维生素A对弹性蛋白酶诱导的大鼠肺气肿的预防作用

目的观察维生素A对弹性蛋白酶诱导大鼠实验性肺气肿的预防作用,及其对肺泡壁细胞增殖和凋亡情况的影响。方法Wistar大鼠24只随机分为3组:对照组,模型组,维生素A组,每组8只。实验之初,维生素A组给予维生素A1×105U·kg-1·d-1灌胃,另两组给予等量油剂,4周后对模型组、维生素A组经气管内滴入弹性蛋白酶复制肺气肿模型,对照组滴入等量生理盐水。实验第8周后处死大鼠。行HE染色观察肺组织病理学变化,免疫组化法观察增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况,末端脱氧核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法观察肺泡壁细胞凋亡情况。结果与对照组比较,模型组的平均肺泡数(MAN)减少、平均肺泡面积(MAA)增大(P均<0.01),增殖指数(PI)上升(P<0.01),凋亡指数(AI)增高(P<0.01),但PI/AI无差异。与模型组比较,维生素A组的MAN增多(P<0.05)、MAA减小(P<0.01),PI升高(P<0.01),AI降低(P<0.05),PI/AI也增高P<0.01。结论维生素A能促进实验性肺气肿大鼠肺泡壁细胞的增殖并抑制其凋亡,使肺泡壁细胞增殖/凋亡的平衡向增殖倾斜,从而对大鼠实验性肺气肿的发生起到了一定的预防作用。     

AECA、VEGF在自身免疫性肺气肿大鼠中的表达及甲泼尼龙琥珀酸钠的干预效果

目的观察抗血管内皮细胞抗体(AECA)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)在自身免疫性肺气肿大鼠中的表达及甲泼尼龙琥珀酸钠对其干预效果,为临床慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制和防治提供理论依据。方法采用随机数表法将30只SD大鼠分为对照组、模型组、干预组,每组10只。采用人脐静脉内皮细胞建立自身免疫性肺气肿大鼠模型组,在自身免疫性肺气肿大鼠腹腔内注入甲泼尼龙琥珀酸钠建立干预组,对照组仅接受完全弗式佐剂腹腔内注射。21 d后处死所有大鼠。采用酶联免疫吸附法测定3组大鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中AECA、VEGF水平。对肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,观察其形态学改变,计算肺平均内衬间隔(MLI)和平均肺泡数(MAN)。采用TUNEL法检测肺泡隔细胞凋亡情况,计算肺泡隔细胞凋亡指数(AI)。结果模型组MLI较对照组高,MAN较对照组低,干预组MLI较模型组低,MAN较模型组高,差异有统计学意义(均P<0.05)。模型组AI高于对照组,血清和BALF中AECA水平高于对照组,VEGF水平低于对照组,干预组AI低于模型组,血清及BALF中AECA水平低于模型组,VEGF水平高于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。模型组、干预组大鼠血清和BALF中AECA水平与VEGF水平呈负相关,AECA水平与AI呈正相关,VEGF水平与AI呈负相关(均P<0.05)。结论 AECA、VEGF参与自身免疫性肺气肿大鼠肺泡隔细胞凋亡,甲强龙可能通过影响AECA、VEGF水平减少肺泡隔细胞凋亡,进而抑制肺气肿的形成。     

