HPLC-ELSD法测定栀子金花丸中知母皂苷BⅡ含量

目的 建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定栀子金花丸中知母皂苷BⅡ的含量.方法 采用Diamonsil-C8色谱柱,柱温为30℃;以乙腈-水（体积比21∶79）为流动相,流速为1.0 mL·min-1;蒸发光散射检测器检测,漂移管温度为80℃,载气压力206.85 kPa.结果 知母皂苷BⅡ质量浓度在8.2～82....     

亳州栽培知母最佳采收期研究

目的考察亳州栽培知母的最佳采收时间。方法采用高效液相色谱-紫外光谱法和高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定不同采收期知母中芒果苷和知母皂苷BⅡ的含量。测定芒果苷的流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(15∶85),流速为0.8ml/min,柱温25℃,检测波长为317nm;测定知母皂苷BⅡ的流动相为乙腈-水(25∶75),流速为1.0ml/min,柱温25℃;蒸发光散射检测器的漂移管温度为60℃,载气压力30N/cm2。结果不同采收期知母药材中芒果苷含量为1.10%~5.28%,知母皂苷BⅡ含量为0.22%~8.68%。结论 11月份是亳州栽培知母的最佳采收期,其芒果苷和知母皂苷含量最高。     

中药知母质量控制方法研究

目的 建立HPLC-DAD同时测定中药知母中芒果苷、知母皂苷BⅡ的方法.方法 采用HPLC法,色谱柱为Hypersil GOLD色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),乙腈-0.01%磷酸水梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长191 nm和258 nm,柱温:30℃.结果 芒果苷的线性范围在2.944～6.624 μg,r=0.999 8;平均回收率为101.06%,RSD=1.61%(n=6).知母皂苷BⅡ的线性范围在18.080～40.680μg,r=0.9994;平均回收率为103.43%,RSD=1.43%(n=6).结论 3批样品测定结果表明,该方法简便准确,可用于知母中芒果苷、知母皂苷BⅡ2种成分的含量测定.     

HPLC-ELSD法测定天冬总呋甾皂苷中AR-Ⅰ的含量

目的:测定天冬总呋甾皂苷中AR-Ⅰ的含量.方法:采用高效液相色谱法,色谱条件:Diamonsil C18(5 mm×250mm,5 μm)色谱柱;流动相:CH 3CN-H2O(36:64);流速:0.8 ml·min1;进样量20μl;柱温:室温.以ELSD为检测器,气化温度40℃,气体(N2)压力2.0×105Pa.结果:AR Ⅰ在0.094～0.940 0 g·L-1范围内呈良好线性关系(r=0.999 2),检测具有较高的灵敏度和稳定性,平均回收率为101.3%(n=6),RSD=2.36%.结论:HPLC ELSD为天冬呋甾皂苷的测定提供了简便实用的分析方法.     

知母饮片炮制前后黄酮类和皂苷类成分变化研究

目的:测定知母饮片炮制前后3个黄酮类和2个皂苷类成分变化。方法:采用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)测定3个黄酮类成分,色谱柱为岛津Intetsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%冰醋酸,梯度洗脱,进样量20μL,流速1.0 mL/min,柱温30℃;采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定2个皂苷类成分,色谱柱为岛津Intetsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%冰醋酸,梯度洗脱,进样量10μL,流速1.0 mL/min,氮气流量2.5 mL/min,蒸发温度80℃。结果:知母饮片炮制后知母皂苷BⅡ、新芒果苷、芒果苷含量下降,知母皂苷AⅢ含量上升,异芒果苷含量相对稳定。结论:知母饮片炮制后部分知母皂苷BⅡ会转化成知母皂苷AⅢ,新芒果苷、芒果苷会转化成其他成分,异芒果苷结构相对稳定,不易转化成其他成分。     

知母皂苷BⅡ对照品的快速制备研究

目的 从知母药材中快速分离制备知母皂苷BⅡ对照品。方法 知母药材粗粉用80%乙醇提取，经大孔树脂D-101柱吸附，以30%乙醇洗脱，得到知母总皂苷。用制备RP-HPLC对总皂苷进行分离纯化，采用柱后分流，ELSD同时检测，收集含高质量分数知母皂苷BⅡ的组分。结果 制备产品经化学方法和¹³C-NMR鉴定； HPLC-ELSD检测，质量分数大于99%。结论 该制备方法简单，重复性好，效率较高，所得化合物质量分数高，可用于知母皂苷BⅡ对照品的制备。     

