化程度以及癌栓形成、转移密切相关。     

Survivin蛋白和mRNA在胆管癌中的表达和意义

目的检测胆管癌和癌旁胆管组织中Survivin蛋白和mRNA的表达,探讨其在胆管癌发生发展中的作用。方法应用免疫组化SP法检测48例胆管癌和其中30例癌旁胆管组织中Survivin蛋白的表达,同时应用RT-PCR技术检测这些组织标本中Survivin mRNA的表达,并与临床病理资料进行相关性分析。结果48例胆管癌组织中,Survivin蛋白阳性表达率为79.2%(38/48),在癌旁胆管组织中Survivin蛋白阳性表达率6.7%(2/30),两者比较差异有显著性意义(P<0.05)。48例胆管癌组织中,有30例Survivin mRNA的表达高于配对正常组织,胆管癌组织中Survivin mR-NA的表达水平(2.18±1.21)明显高于正常对照组织(1.01±1.03)(P<0.05)。临床病理资料的相关性分析显示,胆管癌组织中Survivin蛋白和mRNA的表达分布与临床病理特征无相关性。结论Survivin基因转录和蛋白表达可能参与胆管癌的发生发展过程,检测Survivin表达可能有助于阐明胆管癌的发生机制。     

Bcl-2在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨Bcl-2在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达水平及其临床意义.方法 选取手术切除并经病理证实的NSCLC及相应的癌旁标本51例,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对51例NSCLC患者癌组织和癌旁正常组织的Bcl-2 mRNA表达水平进行检测;运用免疫组织化学方法检测NSCLC组织和癌旁正常组织中Bcl-2 蛋白的表达;分析Bcl-2的表达量和患者的临床特点之间的关系.结果 RT-qPCR结果显示NSCLC组织中Bcl-2 mRNA的表达水平高于癌旁正常组织,而在高、中分化组的NSCLC组织中Bcl-2 mRNA的表达水平高于低分化组(P<0.05).免疫组化显示NSCLC组织Bcl-2蛋白表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05),Bcl-2蛋白的表达水平与NSCLC组织的分化程度及TNM分期有关,其分化程度越高或TNM分期越低,Bcl-2蛋白的表达程度也越高(P<0.05),与患者性别、年龄及是否吸烟无明显相关性.结论 Bcl-2的表达在NSCLC组织和癌旁正常组织中存在差异,Bcl-2可能与NSCLC的发生发展有关.     

DNA错配修复基因hMSH2蛋白表达与胃癌发生关系的探讨

[目的]探讨DNA错配修复基因hMSH2蛋白表达与胃癌发生以及不同病理类型之间的关系.[方法]应用免疫组化技术检测hMSH2基因在38例胃癌患者的癌组织及其癌旁组织的蛋白表达.[结果]癌细胞阳性表达率(52.63%)明显高于癌旁上皮细胞(23.68%)(P＜0.05);同例中癌细胞和癌旁上皮细胞均表达的为15.79%,同例癌细胞表达而癌旁上皮细胞不表达的例数(14/38)明显多于癌旁上皮细胞表达而癌细胞不表达的例数(3/38)(P＜0.05);高中分化腺癌、低分化腺癌和粘液癌表达阳性率分别为33.33%、52.63%、和70%.[结论]DNA错配修复基因hMSH2蛋白表达与胃癌发生密切相关.     

肺癌中Cox-2 mRNA及其蛋白表达的意义

目的:探讨非小细胞肺癌组织中Cox-2 mRNA及蛋白的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用原位杂交方法检测30例肺癌及相应的癌旁组织中Cox-2 mRNA的表达,同时采用免疫组织化学SP法检测相应标本中Cox-2蛋白的表达。结果:在肺癌和相应的癌旁组织中Cox-2 mRNA表达的阳性率分别为66.7%(20/30)、10%(3/30)。Cox-2蛋白的阳性率分别为73.3%(22/30)、13.3%(4/30)。肺癌组远高于癌旁组,有显著性著异(P<0.001)。Cox-2 mRNA与蛋白在肺癌组织的阳性表达具有一致性(P<0.05)。其阳性率高低与肿瘤大小、组织类型无关,而与组织学分级、淋巴结转移、TNM分期有关。结论:从基因水平和蛋白水平说明Cox-2基因异常表达可能对肺癌的发生和发展起重要作用。     

FHIT,Caspase -3及Survivin蛋白在结肠癌组织中的表达及其意义

[目的]探讨结肠癌组织FHIT,Caspase-3及Survivin蛋白表达状况及其意义.[方法]免疫组化方法检测60例结肠癌组织和癌旁组织标本FHIT,Caspase-3及Survivin蛋白表达,并分析结肠癌3种蛋白表达间的相关性.[结果]结肠癌与癌旁组织,FHIT蛋白表达阳性率分别为31.9％和93.3％ (P ...     

