来曲唑增强环磷酰胺对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用探讨

目的观察来曲唑（Letrozol）和环磷酰胺（Cyclophosphamide,CTX）合用对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法采用MDA-MB-231细胞株建立人乳腺癌裸鼠模型,将35只成瘤雌性裸鼠均衡随机分成7组：①对照组（生理盐水0.2mL）;②CTX低剂量组（20mg/kg）;③CTX高剂量组（40mg/kg）;④来曲唑低剂量组（1mg/kg）;⑤来曲唑高剂量组（5mg/kg）;⑥CTX低剂量组＋来曲唑低剂量组;⑦CTX高剂量组＋来曲唑低剂量组,隔天腹腔注射给药,共8次。于最后一次给药后48h处死各组小鼠,收集瘤标本常规光镜观察,用免疫组化法检测Aromatase和PI3K蛋白表达情况。结果①各实验组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤重明显低于对照组（P〈0.05）。低、高剂量环磷酰胺联合用药组较对照组抑瘤作用明显增强（P〈0.01）,其瘤重抑制率分别为60.9%和80.95%。②免疫组化：高剂量来曲唑组与对照组比较,Aromatase和PI3K的表达均下调,差异有统计学意义（P〈0.05）,联合用药组该调节作用进一步增强（P=0.00）。结论来曲唑能够增强环磷酰胺对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用,其作用机制可能与来曲唑抑制Aromatase和PI3K的表达有关。     

三氧化二砷对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨三氧化二砷对人雌激素受体阴性乳腺癌细胞系MDA—MB-435s在裸鼠体内生长的影响及其作用机制。方法建立乳腺癌细胞系MDA—MB-435s的裸鼠体内移植瘤模型,将24只荷瘤裸鼠随机分成4组,即生理盐水（Ns）组、顺铂（DDP）组、低剂量三氧化二砷组（1．5mg／kg）、高剂量三氧化二砷组（3．0mg／kg）。比较各组的抑瘤作用及应用免疫组化技术分别检测PCNA、Caspase-3在各组之间表达情况。结果用药后不同剂量三氧化二砷组和顺铂组均能显著抑制人乳腺癌移植瘤在裸鼠体内的生长,移植瘤的大小和重量显著低于生理盐水组（P〈0．05）。免疫组化结果表明：生理盐水组移植瘤组织中PCNA蛋白大量表达,Caspase-3蛋白少量表达。经不同剂量三氧化二砷或顺铂处理后PCNA蛋白的表达下降,而Caspase3蛋白的表达上调,与生理盐水比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论三氧化二砷可以通过抑制PCNA的增殖及增加Caspase-3的凋亡作用来抑制肿瘤生长,且呈剂量依赖性。     

灵芝孢子粉对裸鼠移植性人肝肿瘤血管生成的抑制作用

目的研究灵芝孢子粉对裸鼠移植性人肝肿瘤血管生成的影响，并初步探讨其抑瘤机制。方法建立裸鼠移植性人肝肿瘤模型，采用随机区组设计法随机分为空白对照组、阳性对照组及灵芝孢子粉组，观察裸鼠肿瘤生长。采用苏木精-伊红染色法、SP免疫组织化学法及病理Imagepro Plus5．0彩色图像定量分析法检测裸鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）。结果灵芝孢子粉为2．1g／kg时，对裸鼠移植瘤的抑制率为57．0％，与空白对照组比较有显著差异（P〈0．01）。镜下观察，灵芝孢子粉组与空白对照组相比；肿瘤坏死组织较多，细胞异型性较小。灵芝孢子粉组VEGF、MVD表达水平较空白对照组有明显下降。结论高浓度及大剂量的灵萝孢子粉对肝肿瘤有明展抑制作用．并能抑制肿瘤新生血管生成．其机制可能与对VEGF表达的抑制有关。     

健脾解毒方治疗裸鼠胃癌及其诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的:研究健脾解毒方诱导胃癌细胞凋亡的作用并探讨其部分机制。方法:建立裸鼠人胃癌MKN-45细胞皮下移植瘤模型,随机分为空白对照组、替加氟组、健脾解毒方组、联合用药组4组,每组12只;给药14 d后观察各组对裸鼠胃癌的治疗作用及其对荷瘤裸鼠生存期的影响;TUNEL法检测各组胃癌细胞凋亡情况;分别采用实时荧光定量PCR方法和免疫组化S-P法检测健脾解毒方干预后Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达情况。结果:与空白对照组相比,健脾解毒方组凋亡指数显著升高、Bcl-2 mRNA水平及Bcl-2蛋白表达显著降低、Bax的mRNA和蛋白表达明显上调、Bcl-2/Bax显著下降,健脾解毒方组和联合用药组均能明显抑制瘤体生长(P0.01),延长荷瘤鼠的生存期(P0.01)。联合用药组在抑制胃癌细胞生长和诱导胃癌细胞凋亡方面的作用均优于单纯化疗药组和单纯健脾解毒方组(P0.05或P0.01)。结论:健脾解毒方能抑制裸鼠胃癌细胞生长,诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能与调控Bcl-2、Bax表达有关。     