电化学检测器的研制及用以测定生物胺的初步实验

研制一种用于高压液相色谱(HPLC)的电化学检测器(ECD)。用该检测器检测了从色谱柱分离出的4种生物胺:肾上腺素(EA)、去甲肾上腺索(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5HT)。结果显示:在0.25～2.25ng范围内线性响应良好;峰高重复性相对偏差2.3％(对1.0ng NE)。EA、NE、DA和5-HT的检测限分别为0.06、0.06,0.07,0.10 ng(信噪比为2.5:1)。     

高效液相色谱-电化学检测测定红葡萄酒中白藜芦醇含量

目的建立一种灵敏、快速的反相高效液相色谱电化学检测方法(RP-HPLC-ECD),测定红葡萄酒中的顺式和反式白藜芦醇.方法色谱条件经过优化,用C18柱(250×4.6mm,5μm)作为分析柱,流动相为20mM柠檬酸钠(pH4.0):甲醇(50:50),柱温为35℃,流速为1ml/min,电化学检测器工作电压为0.75V.结果最低检测限为5 ng/mL,线性范围为10～50000 ng/mL,顺式和反式白藜芦醇重复5次进样的相对标准差(RSD)分别为3.52%和3.16%.结论该方法简便、快速、重复性好,适用于食品及生物样品中白藜芦醇含量的分析.     

HPLC-MSn法分析知母中的皂苷类成分

目的： 应用HPLC-MSⁿ方法分析知母中的甾体皂苷成分。方法： 采用Hedera ODS-2色谱柱(250 mm×4.6 mm ID,5 μm),流动相：乙腈-水梯度洗脱,ELSD检测器,ESI离子源,正负离子模式下采集数据。结果： 根据负离子模式下的准离子峰和正离子模式下的二、三级质谱裂解规律,结合文献并与部分对照品比较,鉴定了15个甾体皂苷。结论： 该法选择性强、灵敏度高、操作简便,适用于知母甾体皂苷类化合物的定性分析。     

天冬化学成分的研究（Ⅱ）

目的:研究天冬的化学成分.方法:经大孔树脂、反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和C-18反相硅胶柱色谱等各种色谱方法分离天冬中的化学成分,通过理化性质和现代波谱技术(MS、1HNMR、13CNMR)确定所分离化合物的结构.结果:从其乙醇提取物中分离得到5个化合物,经鉴定分别为薯蓣皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅰ),异菝葜皂苷元(Ⅱ),26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-呋甾-3β,22,26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅲ),26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-呋甾-5-烯-3β,2α,26-三醇-3-O-[α-α-吡喃鼠李糖基(1→2)]-[α-α-吡喃鼠李糖基-(1→4)]- β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅳ),26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-呋甾-3β,26-二醇-22-甲氧基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅴ).结论:化合物Ⅰ～Ⅴ均为首次从天冬中得到.     

知母HPLC-UVD-ELSD指纹图谱的建立与多特征成分含量测定的质控方法研究

目的?建立知母指纹图谱结合多特征成分含量测定的HPLC-UVD-ELSD分析方法,并应用于多批次市售药材的质量控制。方法?采用UltimateTMXB-C₁₈色谱柱（4.6?mm×250?mm,4.5?μm）,检测波长258?nm,ELSD漂移管温度65?℃,载气流速1.0?L/min,建立知母指纹图谱与主含黄酮及皂苷类成分含量测定的HPLC-UVD-ELSD分析方法,运用相似度软件结合化学计量学分析对多批次药材进行质量评价并同时完成多特征成分的含量测定。结果?建立了高效、快捷的知母HPLC-UVD-ELSD指纹图谱与多特征成分含量测定的方法;18批市售药材的指纹图谱相似度在0.786~0.999,并指认了10个色谱峰。化学计量学结果表明造成18批药材差异较大的成分为新芒果苷、知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ;进而建立了同时测定新芒果苷、芒果苷、知母皂苷N、知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ 5个成分含量的方法,结果表明知母中主含知母皂苷BⅡ。结论?建立的指纹图谱结合多特征成分含量测定的HPLC-UVD-ELSD分析方法,更全面而准确地描述了知母药材化学成分整体轮廓与各类特征成分含量贡献,为提升市售知母药材的质量控制方法奠定了基础。      