青海高原地区胃癌患者MICA基因在mRNA及其蛋白水平表达

目的:研究青海高原地区胃癌组织中MICA基因在mRNA水平与其蛋白表达及相关关系.方法:采用RT-PCR技术检测41例高原地区胃癌组织和相应的癌旁粘膜组织中MICA mRNA表达,采用免疫组化SP法检测MICA蛋白在胃癌和癌旁组织中的表达,Spearman相关关系检验分析它们之间的相关性.结果:青海高原地区胃癌组织MICA mRNA的表达水平高于癌旁组织(P＜0.05).胃癌组织MICA蛋白表达在癌旁组织中为(26.9%,11/41)与胃癌组织阳性率为87.8%(36/41),高分化组(75.0%,6/8),中分化组(83.3%,10/12),低分化组(95.2%,20/21),之间差异有统计学意义(P＜0.05),而与肿瘤发生的性别、年龄、淋巴结转移无关(P＞0.05).Spearman相关分析显示,MICA蛋白表达水平与mRNA的表达水平呈正相关(P＜0.01).结论:MICA的过度表达在青海高原地区胃癌的发生发展过程中起着重要作用,胃癌组织中MICA mRNA以及蛋白水平的升高之间存在密切正相关.     

Clusterin在非小细胞肺癌中的表达及意义

[目的]探讨clusterin蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织表达的临床病理意义.[方法]采用免疫组织化学方法(SP法)检测clusterin蛋白在52例NSCLC组织和20例正常肺组织的表达情况,结合临床病理资料进行分析.[结果]Clusterin阳性表达率在52例肺癌中为78.85%,20例正常肺组织中为10%,二者差异有显著性意义 (P<0.05);clusterin表达与肿瘤的分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05),但与肿瘤的病理类型无关(P>0.05).[结论]检测clusterin表达对判断NSCLC的恶性程度、转移潜能及预后有重要的临床意义.     

原发性卵巢浆液性癌中Aurora-A的表达及意义

目的 探讨Aurora-A在原发性卵巢浆液性癌组织中的表达及临床意义.方法 用免疫组化及Western blot 方法测定61例原发性卵巢浆液性癌组织、22例卵巢良性上皮性肿瘤、20例正常卵巢组织标本中Aurora-A的表达,分析Aurora-A的表达与患者预后的关系.结果 原发性卵巢浆液性癌组织Aurora-A蛋白高表达率为39.34%（24/61）;良性上皮性卵巢、正常卵巢组织高表达率分别为4.55%（1/22）、5.00%（1/20）.两者比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;根据1985年国际妇产科联盟（FIGO）临床手术分期为III～IV期患者的Aurora-A蛋白高表达率高于I～II期患者,差异有统计学意义（P＜0.05）;病理分级高分化者Aurora-A蛋白表达明显低于低分化者（P＜0.05）.Aurora-A蛋白低、中、高表达的患者平均生存期分别是54、50、37个月,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 ⑴原发性卵巢浆液性癌组织中Aurora-A蛋白的表达水平明显高于良性上皮性卵巢肿瘤及正常卵巢组织.⑵原发性卵巢浆液性癌组织Aurora-A蛋白的表达与其病理分级、临床手术分期具有相关性.⑶原发性卵巢浆液性癌组织Aurora-A蛋白的表达与患者预后有相关性,Aurora-A蛋白的表达可能是观察患者预后的指标之一.     

Expression of endoplasmic reticulum molecular chaperon GRP94 in human lung cancer tissues and its clinical significance

Objective To investigate the relationship between the expression of glucose regulated protein 94 (GRP94) at the level of mRNA and protein in vivo and in human lung cancer. Methods RT-PCR, immunohistochemistry and/or Western blot were used in 54 cases of lung cancer tissues and corresponding normal lung tissues.Results There was a significant overexpression of GRP94 mRNA and protein in lung cancer tissues as compared with lung normal tissues.In lung cancer tissue, the relative level of GRP94 mRNA as evaluated by RT-PCR was 3.48±2.06, the level of GRP94 protein as evaluated by immunohistochemistry was ++ to +++, and by Western blot was 256.7±80.6.In lung normal tissue, the relative level of GRP94 mRNA was 2.01±1.83, the level of GRP94 protein was + to ++ and 108.1±42.3.The differences in expression of GRP94 between the two tissues were significant ( P &lt;0.05).Furthermore, the over-expression of GRP94 in the lung cancer tissues was correlated to grade of differentiation and stage of tumors.There was stronger expression in poor-differentiated tumors than in mild-to-high differentiated tumors ( P &lt;0.05).There was also a stronger expression in stage Ⅲ than in stage Ⅰ and Ⅱ tumors ( P &lt;0.05).No statistically significant difference was found among various pathological types of tumors. Conclusion GRP94 was related with the occurrence, differentiation and progress of human lung cancer.Ascertaining the levels of GRP94 mRNA and protein may be valuable in evaluating the grade of differentiation and clinical stage of human lung cancer.     