重组质粒hTERT-siRNA对胰腺癌细胞移植瘤hTERT相关基因及蛋白表达的影响

目的探讨重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA对胰腺癌细胞BxPC-3裸鼠皮下移植瘤hTERT相关基因及蛋白表达的影响.方法建立人原发性胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为4组：（1）肿瘤对照组,未作任何处理;（2）空载组,即pSilencer4.1-CMV neo空质粒组;（3）T1组,即重组质粒pSilencer4.1-CMV neo-hTERT1-siRNA组;（4）T2组,即重组质粒pSilencer4.1-CMV neo-hTERT2-siRNA组）.荷瘤裸鼠分组处理30d后,RT-PCR检测各组瘤体中hTERT、Bcl-2、Bax mRNA的表达,免疫组织化学检测各组瘤体中Bcl-2、Bax、p53、VEGF、端粒酶蛋白表达,Western blot检测各组瘤体中端粒酶蛋白表达情况.结果 T1组和T2组hTERT和Bcl-2 mRNA表达较肿瘤对照组和空载组明显降低,BaxmRNA表达明显升高（P〈0.01）.与肿瘤对照组和空载组比较,T1组和T2组Bcl-2 Telomerase、p53和VEGF蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达明显升高（P〈0.01）.结论 （1）重组质粒T1和T2能够下调裸鼠移植瘤体内抗凋亡基因hTERT mRNA、Bcl-2 mRNA和蛋白、p53和端粒酶蛋白表达水平,上调促凋亡基因Bax mRNA和蛋白表达水平,其抗胰腺癌作用可能与促进胰腺癌细胞凋亡有关.（2）重组质粒T1和T2能够显著下调裸鼠移植瘤体内VEGF蛋白表达水平,可能具有抑制肿瘤血管生成的作用。     

白鹤冲剂对人胃癌BGC-823裸鼠原位移植瘤瘤组织血管内皮生长因子和p53蛋白表达的影响

目的：观察白鹤冲剂对人胃癌BGC-823裸鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用及对瘤组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）与p53蛋白表达的影响。 方法：45只裸鼠原位移植人胃癌细胞BGC-823建立原位移植瘤模型,随机分为白鹤冲剂组、5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）组和模型组。白鹤冲剂组予含生药0.2g/mL的白鹤冲剂0.5mL灌胃,1次/d;5-FU组予5-FU稀释液0.2mL腹腔注射化疗;模型组予生理盐水0.5mL/d灌胃,1次/d。用药6周后,脱颈椎处死裸鼠,观察各组荷瘤裸鼠原位移植瘤转移情况,计算抑瘤率;免疫组织化学法检测各组裸鼠移植瘤组织VEGF与p53蛋白的表达情况。 结果：白鹤冲剂组和5-FU组抑瘤率分别为52.86%和42.87%。白鹤冲剂组与5-FU组裸鼠胃周、肝门淋巴结和肝脏、腹膜转移率较模型组明显减少,3组转移率分别是33.33%、35.71%和80.00%（P〈0.05）。白鹤冲剂组移植瘤组织VEGF与p53蛋白表达较模型组和5-FU组降低（P〈0.01,P〈0.05）。 结论：白鹤冲剂可以抑制裸鼠人胃癌BGC-823原位移植瘤的生长和转移,降低移植瘤组织VEGF与p53蛋白表达,这可能是其抗胃癌生长和转移的机制之一。     

灵芝孢子治疗裸鼠卵巢癌过程中let-7的表达及意义

目的研究破壁灵芝孢子提取物对裸鼠卵巢上皮性癌细胞的生长抑制作用、增强化疗药物紫杉醇作用的机制。方法以人卵巢癌移植瘤为研究对象,以破壁灵芝孢子粉提取物为处理因素,应用实时荧光定量PCR方法检测实验组和对照组瘤体组织中let-7的表达情况。结果 let-7的阳性表达情况:在实验组瘤体组织中呈高表达,在对照组呈低表达;其中灵芝+紫杉醇组表达最高,差异有统计学意义(F=9.51,P﹤0.05)。结论灵芝孢子通过增强let-7的表达来诱导裸鼠卵巢上皮性癌细胞凋亡,抑制其增殖并增强化疗药物紫杉醇的作用。     

