埃他卡林对慢性低氧大鼠肺动脉血管内皮生长因子mRNA和蛋白表达的影响

目的:研究新型ATP敏感性钾通道开放剂埃他卡林(IVT)对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺动脉血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:雄性SD大鼠36只随机分成对照组、HPH模型组、IPT干预组,每组12只.IPT干预组给予IPT1.5 mg/(kg·d)灌胃,对照组及HPH模型组给予0.9%NaCl 5 ml/(kg·d)灌胃.HPH组及IPT干预组在(10.0 ±0.5)%氧浓度下饲养,每天8 h.每周6天,4周时测定平均肺动脉压(mPAP)、RV/(LV+S),逆转录聚合酶链式反应(Rr-PCR)和Western-blot技术检测各组肺动脉主干VEGF mRNA和蛋白的表达.结果:①HPH模型组大鼠mPAP和RV/(LV+S)显著高于对照组(P<0.01),IPT干预组mPAP和RV/(LV+S)较HPH模型组显著下降(P<0.01).②HPH模型组大鼠肺动脉VEGF mRNA及蛋白表达高于对照组,两者具有显著统计学意义(P<0.01),IPT干预组与HPH模型组比较,VEGF mRNA及蛋白表达均下降(P<0.01);IPT干预组与对照组比较,VEGF mRNA及蛋白表达差异无显著性(P>0.05).结论:HPH模型大鼠肺动脉VEGF mRNA及蛋白表达增加,IPT可明显抑制慢性低氧大鼠肺动脉VEGF mRNA和蛋白的表达.     

门脉高压症猪脾组织中内皮素受体及诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的意义

探讨胆汁性肝硬化门脉高压症猪脾组织中内皮素受体(ETR)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达及其对内脏血流动力学的影响.采用原位杂交方法检测实验组(n=10)和对照组(n=5)猪脾组织冰冻切片中ETR(ETAR、ETBR)及iNOS mRNA的表达.同时监测猪的门脉血流量(Qpv)、门静脉压(PPv)及平均动脉压(MAP).结果,实验组ETAR mRNA表达水平与对照组无显著差异(P＞0.05),而ETBR及iNOS mRNA表达水平显著高于对照组(P＜0.01),其中ETAR mRNA表达主要位于血管平滑肌细胞中;ETBR mRNA主要位于脾窦内皮细胞;iNOS mR-NA主要在血管平滑肌细胞、巨噬细胞和内皮细胞中.ETAR mRNA的表达与Qpv、Ppv无明显相关(P=0.11或P=0.08);ETBR与iNOS mRNA的表达水平分别与Qpv、PPv呈正相关(P＜0.05或P＜0.01);而分别与MAP呈负相关(P＜0.05或P＜0.01).研究表明ETBR及iNOS mRNA的表达可能在门脉高压症和内脏高血流动力学中起重要作用.     

新型katp开放剂埃他卡林对原代培养人肺动脉平滑肌细胞pcna mrna表达的影响

目的:观察新型ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂埃他卡林(IPT)对原代培养人肺动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA表达的影响。方法:分离3～4级人肺小动脉,按照组织贴块法原代培养人肺动脉平滑肌细胞,分成对照组、缺氧组、缺氧+埃他卡林或吡那地尔组及缺氧+埃他卡林或吡那地尔+格列本脲组,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)技术检测细胞PCNA mRNA表达。结果:缺氧使人肺动脉平滑肌细胞PCNA mRNA表达增加(3.90±0.24)倍,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);相同条件下,在缺氧的同时,分别在培养液中加入IPT 10-7、10-6、10-5 mol/L,PCNA mRNA表达分别下降(26.00±2.01)%、(55.33±4.04)%、(79.00±1.00)%,与缺氧组比较差异均有显著性(P均<0.01);加入IPT 10-5mol/L前30 min,预先加入格列本脲(GLI)10-5 mol/L,IPT的抑制作用抵消,与缺氧+IPT 10-5 mol/L组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:IPT通过激活细胞KATP通道,浓度依赖性地抑制缺氧时原代培...     