人肺癌组织中富含酪氨酸61和结缔组织生长因子的表达

目的:研究人肺癌组织中富含酪氨酸61(CYR61)和结缔组织生长因子(CTGF)的基因表达及其与临床参数的关系.方法:采用实时定量PCR及免疫组织化学技术对60例肺癌患者的肺癌组织和癌旁正常肺组织CYR61和CTGF基因mRNA表达水平和蛋白表达进行测定,并分析二者的表达与临床参数的关系.结果:肺癌组织中CYR61和CTGF mRNA表达水平和蛋白阳性表达率均低于癌旁正常组织(P均＜0.05).肺癌组织中CYR61和CTGF mRNA的表达水平与患者的病理类型、病理分级、淋巴结转移、吸烟及家族史等临床参数有关(P＜0.05);肺癌组织中CYR61和CTGF mRNA表达水平呈正相关(r=0.604;P=0.000).多元回归分析:病理类型和年龄对CYR61表达有重要影响,肿瘤的位置、CYR61表达和性别对肺癌组织中的CTGF表达有重要影响.结论:CYR61和CTGF单种基因或两者相互作用对肺癌的发展起重要作用,其表达的蛋白产物可作为临床干预治疗的重要靶蛋白.     

Aurora-A在食管鳞癌及癌前病变中的表达特点和研究意义

目的 探讨极光激酶(aurora kinases A,Aurora-A)在食管鳞癌及癌前病变(主要为癌旁癌前病变)组织样本中的表达特征及其在食管鳞癌发生、发展过程中的作用。 方法 应用组织芯片技术和免疫组织化学方法(S-P法)检测Aurora-A在9例重度不典型增生组织和122例食管鳞癌组织以及它们的癌旁癌前病变组织中的表达情况;并使用实时荧光定量PCR法检测Aurora-A基因在8对癌前病变组织和5对早期食管癌组织中的表达水平;同时运用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR法检测Aurora-A基因在各细胞株(人食管上皮永生化细胞株及食管鳞癌细胞株)中的差异性表达情况。 结果 免疫组化结果显示Aurora-A在正常食管黏膜上皮、轻度不典型增生、中度不典型增生、重度不典型增生及食管鳞癌组织中的阳性率分别为17.2%、27.6%、50.0%、71.2%和84.3%,其表达率随病变程度加重而递增。Aurora-A基因mRNA水平在8例癌前病变组织和5例早期食管癌组织中的表达程度也明显高于其相应正常组织,其中病变组织存在Aurora-A显著性高表达的比率分别为75.0%(6/8)和60.0%(3/5)。与人食管上皮永生化细胞株相比,Aurora-A在ESCC细胞株中的表达水平也明显升高。 结论 Aurora-A激酶表达水平与食管癌癌前病变严重程度呈正相关(r=0.548,P=0.000),提示Aurora-A可能参与食管鳞癌的发生与发展,有望为食管鳞癌的早期诊断及治疗提供新的方向。     

生存素基因mRNA和蛋白在胃癌中表达及其意义

目的探讨生存素(survivin)基因mRNA和蛋白表达与胃癌发生发展的关系。方法应用原位杂交和免疫组化技术检测30例胃癌及20例良性胃组织(5例慢性胃炎、5例胃溃疡、10例癌旁正常组织)标本中survivin mRNA和蛋白的表达,并分析其与临床病理参数的关系。原位末端标记技术(TUNEL法)检测细胞凋亡。结果良性胃组织中无survivin的表达,而胃癌组织中survivin mRNA阳性表达率36.67%(P<0.01),蛋白阳性率46.67%(P<0.01),并且其表达在不同的TNM分期、有无淋巴结转移之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论survivin在胃癌中显著表达,并明显抑制凋亡,在胃癌的发生发展过程中起重要作用。     

