中枢神经系统损伤和股骨骨折愈合的关系

目的观察大鼠脑和脊髓损伤后骨折股骨骨痂中神经生长因子（NGF）的受体TrKA表达的变化，以探讨中枢神经系统损伤对骨折愈合的影响和机理。方法选择成年健康雄性Wistar大鼠48只，随机分为单纯股骨骨折组（对照组）16只；股骨骨折合并脑损伤组（实验组A）16只：股骨骨折合并脊髓损伤组（实验组B）16只。每组再分为骨折后1天、4天、7天和14天4个观察骨折愈合时间点，每个观察时间点4只。应用自由坠落重物撞击法建立脑和脊髓损伤的动物模型，以免疫组织化学方法检测各骨折愈合时间点骨痂中NGF受体TrKA的表达变化。结果单纯骨折组骨痂内的纤维母细胞和成骨细胞内NGF受体TrKA呈阳性表达；骨折合并脑损伤组，骨折后1天、4天和7天骨痂内成纤维细胞和成骨细胞内的NGF受体TrKA的阳性表达率与单纯骨折组比较无差异性，至骨折后第14天表达增强（P〈0．05）；骨折合并脊髓损伤组，至骨折后第4天开始明显增多（P〈0．05），7-14天达高峰（P〈0．01）。结论合并脑损伤与合并脊髓损伤时股骨骨折愈合速度增快，这可能与骨折部位骨痂中NGF受体Trk的表达上调有关。     

小鼠股骨骨折合并坐骨神经损伤的标准化动物模型构建与评价

目的 建立并评价小鼠股骨骨折合并坐骨神经损伤的标准化动物模型。方法 将96只C57BL/6J小鼠随机分为2组,分别为A组：股骨骨折合并坐骨神经损伤组(48只)、B组：股骨骨折组(48只)。A组通过止血钳钳夹致小鼠左侧坐骨神经损伤,于同侧进行股骨开放性骨折联合髓内钢针固定,建立了小鼠股骨骨折合并坐骨神经损伤的模型;B组行左侧股骨开放性骨折联合髓内钢针固定,仅游离坐骨神经,不做钳夹处理。术后仔细观察小鼠行为学变化。于术后第3、5、7、10、14、18天6个时间点,取A组(36只)与B组(36只)左侧坐骨神经,其中每个时间点每组6只,分别通过免疫组化染色来分析坐骨神经损伤修复过程。同时,于第7、14、21和28天4个时间点取小鼠左侧股骨,分别通过股骨X线、Micro-CT、组织学染色来分析并评估在周围神经损伤条件下骨折愈合情况。结果 本实验建立的小鼠股骨骨折合并坐骨神经损伤模型,于建模后第14天小鼠步态基本恢复正常;于第14天坐骨神经纤维结构连续性基本恢复;第7天骨折断端几乎不存在骨痂;至第14天出现少量软骨痂,主要为未分化的间充质干细胞构成;第21天软骨痂开始钙化,骨痂中存在部分肥大的软骨细胞;第28天骨折断端新生骨形成,含有大量肥大的软骨细胞、成骨细胞与骨细胞。结论 通过本研究方法建立的小鼠股骨骨折合并坐骨神经损伤模型愈合过程良好,并较单纯股骨骨折的愈合过程有所迟缓,可很大程度上模拟临床骨折合并周围神经损伤后修复及愈合过程,为合并周围神经损伤的骨折愈合相关研究提供实验基础。     

中枢神经损伤与骨折愈合关系的研究进展

中枢神经损伤(颅脑损伤及脊髓损伤)可促进骨痂的形成,加速骨折愈合,甚至诱发机体软组织内异位骨化。本文对中枢神经损伤后骨折愈合的影响因素及其机制研究进展,综述如下。1中枢神经损伤与骨折愈合的关系1960年,G ibson首次报道了并发脑损伤股骨骨折的治疗,发现骨折处有大量骨痂形成[1]。Roberts于1968年报道脑外伤后出现异位骨化现象[2],此后,许多学者对骨折并发脑外伤患者的骨愈合和异位骨化进行了深入研究。Spencer[3]研究发现,脑外伤患者保守治疗后骨折部位有大量骨痂形成,无论是骨痂量,还是骨痂形成速度均比无脑外伤者多和快,他还通过…     

