黄芪注射液对结肠癌SW480细胞的生长抑制作用

目的：探索研究黄芪注射液对人结肠癌细胞株SW480细胞的生长抑制和凋亡作用机制。方法：实验设空白对照组、奥沙利铂对照组和黄芪注射液实验组（125、250、500、1 000μg/ml）。MTT法检测黄芪注射液对SW480细胞生长增殖和凋亡的影响;流式细胞仪PI染色检测SW480细胞的凋亡。结果：与空白对照组相比,黄芪注射液对SW480细胞生长增殖有明显的抑制作用,且与作用浓度呈正比（P=0.000〈0.01）;流式细胞仪显示,黄芪注射液作用SW480细胞48 h后,125、250、500、1 000μg/ml各组的凋亡率分别为24.2%、42.6%、64.1%、84.0%,较空白对照有明显升高,有显著性差异（P=0.000〈0.01）。结论：黄芪注射液能抑制SW480细胞生长,促进结肠癌细胞凋亡。     

奥沙利铂诱导结肠癌细胞株SW480凋亡过程中caspase-8的活化

目的 探讨奥沙利铂诱导结肠癌细胞株SW480凋亡过程中半胱天冬酶亚类8(caspase-8)的变化.方法 以不同浓度(0,0.03,4.0,100 μg/ml)的奥沙利铂干预体外培养的人结肠癌细胞株SW480,分别于24,36,48 h后,应用MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western-blot分析caspase-8酶原的变化,半定量RT-PCR检测caspase-8 mRNA水平的改变,肽核酸(pNA)标记底物的比色法检测caspase-8的相对活性.结果 奥沙利铂对结肠癌细胞株SW480生长增殖具有明显抑制作用,其效应呈浓度和时间依赖性.流式细胞仪分析显示SW480细胞呈G2/M期阻滞;奥沙利铂浓度为0,0.03,4.0,100 μg/ml时SW480细胞的凋亡率分别为(0.15±0.09)%、(0.43 ±0.17)%、(6.92 ±0.81)%、(11.76 ±1.25)%.用不同浓度的奥沙利铂处理SW480细胞株24 h,caspase-8酶原的表达随药物浓度的增加而减少,caspase-8 mRNA水平呈浓度依赖性的增加(P＜0.01).用4.0 μg-ml奥沙利铂分别处理细胞0.5,2,6,12,24,36 h,caspase-8活性于2 h开始升高,12 h达高峰(P＜0.01);用不同浓度的奥沙利铂处理细胞12 h,caspase-8活性呈浓度依赖性的升高(P＜0.01).结论 奥沙利铂能够明显抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,诱导SW480细胞发生G2/M期阻滞,其作用机制可能与caspase-8表达上调有关.     

奥沙利铂对结肠癌细胞XIAP表达及凋亡的影响

目的 研究奥沙利铂对人结肠癌细胞株SW1116中XIAP表达及凋亡的影响,探讨其诱导凋亡的作用机制。方法 应用流式细胞仪检测XIAP表达及凋亡的情况。结果 奥沙利铂对XIAP表达有明显的抑制作用（P〈0.05）,凋亡率明显高于对照组（P〈0.01）。结论 奥沙利铂具有抑制结肠癌细胞株SW1116中XIAP表达,诱导结肠癌细胞凋亡作用,其机制与抗凋亡相关基因表达减弱有关。     

奥沙利铂对人宫颈癌HeLa细胞株的体外作用

 【目的】研究奥沙利铂对人宫颈癌HeLa细胞株的生长抑制作用及对Caspase-3活性的影响。【方法】用人宫颈癌HeLa细胞株经奥沙利铂处理后,MTT法测定细胞生长抑制率,透射电镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪和原位末端标记技术法（TUNEL）检测细胞凋亡率,比色法检测Caspase-3活性变化,,并利用AC-DEVD-CHO进行Caspase-3抑制试验。【结果】奥沙利铂（4～64μmol/L）在体外能以时间和剂量依赖的方式对宫颈癌HeLa细胞产生细胞毒作用并诱导其凋亡,奥沙利铂作用细胞株48 h后,细胞呈现典型的凋亡细胞的形态特征;并能增加HeLa细胞的Caspase-3活性,AC-DEVD-乙醛（AC-DEVD-CHO）可有效抑制奥沙利铂诱导的HeLa细胞凋亡。【结论】奥沙利铂在体外能抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖,诱导细胞凋亡,Caspase-3活化参与了奥沙利铂诱导HeLa细胞的凋亡过程。     