乐息平防治肺动脉高压与肺血管平滑肌表达ET_A-R mRNA的关系

目的:观察乐息平(Lacidipine)对SD大鼠缺氧性肺动脉(HPH)的防治效果,以及内皮素A型受体(ETA-R)mRNA在SD大鼠肺血管平滑肌中的表达情况,进而探讨乐息平防治HPH的作用机制与内皮素(ET)由ETA-R介导的生物学效应之间的关系。方法:实验动物分为4组:正常对照组(N)、缺氧组(H)、正常+乐息平组(N+La)、缺氧+乐息平组(H+La);用常压低氧法(氧浓度:10+0.5%)制作HPH动物模型;用插管法测定肺动脉压;用组织切片内原位杂交法检测ETA-RmRNA的表达情况。结果:缺氧组(H)平均肺动脉压(mPAP)及ETA-RmRNA的表达均高于正常组(N)(P<0.01);缺氧加乐息平组(H+La)mPAP及ETA-RmRNA的表达均无明显增高(与H组比较P<0.01;与N组比较,P>0.05)。结论:乐息平可以防止缺氧诱导的SD大鼠肺动脉压升高,同时可以抑制ETA-RmRNA在缺氧性SD大鼠肺血管平滑肌中的表达。     

肾上腺髓质素及其受体mRNA在低氧性肺动脉高压形成中的动态变化

目的:探讨肾上腺髓质素(AM)在低氧性肺动脉高压(HPH)形成过程中的作用.方法:将大鼠随机分为对照组,低氧1,3,5,7,10,14,21 d组.采用常压间断低氧法制作HPH模型;放免法测定血浆和肺匀浆AM及内皮素1(ET-1)浓度;采用RNA印迹法检测肺组织AM受体mRNA表达情况.结果:(1)低氧第3天,血浆AM浓度即显著升高(P<0.05),至第14天达高峰.(2)ET-1/AM比值从低氧第1天即开始升高,7～10 d达到高峰(P<0.01).肺匀浆AM浓度到低氧14 d方出现显著升高.(3)AM受体mRNA表达相对值在低氧第3天明显降低(P<0.05),到低氧第10天又恢复至正常水平.结论:AM可能作为一种保护性因子参与了HPH的发病过程;AM受体mRNA在低氧早期的下调,可能加剧了HPH的进展.     

内皮素-1及其受体在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 研究内皮素-1(ET-1)及其受体(ETAR、ETBR)在子宫内膜异位症(EMs)患者在位子宫内膜、异位子宫内膜以及对照组妇女子宫内膜中的表达,并探讨其在EMs发病机制中的作用.方法 采用免疫组织化学(SP)法检测48例EMs患者(EMs组)在位内膜和异位内膜以及30例宫颈上皮内瘤变患者(对照组)在位内膜中ET-1、ETAR、ETBR的表达.结果 ET-1、ETAR在EMs组在位内膜和异位内膜中的表达均高于对照组(P均＜0.01);ET-1、ETAR在EMs组在位内膜中的表达均高于异位内膜(P均＜0.01);ET-1和ETAR在EMs组在位内膜和异位内膜中的表达均呈显著正相关(相关系数分别为0.970、0.968,P均＜0.05).ETBR在EMs组在位内膜、异位内膜以及对照组内膜三者间的表达差异不具统计学意义.在子宫内膜的不同的组织学周期,ET-1、ETAR、ETBR表达差异均不具统计学意义.在EMs组不同临床期别(r-AFS分期)内膜,ET-1、ETAR、ETBR表达差异均不具统计学意义.结论 ET-1和ETAR在EMs发生发展中具有一定作用.     

内皮素受体基因表达与肝硬化门脉高压症内脏血流动力学的关系

目的：探讨肝硬化患者肝组织中内皮素受体(ETAR及ETBR)mRNA的表达及其与内脏血流动力学的关系。方法：肝硬化组(n=15例)，组织学检查证实为肝硬化；对照组为肝外伤病人(n=10例)，组织学检查证实为正常肝组织。采用原位杂交及RT-PCR技术检测肝组织中ETBR及ETBR mRNA的表达，同时测定门静脉压力(Pp)、门脉血流量(Qp)、平均动脉压(MAP)和心率(HR)。结果：肝硬化患者肝组织中ETAR及ETBR mRNA的表达均显著高于外伤肝组织，ETAR及ETBR mRNA的表达与：Pp呈直接相关。ETBR mRNA的表达与Qp呈直接相关。结论：ETAR及ETBR mRNA的表达与门脉高压症的严重程度直接相关，ETAR及ETBR可能在门脉高压症内脏高动力循环的形成和维持中起重要作用。     

