七氟烷诱导HO-1基因表达抑制氧糖剥夺神经元凋亡机制的研究

目的：探讨七氟烷诱导HO—1基因表达抑制氧糖剥夺神经元凋亡的机制。方法：将96孔和6孔培养板上培养7d的海马神经元随机分为5组（n=10）：正常培养组（C组）、氧糖剥夺组（D组）、氧糖剥夺组＋2％七氟烷组（s1组）、糖剥夺组十4％七氟烷组（S2组）、糖剥夺组＋4％七氟烷＋Znpp组（Z组）。C组神经元按正常培养方法培养。S1组在神经元缺糖缺氧的同时接受2％七氟烷麻醉。S2组在神经元缺糖缺氧的同时接受4％七氟烷麻醉。Z组在神经元进行缺糖同时加入Znpp使其终浓度分别为10μmol／L后同s2组处理。96孔培养板的神经元进行细胞存活率的检测。6孔培养板的神经元进行神经元纯度鉴定、神经元凋亡率、HO-1-mRNA和Fas蛋白表达的检测。结果：与D组比较S1组海马神经元HO-1—mRNA的表达增加，Fas蛋白表达减少，神经元存活率增加、凋亡率降低（P〈0．05）。与S1组比较S2组海马神经元HO-1-mRNA的表达增加，Fas蛋白表达减少，神经元存活率增加、凋亡率降低（P〈0．05）。与S2组比较Z组海马神经元HO-1-mRNA的表达减少，Fas蛋白表达增加，神经元存活率降低、凋亡率增加（P〈0．05）。结论：七氟烷通过诱导神经元HO-1-mRNA的表达而抑制了凋亡因子Fas，最终抑制了氧糖剥夺神经元的凋亡。     

异氟烷麻醉对发育期大鼠神经元凋亡及远期学习记忆的影响

目的 观察异氟烷麻醉对发育期大鼠神经元凋亡及远期学习记忆能力的影响,明确两者的关系.方法 7日龄SD大鼠32只,随机分为对照组(C组)和异氟烷麻醉组(A组).A组大鼠在35℃恒温下1.5%异氟烷麻醉6 h,C组自主吸入空气6 h.每组取3只大鼠,行动脉血气分析.每组各另取3只大鼠用免疫组织化学法检测大脑皮层active Caspase-3阳性神经元,计算阳性率.其余大鼠继续饲养至出生后60 d,行Morris水迷宫实验.后用免疫组织化学法检测大脑NeuN表达,比较两组大鼠皮层神经元密度.结果 两组大鼠动脉血气分析结果差异无统计学意义.A组大鼠皮层active Caspase-3阳性神经元数量明显多于C组(P ＜0.05).水迷宫实验结果显示,两组大鼠在寻台潜伏期、目标象限停留时间和穿越平台次数等指标上的差异均无统计学意义.两组大鼠皮层神经元密度相当.结论 1.5%异氟烷麻醉6 h能诱导发育期大鼠皮层神经元凋亡增加,但是对远期学习记忆能力没有影响.     

骨痹通方干预凋亡软骨细胞Wnt/β-catenin通路的实验研究

目的探讨骨痹通方通过Wnt/β-catenin通路抑制软骨细胞凋亡的作用机制。方法SD大鼠关节软骨细胞传至第三代后分为空白组,模型组,骨痹通方高、中、低剂量组(简称高、中、低剂量组)。除空白组外其余各组用白细胞介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞凋亡,空白组及模型组培养基中加空白大鼠血清,骨痹通方各组分别加相应剂量的含药血清,并于培养0 h、24 h、72 h时测定各组软骨细胞MTT值,干预后第4天收集软骨细胞,运用PCR及Western Blot法测定Wnt5a、β-catenin mRNA的表达量及蛋白表达水平。结果各组0 h、24 h及72 h所测的MTT值无显著差异(P0.05)。模型组Wnt5a与β-catenin的mRNA表达量与空白组比较明显升高(P0.05),骨痹通方各剂量组能够下调Wnt5a与β-catenin表达,且骨痹通方低剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。模型组与空白组比较Wnt5a、β-catenin的蛋白表达量上调,差异不显著(P0.05),骨痹通方高、中、低剂量组Wnt5a、β-catenin的蛋白表达量与模型组比较均有下调趋势,差异不显著(P0.05),骨痹通方各组间Wnt5a、β-catenin的蛋白表达量比较差异无统计学意义(P0.05)。结论骨痹通方可能通过抑制Wnt5a与β-catenin的表达,从而达到延缓软骨细胞凋亡的作用。     