骨髓间充质干细胞对大鼠实验性肺气肿的作用

目的：观察骨髓间充质干细胞（MSCs）对肺气肿的治疗作用。方法：Wistar大鼠随机分为四组,分别为健康组（A组）、模型组（B组）、生理盐水对照组（C组）和治疗组（D组）。B、C、D组均利用烟熏的方法诱导其肺气肿的形成,之后D组采用DAPI标记的骨髓间充质干细胞进行治疗。结果：4周后取肺组织做病理切片,观察肺泡变化,进行肺泡计数,并计算单位面积平均肺泡数（MNa）和平均肺泡面积（MAA）。D组单位面积平均肺泡数明显高于B组（P〈0.05）和C组（P〈0.05）,但低于A组（P〈0.05）,B组和C组之间无显著性差异（P〉0.05）; B组和D组平均肺泡面积无显著性差异（P〉0.05）,B组和C组之间无显著性差异（P〉0.05）,D组平均肺泡面积明显低于B组（P〈0.05）和C组（P〈0.05）。MSCs治疗组大鼠肺组织中可见DAPI标记的细胞,并且观察到MSCs在受体肺组织内分化为上皮细胞。结论：经骨髓间充质干细胞治疗的肺气肿模型大鼠的肺泡数较B组和C组明显增加,平均肺泡面积明显减小,且MSCs在肺气肿模型大鼠肺组织中分化为肺泡上皮,说明骨髓间充质干细胞对治疗大鼠实验性肺气肿是有效的。     

Caspase抑制剂早期干预对吸烟型肺气肿大鼠肺泡结构保护的实验研究

目的：探讨早期使用Caspase抑制剂z-VAD-fmk对吸烟型肺气肿大鼠肺泡结构保护的机制。方法：30只清洁级SD大鼠平均随机分为对照组（A组）和肺气肿模型组（B组）和z-VAD-fmk干预组（C组）。12周后取肺组织制作石蜡切片,光镜下观察肺泡病理改变。原位缺口末端标记法（TUNEL）检测各组大鼠肺泡隔细胞凋亡指数（apoptosis index,AI）,免疫组化检测肺组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果：12周末光镜显示：B组较C组肺气肿特征性病理改变逐渐加重,A组无肺气肿表现。各组肺泡隔细胞AI,B组与A、C组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。免疫组化显示B组Bax蛋白表达呈强阳性,而Bcl-2蛋白表达相对较弱,与A、C组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：肺气肿形成初期,使用Caspase-3抑制剂z-VAD-fmk可显著上调肺组织中Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白的表达,使肺泡隔细胞凋亡减少,明显减轻肺气肿的病理改变。     

维甲酸对弹性蛋白酶诱导的大鼠肺气肿的干预作用及其与MMP-9和TIMP-1变化之间的关系

目的 观察维甲酸对弹性蛋白酶诱导的大鼠肺气肿的干预作用及其与MMP-9和TIMP-1变化之间的关系,探讨维甲酸可能的作用机制.方法 雄性Wistar大鼠21只,随机分为3组:对照组、模型组和维甲酸组,每组7只.模型组及RA组大鼠气管内滴入弹性蛋白酶复制肺气肿模型,RA组同时给予RA腹腔注射进行干预.25d后,光镜观察各组大鼠肺组织的病理改变,计算机辅助图像分析系统测量肺组织石蜡切片中平均肺泡数、平均肺泡面积、平均内衬间隔,免疫组化方法观察各组大鼠肺组织基质金属蛋白酶(MMP-9)及其组织抑制因子(TIMP-1)的蛋白表达情况.结果 模型组与对照组比较,平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡面积(MAA)增加(P<0.01),平均肺泡数(MAN)减少(P<0.01).模型组MMP-9和TIMP-1的表达与对照组比较明显增强(P<0.01),且MMP-9/TIMP-1比值失衡;RA组与模型组比较.平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡面积(MAA)减少(P<0.01)、平均肺泡数(MAN)增加(P<0.01).维甲酸组MMP-9和TIMP-1的表达与模型组比较明显减少(P<0.01).结论 维甲酸能够抑制弹性蛋白酶诱导的肺气肿的发生和发展,可使肺气肿时增多的MMP-9、TIMP-1下降,使其比值趋于平衡.     

腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对冠状动脉再狭窄的预防作用

目的应用重组腺病毒载体介导的肝细胞生长因子（HGF）基因转染血管内皮细胞（VEC）及血管平滑肌细胞（VSMC），探讨HGF基因对其凋亡的诱导作用。方法以肝细胞中抽提的总RNA为模板，反转录cDNA，采用RT-PCR技术获得HGF基因，并引入酶切位点，转染大肠埃希菌，筛选阳性菌落，经酶切及测序证实后，转染腺病毒，制造病毒包涵体，经3轮扩增，制备高效表达HGF基因腺病毒载体（Ad—HGF）。以此感染VEC及VSMC，设为Ad-HGF组；再以人工合成HGF培养VEC及VSMC为阳性对照组（HGF组）；以未感染Ad-HGF的细胞为阴性对照（对照组）。并采用流式细胞仪检测缺氧情况下各组细胞的凋亡率。结果VEC的Ad—HGF、HGF组细胞凋亡率均低于对照组，差异均有极显著性意义（均P〈0．01），但VSMC的3组细胞凋亡率差异无显著性意义（P＞0．05）。结论腺病毒载体介导HGF基因感染VEC后能在缺氧情况下有效地阻止VEC发生凋亡，但不能有效抑制VSMC凋亡，提示对冠状动脉再狭窄有预防作用。     

间充质干细胞移植减轻大鼠肺气肿和肺泡壁细胞凋亡机制探讨

目的 研究骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植在肺气肿大鼠肺泡壁细胞凋亡和肺气肿的发展过程中的作用.方法 36只雌性Lewis大鼠被随机分为正常对照组12只,肺气肿组12只,肺气肿+MSCs移植组12只.处理8周后处死大鼠,评估肺组织形态学;ELISA方法检测肺泡灌洗液(BALF)中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平;Western blot法检测肺组织VEGF和血管内皮细胞生长因子受体-2(VEGF receptor 2,VEGFR2)蛋白表达;TUNEL法评估肺泡壁细胞凋亡指数.结果 在肺气肿组和肺气肿+MSCs移植组可以观察到大鼠肺气肿样改变.肺气肿+MSCs移植组与肺气肿组相比肺气肿样改变减轻.在这两组之间肺平均内衬间隔(MLI)、单位面积平均肺泡数(MAN)、平均肺泡面积(MAA)差异均有统计学意义(均P＜0.05).肺气肿+MSCs移植组肺泡壁细胞凋亡指数低于肺气肿组.肺气肿+MSCs移植组肺泡灌洗液中VEGF水平明显高于肺气肿组,而且肺组织中VEGF与VEGFR2水平也明显高于肺气肿组.结论 MSCs移植肺气肿大鼠,可以通过逆转VEGF和VEGFR2表达减少来减轻肺泡壁细胞凋亡和肺气肿的发生.     

不同海拔大鼠肺气肿模型肺组织caspase-3水平比较

目的 观察不同海拔肺气肿大鼠肺组织caspase-3表达水平,评估低氧对肺组织凋亡的影响.方法 40只Wistar 大鼠随机分为对照组（A组,6只）、中海拔盐水组（B组,6只）、中海拔肺气肿组（C组,8只）、高海拔盐水组（D组,10只）、高海拔肺气肿组（E组,10只）.A、B、C3组大鼠饲养于西宁,海拔2260m.D组和E组饲养于低压氧舱,模拟海拔5500m.B组和D组腹腔注射生理盐水、C组和E组腹腔注射CSE,饲养4周后,采集大鼠右肺组织,免疫组化法检测肺组织caspase-3的表达.结果 与A、B、D3组比较,C组和E组肺实质破坏、部分肺泡破裂及肺泡腔扩大.5组间caspase-3细胞阳性率比较有统计学差异（P＜0.001）.D组高于B组及A组（P ＜0.001）,E组高于C组（P＜0.001）,C组高于B组（P＜0.001）,E组高于D组（P＜0.001）.结论 高原低氧加重了肺气肿大鼠的凋亡表达.     

