天疱疮抗体对桥粒影响的动态观察

目的 观察天疱疮抗体对表皮角朊细胞粘合性连接（桥粒及其成分ｄｇ２／３）的影响，探讨棘层松解过程中桥粒的动态变化情况。方法采用纯化的天疱疮抗体，建立天疱疮的器官培养模型和棘层松解模型，观察加入天疱疮抗体后不同时相表皮在光学显微镜下和电子显微镜下的结构情况，并用抗ｄｇ２／３单克隆抗体进行免疫组织化学染色。结果天疱疮抗体在２４小时内仅引起细胞间隙增宽；在４８小时时可引起部分桥粒的破坏；７２小时时可致胞膜变平滑，桥粒消失。免疫组织化学检测结果表明有桥粒成分的内部化。结论天疱疮抗体对桥粒及其成分的影响是在较晚期开始的，但桥粒的破坏是棘层松解的关键一环。     

桥粒提取、桥粒蛋白DPⅠ、ⅡMcAb的制备及应用研究

上皮细胞中含有一种细胞连结结构——桥粒。我们从牛鼻表皮组织中初步将桥粒成分提取出来,在电镜下观察,桥粒结构保存较好。提取的桥粒成份作SDS—PAGE,结果与有关文献比较,我们认为DP Ⅰ可能有3种成份:DP Ⅰ a、Ⅰ b、Ⅰ c,分子量分别为235kd、226kd和215kd;DP Ⅱ可能有DP Ⅱ a、Ⅱ b、Ⅱ c3种成份,分子量分别为206kd、198kd和186kd;DP     

上皮桥粒的提取及其蛋白组份初步分析

上皮细胞中含有一种细胞连结结构—桥粒。我们从牛鼻表皮组织中初步将桥粒成份提取出来,桥粒结构保存较好。提取的桥粒成份作SDS-PAGE,初步认为DP Ⅰ可能有3种成份,DP Ⅰ a、Ⅰ b、Ⅰ c,分子量分别为235kd、226kd和215kd,DP Ⅱ可能有DP Ⅱ a、Ⅱb、Ⅱ c三种成份,分子量分别为206kd、198kd和186kd;DP Ⅲ有两种成份DP Ⅲ a、Ⅲb,分子量为87kd和86kd。其它蛋白成份与文献报道相似。     

天疱疮抗体对桥粒影响的动态影响

目的 观察天疱疮抗体对表皮角朊细胞粘合性连续（桥粒及其成分ｄｇ２／３）的影响，探讨棘层松解过程中桥粒的动态变化情况。方法 采用纯化的天疱疮抗体，建立天疱疮的器官培养模型和棘层松解模型，观察加入天疱疮抗体后不同时相表皮在光学显微镜下和电子显微镜下的结构情况，并用抗ｄｇ２／３单克隆抗体进行免疫组织化学染色。结果 天疱疮抗体在２４小时内仅引起细胞间隙增宽；在４８小时时可引起部分桥粒的破坏；７２小时时可致     

生殖器和围生殖器皮肤多发性播散性表皮松解性棘皮瘤

表皮松解性棘皮瘤是一种罕见的良性肿瘤,其主要组织学特征为棘层上层和颗粒层角质形成细胞出现明显的表皮松解。桥粒未受累表明本病不同于其他疾病如皮肤棘层松解性棘皮瘤。本文首次报道1例54岁男性患者在阴囊、会阴、臀部和腹股沟出现散在的表皮松解性棘皮瘤。生殖器和围生殖器皮肤多发性播散性表皮松解性棘皮瘤@Reguia Z. @Cribier B. @Derancourt C. @P.Bernard$Prof. Service de Dermatologie, Hpital Robert- Debré , Ave. du Gé né ral Koenig, FR- 51100 Reims, France @刘安…     

桥粒提取,桥粒蛋白DPⅠ、ⅡMcAb的制备及应用研究

上皮细胞中含有一种细胞连接结构——桥粒。我们从牛鼻表皮组织中初步将桥粒成分提取出来，在电镜下观察，桥粒结构保存较好。提取的桥粒成分作SDS-PAGE，结果与有关文献比较，我们认为DPⅠ可能有3种成分，DPⅠ_a、Ⅰ_b、Ⅰ_c，分子量分别为235、226和215kd；DPⅡ可能有DPⅡ_a、Ⅱ_b、Ⅱ_c3种成分，分子量分别为206、198和186kd；DPⅢ有2种成分，DPⅢ_a、Ⅲ_b，分子量为81和86kd。其它蛋白成分与文献报道相似。DPⅣ分子量为82kd，DGⅠ分子量为150kd，DGⅡ_a、Ⅱ_b分子量为135和118kd。另有一小分子量蛋白，分子量为22kd，可能是DGⅢ。     