糖化β-淀粉样蛋白对阿尔茨海默病样大鼠认知功能的影响

目的探讨糖化β-淀粉样蛋白(Aβ-AGE)对阿尔茨海默病样大鼠认知功能的影响。方法将β-淀粉样蛋白(Aβ)与甲基乙二醛于37℃下温育1个月合成Aβ-AGE。将40只Sprague Dawley大鼠随机分为Aβ组、Aβ+小鼠单克隆高级糖化终产物受体抗体(Anti-RAGE)组、Aβ-AGE组、Aβ-AGE+Anti-RAGE组,每组10只。行立体定向左侧侧脑室注射制备阿尔茨海默病样模型,其中Aβ组大鼠给予Aβ5μg,Aβ+Anti-RAGE组大鼠给予Aβ5μg和RAGE抗体Anti-RAGE 50μg,Aβ-AGE组大鼠给予Aβ-AGE 5μg,Aβ-AGE+Anti-RAGE组大鼠给予Aβ-AGE 5μg和Anti-RAGE 50μg。注射后第2～7天进行Morris水迷宫实验,记录大鼠寻找隐匿平台的潜伏期;注射后第9天,记录各组大鼠穿越平台次数和目标象限停留时间; Western blot法检测各组大鼠海马组织中高级糖化终产物受体(RAGE)蛋白的表达,免疫组织化学染色法检测各组大鼠大脑皮层中RAGE的表达。结果在注射后第2天,各组大鼠潜伏期比较差异无统计学意义(F=3. 767,P> 0. 05)。注射后第3～7天,各组大鼠潜伏期比较差异均有统计学意义(F=9. 167、25. 050、56. 980、62. 380、122. 200,P <0. 05); Aβ-AGE组大鼠潜伏期显著长于Aβ组(P <0. 05),Aβ+AntiRAGE组大鼠潜伏期显著短于Aβ组(P <0. 05),Aβ-AGE+Anti-RAGE组大鼠潜伏期显著短于Aβ-AGE组(P <0. 05)。注射后第9天,各组大鼠穿越平台次数和目标象限停留时间比较差异有统计学意义(F=12. 930、13. 560,P <0. 05); Aβ-AGE组大鼠穿越平台次数和目标象限停留时间显著短于Aβ组(P <0. 05),Aβ+Anti-RAGE组大鼠穿越平台次数和目标象限停留时间显著长于Aβ组(P <0. 05),Aβ-AGE+Anti-RAGE组大鼠穿越平台次数和目标象限停留时间显著长于Aβ-AGE组(P <0. 05)。注射后第9天,各组大鼠海马组织中RAGE蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=8. 626,P <0. 05); Aβ-AGE组大鼠海马组织中RAGE蛋白相对表达量显著高于Aβ组(P <0. 05),Aβ+Anti-RAGE组大鼠海马组织中RAGE蛋白相对表达量与Aβ组比较差异无统计学意义(P> 0. 05),Aβ-AGE+AntiRAGE组大鼠海马组织中RAGE蛋白相对表达量显著低于Aβ-AGE组(P <0. 05)。免疫组织化学染色结果显示,各组大鼠大脑皮层中RAGE阳性细胞数比较差异有统计学意义(F=76. 370、P <0. 01); Aβ-AGE组大鼠大脑皮层中RAGE阳性细胞数显著高于Aβ组(P <0. 01),Aβ+Anti-RAGE组大鼠皮层中RAGE阳性细胞数显著低于Aβ组(P <0. 01); Aβ-AGE+Anti-RAGE组大鼠皮层中RAGE阳性细胞数显著低于Aβ-AGE组(P <0. 01)。结论 Aβ-AGE可能通过激活RAGE信号转导通路介导加重AD样大鼠的认知功能障碍,Aβ-AGE和RAGE可能成为治疗AD的新靶点。     