埃他卡林对低氧诱导的肺动脉高压大鼠炎症反应的影响

目的:研究ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂埃他卡林(iptakalim,IPT)对低氧性肺动脉高压大鼠炎症反应的影响?方法:将96只清洁级SD大鼠随机分为对照(Control)组?低氧(Hypoxia)组?低氧+IPT(IPT)组,每组32只?Hypoxia组及IPT组每天置于常压低氧舱中8 h,每周6 d,持续4周?分别在低氧第1?2?3?4周末,各组随机取出8只大鼠测量右心室收缩压(RVSP),HE染色观察肺小动脉病理变化,抽取外周血,酶联免疫吸附法(ELISA)测定白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-10,ED1+单核细胞免疫组化测定肺小动脉周围炎症细胞的浸润?结果:IPT可抑制大鼠慢性缺氧性RVSP升高?肺小动脉壁重构及其周围炎症细胞浸润;降低大鼠外周血及肺组织IL-1β含量,增加IL-10合成?释放?结论:IPT可能通过抑制肺血管炎症反应?降低RVSP?缓解肺血管重构,防治大鼠低氧性肺动脉高压?     

埃他卡林对ＥＴ-１诱导的人肺动脉平滑肌细胞ＫＡＴＰ通道蛋白表达的影响

目的:研究新型ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂埃他卡林对内皮素-1(ET-1)诱导的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)上KATP蛋白表达的影响.方法:原代培养人肺动脉平滑肌细胞,随机分成对照组,ET-1组,ET-1 埃他卡林组,ET-1 吡那地尔组,ET-1 埃他卡林 格列本脲组,ET-1 吡那地尔 格列本脲组,用Western-blot方法分析各组KATP蛋白磺酰脲受体亚单位(SUR2B)和内向整流性孔区亚单位(Kir6.1)表达变化情况.结果:与ET-1的作用相反,埃他卡林能使ET-1诱导下的SUR2B亚基表达升高,特异性KATP阻断剂格列本脲可逆转埃他卡林引起的SUR2B亚基表达升高;但各组对Kir6.1亚基表达无明显影响.结论:埃他卡林通过上调KATP的SUR2B亚基表达而发挥其在治疗低氧性肺动脉高压(HPH)中的作用,可望成为治疗低氧性肺动脉高压的新药.     

健胃愈疡颗粒对复发胃溃疡大鼠胃黏膜组织中内皮素-1 A受体mRNA表达的影响

目的观察健胃愈疡颗粒对胃溃疡大鼠胃黏膜组织中内皮素-1A受体(endothelin-1A receptor,ETAR)mRNA表达的影响及其抗溃疡复发作用的机制.方法拟Okabe改良法制作SD大鼠胃溃疡模型,腹腔注射白介素-1β(IL-1β)制作胃溃疡复发模型.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测大鼠胃黏膜组织中ETARmRNA的表达.结果①在灌胃第10天后,健胃愈疡组(JG)ETARmRNA的相对表达量显著低于模型组(MG)(P＜0.05),与正常组(NG)、假手术组(POG)、雷尼替丁组(RG)、中西药结合组(CTWG)无明显差异;②在灌胃第92天后,JG ETAR mRNA相对表达量显著低于RG、模型复发组(MRG),具有显著性差异(P＜0.01～0.05);JG在灌胃第10天、第92天后诱发胃溃疡复发,胃黏膜组织中ETARmRNA的表达无明显增加.结论健胃愈疡颗粒可显著抑制胃溃疡和胃溃疡复发大鼠胃黏膜组织中ETAR mRNA的表达,是其修复溃疡和抗溃疡复发机制之一.     

内皮素及其受体在哇巴因高血压鼠发病机制中的作用

目的探索内皮素技其受体任大鼠哇巴因因高乐发病机制中的作用：方法雄性SD大鼠随机分为哇巴因组和生理盐水对照组，分别给予哇巴因或生理盐水腹腔注射6周，每周测量收缩压．分别于实验2、4、6间放免法测定血浆及心脏组织中内皮素的含量，实时荧光定量RT—PCR法检测大鼠左心室内皮素A、B两种受体mRNA水平，并用免疫组化法检测左心室内皮素A、B两种受体蛋白的表达：结果大鼠腹腔注射哇巴因4周后收缩乐开始上升．6周后哇巴因组大鼠血压与对照组相比何显著性差异（P〈0．001）。大鼠腹腔注射哇巴因2周后，血浆及心脏组织内皮素水平升高（P〈0．01），左心室内皮袭A型受体mRNA水平升高：4周时A型受体mRNA水平进一步升高且A型受体蛋白表达也增强，而B型受体mRNA及蛋白的表达存整个实验过程中均无显著变化。结论哇巴因高血压鼠血压升高前即出现血浆及心脏组织中内皮素含量增加，左心室内皮素A型受体转录及表达增强，提示内皮素可能通过其A型受体参与了畦巴因引起的血压升高及靶器官损害。     