两种枸椽酸钠浓度对常规凝血试验的影响

目的 :探讨 10 9mmol/L和 12 9mmol/L枸椽酸钠浓度对凝血酶原时间 (PT)和活化的部分凝血活酶时间(APTT)结果的影响。方法 :应用全自动凝血仪对 2 0例健康人和 35例口服华法令治疗病人进行PT和APTT测定。结果 :健康组含 10 9mmol/L和 12 9mmol/L枸椽酸钠浓度的PT和APTT结果分别为 (12 5± 1 8)s、(2 9 3± 8 3)s、(12 8± 2 0 )s、(30 4± 7 9)s,无显著差异 ;治疗组含 10 9mmol/L和 12 9mmol/L枸椽酸钠浓度的PT和APTT结果分别为(16 6± 3 5 )s、(36 9± 7 0 )s、(17 9± 3 7)s、(41 5± 8 4 )s,该组内两种浓度的结果差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :12 9mmol/L枸橼酸钠对健康人PT和APTT结果无明显影响 ,使口服华法令治疗病人PT和APT结果明显延长 ,故应选用 10 9mmol/L的枸橼酸钠作为凝血试验的抗凝剂     

抗表皮棘细胞桥粒抗体、抗桥粒芯糖蛋白1、3抗体（Dsg1、Dsg3）在天疱疮中的诊断价值

目的：分析评价抗表皮棘细胞桥粒抗体、抗桥粒芯糖蛋白1、3抗体（Dsg1、Dsg3）在天疱疮中的诊断价值。方法选择2011年2月-2013年2月在新疆医科大学第一附属医院皮肤科诊治经临床、组织病理及间接免疫荧光确诊为天疱疮的34例患者（试验组）,选择同期排除天疱疮的36例患者为对照组。采用间接免疫荧光法（IIF）检测抗表皮棘细胞桥粒抗体,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测 Dsg1、Dsg3;统计各检测指标的敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）和诊断符合率。结果试验组和对照组抗表皮棘细胞桥粒抗体的阳性率分别为73．5％（25/34）、2．8％（1/36）。Dsg1抗体阳性率分别为70．6％（24/34）、0．0％（0/36）,Dsg3抗体阳性率分别为79．4％（27/34）、5．6％（2/36）。在天疱疮患者中,抗表皮棘细胞桥粒抗体试验的敏感度、特异度、PPV、NPV、诊断符合率分别为73．5％、97．2％、96．2％、79．5％、85．7％,Dsg1分别为70．6％、100．0％、100．0％、78．3％、85．7％,Dsg3分别为79．4％、94．4％、93．1％、82．9％、87．1％。3种指标在天疱疮患者中灵敏度和特异度的差异无统计学意义（P＞0．05）。结论同时行血中循环抗体检测与具体靶抗原确认试验检测,能互相补充,减少临床漏诊,提高诊断阳性率。抗天疱疮抗体阳性结果对确诊天疱疮准确性较好,阴性者排除天疱疮的价值较大。     

一种简易的血液病诊断方法

福建省血液病研究室和省人民医院内科研究出一种血液浓缩法,有助于查找某些血液病的特殊细胞。方法如下:取枸椽酸—枸椽酸盐—葡萄糖保存液0.31毫升及待查血样2.7毫升置普通试管内混匀,以3000转/分离     

对人皮肤低阻线部表皮之电镜观察

用超薄切片法对5例人腿部脾经与胃经低阻线下的表皮进行了电镜观察。发现该部表皮较薄;基底细胞之基部有外附基膜的胞突;桥粒随细胞分化形成及退化而改变;细胞间隙深部的大、浅部者小,至角化细胞无桥粒处又变大;棘细胞间有两类郎格罕细胞。依观察所见并结合文献进行了讨论。     

上皮性肿瘤标记物桥粒的提取

A simple method is reported for the isolation of desmosomes. The fresh noncornified layers of cow nose epidermis were immersed in 0.1 mol/L citric acid-sodium citrate buffer (pH 2.3, containing 0.5 mmol/L PMSF), and then treated with homogenization and discontinuous sucrose density gradient centrifugation. Desmosomes were located at the 50-56% sucrose interface. Electron microscopy revealed that the characteristic desmosome structure was well preserved, and that a few intermediate filament bundles attached to desmosome plaque were removed by the solubilizing action of the buffer. Approximate 100 mg desmosomes (dry weight) were got from 20g wet noncornified layers of epidermic tissue.     

