经腹膜后入路腹腔镜下肾上腺血管瘤切除术的临床经验分享

目的:总结经腹膜后入路腹腔镜下肾上腺血管瘤切除术的手术经验。方法:回顾分析2014年5月至2016年12月收治的5例术后病理证实肾上腺血管瘤患者的临床资料,其中男1例,女4例,中位年龄42(27~67)岁;中位肿瘤直径3.5(2.4~4.5)cm,左侧2例,右侧3例;术前CT提示5例肿瘤均为囊实性、边界清,2例肿瘤内可见明显多处钙化。5例患者均行后腹腔镜肾上腺肿瘤切除术。结果:5例手术均顺利完成,无一例中转开放,术中、术后无严重并发症发生。中位手术时间65(50~90)min,术中出血量<50 mL,术后中位住院时间4(3~6)d;术后病理结果提示,5例均为肾上腺血管瘤;术后中位随访时间15(9~36)个月,患者恢复情况良好,无激素不足等症状出现,随访期间均未见肿瘤局部复发。结论:肾上腺血管瘤是较罕见的肾上腺良性肿瘤,术前影像学检查明确困难,术后病理为金标准。后腹腔镜肾上腺肿瘤切除术治疗肾上腺血管瘤可行、安全、有效,值得临床推广应用。     

大黄素通过非Caspase依赖通路诱导膀胱癌细胞BIU87凋亡的机制

目的 研究大黄素对人膀胱癌细胞BIU87凋亡及凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)和核酸内切酶G( Endonuclease G,Endo G)的mRNA和蛋白表达的影响,探讨大黄素的抗癌机制. 方法 取对数生长期的人膀胱癌细胞株BIU87,分别加入大黄素和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养.实验分为4组:空白对照组、Z-VAD-FMK组、大黄素组、大黄素+Z-VAD-FMK组.采用甲基噻唑(MTT)比色法测定不同浓度大黄素在不同作用时间内对体外培养的BIU87细胞增殖的影响,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测各组细胞AIF和Endo G mRNA的表达,蛋白质印迹法检测各组细胞AIF和Endo G蛋白的表达. 结果 MTT检测显示,大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强.根据IC50值,选择80 μmol/L的大黄素干预72 h作为干预条件.大黄素组细胞凋亡率为(44.57±1.52)％,大黄素+Z-VAD-FMK组为(35.58±1.61)％,差异有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR和蛋白质印迹结果显示,大黄素+Z-VAD-FMK组中AIF mRNA和蛋白为1.74±0.11、2.59±0.13,大黄素组为1.36±0.08、1.89±0.14,空白对照组为0.37±0.02、0.53±0.11,Z-VAD-FMK组为0.42±0.06、0.44 ±0.07,大黄素+Z-VAD-FMK组与其他各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);大黄素+ Z-VAD-FMK组中Endo G mRNA和蛋白为2.28±0.15、3.31±0.36,大黄素组为1.85±0.13、2.15 ±0.27,空白对照组为0.53±0.07、0.71 0.16,Z-VAD-FMK组为0.61±0.04、0.67±0.22,大黄素+Z-VAD-FMK组与其他各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和Endo G的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡.     

Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒对人膀胱癌细胞BIU87生长的影响

目的:构建Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIGl,并检测其对人膀胱癌细胞BIU87生长的影响.方法:将经同源重组产生的重组腺病毒Ad-Surp-LRIGl在293细胞中大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测其滴度.用Ad-Surp-LRIGl和Ad-LRIGl分别感染人膀胱癌细胞BIU87及人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1,MTT法评估Ad-Surp-LRIGl和Ad-LRIGl对BIU87细胞生长的抑制作用.结果:当感染复数(MOI)=25时,Ad-Surp-LRIGl在BIU87细胞中的转染效率为74.56%,在SV-HUC-1细胞中转染率为0,差异有统计学意义(χ2=58.64,P<0.05);Ad-LRIGl在BIU87细胞中的转染效率为68.27%,在SV-HUC-1细胞中转染率为72.52%,差异无统计学意义(χ2=0.075,P>0.05).Ad-Surp-LRIGl和Ad-LRIGl在BIU87细胞中的转染效率相比,差异无统计学意义(χ2=0.016,P>0.05).与PBS相比,Ad-Surp-LRIGl和Ad-LRIGl均能明显抑制BIU87细胞的生长,转染后第4天这一差异显著(F=15.96,P<0.05),而Ad-Surp-LRIGl组和Ad-LRIGl组细胞生长速度无明显差异.结论:成功构建了含有Survivin启动子驱动LRIG1基因的重组复制腺病毒Ad-Surp-LRIGl并鉴定正确,Ad-Surp-LRIGl能选择性转染人膀胱癌细胞BIU87,在体外能明显抑制膀胱癌细胞BIU87的生长.     