P_(53)与β-catenin在胃息肉与胃癌中的表达及相互关系

目的探讨P53与β-catenin在胃息肉和胃癌中的表达及相互关系。方法采用免疫组化法检测正常胃黏膜组、不同病理类型的胃息肉组和胃癌组中P53蛋白与β-catenin蛋白的表达情况。结果(1)P53蛋白的阳性率:胃癌组明显高于正常胃黏膜组和不同类型的胃息肉组(P<0.05);正常胃黏膜组和不同类型的胃息肉组间差异,均不具有统计学意义(P>0.05)。β-catenin蛋白的阳性率:胃癌组和不同类型的胃息肉组明显高于正常胃黏膜组(P<0.05);胃癌组和不同类型的胃息肉组间差异,均不具有统计学意义(P>0.05)。(2)β-catenin蛋白的强阳性率:胃癌组明显高于不同类型的胃息肉组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论在胃息肉阶段抑癌基因P53保持相对正常的结构和功能,癌基因β-catenin表达增强,增强的程度明显低于胃癌阶段。     

丹龙醒脑方促进脑缺血再灌注损伤大鼠神经干细胞增殖与β-catenin、 Wnt-3a表达及其机制的研究

目的 探究丹龙醒脑方对脑缺血再灌注损伤大鼠海马区内源性神经干细胞增殖与β-catenin、Wnt-3a表达的影响.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组(西药组)、丹龙醒脑方小剂量组(丹小组)、丹龙醒脑方大剂量组(丹大组),线栓法制备局灶性脑缺血再灌注(I/R)损伤模型,再灌注7d后取大鼠缺血侧脑组织.采用BrdU掺入法记录海马齿状回颗粒下区BrdU阳性细胞数目;采用RT-qPCR法检测海马总β-catenin、Wnt-3a mRNA表达;采用Western Blot法检测海马总β-catenin、胞浆β-catenin、Wnt-3a蛋白表达.结果 与假手术组比较,其余各组BrdU阳性细胞数、β-catenin、Wnt-3a蛋白及mRNA的表达明显增强,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);与模型组比较,西药组、丹小组、丹大组BrdU阳性细胞数、β-catenin、Wnt-3a蛋白及mRNA表达明显增强,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 丹龙醒脑方可能通过激活β-catenin及Wnt-3a表达促进神经干细胞增殖.     

Wnt／β-catenin信号转导通路与卵巢癌的相关研究

目的研究Wnt／β-catenin信号通路的枢纽分子β-连环素（β-catenin）及其下游靶基因c—Myc在卵巢癌中的表达。方法应用免疫组化S-P法检测60例卵巢癌、24例卵巢上皮良性肿瘤以及26例正常卵巢上皮组织中β-catenin和c-Myc的表达情况。结果β-catenin在卵巢癌组织的异位表达与正常卵巢组织相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;β-catenin与卵巢癌的组织学分型以及分化程度具有相关性（P〈0．05）;c-Myc在卵巢上皮癌中表达分别与卵巢上皮良性肿瘤和正常卵巢上皮组织组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;c—Myc与卵巢癌分化程度相关（P〈0．05）;在卵巢癌组织中,β-catenin的异位表达与c—Myc的表达具有相关性（P〈0．05）。结论Wntβ-catenin信号通路可能是卵巢癌的发生途径。     