9肺内输入骨髓间充质干细胞对肺气肿大鼠慢性炎症的调控

目的探讨移植骨髓间充质干细胞（MSC）对肺气肿大鼠慢性炎症的调控作用。方法烟熏法复制大鼠肺气肿模型。携带绿色荧光蛋白（GFP）的慢病毒转染MSC,烟熏大鼠肺内输入转染的MSC（n=4）,小动物活体成像系统观察MSC的分布。36只SD大鼠随机分为对照组、肺气肿组及MSC干预组,评估支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数和分类计数,双抗体夹心酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测BALF、血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）水平,比色法检测肺组织丙二醛（MDA）含量,测量平均内衬间隔（MLI）评估肺气肿改变。结果肺内输入MSC 4周后,不同肺叶仍可见存活的MSC。与肺气肿组相比,MSC干预组BALF中细胞总数、血清和BALF中TNF-α及IL-1β水平、肺组织中MDA含量和MLI均明显减低,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 MSC降低肺气肿大鼠气道及全身炎症介质TNF-α和IL-1β的表达,减轻气道炎症和氧化应激水平,对肺气肿有明显的治疗作用。     

MMP-9在肺气肿大鼠BALF中的表达及其与TNF-α、VEGF关系的探讨

目的探讨基质金属酶-9（MMP-9）在吸烟大鼠肺气肿模型支气管肺泡灌洗液（BALF）中的表达及其和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血管内皮生长因子（VEGF）的相互关系。方法 26只大鼠随机分为正常对照组（n=13）和烟雾暴露组（n=13）。单纯吸烟法建立肺气肿模型。酶联免疫吸附法（ELISA）测定两组BALF中的MMP-9、TNF-α和VEGF浓度。肺组织切片行苏木精-伊红染色（HE）观察形态学改变,定量测定肺平均内衬间隔（MLI）和平均肺泡数（MAN）。结果⑴烟雾暴露组肺MLI显著高于正常对照组（P〈0.05）,其MAN显著低于正常对照组（P〈0.05）;⑵烟雾暴露组BALF中MMP-9、TNF-α浓度显著高于正常对照组（P〈0.05）,而VEGF浓度显著低于正常对照组（P〈0.05）;⑶肺气肿组BALF中MMP-9浓度和TNF-α浓度呈显著正相关（r=0.67,P〈0.05）,但和VEGF浓度无关（r=-0.012,P〉0.05）。结论 MMP-9参与了吸烟大鼠肺气肿的发病过程,TNF-α可能和其有协同作用;但吸烟大鼠BALF中MMP-9浓度升高和VEGF浓度降低可能通过不同的途径促进肺气肿的发展的。     

血管内皮生长因子干预烟熏大鼠肺气肿的实验研究

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)对烟熏大鼠肺气肿病变的修复作用。方法:Wistar大鼠24只,随机分为VEGF组、对照组和健康对照组。VEGF组、对照组用烟熏气管内滴入猪胰弹性蛋白酶制作肺气肿模型,健康对照组气管内滴入生理盐水作为对照,3个月后模型成功。VEGF组大鼠气管内滴入VEGF,对照组和健康对照组滴入生理盐水,每周1次,共3次。4周后测大鼠体重,肺泡形态学变化。结果:VEGF组与对照组相比平均肺泡数明显增加(P<0.05)、平均肺泡间隔和平均肺泡面积减小(P<0.05)。结论:VEGF在一定程度上可以修复肺气肿病变。     

血管内皮细胞生长因子和肿瘤坏死因子α在大鼠肺气肿中的作用

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在大鼠肺气肿中的作用。方法 48只大鼠随机分为正常对照组、肺气肿组、rhTNFR:Fc干预组和假干预组。肺气肿组、干预组和假干预组予以香烟熏吸。烟雾暴露达1个月时,干预组予以TNF-α拮抗剂重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)皮下注射,假干预组给予空白对照制剂。熏烟80d后处死大鼠。大鼠肺组织切片行HE染色观察形态学改变。ELISA法测定血清、BALF中TNF-α浓度及BALF中VEGF浓度。结果与正常对照组比较,肺气肿组肺平均内衬间隔(MLI)升高,平均肺泡数(MAN)降低,BALF中VEGF水平降低,血清、BALF中TNF-α浓度升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与肺气肿组比较,rhTNFR:Fc干预组MLI无显著差异(P0.05),MAN增高(P0.05);BALF中TNF-α、VEGF浓度无显著差异(P0.05),血清中TNF-α浓度降低(P0.05)。肺气肿组BALF中VEGF水平与TNF-α浓度无相关性(P0.05)。结论 VEGF表达降低和TNF-α表达增加与吸烟大鼠的肺气肿形成有关。VEGF与TNF-α可能各自独立促进肺气肿的发生发展。     