三氧化二砷联合顺铂治疗乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的初步研究

目的：观察联合应用三氧化二砷（As2O3）和顺铂（DDP）治疗人乳腺癌MCF-7裸鼠皮下移植瘤的疗效。方法：建立裸鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型,应用As2O3和DDP联合治疗,计算抑瘤率并用透射电镜观察瘤体细胞凋亡情况。结果：联合用药组的抑瘤率为76．47％,明显高于单独应用As2O3,或DDP的抑瘤率（P〈0．01）;且联合用药组的肿瘤细胞呈明显凋亡形态改变。结论：As2O3与DDP联合用药比两药单独应用具有较强的抑制肿瘤生长作用,二者具有协同抗癌作用。     

大黄素通过非Caspase依赖通路抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤生长机制研究

目的探讨大黄素对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用,并探讨其作用机制。方法建立人膀胱癌细胞株BIU87裸鼠移植瘤模型,并随机分为4组[对照组、大黄素组、Caspase抑制剂（Z-VAD-FMK）组及大黄素＋Z-VAD-FMK组]。观察各组裸鼠移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线,4周后处死全部裸鼠,取出肿瘤组织,称瘤质量;HE染色观察肿瘤细胞形态,RT-PCR检测各组肿瘤组织中线粒体蛋白凋亡诱导因子（AIF）和核酸内切酶G（Endo G）的mRNA的表达,Western blot检测各组肿瘤组织中AIF和Endo G蛋白的表达。结果大黄素组肿瘤生长速度明显慢于其他3组,大黄素组和大黄素＋Z-VAD-FMK组肿瘤较其他2组轻,差异均有统计学意义（均〈0.01）,大黄素组与大黄素＋Z-VAD-FMK组差异也有统计学意义（〈0.01）。大黄素＋Z-VAD-FMK组中AIF和Endo G的表达水平显著上调,与其他各组比较,差异均有统计学意义（均〈0.01）。结论大黄素能够明显抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能部分与大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和Endo G的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡有关。     

PDTC合并泰素帝对裸鼠移植瘤抑制效应的研究

目的研究PDTC合并泰素帝对SGC-7901人胃癌细胞裸鼠移植瘤的抑制效应及对核因子-κB表达的影响,探讨其对泰素帝的化疗增敏作用。方法将接种SGC-7901人胃癌细胞成瘤的裸鼠分为PDTC组、泰素帝组、联合用药组及对照组,动态观察裸鼠移植瘤体积变化,采用实时荧光定量PCR法测定裸鼠移植瘤组织内c-IAP2及XIAP mRNA表达的改变,采用Western Blot方法检测NF-κB P65、I-κB蛋白表达的改变。结果治疗结束后所有药物治疗组瘤体体积均较对照组降低（P〈0.01）,联合用药组与PDTC组及泰素帝组相比,降低最为明显（P〈0.01）。泰素帝组XIAP及c-IAP2 mRNA表达较对照组升高（P〈0.05）,而联合用药组XIAP及c-IAP2 mRNA表达较对照组、泰素帝组明显下降（P〈0.01）。泰素帝处理后胞浆及胞核NF-κB P65含量增加,而PDTC联合作用后胞浆及胞核NF-κB P65含量较泰素帝组明显降低。结论泰素帝与PDTC均能抑制裸鼠移植瘤生长,并且两者具有协同作用,其机制可能与PDTC拮抗泰素帝的NF-κB激活、抑制其下游凋亡抑制蛋白基因表达有关。     

赤灵芝孢子粉对环孢素A免疫抑制模型小鼠固有免疫功能的影响

目的：探讨赤灵芝孢子粉对环孢素A免疫抑制小鼠固有免疫功能的影响。方法：用不同剂量赤灵芝孢子粉对环孢素A模型小鼠灌胃,于停药后第2、20天分别检测小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞的吞噬功能、免疫器官重量及血清总补体活性（CH50）。结果：与模型空白对照组比较,停药后第2天,高、中、低均可显著提高环孢素A小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力和胸腺指数,P〈0.05,血清CH50值以中剂量组提高显著（P〈0.05）;停药后第20天,巨噬细胞的吞噬能力以中剂量组增强明显（P〈0.05）,血清CH50以高剂量组提高显著（P〈0.05）,胸腺指数以低剂量组提高明显（P〈0.05）。结论：赤灵芝孢子粉可增强环孢素A免疫抑制模型小鼠的固有免疫功能。     