振荡电场对脊髓损伤大鼠β-catenin蛋白表达和神经元再生的影响

目的 观察振荡电场对脊髓损伤大鼠β-catenin蛋白表达规律和神经元再生的影响.方法 60只SD大鼠采用改良Allen′s打击法建立脊髓损伤模型,随机分为对照组和实验组.实验组施加振荡电场干预,对照组只置入振荡电场刺激器而不给予干预.建模成功后分别在3、7、14 d取大鼠脊髓,行HE染色观察脊髓大体形态变化,采用Western blot和免疫组化技术检测脊髓中β-catenin蛋白表达规律,行免疫荧光检测观察神经元变化情况,并在取材前对两组大鼠行Basso-Beattle-Bresnahan(BBB)行为学评分.结果 Western blot和免疫组化结果均显示,3 d时两组脊髓灰质内β-catenin蛋白均高表达,随时间延长表达量逐渐减少,同时实验组在各时间点β-catenin蛋白表达量均高于对照组(P<0.05).神经元的表达在3~14 d时呈现递增的趋势,但实验组神经元在表达数量上明显优于对照组,同时细胞形态更加规则.两组BBB评分3、7 d时差异无统计学意义,而14 d时,实验组BBB评分明显高于对照组(P<0.05).结论 振荡电场可以提高大鼠脊髓损伤区域β-catenin蛋白表达量,并促进神经元再生,从而改善受损脊髓神经功能.     

七氟烷与丙泊酚麻醉对老年肺癌患者术后认知功能影响的比较研究

目的比较七氟烷与丙泊酚麻醉对老年肺癌患者术后认知功能影响的差异。方法对我院120例65岁以上的肺癌患者进行肺癌根治手术,将所有患者随机分为七氟烷组(n=60)和丙泊酚组(n=60),分别于手术前及术后对患者进行简易智能精神状态评分(MMSE),并于麻醉前、术后取血测定血清S100β蛋白。结果术前2组患者的MMSE评分、手术时间、麻醉时间及S100β蛋白水平均无明显差异(P0.05);术后2组患者的MMSE评分均显著下降(P0.05);术后6h、1d及3d两组患者的MMSE评分相比,七氟烷组均显著高于丙泊酚组,差异有统计学意义(P0.05)。术后10min两组患者的S100β蛋白水平均显著升高,与术前10min相比差异有统计学意义(P0.05),但2组间比较差异无统计学意义(P0.05);术后1 d丙泊酚组患者的S100β蛋白水平明显高于七氟烷组,差异有统计学意义(P0.05)。结论七氟烷和丙泊酚对老年肺癌患者全身麻醉术后认知功能均有影响,但七氟烷术后认知功能障碍的发生率低于丙泊酚,且恢复较快。     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡和蛋白表达影响

目的:探讨银杏叶提取物对血管性痴呆(VD)大鼠海马神经元凋亡和Bcl-2及Bax蛋白表达的影响。方法:将60只大鼠随机分为模型组、干预组、假手术组和正常组。再根据造模后断头取脑时间将15只大鼠随机分为3小组,即7d、14d、21d组。用TUNEL法检测海马组织神经元凋亡,用免疫组织化学法检测Bcl-2及Bax蛋白表达。结果:模型组大鼠海马组织在第7d、14d、21d均有大量凋亡神经元,与干预组相比差异有显著性(P<0.05),与假手术组及正常组相比差异有非常显著性(P<0.01);干预组大鼠Bcl-2蛋白表达在第7d、14d及21d均显著高于模型组(P<0.05),与假手术组及正常组相比差异有非常显著性(P<0.01);模型组大鼠Bax蛋白表达在第7d、14d明显高于干预组(P<0.05)和假手术组及正常组(P<0.01),而在第21天各组Bax蛋白表达差异无显著性意义(P>0.05);假手术组和正常组各时段凋亡神经元和蛋白表达均无显著性差异(P>0.05)。结论:银杏叶提取物能明显促进VD大鼠海马组织Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达,阻抑海马组织神经元凋亡,减轻脑缺血对海马神经元的损伤,从而可避免脑卒中患者发展成VD。     

