重组人促红细胞生成素对脑缺血再灌注小鼠海马TNF-α表达的影响

 目的 探讨重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对脑缺血再灌注小鼠海马肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的影响。方法 将96只昆明小鼠随机分为：假手术（Sham）组、rHuEPO治疗组和缺血再灌注（I/R）组,每组32只。每组依据缺血后再灌注不同时间点再分为6 h、24 h、3 d及7 d 4个小组。应用免疫组化和Western blot检测各组小鼠海马TNF-α蛋白的表达,RT-PCR方法检测TNF-α mRNA表达的变化。结果 免疫组化和Western blot检测结果发现,I/R组TNF-α蛋白表达量明显高于Sham组和rHuEPO治疗组（P均<0.05）;RT-PCR结果发现,I/R组TNF-α mRNA表达量明显高于Sham组和rHuEPO治疗组（P<0.05）。结论 rHuEPO可通过减少TNF-α的表达参与脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。     

脑缺血肺损伤大鼠肺组织TNF-α的表达变化

目的 探讨脑缺血后损伤肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达变化。方法 成年SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血肺损伤组(n=13),其中每组5只用于免疫组化检测TNF-α在肺的定位分布,余8只分别用于RT-PCR和Western blot检测TNF-α mRNA和蛋白水平变化。术后24 h取肺组织行RT-PCR、术后48 h取肺组织行Western blot检测肺组织TNF-α mRNA和蛋白表达水平;术后3 d取肺组织行免疫组织化学染色检测肺组织内TNF-α的定位分布。结果 肺组织TNF-α mRNA和蛋白表达在脑缺血肺组织明显增加,与假手术组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。TNF-α主要分布在气道上皮细胞和巨噬样细胞。结论 脑缺血后损伤肺组织TNF-α表达上调,提示其可能与脑缺血肺损伤炎症反应有关。     

米诺环素抑制星形胶质细胞活化改善老年小鼠70%肝切除手术后远期学习和记忆能力

目的:评价米诺环素对老年C57BL/6小鼠术后30 d学习和记忆能力的影响,并探讨星形胶质细胞在此过程中的作用?方法:45只雄性C57BL/6老年小鼠随机分为3组(每组15只):假手术组,仅接受皮肤切开手术;手术组,该组小鼠接受70%肝切除手术但不接受药物治疗;米诺环素组,术后每天腹腔注射45 mg/kg米诺环素,连续30 d,每组15只?利用Morris水迷宫测试其逃避潜伏期和游泳距离以判断小鼠术后学习记忆能力的改变,行为学测试结束后即刻取小鼠海马组织,利用real-time PCR 检测炎性细胞因子TNF-α和IL-6 mRNA的相对表达量,利用Western blot检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙接头蛋白抗体-1(Iba-1)的表达水平,另外取部分海马组织制作冰冻切片样本行免疫组织化学检测?结果:Morris 水迷宫测试显示手术组小鼠逃避潜伏期和游泳距离均延长,显著长于假手术组和米诺环素组(P < 0.05);手术组小鼠海马组织TNF-α mRNA表达水平显著高于假手术组和米诺环素组(P < 0.05),米诺环素组小鼠TNF-α mRNA的表达显著少于手术组(P < 0.05);手术组和米诺环素组小鼠IL-6 mRNA的表达水平显著高于假手术组(P < 0.001),米诺环素组小鼠IL-6 mRNA的表达显著少于手术组(P < 0.001);手术组和米诺环素组GFAP的表达显著高于假手术组(P < 0.001),米诺华素组GFAP的表达水平显著少于手术组(P < 0.001),3组Iba-1的表达水平无差异(P > 0.05);海马组织免疫组化星形胶质细胞的变化与GFAP的变化一致?结论:海马组织星形胶质细胞活化可能与部分肝切除老年小鼠远期学习和记忆能力下降有关,米诺环素可能通过降低TNF-α和IL-6 mRNA的表达,抑制星形胶质细胞的活化改善老年小鼠术后远期学习和记忆能力?     

