Chymase抑制对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨Chymase抑制对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响机制。方法 24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组,n=7)、糖尿病组(DM组,n=7)、应用糜酶(Chymase)抑制剂的糖尿病组(DM+Chy-I组,n=10)。采用链脲佐菌素(streptozocin,STZ)单次腹腔注射方法建立糖尿病大鼠模型。其中DM+Chy-I组给予糜酶抑制剂[Suc-Val-Pro-Phe P-(OPh)2,1mg/(kg·d)],12周后处死,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞的凋亡指数(AI),Western blot法检测心肌caspase-3蛋白的表达,免疫组化检测心肌组织Chymase蛋白表达,采用黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)测定心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活力,TBA(thiobarbituric acid)法测定丙二醛(MDA)含量。结果与NC组相比,DM组大鼠心肌细胞AI明显升高;caspase-3蛋白表达明显增加;MDA含量升高,SOD活力降低(P<0.05);与DM组相比,Chymase抑制剂使心肌细胞AI明显降低;caspase-3蛋白表达减少;MDA含量降低,SOD活力升高(P<0.05)。结论 Chymase抑制剂减少了糖尿病心肌病大鼠心肌细胞的凋亡可能是通过抑制caspase-3的表达和氧化应激损伤。     

Neuregulin-1β对阿霉素致心衰大鼠心肌细胞凋亡及bax、bcl-2蛋白表达的干预效应

目的 观察阿霉素所致心衰大鼠心肌细胞凋亡和bax、bcl-2蛋白表达情况及Neuregulin-1β(NRG-1β)的干预作用.方法 60只雄性SD大鼠,体质量200-250 g,分成3组:①模型组,即阿霉素心肌病组(ADR-DCM,n=20),阿霉素2 mg/kg,尾静脉注射,每周1次,连续注射8周;②阿霉素心肌病+NRG-1治疗组(NRG,n=20),在注射ADR后8周后即丌始给予NRG-1β 10μg(kg·d)尾静脉注射,连续5 d;③正常对照组(n=20),用2 ml/kg生理盐水,尾静脉注射,连续8周.9周后取心肌行HE染色病理观察,TUNEL法观察心肌细胞凋亡,Western blot检测bax、bcl-2蛋白的表达.结果 模型组与NRG治疗组心肌细胞凋亡指数较正常对照组显著增高(P<0.05),与模型组相比,NRG治疗组凋亡指数显著降低(P<0.05).与模型组比较,NRG治疗组bcl-2蛋白表达明显上调(P<0.05),bax蛋白表达明显下调(P<0.05).结论 NRG-1β能够抑制阿霉索所致心衰大鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与bcl-2蛋白表达上调、bax蛋白表达下调、bcl-2/bax值上调有关.     

亚硒酸钠联合高压氧对创伤性颅脑损伤大鼠模型治疗作用的机制研究

目的探讨亚硒酸钠联合高压氧对颅脑损伤大鼠模型治疗作用的机制。方法 30只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组(脑损伤组)、联合组(亚硒酸钠联合高压氧处理组)。然后建立大鼠闭合性颅脑损伤模型,以NSS评分将损伤程度统一为中度颅脑损伤程度。有高压氧的组别伤后0.5、24.0、48.0h做高压氧治疗,各组均以72h统一留取标本,组织匀浆检测MDA、SOD以及GSH的含量;提取组织总RNA,real-time PCR检测bcl-2以及caspase-3mRNA的表达;免疫组化检测皮质区和海马区的caspase-3表达及分布。结果 (1)与正常组相比,模型组MDA含量大量增加(P<0.05),SOD及GSH的含量均显著降低(P<0.05);与模型组相比联合组的大鼠MDA含量均显著下降,SOD和GSH含量均显著升高(P<0.05)。(2)与正常组相比,模型组bcl-2的mRNA表达明显降低(P<0.05),而caspase-3的mRNA则显著增加(P<0.05);与模型组相比,联合组的大鼠均提高了bcl-2的mRNA表达(P<0.05),降低了caspase-3的mRNA的表达(P<0.05)。免疫组化结果也显示在皮质区和海马区联合组的大鼠显著减少了caspase-3的阳性表达。结论亚硒酸钠联合高压氧治疗创伤性颅脑损伤(TBI)是通过降低氧自由基的生成,增加自由基清除剂的产生和凋亡抑制因子bcl-2的表达以及抑制细胞凋亡蛋白caspase-3的表达而实现的。     