胸膜恶性间皮瘤和转移性肺腺癌的微绒毛,桥粒超微结构形态测量研究

本文研究结果表明,应用超微结构形态测量其微绒毛、桥粒有助于胸膜恶性间皮瘤和转移性肺腺癌的鉴别。16例胸膜恶性间皮瘤平均微绒毛长宽比值(L/W)为11.76。相反,10例转移性肺腺癌平均微绒毛L/W为5.22,两者之间具有显著差异(P<0.001)。本文测量了16例恶性间皮瘤和10例转移性肺腺癌的桥粒长度,两组平均桥粒长度差异不十分显著,但是,所有16恶性间皮瘤的桥粒长度均有大于1.5μm,相反,10例转移性肺腺癌无1例桥粒长度超过1.5μm,表明恶性间皮瘤具有长的桥粒,而转移性肺腺癌则缺乏长的桥粒。     

高渗葡萄糖预灌注减轻大鼠心脏缺血再灌注损伤及心律失常

目的 观察高渗葡萄糖灌注液对正常大鼠离体心脏进行预灌注时心肌缺血再灌注引起的心律失常.方法 采用Langendorff离体心脏灌注模型,以葡萄糖加入Krebs-Henseleit平衡灌注液中制成350及400mmol/L的高渗葡萄糖灌注液.采用健康雄性Sprague-Dawley大鼠30只均分为3组(对照组、高渗350组、高渗400组),分别预灌注大鼠心脏20 min后,全心脏热缺血30 min,高渗350组和高渗400组以高渗灌注液平衡灌注20 min,对照组以正常渗透压平衡灌注液复灌30 min,监测灌注过程中室性心律失常的变化,并测定冠状动脉流出液中磷酸肌酸激酶(CPK)、心肌超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)活性的变化.结果 高渗350组和高渗400组心肌再灌注时冠状动脉流出液中CPK量均较对照组显著减少(P值均<0.01).高渗400组的室性心动过速、心室颤动持续时间较对照组显著缩短(P<0.05).高渗400组的心肌SOD及CAT水平均显著高于对照组(P值分别<0.01、0.05),高渗400组的心肌CAT又显著高于高渗350组(P<0.05).结论 高渗葡萄糖预灌注可改善大鼠离体心脏缺血再灌注损伤,该作用可能与高渗透压灌注增加心肌组织的抗氧化能力有关.     

Comparison of Three Methods of Protein Extraction from Dermatophagoides Pteronyssinus for Two-dimensional Electrophoresis

Obiective To explore an effective method of Dermatophagoides pteronyssinus protein extraction suitable for two-dimensional electrophoresis （2-DE） analysis. Methods The extracts of Dermatophagoides pteronyssinus were prepared with Coca＇s solution, lysis buffer of 2-DE, and Trizol reagent, respectively. Bicinchoninic acid （BCA） assay was used to determine the total protein concentration of the samples. The efficiency of different protein extraction methods were evaluated with 2-DE analysis. Results The concentrations of extracted protein by methods of Coca＇s solution, lysis buffer, and Trizol reagent were 0.63 g/L, 0.90 g/L, and 0.80 g/L, respectively. The 2-DE analysis results showed that some protein spots in low molecular weight （LMW） range could be detected with the Coca＇s solution method. With the lysis buffer of 2-DE method, more protein spots in LMW range could be detected, while the medium molecular weight （MMW） protein spots were absent. Several MMW protein spots （174-178 kD and 133 kD） and more LMW protein spots were detected withTrizol reagent method. Conclusions Among Coca＇s solution, lysis buffer of 2-DE, and Trizol reagent, the concentration of extracted protein of Dermatophagoides pteronyssinus by lysis buffer of 2-DE is the highest. However, most protein components of Dermatophagoides pteronyssinus purified mite bodies can be extracted by Trizol reagent, which may generally reflect the whole profile of Dermatophagoides pteronyssinus allergens.     