五味子抗氧化作用研究

目的优化五味子抗氧化物的提取条件;分析湖北产和辽宁产五味子提取物的DPPH清除能力。方法以DPPH自由基的清除能力为参考指标,采用单因素实验的方法,考察溶剂种类、乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数和提取方法等因素对五味子提取物抗氧化作用的影响。结果五味子抗氧化物的最优提取条件为:以60%的乙醇为提取溶剂,超声法提取,料液比为1∶30(g·m L-1),提取次数3次,每次提取20min,室温提取;湖北产和辽宁产五味子提取物清除DPPH自由基的IC50分别为3.79mg·m L-1和7.60mg·m L-1。结论五味子提取物具有较强的抗氧化作用,且湖北产五味子提取物的抗氧化作用比辽宁产五味子的强。     

盐酸坦索罗辛联合吲哚美辛栓治疗输尿管下段结石的初步研究

目的评价盐酸坦索罗辛与吲哚美辛栓联合治疗输尿管下段结石的临床疗效。方法 89例确诊为单纯输尿管下段结石(结石均小于8mm)的患者,随机分为三组:试验组,口服盐酸坦索罗辛(0.4mg/d)和吲哚美辛栓0.1g塞肛,1次/d;对照组1,口服中药排石颗粒4g/次,2次/d;对照组2,口服盐酸坦索罗辛0.4mg,1次/d;观察结石排出率、排出时间、肾绞痛发生率、药物不良反应发生率、干预治疗率等。结果试验组结石排出率为90.63%(29/32),对照组1和对照组2结石排除率分别为42.31%(11/26)和70.97%(22/31),试验组与对照组1比较,试验组与对照组2比较,两个对照组比较,差异均有统计学意义(χ2分别=4.76、3.94、15.65;P均<0.05)。试验组的结石排出时间为(8.73±2.15)d,对照组1和对照组2结石排出时间分别为(12.31±1.52)d和(9.52±1.61)d,试验组与对照组1比较,试验组与对照组2比较,两个对照组比较,差异均有统计学意义(t分别=6.77、-1.70、-7.35;P均<0.05)。试验组、对照组1、照组2的肾绞痛发生率分别为31.25%(10/32)、63.28%(17/26)、45.16%(14/31),试验组和对照组2以及对照组1和对照组2比较,差异均无统计学意义(χ2分别为1.29、2.33,P均>0.05);试验组和对照组1比较,差异有统计学意义(χ2=8.24,P<0.05)。三组患者均未发生严重的药物不良反应(χ2分别=0.33、0.23、0.35,P均>0.05)。结论联合应用盐酸坦索罗辛和吲哚美辛栓治疗输尿管下段结石安全、副作用小,能明显提高排石率,缩短排石时间,并能减少镇痛药物的应用。     

Survivin启动子的克隆及其在膀胱癌细胞BIU87中的活性鉴定

目的克隆Survivin启动子的有效片段,并检测其在人膀胱癌细胞株BIU87和人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中的转录活性。方法用PCR扩增Survivin基因的启动子片段,克隆入荧光素酶报告质粒pGL3-Basic,构建pGL3BSurvivin重组质粒,用脂质体法瞬时转染BIU87及SV-HUC-1中,检测Survivin启动子在细胞中的转录活性。同时构建含CMV启动子的pGL3BCMV重组质粒作为阳性对照。48h后收集转染细胞与荧光素酶底物反应,检测荧光素酶活性。结果成功克隆440 bp的Survivin基因启动子,并构建了携带有Survivin基因启动子的pGL3Basic真核表达载体,转染BIU87细胞后的荧光素酶活性为2 286.98±440.21,而SV-HUC-1荧光素酶活性为12.32±1.16,两者差异有统计学意义（〈0.01）。结论本实验成功克隆的Survivin启动子在BIU87细胞中表现出较高的肿瘤特异性活性,其有可能作为调控元件用于膀胱癌的靶向性基因治疗。     

大黄素通过非Caspase依赖通路抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤生长机制研究

目的探讨大黄素对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用,并探讨其作用机制。方法建立人膀胱癌细胞株BIU87裸鼠移植瘤模型,并随机分为4组[对照组、大黄素组、Caspase抑制剂（Z-VAD-FMK）组及大黄素＋Z-VAD-FMK组]。观察各组裸鼠移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线,4周后处死全部裸鼠,取出肿瘤组织,称瘤质量;HE染色观察肿瘤细胞形态,RT-PCR检测各组肿瘤组织中线粒体蛋白凋亡诱导因子（AIF）和核酸内切酶G（Endo G）的mRNA的表达,Western blot检测各组肿瘤组织中AIF和Endo G蛋白的表达。结果大黄素组肿瘤生长速度明显慢于其他3组,大黄素组和大黄素＋Z-VAD-FMK组肿瘤较其他2组轻,差异均有统计学意义（均〈0.01）,大黄素组与大黄素＋Z-VAD-FMK组差异也有统计学意义（〈0.01）。大黄素＋Z-VAD-FMK组中AIF和Endo G的表达水平显著上调,与其他各组比较,差异均有统计学意义（均〈0.01）。结论大黄素能够明显抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能部分与大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和Endo G的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡有关。     

两种前列腺手术患者生存质量及性功能影响的比较

目的观察经尿道前列腺电切术对前列腺增生患者生存质量及性功能的影响。方法对采用经尿道前列腺电切术治疗的59例前列腺增生患者（观察组）与采用开放性手术治疗的59例患者（对照组）术后生存质量与性功能状态,分别采用IIEF-5量表、CIPE-5量表及BPHQLS量表进行评估。结果观察组手术治疗后3个月、6个月的IIEF-5量表、CIPE-5量表及BPHQLS量表评分均优于对照组（P均〈0.05）。结论经尿道前列腺电切术在前列腺增生患者中的应用价值高于开放性手术,对患者术后生存质量及性功能的影响更小。