壮骨止痛方对去势大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:观察壮骨止痛方对去势大鼠骨组织Wnt/β-catenin信号通路的影响,探讨其治疗骨质疏松的机制。方法:60只3月龄SD雌性大鼠,按体重随机分为假手术组、空白组、模型组、壮骨止痛方组,15只/组。模型组、壮骨止痛方组采用双侧去卵巢建立绝经后骨质疏松大鼠模型,假手术组切除卵巢周围相应质量脂肪。术后5 d开始药物干预,连续13 w。取股骨,观察病理形态及Wnt7b、TCF3、GSK3β蛋白的表达。结果:与模型组相比,壮骨止痛方组骨小梁密度及梁髓比均提高。与模型组相比,壮骨止痛方组骨组织中Wnt7b、TCF3蛋白表达增高,GSK3β蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论:壮骨止痛方可通过上调去势大鼠骨组织中Wnt7b、TCF3蛋白表达,下调GSK3β蛋白表达来调控Wnt/β-catenin信号通路。     

红景天苷对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的：探讨红景天苷对慢性心力衰竭SD大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法：制备SD大鼠慢性心力衰竭模型,随机分为红景天苷高、中、低剂量组（40mg／kg、20mg／kg、10mg／kg）、卡托普利组、模型组和空白组,给予相应的药物干预,8周后观察心肌细胞凋亡指数,免疫组织化学方法检测·22肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达变化。结果：与模型组比较,红景天苷高、中剂量组及卡托普利组Bcl-2、Bax蛋白表达量差异有统计学意义（P〈0．01）;红景天苷低剂量组Bcl-2蛋白表达量差异有统计学意义（P〈0．05）,Bax蛋白表达量差异无统计学意义（P〉0．05）;与卡托普利组比较,红景天苷高、中剂量组Bcl-2、Bax蛋白表达量差异无统计学意义（P〉0．05）;红景天苷低剂量组的Bcl-2、Bax蛋白表达量差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：红景天苷20mg／kg剂量抗心肌细胞凋亡,抑制心力衰竭作用效果最佳,与卡托普利作用相当,再增加剂量作用不明显。     

新生期大鼠重复吸入七氟烷对其成年期Aβ、Tau蛋白的影响

目的研究新生期大鼠间断、重复吸入七氟烷,对其成年期行为学及β淀粉样蛋白(Aβ)、异常磷酸化Tau蛋白(PHF-Tau)在海马CA1区的表达。方法 7日龄SD大鼠24只,随机分为3组(n=8),1.5%七氟烷组(S1组),2.6%七氟烷组(S2组),对照组(C组)。分别于出生7、14、21 d(P7、P14、P21)吸入1.5%、2.6%七氟烷及运载气体1 h,于P91~P95行定位航行和空间探索实验。水迷宫实验结束后,取海马组织,用免疫组织化学的方法测定CA1区Aβ、PHF-Tau蛋白的表达。结果 1与C组相比,P94,S1组、S2组逃避潜伏期延长(P<0.01或P<0.05),P95,S1组潜伏期延长(P<0.05);2与P91相比,C组、S2组P94和P95逃避潜伏期缩短(P<0.05);S1组,P93逃避潜伏期缩短(P<0.05);3与C组比较,S1组原平台象限滞留时间百分比减少(P<0.01);4与C组比较,S1组PHF-Tau蛋白MOD增加(P<0.05),S1组、S2组Aβ蛋白MOD增加(P<0.05或P<0.01)。结论新生期大鼠间断、重复吸入1.5%、2.6%的七氟烷可使其成年期学习记忆能力下降,其中吸入1.5%七氟烷较2.6%七氟烷影响更持久。其机制可能与成年期海马CA1区Aβ、PHF-Tau蛋白水平的改变有关。     