双参平肺方中药味配伍对知母芒果苷提取率的影响与成分作用探讨

目的 探究双参平肺方中不同配伍对知母芒果苷提取率的影响,并以成分配伍研究影响复方提取率的作用机理。方法 根据处方中药含有成分的类别进行处方拆方、配伍,分为知母单煎组、处方合煎组、知母-皂苷类中药复方组、知母-酚酸类中药复方组、知母-碱基类中药复方组。以知母中芒果苷提取率为指标,分析配伍对芒果苷提取率的影响;根据拆方结果,对显著影响芒果苷提取率的桑白皮,以其所含的生物碱成分1-脱氧野尻霉素（1-Deoxynojirimycin,DNJ）、氨基酸等代表性成分进行不同配伍,考察桑白皮中成分对知母中芒果苷的影响,探讨芒果苷提取率的影响机理。结果 知母单煎、处方合煎、知母-皂苷类中药复方、知母-酚酸类中药复方、知母-碱基类中药复方配伍的提取率分别为97.33%、47.03%、94.08%、57.53%、34.31%;进一步拆分表明,处方中桑白皮与知母配伍时对芒果苷的提取率影响最为明显,其中桑白皮生物碱部位、DNJ、甘氨酸、β-丙氨酸溶液分别与知母合煎,芒果苷的提取率分别为16.64%、28.13%、40.75%、48.56%。结论 双参平肺方煎煮提取时主要是桑白皮、地骨皮影响了芒果苷的提取率,推测桑白皮中生物碱及氨基酸与芒果苷形成缔合物,团聚分子量增大,影响了芒果苷煎出时的成分溶出。      

加速溶剂萃取-HPLC-TOF/MS法同时测定重楼中6种甾体皂苷类成分

目的引入加速溶剂萃取(accelerated solvent extraction, ASE)技术,并结合HPLC-TOF/MS法同时测定重楼中6种甾体皂苷类成分的含量。方法加速溶剂萃取仪在120℃、1.17 MPa (1 700 psi)压力下,用70%的乙醇静态萃取样品6 min;6种重楼皂苷的含量用HPLC-TOF/MS同时测定,色谱柱: MGC18柱(3.0 mm×100 mm,3.0 μm);流动相: 乙腈与0.1%(V/V)甲酸水,梯度洗脱;流速: 0.8 ml/min;柱温: 25℃;进样量: 3 μl;离子源: ESI正离子模式;雾化气压力: 275.85 kPa(40 psi);干燥气流速: 10 L/min;干燥气温度: 350℃。结果重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ、薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷的线性范围(μg/ml)分别为: 0.500 0~50.00(r=0.999 8)、0.422 3~42.23(r=0.999 7)、0.612 0~61.20(r=0.999 9)、0.714 0~71.40(r=0.999 5)、0.448 0~44.80(r=0.999 9)和0.436 0~43.60(r=0.999 7);各成分的平均回收率(n=6)分别为98.9%、98.0%、102.5%、101.9%、103.1%和97.9%。结论该法溶剂消耗少、耗时短、便于自动化,可实现高通量分析,可用于重楼中皂苷类成分的含量测定。     

大鼠口服知母皂苷后入血成分研究

目的 分析大鼠口服知母总皂后吸收入血的情况,为进一步研究知母总皂苷的药理作用提供化学物质依据。方法给大鼠灌胃知母皂苷2．5g／kg,于不同时间采集血清样品,用电喷雾质谱（ESI—MS）检测知母皂苷吸收入血成分。结果通过比较给药前后的TOF总离子流图,对给药后血浆中特征峰的保留时间及相关化合物离子峰进行了比较分析,在血浆中发现了两个原型皂苷。结论大鼠口服知母总皂苷后,知母皂苷B-Ⅱ和知母皂苷B-Ⅲ被吸收入血。     

联合检测血清胃蛋白酶原和抗HpIgG抗体在消化溃疡诊断中的价值探讨

目的：探讨联合检测血清胃蛋白酶原和抗 Hp IgG 抗体在消化溃疡诊断中的价值。方法方便选取2010年4月—2015年8月在该院消化科就诊的消化性溃疡患者150例,纳入病例组,另外选择同期在该院门诊行健康体检者100各作为健康对照组。对比两组对象血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ比值及Hp阳性情况。比较消化溃疡患者中Hp阳性者与阴性者的血清PGⅠ、PGⅡ及PGⅠ/PGⅡ比值情况。结果病例组血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGⅠ/PGⅡ值分别为(181.36±20.72)ng/mL、(24.81±9.65)ng/mL、(7.62±1.15)ng/mL,对照组分别为(53.67±19.64)ng/mL、(13.97±6.83)ng/mL、(4.57±1.46)ng/mL,病例组血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGⅠ/PGⅡ值明显高于对照组差异有统计学意义(P﹤0.05)。病例组、对照组Hp阳性率分别为77.33%、24.00%,病例组Hp阳性率明显高于对照组(P﹤0.05)。 Hp阳性患者血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGⅠ/PGⅡ值分别为(217.82±29.47)ng/mL、(28.53±10.81)ng/mL、(8.91±1.20),Hp阴性患者分别为(68.35±20.54)ng/mL、(17.02±7.15)ng/mL、(5.76±1.38)ng/mL, Hp阳性患者血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGⅠ/PGⅡ值明显高于阴性患者差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论检测血清PG及Hp IgG抗体能对消化溃疡进行早期筛查,当两者出现异常时再行胃镜检查以明确诊断,从而一定程度提高了体检患者的检查依从性。     