奥沙利铂对人宫颈癌HeLa细胞株的体外作用

【目的】研究奥沙利铂对人宫颈癌HeLa细胞株的生长抑制作用及对Caspase-3活性的影响。【方法】用人宫颈癌HeLa细胞株经奥沙利铂处理后,MTT法测定细胞生长抑制率,透射电镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪和原位末端标记技术法（TUNEL）检测细胞凋亡率,比色法检测Caspase-3活性变化,,并利用AC-DEVD-CHO进行Caspase-3抑制试验。【结果】奥沙利铂（4～64μmol/L）在体外能以时间和剂量依赖的方式对宫颈癌HeLa细胞产生细胞毒作用并诱导其凋亡,奥沙利铂作用细胞株48 h后,细胞呈现典型的凋亡细胞的形态特征;并能增加HeLa细胞的Caspase-3活性,AC-DEVD-乙醛（AC-DEVD-CHO）可有效抑制奥沙利铂诱导的HeLa细胞凋亡。【结论】奥沙利铂在体外能抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖,诱导细胞凋亡,Caspase-3活化参与了奥沙利铂诱导HeLa细胞的凋亡过程。     

TRAIL联合奥沙利铂对结肠癌细胞株SW480凋亡的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合奥沙利铂(oxaliplatin)对结肠癌细胞株SW480凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法 应用MTT法分别检测TRAIL组、奥沙利铂组及联合组的细胞抑制率,Annexin Ⅴ-FITC/PI染色,流式细胞仪检测SW480细胞的凋亡率.结果 SW480细胞对TRAIL不敏感,对奥沙利铂相对敏感,TRAIL与亚毒性浓度的奥沙利铂联用对细胞的杀伤作用显著增强;亚毒性浓度的TRAIL、奥沙利铂及联合组作用SW480细胞24h的抑制率分别为8.62%,60.51%,81.28%;凋亡率分别为2.43%,11.76%,18.37%,流式细胞学证实这种杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡实现.结论 TRAIL能显著提高奥沙利铂对结肠癌细胞的杀伤作用,此协同作用主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现.     

姜酚肟对谷氨酸诱导PC12细胞损伤的保护作用

【目的】探讨姜酚肟对谷氨酸（glutamate，Glu）诱导PC12细胞损伤的保护作用。【方法】体外培养PCI2细胞，建立谷氨酸诱导PC12细胞损伤的模型；采用MTT法检测细胞活力，流式细胞术和Hoechst 33258 DNA染色法检测细胞凋亡。【结果】经5mmol／L的谷氨酸处理24h后，PC12细胞活力比对照组降低，仅为对照组的58．3％。在一定浓度范围内，姜酚肟能保护PC12细胞免受谷氨酸（5mmol／L）的影响，但较高浓度时对细胞有一定的毒性。经不同浓度姜酚肟（3.125、6．25、12．5、25μg／mL）预处理后，细胞活力明显提高，其保护作用随浓度降低而升高，当浓度为6．25μg／mL时效果最好，使PC12细胞的存活率达到75．2％（P〈0．01），浓度为3．125μg／mL时，细胞存活率降为70．2％（P〈0．01）。谷氨酸（5mmol／L）能诱导PCI2细胞凋亡，处理24h后细胞凋亡率为20．1％，经姜酚肟（3．125、6．25、12．5、25μg／mL）预处理后，细胞凋亡率明显降低，分别为3．5％（P〈0．01），2．8％（P〈O．01），9．6％（P〈0．01），17．7％（P〈0．05）。【结论】谷氨酸能诱导PCI2细胞凋亡，较低浓度的姜酚肟能有效保护PC12细胞免受谷氨酸诱导的细胞损伤。其中6．25μg／mL的姜酚肟效果最好。     