七氟烷保护脑缺血-再灌注损伤大鼠海马机制的研究

目的：研究七氟烷预处理保护腑缺血-再灌注损伤Wistar大鼠海马神经元的机制。方法：40只Wistar大鼠随机分为对照组（C组）、脑缺血-再灌注组（D组）、0．3MAC七氟烷＋腑缺血-再灌注组（S1组）、0．6MAC七氟烷＋脑缺血-再灌注组（S2组）和0．6MAC七氟烷＋锌原卟啉（Znpp）＋脯缺血-再灌注组（Z组）。果用阴动脉阻断法建立大鼠全脑缺血-再灌注模型。缺血20min，再灌注24h后处死大鼠取海马，测定大鼠海马组织中HO-1蛋白和HO-1-mHNA的表达水平，电镜下观察海马线粒体的变化。结果：与C组比较，D组大鼠海马组织中HO-1和HO-1-mRNA表达和海马神经细胞线粒体变性率升高。与D组比较，S1组大鼠海马HO-1和HO-1-mRNA表达升高、线粒体变性率降低。与S1组比较，S2组大鼠海马HO-1和HO-1-mRNA表达升高、细胞线粒体变性率降低。与S2组比较，Z组大鼠海马HO-1和HO-1-mRNA表达降低、线粒体变性率升高（P＜0.05）。结论：七氟烷通过诱导大鼠海马神经细胞HO-1基因表达，保护了神经细胞。     

电针对颈椎病模型大鼠椎间盘细胞Wnt1、GSK-3β蛋白的影响

目的 观察电针“大椎穴”对颈椎病模型大鼠椎间盘纤维环细胞Wnt1蛋白、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的影响,并初步探讨电针对颈椎间盘退变调控及抑制纤维环细胞凋亡的机制.方法 选用SPF级SD大鼠40只,随机分成空白组、模型组、电针组、美洛昔康组,采用Western blot法检测颈椎间盘的纤维环细胞Wnt1、GSK-3β蛋白的表达水平的改变.结果 模型组与空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05);电针组、美洛昔康组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).电针可增加颈椎间盘纤维环细胞的阳性表达,显著上调Wnt1、GSK-3β蛋白表达的水平.结论 电针“大椎穴”可能是通过调节经典的Wnt/β-catenin信号通路中关键因子Wnt1蛋白、GSK-3β蛋白的表达来抑制颈椎病模型大鼠的椎间盘纤维环细胞凋亡.     

不同浓度七氟醚对老年大鼠认知功能的影响

目的:观察不同浓度七氟醚麻醉对老年大鼠认知功能的影响。方法:将80只老年SD大鼠,采用数字表法随机分为5组,每组各16只。分别吸入0%(C)、1%(S1)、2%(S2)、3%(S3)、4%(S4)七氟醚6 h。用Morris水迷宫检测大鼠的认知功能,同时检测β-淀粉样物质前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)以及人BACE-1(beta-siteAPP-cleaving enzyme-1)的表达。结果:(1)Morris水迷宫进行定位航行实验和空间探索实验表明,S3、S4组的老年大鼠学习记忆与C组相比,潜伏期延长,穿越平台象限的次数减少(F=14.215,P<0.05);而S1、S2组潜伏期及平台穿越次数差异无统计学意义(P>0.05)。(2)大鼠海马内的APP、Aβ表达都随着吸入浓度的增加而增加(P<0.05)。(3)大鼠海马中BACE-1的表达与C组相比,S3、S4组的表达显著增高(F=14.215,P<0.05)。结论:七氟醚对老年大鼠术后认知功能的影响具有剂量依赖性,而高浓度七氟醚可能通过诱导APP、Aβ生成从而引起BACE-1表达上调而发挥作用。     