肾组织内皮素受体A、B在老年糖尿病肾病发展中的作用研究

探讨肾组织中内皮素受体A、B（ETAR、ETBR）表达变化在老年糖尿病肾病发展中的作用。方法选取2015年1月-2016年6月该院收治的糖尿病肾病老年患者34例,根据糖尿病肾病病理分型分为：糖尿病肾病Ⅰ级（D1 组10 例）,Ⅱ级（D2 组12 例）,Ⅲ级（D3 组12 例）;选取同期在该院行肾肿瘤切除术后远离肾肿瘤的正常组织为对照组（10 例）。免疫组织化学检测ETAR、ETBR的表达量;免疫荧光双染法定位ETAR、ETBR 在肾组织的分布部位。收集生化检测指标,计算肾小球硬化率,进行相关性分析。结果D3组尿蛋白水平高于D2和D1 组,差异有统计学意义（p <0.05）;D3 组肾小球滤过率（GFR）和白蛋白（Alb）与D1 组比较差异有统计学意义（p <0.05）;D3组和D2 组肾小球硬化率均高于D1组,差异有统计学意义（p <0.05）。糖尿病肾病各组ETAR、ETBR表达量均高于对照组,差异有统计学意义（p <0.05）;对照组ETAR表达量少于ETBR,随着病情加重糖尿病肾病患者肾组织中ETAR 表达量逐渐增加,组间比较差异有统计学意义（p <0.05）;D2 组ETBR表达量最高,与D1组和D3组比较差异无统计学意义（p >0.05）;ETAR/ETBR在各组比较差异有统计学意义（p <0.05）。ETAR在肾小管近端和远端均存在表达,ETBR主要表达于肾小管近端。糖尿病肾病患者肾组织中ETAR表达量与病程、尿蛋白水平、肾小球硬化率（ROG）呈正相关;ETBR表达量与病程呈负相关;ETAR/ETBR比值与病程、尿蛋白水平及ROG呈正相关,与Alb、GFR呈负相关。结论老年糖尿病患者肾组织中ETAR、ETBR表达量增加,ETAR/ETBR 值倒置与病情发展呈正相关。     

内源性硫化氢在大鼠低氧性肺动脉高压中的作用

目的 :观察低氧性肺动脉高压 (HPH)时 ,内源性硫化氢生成的变化以及应用外源性硫化氢处理对HPH的影响 ,探讨气体分子硫化氢在HPH发病中的作用。方法 :Wistar大鼠随机分为对照组 (n =6 )、低氧组 (n =7)和低氧 +NaHS组 (n =6 )。低氧处理采用吸入氧浓度为 10 % (体积分数 )的气体 ,每天低氧 6h ,共持续 3周。低氧 +NaHS组大鼠每天低氧前腹腔注射NaHS (0 78mg·kg-1)。低氧结束后用右心导管法测定肺动脉压 ,测定右心室 /(左心室 +室间隔 ) [RV/ (LV +SP) ]比值 ,弹力纤维染色观察肺小动脉显微结构改变 ,透射电镜观察肺小动脉超微结构 ,酶促反应法测定肺动脉和肺组织中硫化氢合酶活性 ,定量RT PCR方法测定肺组织中胱硫醚 γ 裂解酶(CSE)基因表达水平。结果 :与对照组相比 ,低氧组大鼠平均肺动脉压升高 4 5 .6 % (P <0 .0 1) ,RV/ (LV +SP)比值增加 4 1% (P <0 .0 1) ;光镜下肺小动脉相对中膜厚度 (RMT)和相对中膜面积 (RMA)分别增加 4 1%和 39% (P <0 .0 1) ;电镜下肺小动脉内皮细胞增生 ,平滑肌细胞呈合成表型改变 ;硫化氢合酶活性在肺动脉和肺组织中分别降低 5 2 %和 5 4 % (P <0 .0 1) ,而且与平均肺动脉压均呈明显负相关 ;肺组织中硫化氢合酶基因表达水平下调 5 3%(P <0 .0 1)。与低氧组相比 ,低氧 +     

肾上腺髓质素及其受体mRNAD在低氧性肺动脉高压形成中的动态 …

目的：探讨肾上腺髓质素９ＡＭ）在低氧性肺动脉高压（ＨＰＨ）形成过程中的作用。方法：将大鼠随机分为对照组,低氧１,３,５,７,１０,１４,２１ｄ组。采用常压间断低氧法制作ＨＰＨ模型;放免法测定血浆和肺匀浆ＡＭ及内皮素１（ＥＴ－１）浓度;采用ＲＮＡ印迹法检测肺组织ＡＭ受体ｍＲＮＡ表达情况。结果：（１）低氧第３天,血浆ＡＭ浓度即显著升高（Ｐ〈０．０５）,至第１４天达高峰。（２）ＥＴ－１／ＡＭ比值从低氧第     