骨髓间充质干细胞移植对急性期脑梗死大鼠的干预作用

目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对急性期脑梗死大鼠的干预作用。方法按随机化原则将50只脑梗死大鼠模型随机分为BMSCs移植组、上清液移植组各22只及对照组6只。BMSCs组在脑梗死大鼠模型成功后3 h经静脉注入BMSCs 1 ml,上清液组注入上清液1 ml,对照组注入磷酸盐缓冲液(PBS)1 ml。术后28 d检测PBMSc在脑内的存活转化情况。分别于0、7、14及28 d观察记录各组大鼠的神经损伤严重程度评分(NSS)。结果 28 d后,BMSCs脑梗死灶边缘可见少量BrdU阳性细胞表达神经元特异性烯醇化酶(NSE),而上清液组及对照组病灶边缘则无NSE;细胞移植后,各组神经功能均有不同程度的恢复;从第7天起,BMSCs移植组NSS评分明显低于上清液组及对照组(P<0.05),而后2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论骨髓间充质干细胞移植入急性脑梗死大鼠体内后,可存活、移行至梗死灶周围,并分化为神经元细胞,而且能够减轻脑梗死大鼠的神经损伤程度。     

经颈内动脉注射pLXSN-bcl-2对脑局灶性缺血再灌注大鼠脑组织的影响

目的:研究经颈内动脉注射pLXSN-bcl-2对大鼠脑缺血再灌注损伤后的影响。方法:51只健康成年Wistar大鼠随机分对照组、空质粒组、bcl-2组,每组分缺血再灌注9,24h两小组。采用线栓法制作大脑中动脉梗死模型,2h后实现再灌注。3h后经颈内动脉注射质粒pLXSN,pLXSN-bcl-2。检测缺血再灌注24h后大鼠脑梗死体积,及各组大鼠脑内bcl-2、caspase-3的表达情况和神经细胞凋亡情况。结果:bcl-2组缺血再灌注24h的脑梗死体积最小;bcl-2组在缺血再灌注9,24h后bcl-2阳性表达明显升高;缺血再灌注24h caspase-3蛋白表达及凋亡细胞数明显降低,缺血再灌注9h后与其他组之间无差异。结论:脑缺血再灌注3h后经颈内动脉注射pLXSN-bcl-2可以增加bcl-2在脑内的表达,并在缺血再灌注24h后通过抑制caspase-3的表达,抑制神经细胞凋亡,减少脑梗死体积。而在缺血再灌注9h尚未表现出明显的神经保护作用。     

来曲唑对大鼠子宫内膜异位症的作用及对异位内膜细胞凋亡的影响

目的:初步探讨第3 代芳香化酶抑制剂来曲唑治疗大鼠子宫内膜异位症(endometriosis, EM) 模型异位病灶的作用机制, 及对异位内膜细胞凋亡的影响。方法:用自体子宫内膜移植方法建立大鼠EM 模型, 选择建模成功的大鼠随机分为来曲唑组(n=15) 和对照组(n=15), 比较治疗前后两组大鼠异位病灶的体积、外观变化、病理组织学差异, 并采用免疫组织化学法和RT-PCR 法检测异位病灶中P450 芳香化酶(P450arom)、环氧合酶-2(COX-2)、bcl-2及bax 的表达。结果:与对照组比较, 来曲唑组异位病灶体积明显缩小(P<0.05), 异位病灶中P450arom 和COX-2的蛋白及mRNA 表达均明显减低(P<0.05)。P450arom 与COX-2 在异位病灶中的表达呈正相关(r=0.943, P<0.001;r=0.913, P<0.001)。异位病灶中bcl-2 的蛋白及mRNA 表达较对照组均明显减低(P<0.05), bax 的蛋白及mRNA 表达较对照组明显增高(P<0.05), 来曲唑组bax/bcl-2 的比值较对照组显著增加(P<0.05)。结论:来曲唑可明显缩小异位病灶体积, 可能通过降低异位病灶局部P450arom, COX-2 的表达, 抑制雌激素生成及异位病灶的增殖, 从而促进异位病灶细胞凋亡, 达到治疗目的。     

