大鼠脑缺血再灌注NMDA受体,NO及cGMP含量的变化

目的 观察大鼠脑缺血再灌后Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体－一氧化氮（ＮＯ）－ｃＧＭＰ通路变化。方法 采用大鼠以侧颈总动脉阻断和尾部放血产重复缺血再灌的脑缺血模型,观察术后不同时间动物大脑皮层、海马、纹状体、中脑和下丘脑５个部位的ＮＭＤＡ受体活性（＾３Ｈ－ＭＫ８０１结合）、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性及ｃＧＭＰ含量变化。结果 ＾３Ｈ－ＭＫ８０１结合在海马、纹状体两部位呈持续性明显增加;原生型Ｎ     

大剂量强啡肽A（1—17）对脊髓NMDA受体功能和一氧化氮？…

目的 观察大剂量强啡肽以及一氧化氮麦（ＮＯＳ）抑制剂对脊髓ＮＭＤＡ受体功能和ＮＯＳ活性的影响。方法 以＾３Ｈ－ＭＫ８０１为配基,采用放射配基法测定ＮＭＤＡ受体结合活性;以精氨酸转化法测定脊髓组织胞浆相ＮＯＳ活性。结果 给大鼠蛛网膜下腔注射Ｄｙｎ Ａ（１－１７）０．５ｈ后,脊髓腹侧组织的＾３Ｈ－ＭＫ８０１结合活性以及ｃＮＯＳ活性即显著升高,且持续４８ｈ;ｉＮＯＳ在给药后４ｈ升高,脊髓背侧＾３Ｈ－ＭＫ     

大鼠脑缺血早期阶段不同脑区NO和cGMP的变化

目的 研究大鼠脑缺血后大脑皮质，海马，纹状体和小脑一氧化氮（ＮＯ）和ｃＧＭＰ的变化。方法 采用荧光法和放射免疫分别测定了ＳＤ雄性大鼠（ｎ＝１０）脑缺血不同时点４个脑区ＮＯ代谢产物ＮＯ２和ｃＧＭＰ的含量，结果 各脑区ＮＯ２的含量在脑缺血５ｍｉｎ开始升高，持续到缺血１５ｍｉｎ缺血３０～６０ｍｉｎ开始下降，ｃＧＭＰ的含量在大脑皮质于缺血５～１５ｍｉｎ明显升高，在海马，纹状体和小脑于缺血１０～３０ｍｉｎ升     

大鼠脑缺血再灌流脑区一氧化氮合酶的变化

研究大鼠脑缺血再灌注后大脑皮层,海马,纹状体和小脑组织一氧化氮合酶的变化。方法采用放射免疫法检测脑组织中ＮＯＳ的活性。结果大鼠脑缺血后５ｍｉｎ,各脑区结构型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）活性明显升高,持续到脑缺血３０ｍｉｎ,脑缺血３０－６０开始下降,诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）活性在脑缺血后１０－１５ｍｉｎ开始升高,并持以脑缺血６０ｍｉｎ;脑缺血３０ｍｉｎ再灌注１５ｍｉｎ,各脑区ｃＮＯＳ和ｉＮＯＳ活性明显高于缺血     

氯胺酮对脑缺血大鼠纹状体多巴胺含量的影响

应用ＨＰＬＣ－ＥＣＤ法研究了大鼠脑缺血及复灌期间纹状体多巴胺（ＤＡ）的变化以及ＮＭＤＡ受体拮抗剂氯胺酮（Ｋｅｔａｍｉｎｅ，ＫＴ）对脑缺血纹状体内ＤＡ含量变化的影响。四动脉阻断致急性脑缺血１０ｍｉｎ及缺血１０ｍｉｎ复灌１０ｍｉｎ、３０ｍｉｎ和６０ｍｉｎ，均可见纹状体ＤＡ含量显著减少（Ｐ＜０．０１）。这可能与脑缺血及复灌早期脑组织ＤＡ释放增加和摄取减少有关。ＫＴ２５ｍｇ·ｋｇ－１和５０ｍｇ·ｋｇ－１均可拮抗脑缺血及复灌时ＮＭＤＡ受体介导的纹状体ＤＡ含量减少。     