肿瘤坏死因子α功能抑制剂对肺气肿大鼠气道炎症的影响

目的：探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）抑制剂———重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白（rhT-NFR：Fc）对肺气肿大鼠气道炎症的影响。方法：48只大鼠分为正常对照组、肺气肿组、rhTNFR：Fc干预组（干预组）和干预对照组,单纯吸烟法建立肺气肿模型;后3组烟雾暴露达1月时,干预组给予rhTNFR：Fc进行干预,干预对照组给予空白对照制剂;熏烟80 d后,处理所有大鼠,正常对照组和肺气肿组肺组织切片行苏木素-伊红染色观察形态学改变,定量测定肺平均内衬间隔（MLI）、平均肺泡数（MAN）;支气管肺泡灌洗液（BALF）计数各组白细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞计数及其百分比,用酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组血清及BALF中的TNF-α浓度。结果：（1）肺气肿组MLI高于正常对照组,MAN低于正常对照组（P〈0.05）;（2）肺气肿组血清TNF-α浓度高于正常对照组和rhTNFR：Fc干预组（P〈0.05）,和干预对照组比较差异无显著性（P〉0.05）;肺气肿组BALF中TNF-α浓度高于正常对照组（P〈0.05）,但和rhTNFR：Fc干预组、干预对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;（3）肺气肿组BALF中白细胞总数、中性粒细胞计数及百分比高于正常对照组（P〈0.01,P〈0.05和P〈0.05）和rhTNFR：Fc干预组（P〈0.01,P〈0.05和P〈0.05）,与干预对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：TNF-α与吸烟大鼠的肺气肿形成有关,并影响其气道炎症;rhTNFR：Fc对减轻其气道炎症具有一定作用。     

单次及多次应用肺表面活性物质对COPD鼠肺的保护作用比较

目的观察单次及多次应用外源性肺表面活性物质（PS）对实验性慢性阻塞性肺病（COPD）大鼠肺的保护作用比较。方法设立正常大鼠组和3个实验组：对照组（不用药）；PS一次干预组（PS1组，气道内注入PS1次，100mg／kg），PS多次干预组（PS3组，气道内注入PS3次，100mg／kg）。60d后测定动脉血气，光镜和透射电镜观察肺组织病理学改变；免疫组化法检测肺组织表面活性物质相关蛋白A（SP—A）的阳性表达。结果吸烟60d及气道内注入脂多糖2次，大鼠有明显的慢性支气管炎及肺气肿的变化，应用PS治疗1次，肺组织病变出现轻度改善，应用3次后肺组织损伤程度明显减轻，PaO2升高，PaCO2降低，SP—A表达增加。结论PS干预可减轻吸烟及LPS对肺组织的破坏，改善PaO2，抑制气道炎症，保护肺泡Ⅱ型上皮细胞和SP-A表达，从而可有效减轻COPD的肺部病变，且多次用药效果好。     

凋膜止崩液对雌激素负荷去势大鼠P PR的影响

目的：研究不同剂量凋膜止崩液对雌激素负荷去势大鼠孕激素（P）及其受体（PR）的影响,揭示药物在有效部位靶向干预条件下,HPOA（下丘脑-垂体-卵巢轴）调节通道靶端药物效应机制,探讨靶向药物治疗功能失调性子宫出血（DUB）的分子生物学机制。方法：将大鼠随机分为4组：空白组（A）、模型组（B）、凋膜止崩液小剂量组（C）、凋膜止崩液大剂量组（D）,采用雌激素负荷去势法建立大鼠增生过长子宫内膜动物模型,放射免疫法测定各组大鼠血清孕激素（P）水平,免疫组织化学染色观察大鼠子宫内膜细胞孕激素受体（PR）的表达。结果：血清中P的水平：B组与C组相比有显著性差异（P〈0.01）,C组与D组之间比较无统计学意义（P〉0.05）;子宫内膜PR的表达：C组、D组子宫内膜PR表达明显降低,与B组相比有显著统计学差异（P〈0.01）;C组与D组之间无明显统计学差异（P〉0.05）。结论：凋膜止崩液可能通过直接或间接的作用调节P、PR消除增生过长子宫内膜。     