七龙天对低氧性肺动脉高压大鼠 IL-1β、TNF-α的影响

目的观察七龙天对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因-α(TNF-α)的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、波生坦组、七龙天低剂量组、七龙天中剂量组、七龙天高剂量组。正常组大鼠置于正常环境中饲养,除正常组外所有实验大鼠均采用常压低氧法制模,从制模第1天始给药,连续3周。在直视下行右心导管术测定肺血流动力学参数,以RT-PCR法检测肺组织中IL-1β、TNF-α的mRNA表达及免疫组织化学技术检测IL-1β、TNF-α在肺小动脉内膜中的蛋白表达。结果七龙天及波生坦组均可明显降低大鼠肺动脉高压,且以七龙天高剂量组效果为佳,疗效呈药物剂量依赖表现。与正常组比较,各组的IL-1β、TNF-α表达水平(包括mRNA及蛋白)均有所增加,尤以模型组、波生坦组呈非常显著性差异(P0.01);与模型组比较,波生坦组无显著性差异(P0.05),七龙天各组可明显下调IL-1β、TNF-α表达水平(P0.01或P0.05),以七龙天高、中剂量组更为显著(P0.01或P0.05)。结论不同剂量七龙天均可降低肺动脉高压,且高剂量七龙天疗效优于波生坦。其降压机制与降低IL-1β及TNF-α表达量有关,但仍可能受其他血管张力因子及血管新生因子影响。     

低氧性肺动脉高压大鼠肺内 fractalkine 的变化

目的探讨趋化因子fractalkine在低氧性肺动脉高压发病机制中的作用。方法将20只雄性SD大鼠随机分为对照组和低氧组,每组10只,低氧组以常压低氧建立肺动脉高压模型。以右心导管法检测平均肺动脉压(mPAP),图像分析法测量肺小动脉壁厚度,计算出管壁厚度占血管外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%),逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察大鼠肺组织fractalkine mRNA的表达和酶联免疫法观察肺组织匀浆fractalkine的变化。结果对照组大鼠mPAP为(16.3±2.1)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),低氧组为(28.7±3.8)mmHg,两组比较差异具有统计学意义(P<0.01);对照组大鼠WT%为(10.20±1.56)%、WA%为(38.11±2.30)%,低氧组大鼠WA%和WT%分别为(21.28±4.60)%和(67.08±9.44)%,两组比较差异均具有统计学意义(P均<0.01);低氧组大鼠肺组织fractalkine mRNA的含量较对照组增加〔(0.49±0.05)vs(0.29±0.02),P<0.01〕,肺组织匀浆fractalkine浓度亦高于对照组〔(7622.6±938.4)pg/mL vs(4168.5±403.5)pg/mL,P<0.01〕。相关分析表明,fractalkine mRNA和蛋白与WA%和WT%均呈正相关(P<0.05)。结论慢性低氧大鼠肺组织fractalkine的合成和释放增多,fractalkine增加可能与低氧性肺动脉高压的发生有关。     

脓毒性休克大鼠ET-1及ETAR变化的研究

目的探讨脓毒性休克大鼠内皮素-1和内皮素-A受体在各主要组织器官（心、肝、肺、肾、小肠）中的变化以及组织器官水潴留、功能受损状况。方法雄性Wistar大鼠50只,随机分为5组,正常组、对照组、脓毒症组、脓毒性休克组、干预组,每组10只;采用盲肠结扎穿刺术（CLP）模型,分别检测各组织器官ET-1及ETAR变化量、水潴留、器官功能指标。结果脓毒性休克大鼠各主要组织器官（心、肝、肺、肾）ET-1和ETAR含量较正常组和对照组均明显增加（P〈0．05）,水潴留及脏器功能损害明显（P〈0．05）;干预组中各指标较脓毒性休克组均有不同程度缓和,但肺脏水潴留及血气指标改善不明显（P〉0．05）;脓毒性休克组ET-1、ETAR与各器官功能及水潴留呈正相关（P〈0．01）。结论ET-1和ETAR参与了脓毒症及脓毒性休克的病理生理过程,可加重各主要脏器的水肿,同时参与脓毒症和脓毒性休克并发的多器官功能障碍综合征（MODS）,ETA选择性受体阻滞剂可明显缓和这一结果,为未来治疗脓毒症引起的多器官功能障碍提供一种可能。