一氧化氮在实验性脑缺血中作用机制的研究

目的为研究脑缺血和缺血再灌注对各脑区一氧化氮（ＮＯ）的变化，以及一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）抑制剂ＷＮ－硝基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）对脑缺血和缺血再灌注时各脑区ＮＯ生成的影响。方法采用四动脉阻断的全脑缺血模型，通过组化方法、荧光方法和放射免疫方法，观察脑缺血５ｍｉｎ、１０ｍｉｎ、１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ和６０ｍｉｎ，以及脑缺血１０ｍｉｎ再灌注１５ｍｉｎ、缺血３０ｍｉｎ再灌注１５ｍｉｎ，大脑皮质、海马、纹状体和小脑组织中ＮＯＳ表达、ＮＯＳ活性、ＮＯ２和ｃＧＭＰ的变化；同时观察了Ｌ－ＮＮＡ对脑缺血１０ｍｉｎ、缺血１０ｍｉｎ再灌注１５ｍｉｎ，各脑区ＮＯ２生成量的影响。每组大鼠８～１０只。结果（１）大鼠四个脑区ＮＯＳ表达、ＮＯＳ活性、ＮＯ２和ｃＧＭＰ的含量，在缺血５～１５ｍｉｎ明显高于假手术组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），在缺血３０～６０ｍｉｎ开始下降。（２）在缺血１０ｍｉｎ、３０ｍｉｎ再灌注１５ｍｉｎ，它们的含量可明显增加，与单纯缺血组相比，有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。（３）Ｌ－ＮＮＡ可使脑缺血１０ｍｉｎ和缺血１０ｍｉｎ再灌注１５ｍｉｎ，各脑区ＮＯ２的生成量明显减少（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；左旋精氨酸可部分逆     

PD鼠纹状体内NMDA受体密度及黑质内NMDA受体mRNA含量的观察

采用核酸斑点杂交定量法和放射配体饱和分析法，分别测定了６－羟基多巴胺（６－ＯＨＤＡ）损毁一侧黑质纹状体通路后同侧黑质内Ｎ－甲基－Ｄ－门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体ｍＲＮＡ含量及纹状体内ＮＭＤＡ的受体密度，研究发现该通路损毁两周后，ＮＭＤＡ受体密度减少，而ＮＭＤＡ受体ｍＲＮＡ含量无明显改变；损毁３个月后，两者均明显减少。研究结果提示ＮＭＤＡ受体密度于早期减少，反映了该通路多巴胺能神经纤维的降解，损毁后期两者减少，说明ＮＭＤＡ受体位于该通路神经纤维的突触前膜。     

实验性癫癎时海马内兴奋性氨基酸受体对内阿片肽基因表达的影响

目的阐明在癫发作与发展中起着重要作用的脑内兴奋性氨基酸类递质和内阿片肽之间的关系。方法应用原位杂交方法观察了青霉素致及海马内微量注射ＮＭＤＡ受体阻断剂ＭＫ－８０１（５－ｍｅｔｈｙ１－１０,１１－ｄｉｈｙｄｒｏ－５Ｈ－ｄｉｂｅｎｚｏ［ａ,ｄ］ｃｙｃｌｏｈｅｐｔａｎ－５,１０－ｉｍｉｎｅｍａｌｅａｔｅ）和非ＮＭＤＡ受体阻断剂ＤＮＱＸ（６,７－ｄｉｎｉｔｒｏｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ－２,３－ｄｉｏｎｅ）后,大鼠海马内前脑啡肽原和前强啡肽原ｍＲＮＡ表达的变化。结果在青霉素致４ｈ后,海马ＣＡ１区、ＣＡ３区、齿状回前脑啡肽原ｍＲＮＡ和海马ＣＡ３区、齿状回前强啡肽原ｍＲＮＡ的表达明显增加。在青霉素致前分别在海马内微量注射ＭＫ８０１（６μｇ）和ＤＮＱＸ（４μｇ）,则在减弱发作的同时,海马内前脑啡肽原ｍＲＮＡ的表达明显减少,而前强啡肽原ｍＲＮＡ的表达继续增加。结论青霉素致引起大鼠脑内脑啡肽和强啡肽的变化可能和ＮＭＤＡ受体及非ＮＭＤＡ受体对其基因表达的调节有关     