脑损伤并骨折大鼠血清降钙素基因相关肽对骨折愈合的影响

目的：应用分级液压脑损伤及骨折的大鼠模型研究脑损伤后大鼠血清中降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP）及其对脑损伤后骨折愈合的影响。方法：将SD大鼠随机分成3组,空白对照组10只,单纯骨折组48只,脑损伤骨折组144只,脑损伤按轻重分成轻、中、重3组,通过侧方液压脑损伤及开放骨折建立模型,损伤后按设计取SD大鼠血清及骨折标本,通过放射免疫荧光、X线片及骨折端骨痂形成的直径及生物特性测量了解血清中CGRP的含量、骨折愈合情况、骨痂直径及抗应力的大小。结果：模型建立后,轻、中、重度脑损伤骨折组CGRP含量明显升高,第7天达高峰,分别为（72.38±17.45）ng/L、（196.73±54.98）ng/L、（275.12±109.55）ng/L,随后逐渐下降,单纯骨折组CGRP含量也升高,第5天达高峰,为（74.70±20.76）ng/L,随后下降;脑损伤骨折组中CGRP含量明显高于单纯骨折组,且高峰时间长,除轻度脑损伤骨折组伤后3 h及伤后14 d外,各组、各时间点血清中CGRP含量明显高于骨折组,差异有统计学意义（P〈0.05）;脑损伤骨折组骨痂无论在影像学提示的愈合情况、骨痂直径大小及骨痂抗应力强度均大于单纯骨折组,术后3,4周X线片、骨痂直径及抗应力重度脑损伤骨折组明显大于中度、轻度脑损伤骨折组及单纯骨折组,而中度脑损伤骨折组大于轻度脑损伤骨折组且骨痂致密（P〈0.05）。结论：脑损伤骨折大鼠骨折愈合快于单纯骨折,且脑损伤越重血清中CGRP含量越高,骨折愈合越快,骨痂量越大,愈合时间越短,因此脑损伤轻重可能与血清中CGRP含量及骨折愈合速度有相关性。     

VEGF在大鼠脊髓损伤后股骨干骨痂形成过程中的表达

目的探讨大鼠在脊髓损伤伴骨折中骨折愈合速度增快的原因。方法来自甘肃省中医学院动物实验中心的12周龄大鼠40只,使用抽签法分为两组,实验组为脊髓损伤伴股骨干骨折20只,对照组为单纯股骨干骨折20只,制作股骨干骨折与脊髓损伤的模型。术后分别在1周、2周、3周、4周给予X线摄影,及每周处死实验组和对照组大鼠各5只,截取骨痂,用免疫组织化学染色方法检测血管内皮生长因子(VEGF)表达。结果 X线摄影显示,实验组骨痂形成较对照组骨痂的形成在同一时间点早且数量增多。免疫组织化学结果显示,实验组术后1⁴周骨痂中VEGF阳性细胞百分率分别高于同一时间点对照组(P<0.05)。结论脊髓损伤对骨折愈合有明显的促进作用,这与脊髓损伤后VEGF表达水平升高有关。     

神经生长因子对失神经状态下大鼠骨折愈合的影响?

目的:探讨神经生长因子(NGF)对脊髓完全横断伴胫骨骨折大鼠骨折愈合的影响.方法:120只SD大鼠随机分成3组:胫骨骨折组(F组,n=40),T10 脊髓完全性损伤合并胫骨骨折组(FS组,n=40),T10 脊髓完全性损伤合并胫骨骨折应用神经生长因子治疗组(FSN组,n=40).FS组及FSN组大鼠建立T10脊髓完全横断伴胫骨骨折模型,F组制备单纯胫骨骨折,伤后第4周对3组大鼠骨折断端行断层CT扫描,测量骨折断端最大横截面并计算骨痂灰度值;行生物力学三点弯曲试验;行骨组织形态计量学检查;骨密度测定;骨痂组织形态学观察;免疫组化法测定骨痂组织中骨钙素(OCN)的表达;观察3组大鼠骨痂中成骨细胞的超微结构变化;Western印迹检测Ⅰ、Ⅱ型胶原的表达.结果:F组骨痂断面最大直径明显小于FS组(P＜0.01)和FSN组(P＜0.05),FSN组小于FS组(P＜0.05);骨痂灰度值结果类似.三点折弯试验、骨计量学观察均发现F组各项生物力学参数优于其他2组(P＜0.05);FSN组优于FS组(P＜0.05).F组大鼠胫骨骨痂中OCN及Ⅰ型胶原蛋白表达明显高于其他2组(P＜0.05),FSN组高于FS 组(P＜0.05);而F组骨痂Ⅱ型胶原蛋白的表达明显低于FS组及FSN(P＜0.05),FSN组亦高于FS组(P＜0.05).形态学及超微结构观察见F组骨折愈合最佳,FSN组优于FS组.结论:失神经营养会影响骨折断端的骨化;神经生长因子对失神经状态下骨折断端的骨化有促进作用.     