miR-34a/SIRT1通路在七氟醚麻醉致老年大鼠神经损伤中的作用

目的：探讨miR-34a/沉默信息调节蛋白1(miR-34a/SIRT1)通路在七氟醚麻醉致老年大鼠神经损伤中的作用。方法：将24只雄性老年大鼠随机分为对照组、模型组、miR-34a抑制剂(antagomiR)组及antagomiR-NC组，每组6只；造模前，antagomiR组及antagomiR-NC组分别注射20μmol/L的miR-34a antagomiR或miR-34a antagomiR-NC试剂(5ml/kg),对照组和模型组注射等体积的生理盐水，连续注射5d;除对照组外其余组均建立七氟醚麻醉致神经损伤大鼠模型；采用Morris水迷宫测定大鼠认知功能，qRT-PCR检测海马组织中miR-34a、SIRT1表达水平，Western blot检测相关蛋白表达。结果：与对照组比，模型组的逃避潜伏期、miR-34a、p53、caspase-3、Bax水平均显著增加(P<0.05),穿越平台次数、Bcl-2及SIRT1水平均显著降低(P<0.05);与模型组比，antagomiR组的逃避潜伏期、miR-34a、p53、caspase-3、Bax水平均明显降低(P<...     

骨髓基质细胞与bcl-2基因对脑缺血大鼠疗效以及IGF-1表达影响的研究

目的:探讨联合应用骨髓基质细胞与bcl-2基因治疗大鼠脑缺血的疗效,以及对IGF-1表达的影响。方法:40只Wistar大鼠采用改良栓线法制成大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型,随机分成空白对照组、bcl-2组、MSC组和MSC bcl-2组,每组10只。各组于再灌注后1、3、7及14d进行神经功能评分;于3d及14d分别处死5只大鼠,采用免疫组化法检测BrdU、IGF-1及bcl-2蛋白的表达;通过TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:再灌注7、14d后各治疗组神经功能评分明显低于空白对照组(P<0.05),而14d时MSC bcl-2组神经功能评分明显低于bcl-2组及MSC组(P<0.05);MSC bcl-2组梗死半球BrdU阳性细胞明显多于MSC组(P<0.05);MSC bcl-2组梗死灶侧皮层表达IGF-1和bcl-2的阳性细胞明显多于bcl-2组及MSC组(P<0.05);MSC bcl-2组凋亡细胞明显少于bcl-2组及MSCs组(P<0.05)。结论:bcl-2基因可抑制MSCs移植后的凋亡,增加其治疗脑缺血的疗效,二者联合应用可产生叠加效应;增加IGF-1的表达可能是MSC治疗脑缺血的机制之一。     

糖尿病结肠动力障碍大鼠远端结肠平滑肌细胞bax、bcl-2及caspase-3的表达

目的:探讨糖尿病(DM)结肠动力障碍大鼠远端结肠平滑肌细胞凋亡基因的表达。方法:雄性SD大鼠18只应用链脲佐菌素40mg/kg尾静脉注射后成功建立DM结肠动力障碍大鼠模型,分为模型6周和10周组;另18只分为正常对照6周和10周组,各组9只大鼠。应用实时荧光定量PCR检测各组大鼠远端结肠平滑肌细胞的bax、bcl-2和caspase-3mRNA表达,采用免疫组化SP法检测其蛋白的表达。结果:不同组别和作用时间各组大鼠远端结肠平滑肌细胞bax、bcl-2、caspase-3mRNA和蛋白的表达差异均有统计学意义(P均<0.001),模型组与同一时间点正常对照组以及模型10周组与6周组大鼠比较,远端结肠平滑肌细胞bax和caspase-3mRNA和蛋白的表达增强,bcl-2mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05)。结论:远端结肠平滑肌细胞凋亡基因bax、bcl-2及caspase-3表达的改变可能是DM大鼠结肠动力障碍发病机制之一。     