五种不同介质中瑞格列奈片溶出度对比研究

目的：：比较国产与进口瑞格列奈片在不同介质中的溶出行为。方法：采用桨法,转速为50 r/min,(37±0.5)℃,测定国产和进口瑞格列奈片在5种不同介质(0.1 mol/L 盐酸溶液、pH4.0、pH5.0、pH6.8缓冲液、水)、不同时间点的累积溶出度,高效液相色谱法进行含量测定。结果：在pH4.0缓冲液介质中,进口片剂在不同时间点的累积溶出度均高于国产片剂;在0.1 mol/L 盐酸溶液、pH5.0和pH6.8缓冲溶液及水介质中,两者溶出行为基本一致。结论：国产与进口片剂在 pH4.0缓冲液介质中溶出度存在差异,在其他介质中溶出行为一致。     

反向钠钙交换体参与低钾加重的缺血再灌注后的心功能损伤

目的观察低钾灌注液（含3.1 mmol/L K＋的KH液）对缺血再灌注后对心功能的影响,并评价反向钠钙交换体在此效应中的作用。方法离体灌流大鼠心脏接受1 h缺血/1 h再灌注处理,通过记录左心室发展压（LVDP）、左心室舒张末压（LVEDP）的变化,评价不同处理对心脏功能的影响。结果正常钾KH液（含5.9 mmol/L K＋的KH液）灌注心脏在接受缺血再灌注处理后,LVDP恢复至缺血前（58.1±8.3）%,LVEDP升高至（23.2±1.7）mm Hg。与正常钾KH液灌注条件相比,低钾KH液灌注使得缺血再灌注处理后LVDP进一步降低（P〈0.01）,LVEDP进一步升高（P〈0.01）。10μmol/L KB-R7943（反向钠钙交换体抑制剂）改善低钾灌注液的作用显著大于正常钾KH液。结论低钾KH液灌注加重缺血再灌注后的心功能损伤,其作用与激活反向钠钙交换体活性有关。     

复方烟酸辛伐他汀双层片体外释放度的研究

目的 考察复方烟酸辛伐他汀双层片中缓释层烟酸与速释层辛伐他汀的体外释放度。方法 以国内上市的烟酸缓释片（商品名本悦）作为对照片,用UV法比较了本院自制的复方烟酸辛伐他汀双层片缓释层中烟酸在水、0.1mol/L盐酸及pH 6.8磷酸盐缓冲液三种介质中的释放情况,同时以含0.5%十二烷基硫酸钠（SLS）的0.01?mol/L磷酸盐缓冲液（pH 7.0）为溶出介质,采用HPLC法测定了速释层中辛伐他汀的释放情况。结果 自制复方烟酸辛伐他汀双层片中烟酸在3、9和16h的累积百分释放度在10%～30%、40%～60%和75%以上,符合规定。复方烟酸辛伐他汀双层自制片和对照片中烟酸的释放曲线均符合Higuchi方程,相关系数大于0.99,相似因子f2值在规定的50～100之内。速释层中辛伐他汀在45min内溶出80％以上。结论 自制复方烟酸辛伐他汀双层片与对照片中烟酸的释放性能相似,辛伐他汀溶出度亦符合要求。     

毛细管电泳法检查盐酸左西替利嗪片中右旋异构体杂质

目的：建立毛细管电泳法检查盐酸左西替利嗪片中右旋异构体杂质。方法：用磺酸化-β-环糊精（S-β-CD）作为手性选择剂,考察了S-β-CD浓度、pH值和缓冲盐浓度对分离的影响。结果：在30 mmol/L磷酸盐运行缓冲液(含20 g/L S-β-CD,pH 7.0)中,西替利嗪对映体在分离电压为15 kV的条件下得到良好分离,并满足对盐酸左西替利嗪片检查右旋异构体杂质所需要的条件。结论：本实验建立的方法灵敏、可靠,可用于左旋西替利嗪中右旋异构体杂质的检查。     

载脂蛋白A-I的凝胶切割纯化法及其抗血清制备的研究

本文介绍以肝素-柠檬酸液沉淀法提取纯化人血清载脂蛋自 A-I(ApoA-I)法,方法简便易行,同时免疫得到高效价羊抗人 ApoA-I 单价抗血清。测定了1169名健康人和31例冠心病患者血清 ApoA-I 和 ApoB 的含量,并计算 Apok-I/ApoB 比值。对血清 ApoA-I、B 及其比值变动的临床意义进行了讨论。