益气化瘀中药对糖尿病皮肤溃疡大鼠缺氧诱导因子-1α和血管内皮细胞生长因子的影响

目的:探讨益气化瘀中药对糖尿病皮肤溃疡气虚血瘀证大鼠缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法:72只清洁级雄性SD大鼠,除8只作正常对照组外,其他大鼠在背部全层皮肤缺损开放性创面的基础上加造气虚血瘀证糖尿病模型后,随机分为模型组、贝复济组、益气化瘀组、益气组和化瘀组。应用免疫组织化学、图像分析等技术,观察各组大鼠创面肉芽组织中HIF-1α和VEGF水平的变化。结果:模型组HIF-1α水平高于正常对照组(P<0.01),VEGF浓度明显低于正常对照组(P<0.01)。各用药组HIF-1α表达水平明显低于模型组(P<0.01),VEGF表达水平明显高于模型组(P<0.01)。益气化瘀组HIF-1α表达水平明显低于贝复济组、益气组和化瘀组(P<0.05或P<0.01),VEGF表达水平明显高于贝复济组(P<0.01)。益气组与化瘀组HIF-1α和VEGF的表达水平相似,它们与贝复济组之间无明显差异。结论:益气化瘀中药能明显促进糖尿病皮肤溃疡气虚血瘀证大鼠的创面愈合,其机制与下调HIF-1α水平、上调VEGF的表达水平和改善局部缺血缺氧状态有关。     

实验性颅脑损伤鼠垂体前叶HIF-1α、Bcl-2/Bax的表达和细胞凋亡的研究

目的：探讨颅脑损伤后垂体前叶细胞缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、Bcl-2和Bax的表达及细胞凋亡情况。方法：采用Feeney自由落体方法制作大鼠颅脑损伤模型,分别于建模后24、72 h和7 d灌注固定取材,同时设立对照组,免疫组化染色法检测HIF-1α、Bcl-2和Bax蛋白的表达,TUNEL染色法检测细胞凋亡。结果：垂体前叶组织于伤后24 h HIF-1α、Bcl-2和Bax蛋白的表达即有升高,72 h达到高峰,一直持续到伤后7 d,与对照组相比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;TUNEL染色显示凋亡细胞明显增多,且凋亡指数与HIF-1α的表达和Bcl-2/Bax的比值成规律性变化。结论：颅脑损伤后垂体前叶组织HIF-1α、Bc1-2、Bax蛋白的表达增加而诱发细胞凋亡,是颅脑损伤后垂体前叶功能紊乱的重要原因。     

A型肉毒毒素对大鼠前列腺增生组织中缺氧诱导因子-a及血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的探讨A型肉毒毒素（BTX—A）对大鼠前列腺增生组织中缺氧诱导因子-1a（HIF-1a）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响。方法取60只大鼠,实验组45只,空白对照组15只。实验组大鼠均制作前列腺增生模型,1周后两组均随机处死5只大鼠观察建模是否成功。实验组剩余大鼠随机分为高剂量组（注射10U／01mlBTX—A）、中剂量组（注射6U／01mlBTX—A）、低剂量组（注射2U／0．1mlBTX—A）、阴性对照组（注射0,1m10．9％氯化钠溶液）,术后各组继续给予长效雄激素（十一酸睾酮针4mg·kg-1·d-1）维持,空白对照组仍给予等量橄榄油皮下注射。4周后处死各组大鼠。取出前列腺称重,免疫组化法检测比较各组大鼠前列腺组织中HIF-1a和VEGF的表达情况。结果大鼠前列腺增生模型建立成功。实验组大鼠HIF-1a在细胞质与细胞核均有表达,在新生血管周围表达明显增强,而VEGF的表达主要在细胞质中。与空白对照组比较,其他各组大鼠前列腺湿重均发生明显变化,差异均有统计学意义（均P〈0．05）：与阴性对照组比较,低、中、高剂量组大鼠前列腺湿重均发生明显增加,差异均有统计学意义（均,,〈0．05）。空白组及阴性对照组均未见HIF-1a的表达;与空白对照组比较,高、中、低剂量组VEGF及HIF-1a的阳性表达率及灰度值、阴性对照组VEGF灰度值均发生明显变化（均P〈0．05）;与阴性对照组比较,中、低剂量组VEGF及HIF-1a的阳性表达率和高、中、低剂量组VEGF及HIF-1a（的灰度值均发生明显变化（均P〈0．05）;与低剂量量组比较,高、中剂量组VEGF及HIF-1a的阳性表达率及灰度值均发生明显变化（均P〈0．05）;与中剂量组比较,高剂量组VEGF的阳性表达率及灰度值和HlF-1a的阳性表达率均发生明显变化（均P〈0．05）。实验组大鼠HIF-1a与VEGF的表达呈明显正相关关系（r=0．575,P〈0．01）。结论前列腺内注射BTX—A可以通过抑制HIF-1a和VEGF的表达,从而-}EBN前列腺组织的血管形成,促使前列腺缩小。     