大柴胡汤联合奥曲肽对急性胰腺炎模型大鼠血清细胞因子的影响

目的:观察大柴胡汤联合奥曲肽对急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型大鼠血清细胞因子表达水平的影响。方法:采用5%牛黄胆酸钠复制急性胰腺炎大鼠模型。将60只SD大鼠随机分为假手术组、AP组、奥曲肽组、大柴胡汤组和联合用药组。比较各组大鼠血清中淀粉酶(amylase,AMY)、脂肪酶、丙氨酸氨基转移酶(alainine aminotransferase,ALT)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、β-半乳糖苷酶的表达水平,各组大鼠存活率及腹水量。结果:联合用药组腹水量少于奥曲肽组和大柴胡汤组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。假手术组大鼠全部存活,联合用药组存活率为91. 67%,与其他几组比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。与假手术组比较,AP组大鼠β-半乳糖苷酶显著降低,TNF-α、IL-6表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P <0. 05)。与大柴胡汤组比较,联合用药组可显著升高大鼠血清β-半乳糖苷酶水平,降低TNF-α、IL-6表达水平,差异均有统计学意义(P <0. 05)。与假手术组比较,AP组大鼠血清AMY、脂肪酶、ALT表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P <0. 05)。联合用药组能明显降低大鼠血清AMY、脂肪酶、ALT的表达量,与奥曲肽组及大柴胡汤组比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论:AP模型大鼠外周血TNF-α、IL-6异常升高,诱导β-半乳糖苷酶急剧下降,导致胰腺组织内AMY、脂肪酶的表达异常,进一步刺激胰腺腺泡细胞的凋亡;联合用药(奥曲肽+大柴胡汤)可在保护肝功能的基础上明显改善外周血的炎症反应,抑制胰腺组织细胞凋亡,改善血清指标的异常表达。     

大柴胡汤联合奥曲肽对急性胰腺炎模型大鼠血清细胞因子的影响

目的:观察大柴胡汤联合奥曲肽对急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型大鼠血清细胞因子表达水平的影响。方法:采用5%牛黄胆酸钠复制急性胰腺炎大鼠模型。将60只SD大鼠随机分为假手术组、AP组、奥曲肽组、大柴胡汤组和联合用药组。比较各组大鼠血清中淀粉酶(amylase,AMY)、脂肪酶、丙氨酸氨基转移酶(alainine aminotransferase,ALT)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、β-半乳糖苷酶的表达水平,各组大鼠存活率及腹水量。结果:联合用药组腹水量少于奥曲肽组和大柴胡汤组,差异均有统计学意义(P 0. 05)。假手术组大鼠全部存活,联合用药组存活率为91. 67%,与其他几组比较,差异有统计学意义(P 0. 05)。与假手术组比较,AP组大鼠β-半乳糖苷酶显著降低,TNF-α、IL-6表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P 0. 05)。与大柴胡汤组比较,联合用药组可显著升高大鼠血清β-半乳糖苷酶水平,降低TNF-α、IL-6表达水平,差异均有统计学意义(P 0. 05)。与假手术组比较,AP组大鼠血清AMY、脂肪酶、ALT表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P 0. 05)。联合用药组能明显降低大鼠血清AMY、脂肪酶、ALT的表达量,与奥曲肽组及大柴胡汤组比较,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:AP模型大鼠外周血TNF-α、IL-6异常升高,诱导β-半乳糖苷酶急剧下降,导致胰腺组织内AMY、脂肪酶的表达异常,进一步刺激胰腺腺泡细胞的凋亡;联合用药(奥曲肽+大柴胡汤)可在保护肝功能的基础上明显改善外周血的炎症反应,抑制胰腺组织细胞凋亡,改善血清指标的异常表达。     