β-榄香烯联合卡铂对结肠癌SW480细胞放疗增敏作用的实验研究

目的探讨β-榄香烯联合卡铂对结肠癌SW480细胞放疗增敏作用。方法 2019年3—5月于海南省第三人民医院肿瘤中心分子生物实验室进行实验。收集SW480细胞分为SW480细胞组(培养环境为37℃、5%CO_2、20%O_2)、放疗组(放射剂量为8 Gy,时间为24 h)、β-榄香烯组(80.0μg/ml)、卡铂组(100μg/ml)、β-榄香烯联合卡铂+放疗组(β-榄香烯、卡铂浓度分别为80.0μg/ml、100μg/ml,放射能量为8 Gy,时间为24 h);培养结束后,MTT法测定细胞SW480细胞增殖情况、培养计数细胞克隆形成数目,流式细胞仪测定细胞凋亡水平、细胞周期、Matrigel跨膜细胞侵袭,RT-PCR法测定SW480细胞Caspase-3、Caspase-6基因表达,Western-blot法测定SW480细胞Caspase-3、Caspase-6蛋白表达。结果与SW480细胞组比较,放疗组、β-榄香烯组、卡铂组、β-榄香烯联合卡铂+放疗组SW480细胞OD值、存活率水平、克隆形成数目降低,凋亡率、G1期比例及Caspase-3、Caspase-6 mRNA/蛋白表达水平升高(F=16.365、21.654、25.654、15.654、18.598、19.987、25.654、32.365、26.987,P均=0.000);与放疗组、β-榄香烯组、卡铂组比较,β-榄香烯联合卡铂+放疗组SW480细胞OD值、存活率水平、克隆形成数目降低,G1期比例、凋亡率及Caspase-3、Caspase-6 mRNA/蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论β-榄香烯联合卡铂能增加结肠癌SW480细胞放疗敏感性,抑制结肠癌SW480细胞增殖、侵袭水平,提高凋亡水平,其机制与β-榄香烯联合卡铂能增促进SW480细胞Caspase-3、Caspase-6 mRNA和蛋白高表达有关。     

紫草素诱导人结肠癌细胞SW620凋亡及机制研究

目的探讨紫草素诱导人结肠癌细胞株SW620凋亡及分子机制。方法体外培养人结肠癌细胞株SW620,加入终浓度分别为2.5～15μmol/L的紫草素。采用MTT法测定紫草素对肿瘤细胞的增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率,Western blot方法测定对bcl-2、bax蛋白表达水平。结果紫草素随时间和浓度的增加对SW620细胞增殖抑制率增加,细胞凋亡率增加（P〈0.05）。Western blot法检测发现bax蛋白表达升高同时bcl-2蛋白表达下降。结论紫草素有抑制结肠癌细胞增殖和诱导凋亡的作用,可以通过调控bax和bcl-2蛋白的表达经线粒体途径诱导细胞凋亡。     

衣霉素逆转CD147介导的结肠癌细胞株SW620/5-FU耐药性的实验研究

目的:探讨衣霉素对结肠癌5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞株(SW620/5-FU)耐药性的逆转作用及机制。方法:采用药物浓度梯度递增法诱导建立结肠癌耐药细胞株SW620/5-FU;MTT法检测细胞药物敏感性变化;流式细胞术和Lection blot检测N-糖链结构差异;Western blot检测糖蛋白CD147 N-糖基化水平。进一步采用衣霉素作用于SW620/5-FU,观察细胞耐药性状的改变。结果:成功建立结肠癌耐药细胞株SW620/5-FU,其细胞表面N-糖链合成增加,高糖基化CD147表达上升;衣霉素可阻断SW620/5-FU细胞中CD147 N-糖链合成,实现其5-FU耐药性的逆转。结论:衣霉素通过抑制N-糖链合成从而逆转CD147介导的结肠癌细胞株SW620/5-FU的耐药性。     

人钠/碘转运体基因转染结肠癌SW480细胞介导放射性碘治疗的实验研究

目的：检测碘131（131I）对转染了人钠/碘转运体（hNIS）基因的人结肠癌细胞（SW480细胞）的杀伤作用。方法：将SW480细胞分为转染组、空白质粒转染组（空白质粒组）和空白对照组,行体外摄131I试验、高氯酸盐抑制实验,及AnnexinV-FITC/PI双染行流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果：转染组与空白对照组及空白质粒组比较,摄131I能力均增高8倍;高氯酸盐可以有效地抑制转染组的摄131I能力;AnnexinV-FITC/PI双染后流式细胞仪检测结果显示,转染组凋亡指数高于空白对照组和空白质粒组。结论：131I对转染hNIS-SW480细胞具有显著杀伤效果。     