高效液相色谱法测定丹参类药材中四种脂溶性成分含量

目的建立高效液相色谱法同时测定丹参、甘肃丹参中丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮和隐丹参酮含量的方法,评价药材质量。方法色谱柱：C18色谱柱（4．6mm×250mm,5um）,流动相：V（甲醇）：V（水）：80：20;流速：1．0mL／min。结果丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮和隐丹参酮分别在17-200、10-124、11-134ng和4—49ng范围内线性关系良好,平均回收率分别为101．91％、98．83％、103．10％、99．95％。结论方法简便、准确、分离效果好,可作为丹参类药材含量的定量方法。     

血清CEA、CA199、CA72-4及胃蛋白酶原联合检测对胃癌的诊断价值

目的 探讨联合检测血清癌胚抗原(CEA)、糖蛋白抗原199(CA199)、糖蛋白抗原72-4(CA72-4)、胃蛋白酶原及其亚群PG(PG-Ⅰ、P4G- Ⅰ/PG- Ⅱ)对胃癌诊断的临床价值.方法 采用化学发光微粒子免疫检测方法测定75例胃癌患者、75例良性胃病患者以及30例健康人血清中CEA、CA199、CA72-4...     

两组食管癌放疗,化疗及热疗(三联)的热剂量比较

目的：对食管癌三联治疗两种方案的７５例及三联后手术７例，共８２例进行热剂量分析，看影响局控的因素。方法：第Ⅰ组，５Ｇｙ／周一次，共６次，热疗：４３．５℃，４５ｍｉｎ，化疗ＤＤＰ１．５ｍｇ／ｋｇ体重，ＰＹＭ２０ｍｇ，每周一次，共６次。Ⅱ组，３．６Ｇｙ／周二次，共１０次，热疗４３～４４℃，４５ｍｉｎ，周一次，化疗同Ⅰ组，共３次。以２年无临床复发，或因远处转移死亡，或术后标本Ⅲ级损伤为局控，２年内复发及标本损伤Ⅱ级的为未控。结果：Ⅰ组按计划完成治疗的局控率为６４％（７／１１），拖延疗期在７周以上或放疗量偏低的局控率为２２％（２／９）。第Ⅱ组只有３例未能按期完成治疗。热疗次数似与局部控制率无关。Ⅰ，Ⅱ组局控率Ｔ９０４３．０～４３．９℃组分别为５３％（１０／１９），４４％（１２／２７），Ｔ９０＞４４℃组为１７％（２／３），８９％（１６／１８）。两组Ｔ９０平均值分布与局控率呈典型的Ｓ状曲线，两组曲线相近。Ⅱ组Ｔ９０≥４３℃的病例５年存活率达３４．２％（１２／３５），而Ｔ９０≤４２．９℃的为０％（０／１３，Ｐ＜０．０５）。结论：虽然只测量肿瘤表面的两点温度，但由此得出的热剂量与局控率呈正相关。提高Ｔ９０使其＞４３℃是提高?     

射频热凝毁损治疗三叉神经痛

目的探讨经皮穿刺射频温控热凝治疗三叉神经痛的疗效。方法对住院的105例三叉神经痛患者采用经皮穿刺半月神经节或侧人路行上颌神经、下颌神经射频温控热凝毁损治疗,温度用60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃各1次,每次60s。结果105例中,Ⅰ支12例,Ⅱ支45例,Ⅲ支23例,Ⅱ、Ⅲ支同时受累25例。治疗后3个月评定疗效.优效84例（80.0%）,良效15例（14.2%）,3例经2次治疗后获良效（2.9%）;无效者3例（2.9%）,包括虽经2次治疗仍有部分疼痛者。总有效率为97.1%。除原疼痛部位有不同程度的感觉减退外,无其他严重、永久并发症。结论采用经皮穿刺射频温控热凝治疗三叉神经痛操作安全,治疗效果良好,具有较高临床实用价值