非小细胞肺癌中基质金属蛋白酶-10的表达

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中基质金属蛋白酶-10(matrix metalloproteinase-10,MMP-10)的表达及其与临床参数间的关系.方法:使用RT-PCR法及免疫组化法,检测32对NSCLC癌组织及癌旁正常组织中MMP-10的表达水平,并分析其与性别、年龄、分期、分级、肿瘤大小、淋巴结转移及病理类型之间的相关性.结果:MMP-10 的表达在mRNA水平与蛋白质水平表达有差异:MMP-10 mRNA在NSCLC癌组织中的表达要显著低于癌旁正常肺组织(P＜0.05),MMP-10蛋白在肺癌癌组织中的表达要显著高于癌旁正常肺组织(P＜0.01);在NSCLC癌组织中MMP-10 mRNA 的表达与MMP-10蛋白的表达呈正相关(r=0.4672, P＜0.05),而在癌旁正常肺组织中,两者表达相关性无显著统计学差异(r=-0.003022,P＞0.05).结论:MMP-10 mRNA在肺癌癌组织中表达要低于正常组织,MMP-10蛋白在肺癌癌组织中表达要高于正常组织.     

大肠癌组织CD137L的表达及意义

【目的】 检测大肠癌组织及癌旁组织中CD137L mRNA及蛋白的表达情况,探讨其在大肠癌发生进展中的意义&#65377; 【方法】 运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应及冰冻切片免疫组化的方法检测大肠癌组织及癌旁组织中CD137L的表达情况,并分析其表达情况与各临床因素的相关性&#65377; 【结果】 54例大肠癌组织中CD137L mRNA的相对表达水平为 0.035 ± 0.013,显著高于癌旁组织的0.008 ± 0.005(P < 0.05)&#65377;但在不同性别&#65380;年龄&#65380;肿瘤发生部位&#65380;Dukes分期&#65380;病理分化及血清CEA水平情况下,CD137L mRNA的表达水平无显著性差异(P > 0.05)&#65377;随机抽取8例大肠癌肿瘤组织及3例癌旁组织,进行免疫组化检测,结果显示6例CD137L蛋白呈阳性表达,CD137L表达于肿瘤细胞表面;3例癌旁组织该分子的表达均为阴性&#65377;【结论】 CD137L mRNA在大肠癌组织中高表达,CD137L分子表达于大肠癌肿瘤细胞表面,提示该分子可能在大肠癌的发生进展中发挥作用&#65377;     

p73蛋白表达与老年人和非老年人肺癌临床病理特征的比较研究

目的 探讨p73与老年人肺癌和非老年人肺癌发生、发展的关系.方法 应用免疫组化SP法检测72例老年人肺癌组织、38例非老年人肺癌组织及34例癌旁组织中p73蛋白的表达.结果 p73蛋白在老年人肺癌组织和非老年人肺癌组织中的阳性表达率分别为62.5%、76.3%,均明显高于癌旁组织(26.5%),差异有统计学意义(P<0.05).老年人肺癌中,在不同性别和不同淋巴结转移状况的患者中,p73蛋白表达均有统计学差异(P<0.05);在不同肿瘤大小、不同组织学类型、不同分化程度、不同临床分期的患者中,p73蛋白表达无统计学差异(P>0.05).非老年人肺癌中,在不同性别的患者中p73蛋白表达有统计学差异(P<0.05);在不同肿瘤大小、不同组织学类型、不同分化程度、不同临床分期及不同淋巴结转移状况的患者中,p73蛋白表达均无统计学差异(P>0.05).结论 p73表达上调可能是肺癌发生、发展的重要因素;p73在老年人和非老年人肺癌组织中的表达有差异.推测p73上调可能与老年人肺癌的转移有关.     

骨肉瘤组织中MICA基因mRNA和蛋白的表达

【目的】 检测骨肉瘤组织中MHC I类链相关蛋白A(MHC class I chain-related A,MICA)基因mRNA和蛋白的表达情况,为探讨骨肉瘤的肿瘤免疫机制提供信息&#65377; 【方法】 应用RT-PCR方法检测MICA mRNA在11例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中的表达情况;分别应用免疫组织化学方法&#65380;Western blot和流式细胞术检测66例石蜡包埋骨肉瘤组织&#65380;6例石蜡包埋正常人骨组织&#65380;9例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中MICA蛋白的表达情况&#65377; 【结果】 骨肉瘤组织中MICA mRNA表达率为81.8%(9/11),5个骨肉瘤细胞株均表达MICA mRNA;MICA蛋白在骨肉瘤组织和正常骨组织的表达率分别为51.6%(34/66)和0%(0/6);骨肉瘤细胞株Saos-2&#65380;MG63和HOS阳性表达膜表面MICA蛋白,而细胞株U2OS和OS732只有少量细胞呈阳性表达&#65377;【结论】 MICA mRNA和蛋白广泛表达于骨肉瘤组织和细胞株&#65377;