Down-regulation of p110β expression increases chemosensitivity of colon cancer cell lines to oxaliplatin

This study examined the synergetic effect of class ?A Phosphoinositide 3-kinases cata-lytic subunit p110β knockdown in conjunction with oxaliplatin treatment on colon cancer cells. Down-regulation of p110β by siRNA interference and oxaliplatin treatment were applied in colon cancer cell lines HT29, SW620 and HCT116. MTT assay was used to measure the inhibitory effect of p110β knockdown on the proliferation of colon cancer cell lines. SubG1 assay and Annexin-Ⅴ FITC/PI double-labeling cytometry were applied to detect cell apoptosis. And cell cycle was evalu-ated by using PI staining and flow cytometry. The expression of caspase 3, cleaved PARP, p-Akt, T-Akt and p110β was determined by western blotting. The results suggested that down-regulation of p110β expression by siRNA obviously reduced cell number via accumulation in G0-G1 phase of the cell cycle in the absence of notablely increased apoptosis in colon cancer cell lines HT29 and SW620 (S phase arrest in HCT116). Moreover, inhibition of p110β expression increased oxaliplatin-induced cell apoptosis and cell cycle arrest in HT29, HCT116 and SW620 cell lines. In addition, increases of cleaved caspase-3 and cleaved PARP induced by oxaliplatin treatment were determined by im-munoblotting in p110β knockdown group compared with normal control group and wild-type group. It is concluded that down-regulated expression of p110β could inhibit colon cancer cells proliferation and result in increased chemosensitivity of colorectal cancer cells to oxaliplatin through augmentation of oxaliplatin-induced cell apoptosis and cell cycle arrest.     

半边旗提取物5F对人结肠腺癌细胞株SW620埃兹蛋白表达及活性影响

目的 观察半边旗提取物5F对人结肠腺癌细胞株SW620的埃兹(Ezrin)蛋白表达及活性影响.方法 采用四氮甲唑蓝[3-(4,5-dimethyhhiazol-2-yl)-2,5-diphenyhetrazolium bromide,MTT]检测5F对SW620细胞的增殖抑制作用,采用逆转录-聚合酶链反应(revers...     

CD3ε和5-氟尿嘧啶在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P53的表达

目的研究CD3ε分子与化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P53的表达,为探索T淋巴细胞凋亡的分子机制打下基础,为相关肿瘤的治疗提供新的实验依据。方法培养人T淋巴白血病细胞株JK,转染了突变的CD3εITAM的TJK及T3JK细胞株。用CD3ε特异的单克隆抗体(200μg／ml)和／或5-FU(2．5μg/ml)刺激不同的T淋巴细胞诱导细胞凋亡,用噻唑蓝比色法检测细胞存活率,并计算细胞死亡率;用瞬时转染野生型或突变型P53表达质粒的方法和Western印迹检测P53蛋白质的表达,分析其在T淋巴细胞凋亡中的作用。结果在CD3ε和5-FU分别诱导T淋巴细胞凋亡过程中,均伴随着P53蛋白质表达增加;两者联合使用使T淋巴细胞凋亡和P53蛋白质表达显著增加;P53过表达可明显增加T淋巴细胞对5-FU的敏感性。结论抗CD3ε抗体和5-FU联合作用可显著提高P53蛋白质表达,两者在T淋巴细胞凋亡中具有协同效应。     

姜黄素抑制结肠癌SW620细胞侵袭的体外实验研究

目的：观察姜黄素对结肠癌SW620细胞侵袭的影响，并探讨其作用机制。方法：应用姜黄素处理人结肠癌细胞系SW620后，采用软琼脂集落培养试验检测锚着不依赖性增殖，采用Boyden小室模型试验检测癌细胞的侵袭性，采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEI，检测癌细胞失巢凋亡。结果：姜黄素可有效抑制结肠腺癌细胞集落生长和穿膜侵袭能力,且与浓度相关。琼脂糖凝胶电泳和TUNEL结果显示，姜黄素可诱导结肠癌细胞失巢凋亡，且与浓度和时间相关。结论：姜黄素呵抑制人结肠癌细胞侵袭，诱导失巢凋亡是其机制之一。     