不同程度脑损伤并骨折大鼠血清中神经肽Y对骨折愈合的影响

目的利用分级液压脑损伤骨折模型研究脑损伤后大鼠血清中神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)的变化及对脑损伤后骨折愈合加速的影响。方法 SD大鼠随机分成三组,空白对照组10只,单纯骨折组48只,脑损伤骨折组144只,脑损伤按轻重分成轻、中、重三组,通过侧方液压脑损伤及开放骨折建立模型,损伤后适时取SD大鼠血清及骨折标本,通过放射免疫荧光、X片及骨折直径及生物特性测量了解血清中NPY的含量、骨折愈合情况、骨痂直径及抗应力的大小。结果单纯骨折组、脑损伤骨折组血清中NPY含量升高,尤以中、重度脑损伤骨折组明显;单纯骨折于第1天达到高峰,为(10.96±4.48)ng/ml,随后下降,而脑损伤骨折组于第3天达到高峰,分别为(22.27±6.48)ng/ml、(34.94±7.12)ng/ml、(56.63±12.36)ng/ml,随后下降,除轻度脑损伤骨折组伤后3h及伤后14天,轻、中、重度脑损伤骨折组血清中NPY含量明显高于单纯骨折组(P<0.05),且时间长;脑损伤骨折组骨痂无论在影像学、直径大小及骨痂抗应力均大于单纯骨折组,术后3、4周X片、骨痂直径及抗应力重度组明显大于中度、轻度及单纯骨折组,而中度组大于轻度组且骨痂致密差异有显著性(P<0.05)。结论本实验结论与临床观察一致,脑损伤骨折大鼠骨折愈合快于单纯骨折,且脑损伤越重血清中NPY含量越高,骨折愈合越快,骨痂量越大,愈合时间短,推测脑损伤轻重可能与NPY含量及骨折愈合速度相关。     

脑损伤并胫骨骨折大鼠血清中神经生长因子的表达意义

目的:探讨脑损伤并胫骨骨折大鼠血清中神经生长因子(NGF)的水平变化及其与预后的关系。方法:①实验分组:雄性Wistar大鼠64只,体质量450～550 g,随机数字表法分为单纯骨折组(n=32),脑损伤合并骨折组(n=32);②实验方法:麻醉后显露大鼠右颅顶骨,中线旁2 mm处开直径5 mm骨窗,液压打击致中度脑损伤,并制备大鼠胫骨骨折模型,其中单纯骨折组头部只做颅骨开窗。采用双抗体夹心-ELISA法进行伤后第1天、7天、14天及21天血清NGF的检测,并对混合损伤组大鼠的骨折临床愈合时间与其伤后第1天的血清NGF水平进行相关分析。结果:混合损伤组的骨折临床愈合时间(62.88±5.99)d比单纯组(82.47±3.07)d的短(t=-16.473,P<0.001),而且混合损伤组大鼠的骨折临床愈合时间与它们伤后第1天的血清NGF水平高度负相关(Pearson相关系数=-0.966,P<0.001)。结论:NGF在合并脑外伤的骨折大鼠血清中呈高表达,并与患者的预后高度相关。     

三七总皂甙对实验性骨折愈合过程中低氧诱导因子-1αmRNA表达的影响

目的:探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在骨折愈合过程中的表达及三七总皂甙(total saponins of panax notoginseng,PNS)的干预作用。方法:在36只雄性SD大鼠左桡骨形成骨折模型,后随机分成对照组和PNS组,予以PNS100mg/kg/d腹腔内注射,对照组予以等量盐水。在骨折后7,14,21天X线观察骨折愈合及骨痂形成情况;HE染色了解骨痂形成情况;RT-PCR方法检测骨痂组织HIF-1αmRNA的表达。结果:X线显示PNS组骨痂形成明显加快,HE染色显示骨折断端成骨细胞数目及骨痂增多;对照组HIF-1αmRNA7天表达较低、14天达峰值、21天下降;PNS组7天、14天时点表达高于对照组(P0.05),21天低于对照组P0.05)。结论:PNS可上调骨折愈合过程中骨痂组织HIF-1α的表达,改善骨折部位的血供,促进骨折愈合。     