亚低温治疗对脑出血模型大鼠动物行为学的影响及其机制

目的 探讨亚低温治疗对脑出血大鼠脑组织炎症反应及血管新生的影响,分析其改善脑出血大鼠动物行为学的可能作用机制。方法 将120只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血组、亚低温组,40只/组。脑出血组、亚低温组：采用立体定向注射自体血的方法建立脑出血动物模型;假手术组：注入等体积生理盐水。亚低温组建模成功后15 min给予亚低温（30~32 ℃）干预8 h后复温（37~38 ℃）,假手术组、脑出血组体温控制37~38 ℃。治疗2、4、7、14及21 d,采用Longa评分法、平衡木评分法、Berderson评分法评估大鼠动物行为学;采用免疫组化法检测大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、兔核转录因子-κB（NF-κB）蛋白表达;采用RT-PCR法检测缺氧诱导因子-1α（HIF1-α）、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达。结果 治疗2、4、7、14、21 d,脑 出血组、亚低温组脑出血大鼠动物行为学评分高于假手术组（P<0.05,P<0.01）,脑组织TNF-α、NF-κB蛋白表达高于假手术组（P<0.01）,脑组织HIF1-α mRNA、VEGF mRNA表达高于假手术组（P<0.01）;亚低温组脑出血大鼠动物行为学评分低于脑出血组（P<0.05）,脑组织TNF-α、NF-κB蛋白表达低于脑出血组（P<0.01）,脑组织HIF1-α mRNA、VEGF mRNA表达高于脑出血组（P<0.05,P<0.01）。结论 亚低温治疗能够改善脑出血模型大鼠动物行为学,可能与拮抗脑组织炎症反应、促进血管新生等因素有关。     

脑缺血肺损伤大鼠肺组织trkB的表达变化

目的 观察脑缺血肺损伤大鼠肺组织酪氨酸蛋白激酶B（trkB）的表达变化, 并探讨其与肺损伤的关系。 方法 成年SD大鼠分为假手术组和脑缺血肺损伤组,每组13只动物。术后3 d处死大鼠,每组中5只取肺组织进行免疫组化染色、8只取肺组织进行RT-PCR和Western blot,检测trkB蛋白在肺组织的分布、trkB mRNA和蛋白的表达变化。 结果 trkB分布于气管上皮和平滑肌。与假手术组相比,trkB mRNA和蛋白在损伤肺组织表达增加（P<0.05）。 结论 脑缺血肺损伤大鼠肺组织trkB表达水平明显上调,提示其与脑缺血肺损伤有关。     

细胞间黏附分子-1和肿瘤坏死因子α在心肌肥厚实验中的意义

目的：①从转录和翻译两个水平研究细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）在大鼠肥厚心肌中和在正常大鼠心肌中的表达,并作比较,探讨其表达规律和与心肌肥厚的关系,初步阐述心肌肥厚发生的可能机制.②应用血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）后,重复观察上述指标,探讨ACEI逆转心肌肥厚的可能机制. 方法：取SD大鼠30只,雌雄不限,随机分为心肌肥厚组、心肌肥厚＋药物组和假手术组3组,每组10只.手术后按要求饲养8周后处死,取心肌标本,行ICAM-1、TNF-α的免疫组化染色;应用RT-PCR法行ICAM-1 mRNA、TNF-α mRNA检测,并进行统计学方法比较. 结果：ICAM-1、TNF-α免疫组化结果：心肌肥厚组心肌中2种蛋白表达明显增多,其次是心肌肥厚＋药物组;假手术组表达量最少.3组标本ICAM-1mRNA、TNF-α mRNA的RT-PCR检测结果：心肌肥厚组表达量最高,其次是心肌肥厚＋药物组,而假手术组表达量最少. 结论：ICAM-1、TNF-α参与心肌肥厚的发生和发展.ACEI抑制心肌肥厚的机制与减少ICAM-1、TNF-α的表达有关.     