灵芝孢子粉对PTZ致痫大鼠神经细胞野生型p53表达的影响

目的观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马野生型p53(wtp53)蛋白表达的影响。方法将60只成年SD大鼠随机分为空白对照组,癫痫模型组,灵芝孢子粉用药高、中、低剂量组共5组。癫痫模型组和灵芝孢子粉用药各组大鼠腹腔注射亚惊厥剂量的PTZ35mg/(kg.d),直至达到点燃标准;用药组以灵芝孢子粉灌胃。采用免疫组织化学法检测大鼠海马CA1区wtp53蛋白的免疫反应性。结果大鼠海马CA1区wtp53蛋白表达模型组明显高于对照组(P<0.01);用药高剂量组wtp53蛋白表达明显低于模型组(P<0.05)。结论灵芝孢子粉能明显抑制wtp53蛋白的表达,可能是其对癫痫所致神经细胞凋亡有明显抑制,从而是对脑组织起保护作用的分子机制之一。     

三七粉对小鼠S180移植肿瘤的抑制作用及免疫功能的影响

目的:观察三七粉对小鼠S180移植肿瘤的抑制作用及免疫功能的影响,为寻找有效和低毒的抗肿瘤药物提供有价值的实验资料。方法:建立小鼠S180腹水瘤及实体瘤模型,分别设羧甲基纤维素钠(SCMC)组、环磷酰胺(CTX)组及三七粉低(3 mg/kg)、中(6 mg/kg)、高(12 mg/kg)剂量组。观察腹水瘤小鼠生存时间,计算生命延长率;测实体瘤小鼠瘤重、脾重及胸腺重,计算抑瘤率、脾指数及胸腺指数。各组比较并进行统计学分析。结果:与SCMC组比较,三七粉中、高剂量组及CTX组生存时间均延长(P<0.05~P<0.01),瘤体均缩小(P<0.05~P<0.01);与SCMC组及CTX组比较,三七粉中、高剂量组脾指数和胸腺指数均升高(P<0.05~P<0.01)。结论:三七粉对小鼠S180移植肿瘤具有抑制作用,并可增强荷瘤小鼠的免疫功能。     

健脾为基础中药方对人胃癌MKN-45裸小鼠皮下移植瘤生长及瘤组织内P-Stat3蛋白表达的影响

目的研究健脾为基础中药方对人胃癌MKN-45裸小鼠皮下移植瘤生长及瘤组织内P-Stat3蛋白表达的影响。方法将裸小鼠皮下移植瘤模型随机分为中药组及生理盐水组,比较第31天2组实验鼠皮下移植瘤生长及瘤组织内P-Stat3的蛋白表达情况。结果中药组的抑瘤率为23.68%,P-Stat3蛋白表达相对定量值为(0.33±0.52),与生理盐水组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论健脾为基础的中药方可抑制人胃癌细胞MKN-45裸小鼠皮下移植瘤的生长,并能抑制P-Stat3的蛋白表达。     

艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤细胞凋亡的影响

目的：观察艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤细胞凋亡的影响。方法：将人胃癌细胞BGC-823接种于裸鼠右侧腋皮下,建立荷瘤裸鼠模型。将荷瘤裸鼠随机分为：模型、环磷酰胺及艾迪注射液高、中、低剂量5个组,加上1个对照组（未接种肿瘤细胞）,各组动物按各自药物和剂量腹腔注射（ip）给药,连续14d。末次给药后处死动物,剥取瘤块,用流式细胞仪测定移植瘤组织的细胞凋亡率,并用电子显微镜观察其超微结构。结果：艾迪注射液高剂量组的细胞凋亡率明显高于模型组,电镜下可见明显的凋亡表现。结论：艾迪注射液具有促进裸鼠人胃癌移植瘤组织细胞凋亡的作用。     

艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤的抑瘤作用研究

目的：观察艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤的抑瘤作用。方法：将人胃癌细胞BGC-823接种于裸鼠右腋皮下,建立荷瘤裸鼠模型;将荷瘤裸鼠随机分为5组：模型组、环磷酰胺组和艾迪注射液高、中、低剂量组,各组动物按相应药物和剂量给药,连续14d;末次给药后处死动物,剥取瘤块,称重计算抑瘤率并作组织学观察。结果：艾迪注射液高剂量组的抑瘤率为61.84%,光镜下可见大片状的坏死区。结论：艾迪注射液对裸鼠人胃癌细胞BGC-823具有抑制作用。     

