米诺环素对缺氧缺血脑损伤未成熟新生大鼠TLR4、NF—κBp65和TNF—α表达的影响

目的观察米诺环素（Minocycline,MN）对缺氧缺血脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）未成熟新生大鼠Toll样受体4（Toll-1ike receptor4,TLR4）、核因子-κB（nuclear factor-kappa B,NF—κB）p65和TNF．仪表达的影响,探索米诺环素脑保护作用机制。方法将160只生后2d（P2）Sprague—Dawley（SD）新生大鼠随机分成正常对照组、假手术组、HIBD组、HIBD加MN组。通过结扎左侧颈总动脉及8％氮氧混合气缺氧4h,制备未成熟新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型。HIBD加MN组大鼠缺氧后予腹腔注射1次MN45mg／kg,HIBD组予腹腔注射等剂量的无菌PBS（pH7．4）。HI后24h、48h、72h取材,Westernblotting检测TLR4、NF．KBp65和TNF—Ot蛋白表达,HI后72h、4周行脑组织HE染色及病理评分,HI后4周行行为学检测。结果HI后72h、4周HIBD加MN组脑组织病理损伤较HIBD组减轻,HIBD加MN组半定量病理评分低于HIBD组,差异有统计学意义（P〈0．05）。Western blotting显示HI后24、48和72hHIBD加MN组TLR4、NF—KBp65和TNF-α的表达低于HIBD组,较正常组及假手术组升高。HI后4周,在悬吊试验及斜坡试验中,HIBD加MN组与正常组、假手术组差异无统计学意义（Jp〉0．05）。旷场试验中,HIBD加MN组与正常组、假手术组对比,差异有统计学意义（P〈0．05）;与HIBD组比较,P=0．375,差异无统计学意义（P〉O．05）。圆筒实验中HIBD加MN组左侧上肢触壁百分比较HIBD组降低（P〈0．05）,与正常组、假手术组差异无统计学意义（P〉0．05）;右侧触壁百分比的比较中,HIBD加MN组与正常组、假手术组、HIBD组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论米诺环素对缺氧缺血脑损伤近期及远期具有良好的保护作用,其对缺氧缺血脑损伤的保护作用机制可能与抑制TLR4．NF—κBp65-TNF-α信号途径的激活有关。     

影响肝细胞癌生物学行为及预后的相关因子分析

目的探讨影响肝癌生物学行为及预后的重要因素和寻求肝癌基因治疗的有效靶点。方法运用免疫组化方法检测Ki67、nm23H1、cMet及MT1MMP蛋白在93例肝细胞癌组织中的表达水平,并判断其与肝癌细胞恶性生物学行为及患者预后的关系。结果Ki67、nm23H1、cMet及MT1MMP蛋白表达水平与肝癌患者预后均具有显著相关性(P均<0.01);nm23H1的表达与肿瘤远处转移之间呈负相关关系(P=0.041);cMet、MT1MMP的表达与肝癌瘤旁浸润及远处转移之间均呈正相关关系(P<0.05)。结论nm23H1基因的失活或突变,伴随cMet以及MT1MMP蛋白的异常表达可能是导致肝癌浸润、转移的关键因素。     

IgA肾病的病理特点及类型

[目的]探讨IgA肾病的病理特点及类型.[方法]肾穿活检病例分别作免疫萤光、常规光镜和电镜观察.统计临床及病理特点.[结果]本组IgA肾病共634例,占同期肾穿病例的17.6%.平均年龄29.1岁.88.4%的病例发生在10～49 岁.临床上以血尿为主诉的仅占40.3%.IgA肾病病理分类为①正常肾小球55例,占8.7%;②系膜增生型333例,占52.5%;③进行性硬化型92例,占14.5%;④局灶性病变146例,占23.1%;⑤其他类型8例,占1.3%.[结论]①IgA肾病诊断标准临床上以无诱因血尿,血液免疫学IgA升高为主,部分病例亦可或/和合并蛋白尿.病理学上以系膜区大量IgA沉积为主要特征,有时亦可合并基底膜上沉积.②IgA肾病的病理学类型是多样性的.     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的远期影响