卵巢切除小鼠骨折早期愈合延迟机制的初步探讨

目的观察卵巢切除小鼠的骨折早期愈合情况,并探讨其可能的机制。方法 40只6周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为卵巢切除组(OVX组)和假手术组,每组20只。于OVX组小鼠卵巢切除术后4周,两组分别建立右侧股骨骨折模型。建模后2周,X线摄片观察骨折愈合情况;M icro-CT测定骨痂体积和骨密度,观察血管灌注后骨折部位血管化情况并测定血管体积和血管体积分数;制作骨组织标本,HE染色光学显微镜观察骨折愈合进程,免疫组织化学染色观察骨痂组织血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果 X线片观察和骨折标本组织学检查显示:OVX组小鼠早期骨折愈合明显较假手术组延迟。M icro-CT检测结果显示:与假手术组比较,OVX组骨痂体积较小,骨密度较低,血管灌注后骨折部位新生血管少且血管体积和血管体积分数较小,且差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色观察发现OVX组骨痂组织中VEGF表达明显少于假手术组。结论卵巢切除后股骨骨折小鼠的骨折早期愈合明显延迟,可能与骨痂组织新生血管减少有关。     

天鹅型记忆接骨器对骨折愈合影响的超微结构研究

目的：对比天鹅型记忆接骨器（SMC）与加压接骨折（CP）固定下骨折愈合的组织学和细胞超微结构变化,探讨SMC内固定下骨折愈合的特点。方法：25只家犬两侧股骨中段横型截骨,左侧以SMC内固定,右侧以CP固定,术后1、2、4、8、12周行X线摄片、光镜、电镜观察。结果：X线显示SMC组内固定后4周,骨折初步愈合,CP组在8周骨折愈合,SMC组愈合过程中未见明显的外骨痂及骨质疏松。骨折后2、4周时,SMC组骨痂内成骨细胞和成软骨细胞在数量上高于CP组,功能活跃。8周时SMC组骨折端已出现板样骨替代,CP组发生骨性连接,板下已出现骨吸收腔和退变相骨细胞。12周时SMC侧骨皮质出现部分吸收腔,CP组板下骨皮质吸腔更趋明显。结论：与CP相比,SMC内固定可使骨折端稳定的同时,又可对骨折断端施加主动的、持续的轴向应力刺激、有利于促进骨折愈合和骨改建。     

ULTRASTRUCTURAL INVESTIGATION OF EXPERIMENTAL FRACTIJRE HEALING L* ELECTRON MICROSCOPIC OBSERVATION OF CELLULAR ACTIVITY

Cellular activity in rabbit radius fractures is studied and observed by elcctron micro- scope. After fract,urc, polymorphonuclear neu- trophils, macrophages, fibrobIasts, chondroblasts and osteoblasts and osteoeytes appear at the fracture site in suc.cession. They represenL Lhe folloiving stages of fraet,ure healing: inflamma- tory stage, debridement stage, fibrous caUus stage, primary bony callus stage and secondary bony callus stage. Fibroblasts particjpate in and possess the action of osteagcnesis.     

基于PI3K/Akt通路探究下调miR-206对肋骨骨折模型大鼠骨折愈合的影响

目的 观察miR-206与PI3K/Akt在大鼠肋骨骨折愈合中的作用。 方法 32只SPF级SD大鼠进行肋骨骨折的造模,后随机分为miR-206组和对照组,每组16只。14 d和28 d每组各处死8只大鼠,行micro-CT检查,观察骨折愈合情况,qPCR检测PI3K和Akt的表达水平,western blot检测PI3K和Akt蛋白水平。 结果 术后大鼠基本状况良好且均造模成功。micro-CT三维重建分析表明,各组大鼠的骨痂总体积、骨性骨痂体积、骨骼体积比均随时间逐渐增加,在14、28 d时,miR-206组在骨痂形成相关指标与对照组的差异有统计学意义(P＜0.05)。qPCR和Western blot结果显示在14、28 d时,miR-206抑制剂注射能明显升高PI3K和AKt的表达量和蛋白水平,差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 下调miR-206能够激活PI3K/Akt通路促进肋骨骨折部位的骨痂生长和骨化过程,从而促进骨折愈合。     