美洲大蠊对小鼠移植性肝癌的药效学研究

目的：以美洲大蠊作为治疗药物,研究其对小鼠移植性肝癌的影响,为肝癌的临床选药提供理论依据。方法：100只小鼠随机分为空白组、模型组、5-FU组、CTX组、美洲大蠊未脱脂粉大、中、小剂量组以及美洲大蠊脱脂粉大、中、小剂量组,每组10只。建立小鼠移植性肝癌模型,观察美洲大蠊对肿瘤抑制率、生存时间的影响。结果：与模型组比较,美洲大蠊未脱脂粉及脱脂粉中、小剂量组小鼠瘤重降低,脱脂型中剂量组小鼠生存时间延长,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：美洲大蠊未脱脂粉及脱脂粉均对小鼠肝癌有抑制作用。     

灵芝孢子粉提取物对甲醛所致小鼠遗传毒性干预研究

目的:探讨灵芝孢子粉提取液对甲醛所致小鼠遗传毒性的干预作用。方法:将昆明种小鼠随机分成4组,每组10只,分别为阳性对照组,高剂量、中剂量和低剂量灵芝液组,各组小鼠每天以10 mg/m3甲醛溶液静态染毒2h后,实验组分别以150、30和15 mg/(kg·d)剂量灵芝孢子粉提取液灌胃,阳性对照组以同等体积蒸馏水灌胃,染毒和灌胃过程持续14 d。14 d后,处死小鼠,检测各组小鼠的睾丸系数、精子畸形率和骨髓细胞微核率。结果:与阳性对照组比较,高、中、低剂量实验组小鼠的睾丸脏器系数均升高(P<0.01),以高、中剂量组显著;小鼠精子畸形率与骨髓微核率不同程度降低(P<0.01),而且存在明显的剂量效应关系。结论:灵芝孢子粉提取液对甲醛所致小鼠遗传毒性具有一定的保护作用。     

辛二酰苯胺异羟肟酸对裸鼠人宫颈癌移植瘤的作用及其机制

目的观察辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对裸鼠人宫颈癌移植瘤生长的抑制作用,并对药物作用机制进行探讨。方法培养人宫颈癌SiHa细胞接种至20只裸鼠右下肢背侧根部皮下,15 d后将成瘤的18只裸鼠随机分3组:空白对照组、SAHA1组(25 mg/kg)、SAHA2组(50mg/kg),每组6只。连续4 d腹腔注射药物,间歇7 d,再连续给药4 d,1次/d。观察各组裸鼠宫颈癌移植瘤的生长情况,计算抑瘤率。免疫组化分析及Western blot方法检测各组移植瘤中的Bax及Bcl-2蛋白的表达。结果空白对照组抑廇率为0,SAHA1组为22.44%,SAHA2组为35.52%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。用药后,SAHA2组裸鼠体质量低于空白对照组及SAHA1组(P<0.05)。SAHA1组与SAHA2组肿瘤体积均小于空白对照组,且SAHA2组小于SAHA1组(P均<0.05)。与空白对照组相比,SAHA1组与SAHA2组裸鼠肿瘤质量低,且SAHA2组低于SAHA1组,差异均有统计学意义(P均<0.05);免疫组化及蛋白印迹法检测结果显示,与空白对照组比较,SAHA1组、SAHA2组Bax蛋白均明显升高,Bcl-2蛋白均明显降低(P均<0.05)。而SAHA2组较SAHA1组变化更明显,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论SAHA可以有效抑制人宫颈癌SiHa细胞裸鼠移植瘤的生长,Bax/Bcl-2相关的细胞凋亡是其抑癌机制之一。     

苦参素对裸鼠胃癌移植瘤组织中BIP表达的影响

目的通过研究苦参素对裸鼠胃癌移植瘤组织中结合免疫球蛋白(BIP)表达的影响,以探讨其诱导肿瘤凋亡的可能机制。方法运用移植瘤体积判定肿瘤生长抑制,TUNEL检测细胞凋亡率,原位杂交技术显现BIP表达状况。结果经不同浓度苦参素处理9 d后,肿瘤平均体积出现明显缩小(P0.05);各剂量组均出现细胞凋亡(P0.01);BIP表达明显下降(P0.01)。结论苦参素诱导裸鼠移植瘤凋亡的作用与调控内质网应激信号通路相关,BIP基因下调可能是其作用靶点之一。