外源性联合应用EPCs和SDF-1α对大鼠肝移植缺血再灌注的保护作用

目的：探讨外源性注射骨髓来源的血管内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）或基质细胞源性因子-1α（stro－mal derived factor-1 alpha,SDF-1α）或两者联合,比较性评估3种方法对大鼠肝移植术后缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury,IRI）的影响。方法：LEWIS大鼠骨髓EPCs提取培养,流式表型鉴定,激光共聚焦功能鉴定;建立大鼠原位肝移植模型,随机分为5组：A组（假手术组）,B组（手术组）,C组（SDF-1α组）,D组（EPCs组）,E组（SDF-1α+EPCs组）;再灌注12 h后处死各组大鼠,免疫组化检测肝组织再生以及肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）的表达情况;WB检测肝组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、HGF、转化生长因子-β（transforming growth factor-beta,TGF-β）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3）蛋白表达;ELISA检测VEGF、HGF、TGF-β表达。结果：LEWIS大鼠骨髓提取的EPCs CD34、CD133的阳性比例分别为78.32%、70.76%,同时具有结合ac-LDL和UEA-1功能的EPCs,阳性率达80%以上;SDF-1α诱导EPCs穿过的细胞数[（79.6±6.3）个]明显高于对照组[（36.2±2.9）个]（P=0.000）;各组大鼠肝组织中,C、D组肝组织HGF分泌和再生情况免疫评分明显高于A、B组（P=0.000）,E组免疫评分明显高于C、D组（P=0.000）;各组VEGF、HGF、TGF-β、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达结果,C、D组VEGF、HGF、TGF-β、Bcl-2蛋白表达明显高于A、B组（P=0.000）,E组VEGF、HGF、TGF-β蛋白表达明显高于C、D组（P=0.000）,而C、D、E组Bcl-2蛋白表达比较差异无统计学意义。B、C、D组Caspase-3蛋白表达明显高于A组（P=0.000）,而E组Caspase-3蛋白明显低于C、D组（P=0.000）;ELISA结果与Western blot结果一致。结论：外源性联合应用EPCs和SDF-1α能有效保护肝移植缺血再灌注的损伤,诱导肝细胞再生,减少肝细胞凋亡。     

LED红光联合胰岛素外用对糖尿病大鼠创面愈合的影响

目的 明确LED红光联合胰岛素外用对糖尿病大鼠创面愈合的影响及其初步机制。方法 将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、红光组、胰岛素组、红光联合胰岛素组,高脂饲养后腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)进行糖尿病造模,成功后在大鼠的背部制造4个全层皮肤缺损创面,每两天对红光联合胰岛素组及红光组大鼠的创面进行20J/cm²的红光照射,胰岛素组及红光联合胰岛素组大鼠创面滴加0.5U短效胰岛素。在第0、7、10、14、21天,麻醉大鼠后拍摄创面照片并用image J软件计算大鼠创面愈合率；在第10、14天在各组随机选择两只大鼠,取创缘组织固定后进行HE染色观察组织新生血管情况以及用免疫荧光法检测VEGF、CD34表达情况,用免疫组化法检测p-Akt、Akt、HIF-1α表达情况。结果 在各个时间点,红光联合胰岛素组创面愈合率均高于其他组,差异有统计学意义(P＜0.05)；第10、14天,创面组织HE染色显示,红光联合胰岛素组创面组织内见大量新生毛细血管,胰岛素组及红光组新生毛细血管少于红光联合胰岛素组,对照组新生血管最少；用免疫荧光法检测CD34、VEGF表达情况,红光联合胰岛素组CD34和VEGF表达量高于其他组,而红光组和胰岛素组表达高于对照组；红光联合胰岛素组p-Akt、HIF-1α表达高于其他组,而红光组和胰岛素组p-Akt、HIF-1α表达高于对照组；各组Akt表达量比较,差异无统计学意义。结论 LED红光和胰岛素联合应用介导PI₃K/Akt/HIF-1α/VEGF信号通路促进糖尿病大鼠创面愈合。     

二苯乙烯苷对阿尔茨海默病神经元细胞凋亡的抑制作用

目的 探讨二苯乙烯苷(2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glycoside, TSG)对阿尔茨海默病神经元细胞凋亡的抑制情况。方法 选取24月龄SPF级SD大鼠随机分为7组，分别为正常组、假手术组、模型组、阳性药组(0.150 mg/kg石杉碱甲)、TSG低剂量组(0.033 g/kg TSG)、TSG中剂量组(0.100 g/kg TSG)、TSG高剂量组(0.300 g/kg TSG)。模型组、阳性药组与TSG各剂量组通过大鼠脑立体定位仪选取海马区域注射Aβ_25-35溶液建立AD大鼠模型，假手术组注射等量生理盐水，正常组不做处理。经被动回避实验筛选造模成功的SD大鼠，每组每日灌胃给药1次，连续给药4周。通过TUNEL凋亡实验观察大鼠海马区和皮层区神经元细胞凋亡的情况；实时荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测各组大鼠脑组织Bax、Bcl-2 mRNA的表达；免疫组织化学染色法(IHC)检测各组大鼠脑组织Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果 与正常组比较，假手术和阳性药组脑组织中海马区和皮层区神经元细胞凋亡情况无明...     