颅脑损伤合并股骨闭合性骨折大鼠模型的建立及骨痂中降钙素基因相关肽的表达及意义

目的制备稳定的颅脑损伤合并股骨闭合性骨折大鼠模型,研究颅脑损伤后SD大鼠股骨折愈合过程中骨痂降钙素基因相关肽（cGRP）的表达,分析脑外伤对大鼠股骨折愈合速度的影响机制。方法48只雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠随机分成二组：颅脑损伤合并股骨折组;单纯股骨折组,分别于造模后7d、14d、28d分批处死动物,截取骨折端长约10mm左右股骨骨痂标本,应用HE染色,免疫组化法,观察CGRP表达的动态变化。结果免疫组化法测定骨折位点骨痂中CGRP平均阳性细胞百分率：脑外伤合并股骨折组在7d、14d与单纯骨折组比较差异有统计学意义。28d二组比较差异无统计学意义。结论脑外伤后合并股骨折,骨折端CGRP在骨折愈合的早中期表达增高,有利于多种细胞趋化、增殖与分化,促进成骨。     

大鼠失神经骨折愈合中骨痂体积与生物力学强度的相关性分析

目的 探讨失神经骨折愈合中病理性骨痂的体积与力学强度的相关性.方法 Wistar大鼠90只随机分为3组,每组30只:运动神经(前根)切断组、感觉神经(后根)切断组、前后根切断组,均选择性切断一侧L4-L6神经根.所有大鼠于神经根切断侧胫骨造成横行骨折,髓钉固定.30 d后取大鼠患侧胫骨,测胫骨近端骨密度、胫骨湿重称量、在X线片上测量骨痂宽度、胫骨进行生物力学拉伸测试,SPSS统计数据.结果 患侧胫骨近端骨密度三组间比较无统计学差异(P>0.05),病理性骨痂其体积与生物力学强度呈负相关(P<0.05),以涉及感觉神经(后根)损伤组尤甚(P<0.05).结论 失神经骨折愈合中所形成的病理性骨痂其体积与生物力学强度呈负相关,感觉神经纤维对骨折愈合的影响较运动神经纤维显著.     

Antioxidation of melatonin against spinal cord injury in rats

Background The iron catalyzed lipid peroxidation plays an important role in the autodestruction of the injured spinal cord. This study was to detect the antioxidation of melatonin against spinal cord injury(SCI) in rats.Methods Sity Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups: group A (n=15) for laminectomyanly, group B (n=15) for laminectomy with SCI, group C (n = 15) for SCI and intraperitoneal injection of a bolus of 100 mg/kg melatonin, and group D (n = 15 ) for SCI and intraperitoneal injection of saline containing 5% ethanol. The SCI of animal model was made using modified Allen‘s method on T12. Six rats of each group were sacrificed 4 hours after injury, and the levels of free iron and malondialdehyde (MDA) of the involved spinal cord segments were measured by the bleomycin assay and thiobarbituric acid (TBA) separately. Functional recovery of the spinal cord was assessed by Modified Tarlov‘s scale and the inclined plane method at 1, 3, 7, 14, 21 days after SCI. The histologic changes of the damaged spinal cord were also examined at 7 days after SCI.Results After SCI, the levels of free iron and MDA were increased significantly and the modified Tarlov‘s score and inclined plane angle decreased significantly in groups B and D. In group C, the Tarlov‘s score and inclined plane angle were increased significantly at 7, 14 and 21 days, with histological improvement.Conclusion: Melatonin can reduce the level of lipid peroxidation and prevent damage to the spinal cord of rat.     

相对数统计方法在大鼠骨痂力学强度评测中的应用

目的探讨骨痂生物力学测试资料更好的数据统计分析方式。方法将实验大鼠70只随机分成实验组与对照组各35只,两组大鼠均造成随机一侧胫骨中上段横形骨折,髓钉固定。实验组切断胫骨骨折侧的坐骨神经,对照组只暴露坐骨神经不切断。术后30d处死全部大鼠,取出所有大鼠双侧胫骨,所有健、患侧胫骨均进行生物力学拉伸测试,得出最大载荷,用健侧载荷数据除以同一大鼠患侧载荷数据,得到一相对数。分别用患侧载荷的绝对数数据和健/患侧载荷的相对数数据进行统计分析。结果用患侧绝对数数据进行统计,两组数据无显著差异(P=0.076),用健/患侧载荷相对数数据进行统计,两组数据有显著差异(P=0.000)。结论在骨痂生物力学测试数据分析比较中,用相对数数据进行统计更能有效地消除个体差异,使结果更加客观。