TNF-α在实验性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用

目的探讨TNF-α抑制剂在大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期脑损伤中的保护作用及其机制。方法健康成年雄性SD大鼠48只,体质量250～300 g,按随机数字表法分为假手术组、SAH组、安慰剂组和TNF-α抑制剂组。采用经视交叉前池注血法建立SAH模型,各组于处理后24 h,对实验动物临床行为进行评估;应用免疫组化方法检测大鼠脑皮层TNF-α表达;应用Western blot方法检测大鼠脑皮层MMP-9蛋白表达。结果免疫组化显示:SAH组大鼠皮层神经元TNF-α表达明显升高,显著高于假手术组;TNF-α抑制剂组TNF-α表达明显下降(P<0.01)。Western blot检测结果显示:假手术组大鼠MMP-9蛋白表达较低[(2.03±0.21)%];SAH组大鼠皮层MMP-9含量明显升高[(98.92±8.33)%,P<0.01];TNF-α抑制剂组MMP-9蛋白表达降低[(52.12±6.25)%],与SAH组相比差异有统计学意义(P<0.01)。临床行为评估显示:TNF-α抑制剂组大鼠临床行为得到明显改善(P<0.01)。结论大鼠SAH后早期脑损伤过程中TNF-α通过调节MMP-9蛋白表达参与SAH后早期脑损伤的病理过程。TNF-α抑制剂能够改善大鼠临床行为,对早期脑损伤发挥保护作用。     

原花青素对小鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护机制

目的：探讨原花青素对小鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护机制。方法：120只昆明小鼠随机分成正常对照组、假手术组、14 d 模型组、14 d 治疗组、28 d 模型组、28 d 治疗组;采用小鼠双侧颈总动脉结扎缺血15 min、再灌注15 min,反复3次构建脑缺血再灌注损伤模型;各治疗组在处死前7 d 连续给予松树皮提取物灌胃治疗,其余各组灌注等量生理盐水,小鼠处死后取各组海马组织用 ELISA 法测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白介素-6（IL-6）的表达,westen blot 法检测海马内核因子-κB（NF-κB）的表达。结果：各治疗组脑组织 TNF-α、IL-6及 NF-κB 蛋白表达水平与同时点模型组比较均明显降低,差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论：原花青素对脑缺血再灌注损伤小鼠神经保护机制可能是通过降低 NF-κB、TNF-α以及 IL-6表达而实现。     

保护素DX 对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探讨保护素DX（PDX）对小鼠脓毒症所致急性肺损伤的保护作用。方法 45 只健康雄性昆明 小鼠利用随机数字表随机分为假手术组、脓毒症组和PDX 干预组，每组15 只，复制小鼠脓毒症模型，术毕 60 min 后，PDX 干预组小鼠腹腔注射1 μg 的PDX，假手术组和脓毒症组则给予等量的生理盐水，建模24 h 后， 处死各组小鼠，观察各组小鼠肺组织病理学变化，检测各组小鼠肺组织中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介 素6（IL-6）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平，Western blot 检 测肺组织胞核中核因子κB（NF-κB）和胞浆中核因子κB 抑制蛋白α 抗原（IκB-α）蛋白表达。结果 与 假手术组比较，脓毒症组和PDX 干预组小鼠肺组织损伤组织学评分均升高，与脓毒症组比较，PDX 干预组 小鼠肺组织损伤组织学评分则降低，差异有统计学意义（F =253.323，P =0.000）；与假手术组比较，脓毒症组和 PDX 干预组小鼠肺组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD 及MDA 水平均升高，差异有统计学意义（P <0.05）， 与脓毒症组比较，PDX 干预组小鼠肺组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD 及MDA 水平均降低，差异有统计 学意义（P <0.05）；与假手术组比较，脓毒症组和PDX 干预组小鼠肺组织胞核中NF-κB 蛋白相对表达量均 升高，而胞浆中IκB-α 蛋白相对表达量均降低，差异有统计学意义（P <0.05）；与脓毒症组比较，PDX 干 预组小鼠肺组织胞核中NF-κB 蛋白相对表达量均降低，而胞浆中IκB-α 蛋白相对表达量均升高，差异有 统计学意义（P <0.05）。结论 PDX 可减轻脓毒症所致小鼠肺组织损伤，其机制与减轻氧化应激反应及通过 调控NF-κB/IκB-α 通路而抑制炎症因子释放有关。     