白藜芦醇通过调节SIRT1/AMPK信号通路对复发大鼠MCAO的神经保护作用机制研究

目的 探讨白藜芦醇(resveratrol, RSV)通过调节SIRT1/AMPK信号通路对复发大鼠缺血性脑卒中的神经保护作用机制研究。方法 成年雄性Wistar大鼠38只,采用微型动脉瘤夹夹闭法制作单次大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO,n=14)和双次MCAO模型(n=16),随机分为RSV治疗组和实验对照组,术后3天测定各组大鼠脑梗死体积并评价行为缺损的变化。另外8只大鼠为假手术组,随机分为RSV治疗组(n=5)和对照组(n=3)。采用Western blot法测定大鼠的SIRT1表达、AMPK、phospho-AMPK表达,去乙酰化荧光检测试剂盒进行SIRT1活性检测,ATP生物发光检测试剂盒测定ATP水平。结果 与对照组比较,RSV显著改善神经行为功能(P<0.05),降低单次及双次MCAO大鼠脑梗死体积(P<0.05),提高缺血脑组织SIRT1及AMPK活性(P<0.05),SIRT1蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,RSV喂养3天后假手术组、单次MCAO组和双次MCAO组大鼠缺血脑组织ATP含量均显著增高(P<0.05),RSV使组织内ATP含量升高1.5~2.0倍。结论 RSV对大鼠单次和双次MCAO模型均具有神经保护作用,RSV的神经保护作用与提高SIRT1及AMPK活性和增加脑缺血时能量需求有关。     

实验性视网膜脱离时神经生长因子对凋亡相关蛋白表达的影响

目的 研究神经生长因子(NGF)对实验性视网膜脱离(RD)后视网膜细胞凋亡相关基因c-fos、bcl-2、Fas-L与caspase-3表达的影响.方法 20只大鼠右眼和左眼分别设为实验组(NGF组)和实验对照组(PBS组),另设立正常对照2只.通过在视网膜下注射透明质酸钠的方法建立视网膜脱离(RD)动物模型后,右眼在玻璃体腔内注射NGF 5 μg/次(1 g/L),每4 d注射1次,作为NGF组;左眼注射PBS作为实验对照组.两组在建立模型后1.5、3、6、12 h和1、2、4、8、16、32 d分别取眼球,采用免疫组化学法对视网膜细胞的bcl-2、Fas-L、caspase-3和c-fos进行标记.结果 Fas-L、bcl-2、caspase-3和c-fos在实验各组均有表达,并随着时间的变化而变化.NGF组的各基因蛋白表达与PBS组相比差异有统计学意义(P<0.05).NGF组的c-fos蛋白表达与PBS组相比,表达高峰时间延迟,且表达量下降(P<0.05).结论 实验性RD后给予外源性NGF能促进bcl-2基因的表达,抑制c-fos基因和Fas-L的表达,影响caspase-3的激活和表达,从而抑制RD后视网膜细胞凋亡的发生.     

异丙酚对新生鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的:研究异丙酚对新生鼠海马神经细胞凋亡的影响.方法:新生7d SD大鼠42只随机分为三组(n=14只).雌雄各半:对照组(A组)和异丙酚单次注射组(B组)腹腔注射生理盐水7.5ml/kg,1次/d,连续6d;第7 d分别注射生理盐水7.5ml/kg 和异丙酚75 mg/kg;异丙酚多次注射组(C组)腹腔注射异丙酚75 mg/kg,1次/d,连续7 d.于第7 d给药后3 h,各组抽取2只断尾取血测定血糖;给药后5 h,各组随机抽取6只用免疫组化方法测定海马CAl区caspase-3表达水平.其余6只3周后处死.在光镜下观察海马CAl区锥体细胞的形态及缺失情况.结果:与对照组(A组)比较,异丙酚单次注射组(B组)和异丙酚多次注射组(C组)caspase-3表达均明显增高(P<0.05),海马CAl区单位面积锥体细胞不同程度减少(P<0.05),C组较B组上述改变更为显著(P相似文献   