赛庚啶对脑缺血实验治疗的研究

为了探讨脑缺血时５－羟色胺（ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ，５－ＨＤ）的变化及５－ＨＴ２受体拮抗剂的保护作用：（１）实验通过结扎沙土鼠双侧颈总动脉１０，３０ｍｉｎ，及结扎３０ｍｉｎ再灌２ｈ后，测定脑缺血及缺血再灌双侧大脑皮层５－ＨＴ和５－羟吲哚乙酸（５－ＨＩＡＡ）的变化，结果发现：脑缺血时５－ＨＴ，５－ＨＩＡＡ含量显著降低；再灌后５－ＨＩＡＡ恢复并有增加的趋势．（２）应用５－ＨＴ２受体拮抗剂赛庚啶（ｃｙｐｒｏｈｅｐｔａｄｉｎｅ，ＣＹＰ）对沙土鼠脑缺血５ｍｉｎ再灌７ｄ海马ＣＡ１区神经元损伤的影响，结果赛庚啶能明显提高海马ＣＡ１区存活神经元密度。（３）５－ＨＴ，受体拮抗剂赛庚啶对沙土鼠单侧颈总动脉结扎所致单侧脑缺血及再灌时，有明显减轻脑水肿及钙离子积聚作用，但赛庚啶对ＳＯＤ，ＭＤＡ无影响．对赛庚啶作用的可能机制进行了讨论。     

胚鼠大脑皮质神经元原代培养中NMDA诱导c－fosmRNA表达

为了进一步研究对神经元的早期保护，本实验观察了Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）在胚鼠大脑皮层神经元原代培养诱导ｃ－ｆｏｓ基因表达特点。结果显示：ＮＭＤＡ可诱导快速、短暂的ｃ－ｆｏｓ基因表达，并呈剂量、时间依赖关系；ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达可被ＮＭＤＡ竞争性或非竞争性受体拮抗剂Ａｐ－５（５０μｍｏｌ／Ｌ）ＭＫ－８０１（１０μｍｏｌ／Ｌ）完全阻断，Ｍｇ２＋（２ｍｍｏｌ／Ｌ）可部分阻滞，异搏定、尼凡地平与安定则无阻断作用。     

大剂量强啡肽A(1-17)对脊髓NMDA受体功能和一氧化氮合酶活性的影响

目的　观察大剂量强啡肽 A( 1 - 1 7) (dynorphin,Dyn)以及一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂对脊髓NMDA受体功能和 NOS活性的影响。方法　以 3H- MK80 1为配基 ,采用放射配基法测定 NMDA受体结合活性 ;以精氨酸转化法测定脊髓组织胞浆相 NOS活性。结果　给大鼠蛛网膜下腔注射 Dyn A( 1 - 1 7)0 .5 h后 ,脊髓腹侧组织的 3H- MK80 1结合活性以及 c NOS活性即显著升高 ,且持续 48h;i NOS在给药后 4h升高。脊髓背侧 3H- MK80 1结合活性在给药后 4h开始下降 ,48h恢复正常 ,背侧 c NOS活性无明显变化。预先蛛网膜下腔注射 ne NOS抑制剂 7-硝基吲哚和 i NOS抑制剂氨基胍可对抗 Dyn的致瘫作用 ,同时对抗脊髓腹侧 NMDA受体结合活性及 c NOS、i NOS活性的升高。结论　脊髓腹侧 NMDA受体功能和 NOS活性增高可能与 Dyn致瘫作用有关。NOS抑制剂可对抗 Dyn的致瘫作用 ,并且与 Dyn协同下调脊髓背侧 NMDA- NOS通路的功能     

EXPERIMENTAL WORK AND RESEARCH Study on Mechanism of Huanshao Dan (还少丹) in Brain Protection

ＩｎｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ（ＴＣＭ）,ＨｕａｎｓｈａｏＤａｎ（还少丹,ＨＳＤ）ｈａｓｂｅｅｎｃｌｉｎｉ ｃａｌｌｙｕｓｅｄｖｉａｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔ ｍｅｎｔｏｆｃｈｒｏｎｉｃｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅｄｉｓｏｒｄｅｒｓｓｕｃｈａｓｄｅｍｅｎｔｉａａｎｄｏｔｈｅｒｓｙｎｄｒｏｍｅｓｗｉｔｈＹａｎｇＤｅｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆＫｉｄｎｅｙ．Ｔｈｉｓｃｏｍｐｏｓｉｔｅｈｅｒｂａｌｆｏｒｍｕｌａｈａｓｐｒｏｖｅｄｔｏｒｅｔａｒｄａｇ…     