地塞米松对ANIT诱导的胆汁淤积大鼠的治疗作用

[目的]探讨地塞米松对α-萘异硫氰酸（ANIT ）诱导的胆汁淤积大鼠的治疗作用。[方法]将健康雄性Wistar大鼠32只随机分为A、B、C、D四组。A组,仅灌花生油。B组,仅灌ANIT液。C组,灌ANIT液的同时予地塞米松（DEM ）处理。D组,灌ANIT液后24 h予DEM处理,每组8只。48 h后收集胆汁,计1 h胆汁量（BC）。取门静脉血检测总胆红素（TBIL）,直接胆红素（DBIL）碱性磷酸酶（ALP）,丙氨酸转氨酶（ALT ）的浓度。肝脏标本活检。[结果]B组各项指标明显高于A组（ P ＜0．01）。C、D两组 TBIL、DBIL指标低于B组（P ＜0．01）,D组与C组两组无明显区别（P ＞0．05）,D组略高于C组。B组ALP高于C组（P＜0．05）,低于D组（ P＜0．01）。D组高于C组（ P ＜0．01）。B组ALT低于C组（ P ＜0．01）。C、D两组没有明显差别（P＞0．05）。B、D两组没有明显差别（P ＞0．05）。B、C、D三组中,BC值C组多于B、D组（P＜0．01）。D组多于B组（ P ＜0．01）。[结论]地塞米松有减黄作用,提示临床对药物性肝损引起的急性黄疸病例可早期予激素制剂干预。鉴于激素干预可能增加肝细胞损伤,大剂量应用应该谨慎。     

Effect of human hepatocyte growth factor on promoting wound healing and preventing scar formation by adenovirus-mediated gene transfer

Objective To evaluate the effects of hepatocyte growth factor (HGF) on the prevention of scar formation and the promotion of wound healing by gene transfer. Methods A total of 12 female New Zealand rabbits were used in this study. Rabbits were anesthetized with an intravenous injection of sodium pentobarbital, and identical wounds were made over the ventral surface of each ear. Five circular wounds, 7 mm in diameter, were created in each ear by excision through the skin to the underlying cartilage using sterile technique. After the surgical procedures, 10 of the rabbits were randomly allocated to five groups, with 2 rabbits in each group: Ad-HGF group 1, Ad-HGF group 2, Ad-HGF group 3, Ad-GFP (a reporter gene) group and the solvent group. Immediately after surgery, 6×10(7) pfu Ad-HGF, 6×10(8) pfu Ad-HGF, 6×10(9) pfu of Ad-HGF, 6×10(9) pfu of Ad-GFP, or same volume of solvent (PBS, pH 7.2) was applied once to each wound in groups 1 to 5, respectively. One additional rabbit was used to evaluate the transfer efficiency of the adenovirus vector by transferring Ad-GFP (6×10(9) pfu) into its wounds. Ice slides of wounds from this animal were observed under fluorescence microscopy. Another additional rabbit was used to evaluate the expression of HGF and TGFβ1 after transferring Ad-HGF (6×10(9) pfu) into each of its wound. Immunohistochemistry was used for detection. Results The effect of HGF on reducing excessive dermal scarring was observed by adenovirus-mediated gene transfer. Transfection of the human HGF cDNA into skin wounds through an adenoviral vector suppressed the over-expression of TGFβ1, which plays an essential role in the progression of dermal fibrogenesis. Application of HGF to the wounds significantly enhanced wound healing and inhibited over scarring.Conclusion HGF gene therapy could be a new approach for preventing excessive dermal scarring in wound healing.     