重复异丙酚麻醉对新生大鼠海马细胞凋亡及远期学习记忆能力的影响

目的：探讨重复异丙酚麻醉对新生大鼠海马细胞凋亡及远期学习记忆能力的影响。方法： 清洁级SD大鼠45只,7 d龄,雄性,随机分为3组（n=15）：对照组（C组）腹腔注射脂肪乳剂7.5 mL/kg,每天1次,连续7 d;反复注射异丙酚组（P1组）腹腔注射异丙酚75 mg/kg,每天1次,连续7 d;单次注射异丙酚组（P2组）腹腔注射脂肪乳剂7.5 mL/kg,每天1次,连续6 d,第7天注射异丙酚75 mg/kg。每组取5只大鼠,于苏醒后即刻抽取动脉血样行血气分析。异丙酚给药结束后2周时采用Morris水迷宫实验测试大鼠的学习记忆功能,之后处死大鼠,免疫组织化学法检测大鼠海马神经元特异性核蛋白（neuron-specific nucleoprotein,NeuN）的表达,Western blot检测大鼠海马组织中caspase-3的表达。结果： 3组大鼠动脉血气指标差异无统计学意义。与C组相比,P1组大鼠第5天寻找平台潜伏期延长、寻找平台路径增长,第6天目标象限探索时间缩短、穿环次数减少（P<0.05）;而P2组的寻找平台潜伏期、寻找平台路径长度、探索时间、穿环次数与C组相比差异无统计学意义。与C组相比,P1组大鼠海马组织内NeuN阳性细胞数量减少、caspase 3表达增强;P2组大鼠海马内NeuN阳性细胞数量、caspase-3的表达与C组相比差异无统计学意义。结论： 重复异丙酚麻醉可降低新生大鼠的远期学习记忆能力,可能与其增加海马内的细胞凋亡有关,单次异丙酚麻醉对新生大鼠的海马细胞凋亡及远期学习记忆能力没有显著影响。     

6-羟多巴损伤黑质导致迷走神经背核乙酰胆碱转移酶和酪氨酸羟化酶表达变化

目的观察6-羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损伤大鼠黑质后迷走神经背核(dorsal motor nucleus ofthe vagus,10N)中乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)含量的变化。方法 16只SD大鼠根据随机数字表分为6-OHDA大鼠组和对照组。6-OHDA大鼠组双侧黑质(substantia nigra,SN)内注射6-OHDA,对照组双侧SN内注射等体积的生理盐水。6周后断头取脑,Nissl染色观察SN和10N中的Nissl小体,免疫荧光和免疫印迹检测SN内TH和10N内ChAT与TH的表达。结果与对照组比较,6-OHDA大鼠组SN内TH阳性细胞数量从(54±5)个减少至(13±2)个(P<0.05),蛋白表达水平从0.62±0.13降低至0.34±0.11(P<0.05),10N中ChAT阳性细胞数量从(37±3)个减少到(26±5)个(P<0.05),TH阳性细胞数量从(6±3)个增加到(13±2)个(P<0.05),背侧延髓内ChAT的蛋白表达水平从0.07±0.02下降至0.05±0.02(P<0.05),TH蛋白表达水平从0.08±0.05增高到0.13±0.04(P<0.05)。结论 6-OHDA大鼠10N中ChAT和TH表达变化可能与帕金森病患者的胃排空障碍存在一定的联系。     