急性心肌缺血再灌注损伤大鼠海马长时程增强及TNF-α,IL-1β表达的变化

目的观察急性心肌缺血再灌注损伤对海马长时程增强(LTP)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达的变化影响。方法SD大鼠42只,随机分为对照组(A组)6只、假手术组(B组)18只和急性心肌缺血再灌注组(C组)18只。B、C组手术后1,3,7d进行LTP测试分为B1、B3、B7亚组和C1、C3、C7亚组,每亚组6只。B组大鼠仅挂线不结扎左冠状动脉。在不同的时间点测定LTP,RT-PCR检测海马内的血红素氧合酶-1(HO-1)、TNF-α、IL-1β mRNA表达,Western blotting测定TNF-α、IL-1β蛋白的表达。结果与A组相比,C组HO-1 mRNA水平均升高;SOD活性降低、MDA含量增高(P<0.05)。与A、B1、B3组相比,C1、C3组TNF-α mRNA和IL-1β mRNA表达增多;与A、B1组相比,C1组IL-1β蛋白的表达增多(P<0.05)。与A、B1、B3组相比,C1、C3组LTP受到抑制(P<0.05)。结论急性心肌缺血再灌注损伤大鼠1,3d存在短暂认知功能改变,可能与海马内TNF-α mRNA、IL-1β mRNA升高和IL-1β蛋白表达增多有关。     

创伤后应激障碍大鼠海马分子伴侣葡萄糖调节蛋白94表达的变化

目的观察创伤后应激障碍(PTSD)模型大鼠海马神经元分子伴侣葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的表达变化。方法建立单一延长应激(SPS)大鼠模型,随机分为SPS刺激后第7天组、第14天组及正常对照组,采用免疫组化、Western blot、RT-PCR方法检测各组海马神经元GRP94的表达。结果免疫组化及Western blot结果均显示:造模第7天海马神经元GRP94蛋白表达较正常对照组明显增加(P<0.05),而第14天明显降低(P<0.05)。RT-PCR结果显示:造模第7天海马神经元GRP94 mRNA水平明显增加(P<0.05),第14天则明显降低。结论 PTSD大鼠海马GRP94蛋白水平发生了变化,为进一步研究内质网径路细胞凋亡提供了实验基础。     

盐酸椒苯酮胺对耳蜗缺血再灌注后白介素-1β、肿瘤坏死因子-α mRNA及Fas 蛋白表达的影响

目的探讨豚鼠耳蜗白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA、Fas蛋白表达与耳蜗缺血再灌注损伤关系及盐酸
椒苯酮胺（PPTA）对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤保护机制。方法豚鼠64只随机分为4组,每组16只,分别为正常组、空白对照组、
缺血再灌注对照组和缺血再灌注PPTA组,每组随机选6只用于RT-PCR检测,剩余10只用于免疫组化。微血管夹夹闭双侧椎
动脉及右侧颈总动脉1 h松开动脉夹以制造耳蜗缺血模型,缺血再灌注PPTA组于缺血1 h再灌注后立即经股静脉注射PPTA
（10 mg/kg）,缺血再灌注对照组注射等量生理盐水,24 h后取标本。用RT-PCR法检测IL-1β和TNF-α的mRNA的表达。结果
缺血再灌注对照组耳蜗组织IL-1β、TNF-α mRNA表达量显著高于正常组和空白对照组（P<0.001）;缺血再灌注PPTA组耳蜗组
织IL-1β mRNA、TNF-α mRNA表达量显著低于缺血再灌注对照组（P<0.001）;缺血再灌注组Corti器、螺旋神经节和血管纹Fas
表达阳性,积分光密度值（IOD）值较其它三组明显增高（P<0.05）,缺血再灌注PPTA干预组IOD值与正常组及空白对照组差异
无统计学意义（P>0.05）。结论PPTA可抑制缺血再灌注耳蜗各部位IL-1β、TNF-α mRNA、Fas蛋白表达;PPTA可能通过抑制炎
性反应及抑制细胞凋亡实现对耳蜗缺血再灌注损伤的拮抗作用。
     