哮喘大鼠HIF-1α、转化生长因子-β的表达及调控

目的 探讨HIF-1α、TGF-β1在哮喘急性发作期中的作用及两者间的相关性.方法 选取健康清洁级雄性SD大鼠48只,随机均分为4组：正常对照组、哮喘组、地塞米松治疗组（地塞米松组）、布地奈德治疗组（布地奈德组）.制备大鼠哮喘模型,观察各组大鼠肺组织病理变化、分析支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞总数和分类计数,并采用免疫组织化学法和原位杂交法测定各组大鼠肺组织中HIF-1α、TGF-β1的表达情况,并作相关性分析.结果 正常对照组大鼠气道及肺实质无异常改变,细胞结构完整;哮喘组大鼠气道腔内有大量炎症细胞及分泌物充塞,形成黏液栓,气道上皮细胞损伤、脱落、基底膜增厚且形态不规则、平滑肌肥大增生;布地奈德组和地塞米松组大鼠气道腔内无明显分泌物,其它症状亦较哮喘组明显减轻.哮喘组细胞总数及EOS、PMN、Lym计数比例均显著高于正常对照组（P〈0.01）,Mφ计数比例显著低于正常对照组（P〈0.01）;布地奈德组和地塞米松组细胞总数及EOS、Lym计数比例均显著低于哮喘组（P〈0.01）,Mφ计数比例显著高于哮喘组（P〈0.01）.哮喘组大鼠肺组织HIF-1α及TGF-β1的表达均显著高于正常对照组（P〈0.01）,地塞米松组和布地奈德组HIF-1α的表达均明显高于正常对照组（P〈0.05）,布地奈德组和地塞米松组大鼠肺组织HIF-1α及TGF-β1的表达均显著低于哮喘组（P〈0.01）.哮喘大鼠肺组织中HIF-1α与TGF-β1的表达呈显著正相关（P〈0.01）.结论 哮喘急性发作期HIF-1α及TGF-β1的表达显著增加,两者间呈现显著正相关;糖皮质激素干预可以降低HIF-1α及TGF-β1的表达,减轻哮喘气道炎症.     

香烟烟雾暴露建立肺气肿小鼠骨骼肌并发症模型的方法

目的探讨通过香烟烟雾暴露将小鼠制备成肺气肿模型,再进一步使其产生系统性炎症形成骨骼肌并发症模型的方法。方法将昆明种系雄性小鼠48只随机平均分为4组:12周正常对照组(A组),24周正常对照组(B组),12周烟雾暴露组(C组),24周烟雾暴露组(D组)。采用单纯长期香烟烟雾被动吸入方式,建立小鼠肺气肿模型。通过肺组织石蜡包埋切片,HE染色观察肺泡结构病理变化,并定量测定平均肺泡数(MAN)和平均肺泡面积量化肺气肿变化程度;进一步测量小鼠体重变化情况,通过该小鼠骨骼肌组织石蜡包埋切片,HE染色观察骨骼肌形态学及结构改变。通过肌间隙产生炎症细胞浸润,肌细胞出现形态结构上的改变,以及局部出现坏死病灶来衡量骨骼肌并发症严重程度。结果观察香烟烟雾暴露小鼠肺组织病理切片发现,肺泡腔扩大、部分肺泡间隔断裂、肺泡腔融合、肺组织肺大泡形成伴周围炎症细胞浸润。A组小鼠平均肺泡面积为(18860±813.2)μm2,B组为(18204±1248.4)μm2,C组为(41787.2±2310.4)μm2,D组为(51577.2±2207.2)μm2。分析发现对照组平均肺泡面积明显低于烟雾暴露组(P<0.01)。烟雾暴露组MAN比正常对照组低(P<0.01)。进一步观察同一例小鼠骨骼肌组织病理切片发现,烟雾暴露组骨骼肌组织中有周围炎症细胞浸润伴随肌细胞形态结构改变,局部性坏死病灶产生,而正常对照组无此改变。结论单纯吸烟法既可以建立肺气肿模型,也可以建立骨骼肌并发症的模型。这为模拟慢性阻塞性肺部疾病(COPD)病人出现系统性炎症,以进行相关科学研究提供了有利条件。