60Co照射后豚鼠内耳前庭终器毛细胞损伤及凋亡的实验研究

目的:探讨60 Co照射后豚鼠内耳前庭终器损伤与caspase-3、bax及bcl-2表达的关系及照射后前庭功能的损伤情况。方法:将白化豚鼠40只随机分为正常对照组和照射组(1,4,14,30d组),每组8只。照射组豚鼠右耳颞部做一次性60 Coγ射线照射40Gy。分别于照射前、照射后1,4,14d及30d行冰水试验后处死,取出听泡,行前庭终器切片、HE染色、免疫组化染色,并分离囊斑及壶腹嵴,行超薄切片透射电镜检查。结果:冰水试验照射组眼震时间较对照组缩短,差异有统计学意义(P<0.05),照射后30d组眼震时间较其他照射组长,差异有统计学意义(P<0.05)。照射组豚鼠的囊斑较对照组感觉上皮层厚度变薄,毛细胞数量减少,纤毛变短、减少,照射组壶腹嵴耳石层消失,纤毛消失。透射电镜显示,照射后各组的囊斑及壶腹嵴均可见受损的毛细胞,受损毛细胞线粒体肿胀,以30d为明显,线粒体嵴变短减少并且发生断裂。照射后各组囊斑caspase-3、bax、bcl-2表达较对照组增强,差异有统计学意义(P<0.05)。照射后30d组囊斑、壶腹嵴caspase-3表达强度较其他对照组减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。照射后4d组囊斑、壶腹嵴bax表达上调程度较bcl-2表达上调程度强,差异有统计学意义(P<0.05),bax/bcl-2上升。照射后30d组囊斑、壶腹嵴bcl-2的上调程度较bax表达上调程度强,差异有统计学意义(P<0.05),bax/bcl-2下降。结论:凋亡相关蛋白caspase-3的表达上调及bax、bcl-2的不均衡表达上调可能在60 Coγ射线造成的前庭损伤中起重要作用。     

脂肪源性干细胞穴位注射对大鼠脑缺血/再灌注后海马中血管生成的影响

目的探讨脂肪源性干细胞(ADSC)穴位注射对大鼠脑缺血/再灌注损伤后海马中血管生成的影响。方法24只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、对照组(穴位注射生理盐水)和治疗组(穴位注射ADSC),每组6只。线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型,治疗组在大鼠大椎、双侧内关穴位注射PKH-26标记ADSC细胞悬液,对照组相同穴位注射同剂量生理盐水。缺血72 h后行神经功能损害评分(NSS),采用免疫组织化学法及实时荧光定量聚合酶链反应检测血管内皮生长因子(VEGF)蛋白和mRNA表达,免疫组织化学法进行CD34染色计数微血管密度(MVD)。结果脑缺血后72 h,治疗组大鼠海马区可见PKH-26标记的ADSC表达,而其他3组未发现红色荧光信号。模型组、对照组和治疗组NSS评分高于假手术组(P<0.05);与模型组比较,对照组和治疗组NSS评分显著降低(P<0.05),其中治疗组NSS评分低于对照组(P<0.05)。假手术组海马区中未见VEGF蛋白和mRNA表达,模型组、对照组和治疗组VEGF蛋白和mRNA表达及MVD较假手术组显著增加(P<0.05),其中治疗组VEGF蛋白和mRNA表达及MVD较模型组和对照组显著增高(P<0.05),而模型组和对照组3个指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论穴位注射ADSC对大鼠脑缺血/再灌注有神经保护作用,其作用机制可能与促进海马VEGF表达,增加MVD有关。     

SHH信号通路对MCAO模型大鼠脑缺血后的保护机制分析

目的:探讨人重组Shh蛋白(SHH)信号通路对大脑中动脉梗死(MCAO)模型大鼠脑缺血后的保护机制。方法:SPF级SD大鼠36只随机分为假手术组、模型组和SHH组,每组各12只。大鼠MCAO模型制备采用线栓法制成,侧脑室注射外源性SHH蛋白激活SHH信号通路。神经功能依据Longa标准评分进行评价;采用TTC测定大鼠梗死体积;采用激光多普勒血流仪,记录左侧大脑中动脉供血区域血流变化值;实时荧光定量PCR法(RT-PCR)测定VEGF和Ang-1mRNA表达;采用Western blot测定VEGF和Ang-1蛋白表达。结果:模型组和SHH组大鼠神经功能评分高于假手术组(P<0.05);SHH组大鼠神经功能评分低于模型组(P<0.05)。模型组和SHH组大鼠梗死体积高于假手术组(P<0.05);SHH组大鼠梗死体积低于模型组(P<0.05)。模型组和SHH组大鼠脑血流值低于假手术组(P<0.05);SHH组大鼠脑血流值高于模型组(P<0.05)。模型组和SHH组大鼠VEGF和Ang-1相对表达量低于假手术组(P<0.05);SHH组大鼠VEGF和Ang-1相对表达量高于模型组(P<0.05)。模型组和SHH组大鼠VEGF和Ang-1蛋白表达灰度值低于假手术组(P<0.05);SHH组大鼠VEGF和Ang-1蛋白表达灰度值高于模型组(P<0.05)。结论:SHH信号通路可改善MCAO大鼠神经功能,降低梗死体积,通过上调VEGF和Ang-1表达促进血管新生。     