多西他赛联合奥沙利铂诱导人胃癌细胞凋亡的实验研究

目的：探讨多西他赛（Docetaxel,TXT）联合奥沙利铂（Oxaliplatin,OXA）抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖及诱导细胞凋亡的作用。方法：应用CCK-8法检测不同浓度TXT和OXA单药以及联合用药对胃癌SGC-7901细胞生长的抑制作用,激光共聚焦显微镜测定细胞内Ca2＋浓度的变化,AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术对细胞凋亡进行检测,观察凋亡细胞的比例,荧光显微镜观察对细胞凋亡的作用。结果：TXT和OXA均能明显抑制SGC-7901细胞增殖和诱导细胞凋亡,两药合用具有协同作用。结论：TXT与OXA联合用药在抑制胃癌SGC-7901细胞的生长和诱导细胞凋亡方面具有协同作用。     

苦参碱体外诱导人结肠腺癌SW620细胞凋亡的实验研究

目的 观察苦参碱(MT)诱导结肠腺癌细胞株SW620凋亡的作用并探讨其可能机制.方法 采用MTT法检测MT对SW620细胞的增殖抑制作用.应用流式细胞仪检测MT对SW620胞生长周期的影响,光学显微镜、荧光显微镜、电镜下观察细胞形态学变化.Annexin V-FITC法检测MT对SW620细胞凋亡的影响.结果 MT抑制SW620细胞增殖和诱导SW620细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性,其48 h IC50=0.934 mg/ml.与对照组相比,苦参碱处理后的SW620细胞G0/G12期百分比明显增高,S期细胞比例下降.细胞爬片HE染色以及透射电镜可见实验组细胞出现典型的细胞凋亡形态改变:细胞皱缩,体积减小,胞浆凝聚,空泡化明显,凋亡小体形成以及所谓的"印戒"细胞.结论 MT在体外能抑制SW620细胞的增殖.诱导细胞凋亡,其诱导作用具有明显的量效和时效关系.     

miR-28-5p对结肠癌细胞增殖和迁移的影响

目的探究miR-28-5p对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用qRT-PCR检测miR-28-5p在正常结肠细胞NCM460与结肠癌细胞HCT116、SW480、SW620中表达量的差异。将HCT116、SW480、SW620各分为三组:对照组,过表达组,沉默组。对照组不予特殊处理,其余两组分别转染miR-28-5p mimic和miR-28-5p inhibitor,采用qRT-PCR验证转染效率,采用CCK8法检测三组细胞的增殖能力,采用划痕实验检测三组细胞的的迁移能力。结果miR-28-5p在结肠癌细胞HCT116、SW480、SW620中低表达,与正常结肠细胞NCM460比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,过表达组细胞增殖和迁移能力均降低(P<0.05),沉默组细胞增殖和迁移能力均增强(P<0.05)。结论miR-28-5p在结肠癌细胞中低表达且有调控结肠癌细胞增殖和迁移的作用。     

姜黄素逆转结肠癌细胞耐药的实验研究

目的：探索姜黄素逆转人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5FU作用及机制。方法：姜黄素、5-FU诱导细胞凋亡,采用MTT法检测细胞增殖以明确最佳实验条件;AnnexinV-FITC试剂盒检测细胞凋亡率;Western-blot分析耐药细胞株内cleaved-Caspase3、IL-6、STAT3蛋白表达水平。结果：姜黄素能逆转人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5FU的耐药程度;对照组、5-FU组、姜黄素组、联合用药组凋亡率分别为(2.5±2.1)%、(6.5±3.2)%、(19.9±7.2)%和(56.0±12.1)%;耐药细胞株中IL-6、STAT3蛋白表达明显高于亲本株;姜黄素的使用降低了耐药细胞株中IL-6、STAT3的蛋白表达量。结论：姜黄素能逆转人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5FU的耐药,其机制可能与下调IL-6/ STAT3有关。