【目的】探讨早期和延迟高压氧（HBO）治疗对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠的远期影响。【方法】7日龄大鼠37只随机分为对照组（n=10，假手术处理）、HIBD组（n=9）、EHBO组（n=9，HIBD模型后0．5～1h开始2个绝对大气压HBO治疗，稳压30min／次，间隔24h，连续2次）和LHBO组（n=9，HIBD模型后48～72h开始2个绝对大气压HBO治疗，稳压30min／次，间隔24h，连续5次），以大鼠远期的学习记忆功能（Morris水迷宫实验）和海马形态组织学（海马锥体细胞层结构和CAl区存活神经元数）来判断干预效果。【结果】HIBD组大鼠的学习记忆功能严重不良伴海马结构严重受损，与对照组相比，水迷宫实验中平均逃逸潜伏期延长（56．35S与23．07S，P〈0．05）、搜索时间和搜索路程缩短（分别为29．29S与51．21S，548cm与989cm．均P〈0．05）、海马存活神经元减少（100个／mm与183个／mm，P〈0．05）；早期HBO治疗明显减轻HIBD大鼠的学习记忆功能障碍（潜伏期：39．17s与56．35s；搜索时间：36．84s与29．29s；搜索路程：686cm与548cm，P〈0．05），并使海马存活神经元增多（131个／mm与100个／mm，P〈0．05），延迟HBO治疗不能减轻HIBD大鼠的学习记忆功能障碍（潜伏期：56．25s与56．35。；搜索时间：30．11s与29．29s；搜索路程：572cm与548cm，P〉0．05），海马存活神经元无增多（95个／mm与100个／mm，P〉0．05）；大鼠在水迷宫实验中的逃逸潜伏期与海马锥体细胞层存活神经元数呈直线负相关（r=-0．819，P〈0．01）。【结论】早期HBO治疗可减轻HIBD程度，并可改善HIBD所引起的远期学习记忆功能缺陷，延迟HBO治疗对HIBD无效。     

不锈钢网在分离和提取多核巨细胞方法中的应用

<正>骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCT)是一种以多核巨细胞和单核基质细胞组成的常见骨肿瘤,在GCT中,多核巨细胞的存在,始终是该肿瘤的典型组织学特征之一.尽管在GCT的众多研究中发现,GCT中的多核巨细胞可能就是肿瘤环境中的破骨细胞[1～3],并可直接引起骨质的溶解[4,5].但一直未能找到一种有效的方法从GCT中提取高纯度的多核巨细胞,以供体外实验研究.1997年我们在完成国家教委博士点基金和霍英东教育基金课题"骨巨细胞瘤病变部位局部骨质吸收机制"的研究中[6,7],先后尝试运用了percoll密度梯离心法和50μm孔经不锈钢网过滤法,从GCT组织中提取多核巨细胞.结果证实,不锈钢网过滤法确为一种简便、经济而高效的分离提纯方法,值得介绍和推广.     

骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A蛋白和基质金属蛋白酶-9的关系

目的：探讨骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A（MICA）蛋白和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的关系。方法：用免疫组化检测66例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达情况。结果：MICA和MMP-9蛋白在骨肉瘤组织的表达率分别为51.5%和54.5%,两者在骨肉瘤组织的表达呈正相关（r=0.414,P〈0.01）。结论：MICA广泛表达于骨肉瘤组织,其与MMP-9表达可能由相同信号通路调控。     

骨肉瘤组织中MICA基因mRNA和蛋白的表达

【目的】 检测骨肉瘤组织中MHC I类链相关蛋白A(MHC class I chain-related A,MICA)基因mRNA和蛋白的表达情况,为探讨骨肉瘤的肿瘤免疫机制提供信息&#65377; 【方法】 应用RT-PCR方法检测MICA mRNA在11例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中的表达情况;分别应用免疫组织化学方法&#65380;Western blot和流式细胞术检测66例石蜡包埋骨肉瘤组织&#65380;6例石蜡包埋正常人骨组织&#65380;9例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中MICA蛋白的表达情况&#65377; 【结果】 骨肉瘤组织中MICA mRNA表达率为81.8%(9/11),5个骨肉瘤细胞株均表达MICA mRNA;MICA蛋白在骨肉瘤组织和正常骨组织的表达率分别为51.6%(34/66)和0%(0/6);骨肉瘤细胞株Saos-2&#65380;MG63和HOS阳性表达膜表面MICA蛋白,而细胞株U2OS和OS732只有少量细胞呈阳性表达&#65377;【结论】 MICA mRNA和蛋白广泛表达于骨肉瘤组织和细胞株&#65377;     

卵圆细胞的生物学特征及其与肝癌发生的关系

目的通过动态的方法观察卵圆细胞的主要生物学特征及其在肝癌发生过程中的演变规律,揭示卵圆细胞与肝癌发生之间的关系。方法构建实验性肝癌的大鼠诱癌模型,运用常规HE染色、免疫组织化学和爱新蓝染色等方法,动态观察卵圆细胞在肝癌发生过程中的演变规律和分子表达特征。结果随着诱癌时间延长,逐渐出现卵圆细胞的增生、癌前病变、胆管细胞癌和(或)肝细胞癌,各阶段卵圆细胞均表达OV-6、AFP和c-kit。结论原发性肝癌可能与卵圆细胞异常分化有关,卵圆细胞特征性表达为OV-6、AFP和c-kit。     

卵圆细胞转化过程中生物学标志物的表达变化及其意义

卵圆细胞为肝内的干细胞,大量研究认为,卵圆细胞参与了肝脏肿瘤的发生,可能是肝癌发生的始动细胞.鉴于卵圆细胞在原发性肝癌的发生中具有特殊作用,将其体外培养,使之成为细胞癌变多步骤发生发展的体外模型,动态观察其在转化过程中的生物学特征和蛋白表达变化,对于探讨卵圆细胞分化调控的机制以及进一步研究肝癌的发生机制都具有重要意义.