细胞周期素依赖性激酶抑制剂olomoucine对大鼠癫痫持续状态后神经元凋亡的影响

目的探讨选择性细胞周期素依赖性激酶抑制剂olomoucine对癫痫持续状态（SE）后神经元凋亡的影响。方法建立氯化锂-匹罗卡品SE模型,随机分为生理盐水组、SE组和olomoucine干预组。应用免疫荧光化学法检测神经元核心抗原（NeuN）和周期素蛋白B1表达,通过TUNEL方法检测神经元凋亡情况;应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测皮质及海马白介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA表达情况。统计方法采用方差分析与t检验。结果（1）生理盐水组TUNEL示阳性神经元稀少,SE后显著增加（P〈0．05）,olomoucine干预组明显少于SE组（P〈0．05）,尤其齿状回门区与生理盐水组相比差异没有统计学意义（P〉0．05）;（2）与SE组比较,olomoucine干预组细胞周期素B1阳性神经元数目减少,差异具有统计学意义（P〈0．05）;（3）生理盐水组IL-1β、TNF-α mRNA表达量稀少,SE后显著增加（P〈0．05）,除皮质TNF-α mRNA外,olomoucine干预组较SE组均明显降低（P〈0．05）。结论olomoucine可通过调控细胞周期,抑制癫痫持续状态后神经元重新进入细胞周期,以及抑制活化的胶质细胞分泌炎性细胞因子,抑制癫痫持续状态后神经元凋亡而减轻脑损伤。     

红花对四氯化碳致大鼠急性肝损伤的保护作用及其机制

目的研究红花对四氯化碳(CCl4)致大鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法 50只Wistar雄性大鼠,随机分为正常组,模型组,红花高、中、低剂量组,每组10只。红花高、中、低剂量组灌胃给药剂量分别为1、0. 5、0. 25 g/kg,连续给药8 d,末次给药后1 h,除正常组外,其余组大鼠一次性腹腔注射CCl4花生油溶液致急性肝损伤。于CCl4染毒后24 h处死动物。取血测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活力;取肝组织进行HE染色及测定肝组织中丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力((TAOC)的活力;蛋白印迹法(Western blot)检测炎性指标肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及JNK通路中JNK、p-JNK和p-c-Jun、Caspase-3、cleaved Caspase-3蛋白表达;采用RT-PCR和Western blot分别测定死亡受体凋亡途径FasL、Fas及线粒体凋亡途径Bax、Bcl-2的mRNA和蛋白表达。结果急性损伤后,模型组血清ALT、AST、ALP及肝组织的MDA水平与正常组相比明显升高(P 0. 05),CAT、GSH-Px和T-AOC的水平显著下降(P 0. 05),红花各剂量组同模型组相比上述指标均有统计学差异(P 0. 05); HE染色表明模型组中央静脉周围多数融合坏死,易见凋亡小体,红花各剂量组凋亡小体和小坏死灶均有所减少;模型组各炎症因子及p-JNK、p-c-Jun和cleaved Caspase-3的蛋白表达与正常组相比显著增加(P 0. 05),Bax、FasL、Fas的mRNA和蛋白表达明显增加(P 0. 05),而Bcl-2的mRNA和蛋白表达明显减少(P 0. 05)。红花各剂量组与模型组相比各炎症因子蛋白表达均有统计学差异(P 0. 05),JNK通路Bax、p-JNK、p-c-Jun、FasL、Fas、Bcl-2蛋白表达与模型组相比均有统计学差异(P 0. 05)。与模型组相比,红花中、低剂量组Bax、Bcl-2 mRNA的表达有统计学差异(P 0. 05),高剂量组与模型组之间无统计学差异(P 0. 05)。结论红花对CCl4致大鼠急性肝损伤有保护作用,且可能是通过其抗氧化、抗炎性因子激活以及抑制JNK通路激活、减少该通路激活后诱导的凋亡来实现的。