ZLN005通过上调PGC-1α表达诱导巨噬细胞的M2型分化减轻脓毒症引起的急性肺损伤

目的:在脓毒症诱导的急性肺损伤(ALI)中探究小分子化合物ZLN005的作用及相关机制.方法:利用盲肠结扎穿孔(CLP)术建立小鼠脓毒症诱导的急性肺损伤模型,并按处理方式的不同将小鼠分为四组,假手术(Sham)组,ZLN005组、CLP组及CLP+ZLN005组;应用RT-PCR、免疫荧光染色及Western blot实验检测各组小鼠肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 共激活因子-1α(PGC-1α)的mRNA及蛋白表达水平;ELISA检测肺泡支气管灌洗液(BALF)中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的含量;HE染色观察各组小鼠肺组织病理组织学损伤;统计学方法分析CLP造模7d后各组小鼠的存活率;体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,转染靶向沉默PGC-1α 的siRNA,RT-PCR及Western blot检测转染效率;利用LPS诱导脓毒症ALI的体外细胞模型,并将RAW264.7细胞分为五组,对照组(NC),ZLN005组,LPS组,LPS+ZLN005+si-NC和LPS+ZLN005+si-PGC-1α;RT-PCR检测各组细胞中M1型巨噬细胞标记物iNOS与MHC-Ⅱ与M2型巨噬细胞标记物Arg1与CD206的mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞中AMPK-α的磷酸化水平(p-AMPK-α/AMPK-α)及线粒体生物发生中关键蛋白NRF1、NRF2和mtTFA的蛋白表达.结果:成功建立小鼠脓毒症诱导的急性肺损伤模型;其中,与Sham组比较,ZLN005组与CLP+ZLN005组肺组织中PGC-1α 的表达水平显著升高(P<0.05),CLP组中明显降低(P<0.05),但CLP+ZLN005组又较CLP组中PGC-1α的表达显著升高(P<0.05);各组小鼠的BALF、HE染色及术后7d的存活率结果显示,与CLP组和CLP+ZLN005组中BALF中促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达与肺组织病理损伤水平较Sham组或ZLN005组明显升高(P<0.05),抑炎因子IL-10及术后7d的存活率却显著降低(P<0.05),而CLP+ZLN005组又较CLP组明显改善(P<0.05);在体外细胞实验中,与NC组相比,PGC-1α 蛋白表达在ZLN005组与LPS+ZLN005组明显升高(P<0.05),LPS组显著降低(P<0.05);转染si-PGC-1α 后RAW264.7巨噬细胞中PGC-1的表达被显著抑制(P<0.05);与NC组相比,LPS组、ZLN005+LPS+si-NC组与ZLN005+LPS+si-PGC-1α 组中M1型巨噬细胞标记物的mRNA表达水平明显升高(P<0.05),同时ZLN005+LPS+si-NC组的M2型巨噬细胞标记物的mRNA表达也显著升高(P<0.05),但AMPK-α 的磷酸化水平与线粒体生物发生中关键蛋白的表达均显著下降(P<0.05);而ZLN005+LPS+si-NC组又较LPS组与ZLN005+LPS+si-PGC-1α 中M1型标记物表达显著升高(P<0.05),但M2型标记物与AMPK-α 的磷酸化水平与线粒体生发蛋白的蛋白表达均显著降低(P<0.05).结论:ZLN005能促进PGC-1α 的表达以促进M2巨噬细胞的极化来保护脓毒症引起的肺损伤,而其相关作用机制可能与ZLN005通过AMP K信号通路促进线粒体生物发生相关.     