骨髓间充质干细胞定向分化移植对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响

目的通过β淀粉样蛋白1-40诱导建立阿尔茨海默病(AD)大鼠模型,探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向分化移植对AD大鼠行为学的影响。方法将45只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组及移植组,每组15只。首先利用β淀粉样蛋白1-40通过立体定向注射技术建立AD动物模型,造模3周后采用立体定向注射技术移植诱导分化的BMSCs,并采用Morris水迷宫实验观察大鼠模型行为学的变化;采用免疫荧光组织化学染色法观察各组大鼠海马区胆碱乙酰化酶(ChAT)阳性细胞。结果移植组大鼠学习记忆成绩较移植前明显提高(P<0.05),与模型组大鼠学习记忆成绩比较有明显提高(P<0.05);同时通过免疫荧光组织化学染色可在移植组大鼠海马区发现ChAT阳性细胞。结论 BMSCs移植能够改善AD大鼠空间行为学能力,为利用BMSCs移植治疗AS提供实践依据。     

应用bcl-2基因及GDNF治疗大鼠脑缺血的研究

目的 观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)与bcl-2基因对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)的影响.方法 取健康Wistar大鼠40只,采用Longa改良栓线法制成大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血2 h后再灌注,随机分4组:对照组、bcl-2组、GDNF组、bcl-2+GDNF组,于再灌注3 h后经侧脑室注射GDNF 10μl、经颈动脉注射pLXSN-bcl-2质粒10μg,MCAO后3d(n=5),14 d(n=5),通过免疫组化染色检测bcl-2蛋白和GDNF的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果 bcl-2+GDNF组bcl-2蛋白表达与GDNF表达水平均较其他组表达明显增加(P<0.05),bcl-2组、GDNF组较对照组明显增加(P<0.05);脑内细胞凋亡GDNF+bcl-2组较其他组明显减少(P<0.05),bcl-2组、GDNF组较对照组明显减少(P<0.05).结论 bcl-2基因和GDNF可能通过减少神经细胞凋亡,促进bcl-2与GDNF蛋白表达,增强对局灶性缺血脑组织的保护能力,加速中枢神经损伤的修复;bcl-2基因与GDNF协同作用,促使神经细胞在脑内的凋亡进一步减少,从而避免脑缺血再灌注后脑细胞进一步损伤.     

富氢液对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响

目的脑组织缺血缺氧后,过量自由基产生,破坏组织细胞,形成再灌注损伤。最近,学者研究报道氢气溶解在液体中可选择性中和培养细胞中的羟自由基和亚硝酸阴离子。文中观察腹腔注射富氢液对大鼠暂时性全脑缺血再灌注损伤的影响。方法雄性SD大鼠90只,建立四血管阻塞全脑缺血(15 min)再灌注损伤模型,分为3组:假手术组(n=30),模型组(再灌注同时腹腔注射等渗盐水5ml/kg,n=30)和治疗组(再灌注同时腹腔注射0.6mmol/L富氢液5ml/kg,n=30),检测各组再灌注24 h海马丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)浓度、核因子-κB(nu-clear factor-kappaB,NF-κB)免疫组化阳性细胞数和活化caspase-3的表达水平以及再灌注72 h海马CA1区HE染色未损伤锥体细胞数。结果与模型组相比,治疗组海马MDA浓度、TNF-α浓度和NF-κB阳性细胞数活均显著下降(P<0.01);活化caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05);海马CA1区锥体细胞数显著增多(P<0.01)。结论腹腔注射富氢液能够有效减轻全脑缺血(15 min)后再灌注时大鼠脑的氧化应激和炎症反应,进而缓减再灌注损伤。