局灶性脑缺血大鼠体内与体外结合[^3H]MK—801放射自显影的差别和意义

目的：比较体内与体外两种结合[^3H]MK－801的方式放射自显影在反映局灶性脑缺血大鼠脑内N－甲基－D－门冬氨酸（NMDA）受体状态上的差别和意义。方法：线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉,制成局灶性脑缺血模型。以[^3H]MK－801为配基,分别进行体内与体外受体结合实验,然后做放射自显影。结果：体内结合实验中,缺血1h、2h、4h组缺血侧损伤区纹状体、皮层[^3H]MK-801结合位点密度显著高于非缺血侧（P＜0．05）。体外结合实验中,缺血侧半脑[^3H]MK-801结合位点分布与非缺血侧无显著性差别（P＞0．05）。结论：体内受体结合实验可反映局灶性脑缺血大鼠脑内NMDA受体活性的变化,体外受体结合实验仅反映脑内存在的受体的总数量。     

PROTECTIVE EFFECT OF TETRAMETHYLPYRAZINE ON LEARNING AND MEMORY FUNCTION IN D-GALACTOSE-LESIONED MICE

ALZHEIMER'Sdisease(AD)isaneurodegenerative disorderofcentralnervoussystemthatcausespro-gressivecognitiveandmemorydysfunctionintheelderlypeople.ADbrainsarecharacterizedbythepresenceofsenileplaques(SP)andneurofibrillarytangles (NFT),ac-companiedbythedecreaseofacetylcholine(ACh)levelandAofnumberofcholinergicneuronsandsynapses.1,2 Withtheincreaseoftheelderlypeople,theincidenceofADisincreas-ingandgivingrisetoaheavyloadonfamiliesandsociety.ThoughalotofresearcheshavebeenmadeonAD,thepath-oge…     

Study on mechanism of huanshao dan in brain protectionΔin brain protectionΔ

Objective: To observe the behavioral and biochemical effects of a traditional Chinese medicine Huanshao Dan (HSD) on learning and memory deficits in transient cerebral ischemia model in mice.Methods: Step-through experiments, receptor binding test and choline acetyltransferase (ChAT) activities determination were performed.Results: Mice undertaken transient ischemia commited much more mistakes in step-through experiments and showed relatively higher³ H-MK801 binding in cerebral cortex and hippocampus than in sham operated animals. HSD decoction was most effective in reducing these mistakes in mice. At the same time, and³ H-MK801 binding of cerebral cortex and hippocampus tissues were also significantly decreased, while ChAT activities in the same tissues were increased.Conclusion: HSD might antagonize ischemic injury of brain through inhibition of glutamate N-methyl-D-Aspartic acid receptor overactivity. ΔThis program was supported by National Nature Science Foundation of China (No.39421012)     

一氧化氮合酶在大鼠脑缺血再灌注损伤后时间-量的变化

目的探讨在大鼠可逆性大脑中动脉栓塞模型(MCAO)中,在不同的再灌注时间点NOS各亚型酶的发生发展规律。方法雄性SD大鼠用异氟烷吸入性麻醉,MCAO90 min后再灌注。分别在再灌注1,2,6,9,12,24 h后检测左、右侧大脑组织中NOS各亚型酶的活力(cNOS和iNOS),进行神经功能评分,取脑,切片,用TTC染色,经图像分析仪分析脑梗死灶体积。结果大脑中动脉栓塞导致了严重的脑缺血,再灌注激活了NOS的活性,使得cNOS和iNOS的活力在再灌注后的各个时间点都大幅度增加,至少持续到再灌注24 h。cNOS的高峰出现在再灌注后6h,iNOS的高峰出现在再灌注后9 h。梗死灶体积的增加与NOS活力的增加呈平行状态。结论原生型酶(cNOS)包括eNOS和nNOS,在缺血再灌注早期被诱导表达,其活力在再灌注6 h后达到高峰。iNOS,在正常生理状态下很少表达,其高峰出现在缺血后再灌9 h。cNOS和iNOS在缺血性脑损伤再灌注阶段发挥着重要的作用。     

兴奋性氨基酸及其受体阻滞剂在脑缺血性大鼠海马损伤中的作用

目的：通过制作大鼠脑缺血模型和运用兴奋性氨基酸NMDA型受体阻滞剂MK－801,观察海马兴奋性氨基酸（EAA）的变化及其所致细胞结构改变。方法：采用Pulsinelli氏改良方法,分别测定大鼠海马在脑缺血不同时期EAA的改变及MK－801对EAA所致结构变化的影响。提示脑缺血时EAA明显升高,且缺血时间越长释放越多,经过MK－801治疗细胞损伤明显减少,结论：大鼠脑缺血后EAA明显升高;MK－801能阻止EAA对脑的损伤,起保护作用。