噻唑烷二酮类药物对急性脑损伤后IL-1β、TNF-α表达的影响

目的 探讨过氧化物酶增值物激活受体-γ（PPAR-γ）激活剂噻唑烷二酮类药物对创伤性脑损伤（TBI）大鼠模型脑组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素（IL-1β）表达的影响。方法 采用改进的Feeney自由落体脑损伤装置制作TBI大鼠模型,分别给予生理盐水或pioglitazone,并与假手术组大鼠比较,7d后收集脑组织,采用RT-PCR或Western Blotting法检测各组PPAR-γmRNA、TNF-α及IL-1β的mRNA及蛋白表达差异。结果 创伤性脑损伤大鼠脑组织与对照组及假手术组相比, PPAR-γmRNA表达显著增强（P<0.05）,同时TNF-α、IL-1β蛋白及mRNA表达也显著上调（P<0.05）,而应用pioglitazone治疗进一步增加了大鼠脑组织PPAR-γ的表达,并有效抑制TNF-α及IL-1β的上调表达（P<0.05）。结论 PPAR-γ激动剂吡格列酮对减轻创伤性脑损伤后持续存在的炎症反应具有一定的保护作用,其机制可能与降低脑组织中TNF-α及IL-1β等炎性细胞因子的含量有关。     

辣椒素抑制Lewis 肺癌小鼠血管生成的实验研究

目的 观察辣椒素对Lewis 肺癌小鼠血管生成的影响,并探讨其可能的机制。方法 复制Lewis肺癌小鼠模型,随机分为模型组,辣椒素低、中、高剂量组,以及阳性对照组5 组,每组9 只。各组连续用药20 d,于末次给药后处死全部小鼠,比较各组小鼠瘤体积、瘤重、抑瘤率及微血管密度（MVD）。采用免疫组织化学法检测CD34 阳性细胞率;采用Western blot 和实时荧光定量聚合酶链反应检测缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白和mRNA 表达的变化。结果 与模型组比较,辣椒素抑制Lewis 肺癌小鼠瘤体积、瘤重、MVD 和CD34 阳性细胞率（P <0.05）;与模型组比较,辣椒素抑制Lewis 肺癌小鼠HIF-1α、VEGF 蛋白和mRNA 的表达（P <0.05）。结论 辣椒素抑制Lewis 肺癌小鼠肿瘤生长和血管生成,其机制可能与抑制HIF-1α 和VEGF 的表达有关。     

反式白藜芦醇对Aβ25-35致痴呆大鼠海马caspase12的影响

目的观察反式白藜芦醇(TR)对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)致痴呆大鼠海马caspase12 mRNA和蛋白表达的影响,补充说明TR抗痴呆的作用机制。方法大鼠随机分为五组:假手术组、阳性对照组、模型组、低剂量组、高剂量组,每组9只。在大鼠海马给予Aβ25-35造模结束后连续灌胃15 d每日1次,阳性对照组给予多奈哌齐1mg/kg,低剂量给予TR10mg/kg,高剂量TR40mg/kg,假手术组和模型组给予同体积的生理盐水。第15天时处死大鼠,免疫组化及Western blot检测海马caspase12蛋白表达,实时定量PCR检测海马caspase12 mRNA的表达。结果大鼠注射Aβ25-35后,模型组海马caspase12蛋白和mRNA表达明显高于假手术组(P<0.01)。TR剂量依赖性地降低了大鼠caspase12蛋白表达和mRNA表达(P<0.05)。结论 TR抗Aβ25-35致痴呆大鼠的作用机制与抑制海马caspase12基因表达有关。     

多奈哌齐对血管性痴呆小鼠学习记忆及海马磷脂酰肌醇3激酶表达的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)小鼠学习记忆能力及对海马磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达的调节作用。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型。90只雄性昆明小鼠随机分为3组,假手术组(30只)、模型组(30只)及盐酸多奈哌齐组(30只)。在术后第29天、第30天,经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化和Western blot方法检测各组小鼠海马PI3K的表达变化。结果盐酸多奈哌齐治疗组小鼠的学习和记忆成绩明显高于VD模型组小鼠(P<0.05);免疫组化和Western blot结果发现,盐酸多奈哌齐治疗组小鼠海马CAl区PI3K蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于VD模型组(P<0.05)。结论盐酸多奈哌齐能够上调VD小鼠PI3K的表达,有助于改善学习和记忆功能。     

BDNF抗体封闭对大鼠脑缺血损伤肺组织IL-6表达的影响

目的 探讨脑缺血肺损伤后脑源性神经营养因子(BDNF)是否能调节损伤肺组织炎症因子白细胞介素-6(IL-6)的表达。方法 将大鼠随机分为假手术组、脑缺血肺损伤组、脑缺血肺损伤给予BDNF抗体封闭组(BDNF抗体封闭组)。每组13只大鼠,于BDNF抗体干预后3 d处死,5只用于免疫组化,8只用于RT-PCR和Western blot,检测BDNF封闭对IL-6定位与表达量的影响。结果 免疫组化染色显示,气道上皮细胞和巨噬细胞可见IL-6表达,胞浆染色为主。RT-PCR和Western blot检测显示BDNF抗体封闭后3 d,肺组织IL-6 mRNA和蛋白表达下降,与脑缺血肺损伤组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 BDNF抗体封闭减少脑缺血肺组织IL-6表达,提示BDNF可能通过调节IL-6参与脑缺血肺水肿。     

手术创伤引起的海马炎症反应对老年小鼠术后认知功能的影响

目的:探讨手术创伤引起的海马炎症反应对老年小鼠术后认知功能的影响。方法:96只雄性昆明小鼠随机分为对照组(NS组)、麻醉组(Ane组)、假手术组(Sham组)和手术组(Sur组)4组(n均为24)。使用Morris水迷宫进行认知功能测试。测试完毕后,采用Western blot和Real Time RT-PCR检测海马IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白及mRNA表达水平。结果:术后第1、3、7天,4组动物目标象限停留时间百分比及1min内穿台次数差异有统计学意义(P均<0.05),且Sur组低于其他3组;4组动物海马IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白及mRNA的表达差异有统计学意义(P均<0.001),Sur组较其他3组表达上调。结论:手术创伤能够引起老年小鼠术后认知功能障碍,其机制可能与术后海马组织中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达上调有关。     

重症急性胰腺炎急性肾损伤机制探讨

目的：通过体内体外观察大鼠和大鼠正常肾细胞(NRK)在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）状态下凋亡和分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)的情况，探讨SAP时急性肾功能损伤的机制。方法: SD大鼠54只随机分成SAP组（n=30）和假手术组(n=24)，SAP组以5%牛磺酸胆酸钠溶液胆管逆行注射诱导模型，术后6、12、24h采集血清、腹水。ELISA法检测血清、腹水TNF-α水平，TUNEL法检测肾组织凋亡率，RT-PCR检测肾组织TNF-αmRNA表达。将24h采集的血清和腹水处理后，体外培养NRK细胞，MTT法检测细胞活性，检测培养液TNF-α水平，流式细胞术测定NRK细胞凋亡率，检测NRK细胞TNF-αmRNA表达。 结果: SAP组6、12、24h血清和腹水TNF-α水平呈进行性升高，各时段比较差异有统计学意义(P<0.05)，较假手术组在各时段明显升高(P<0.01)。SAP组肾组织TNF-α　mRNA表达较假手术组明显上调。SAP组凋亡指数在6、12、24h时分别为（18.6±5.6）%、（18.1±4.7）%、（25.3±5.1）%，假手术组分别为（19.4±3.1）%、（13.5±2.8）%、（14.6±5.5）%， 24?h时SAP组凋亡指数明显高于假手术组（P<0.05）。SAP组24h肾组织TNF-α mRNA的表达较假手术组明显上调。经SAP组大鼠血清和腹水处理后，NRK细胞活性低于假手术组。经SAP组大鼠血清和腹水处理24h后，NRK细胞培养液中TNF-α水平较假手术组明显升高（P<0.01），NRK细胞TNF-αmRNA表达上调，显著高于假手术组，NRK细胞凋亡率均较假手术组明显升高（P<0.05）。结论: SAP时肾损害明显，其损伤可能与肾细胞过度凋亡有关，而肾细胞过度凋亡与血清和腹水TNF-α升高及肾细胞过多分泌TNF-α有关，SAP腹水对肾的直接损伤可能比血清明显。