芍药苷对难愈性溃疡大鼠创面愈合及HIF-1α/VEGF/VEGFR2信号通路的影响

目的:探讨芍药苷(PF)调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)对难愈性溃疡大鼠创面愈合的影响和作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组、PF组(30mg/kg, 2次/d)、PX-478组(100mg/kg HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路抑制剂PX-478,1次/d)、PF+PX-478组，每组12只，持续2周。通过一般创面注射肌注氢化可的松制成大鼠难愈性创面模型，用相机结合Image J软件计算各组大鼠创面的愈合率；用ELISA法检测大鼠血清中氧化应激指标；HE染色检测大鼠创面病理变化；TUNEL染色检测创面组织细胞凋亡；RT-qPCR检测大鼠创面组织转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板衍生因子(PDGF)表达情况；Western blotting法检测大鼠创面组织HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路相关蛋白表达。结果:与Sham组相比，Model组大鼠创面成纤维细胞和毛细血管稀疏，愈合率、SOD、GSH-PX水平、TGF-β1、PDGF mRNA水平及H...     

精索静脉曲张对青春期大鼠睾丸生精细胞HIF-1α和VEGF表达的影响

目的:研究精索静脉曲张(VC)对大鼠睾丸生精细胞低氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible facmr-1α、HIF-1α)和VEGF表达的影响,探索精索静脉曲张引起不育的机理.方法:采用青春期雄性Wistar大鼠复制左侧精索静脉曲张模型,分别于术后30天、60天处死、取左侧睾丸,用免疫组化SP法检测HIF-1α和VEGF的表达.结果:HIF-1α和VEGF在VC组左侧睾丸组织中的表达均明显高于假手术组(SOG),随着精索静脉时间延长,HIF-1α、VEGF表达降低,但仍高于假手术组.结论:实验性精索静脉曲张可以改变青春期大鼠睾丸组织生精细胞HIF-1α和VEGF的表达.     

不同类型环氧化酶2抑制剂对椎间盘退变模型大鼠缺氧诱导因子1α和血管内皮生长因子表达的影响研究

目的探讨不同类型环氧化酶2(COX-2)抑制剂对椎间盘退变模型大鼠缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,为椎间盘退变的治疗提供参考。方法选择12月龄SPF级SD大鼠60只,建立椎间盘退变模型后采用简单随机法分为4组,每组15只:对照组采用安慰剂10 mg.kg-1.d-1灌胃给药;塞来昔布组采用塞来昔布胶囊10 mg.kg-1.d-1灌胃给药,尼美舒利组采用尼美舒利颗粒10 mg.kg-1.d-1灌胃给药,双药组采用塞来昔布胶囊5 mg.kg-1.d-1和尼美舒利颗粒5 mg.kg-1.d-1灌胃给药;共饲喂8周。检测各组大鼠HIF-1α和VEGF表达情况,椎间盘组织蛋白多糖的水平,计算软骨细胞凋亡指数(AI)。结果对照组大鼠HIF-1α和VEGF均呈阴性表达,其他各组均呈阳性表达;各组大鼠HIF-1α、VEGF阳性表达情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠蛋白多糖水平、AI比较,差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论不同类型COX-2抑制剂塞来昔布和尼美舒利可抑制HIF-1α和VEGF的表达,增加椎间盘组织蛋白多糖水平,降低AI,联合应用效果更明显,可能在椎间盘退变过程中发挥着重要作用。     

白花蛇舌草多糖对Lewis肺癌小鼠肿瘤抑制作用及机制研究

目的:白花蛇舌草多糖对Lewis肺癌小鼠肿瘤抑制作用及机制研究。方法:选取C57BL/6J小鼠,建立Lewis肺癌模型,随机分为空白组、模型组、顺铂组(6 mg·kg^-1)、白花蛇舌草多糖高、中、低剂量(200 mg·kg^-1、100 mg·kg^-1、50 mg·kg^-1)组,各组小鼠给予相应药物灌胃,连续给药21 d。取肿瘤组织称重,测定肿瘤抑制率;腹主动脉取血检测血清中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、干扰素-γ(interferon gamma,TFN-γ)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)含量;RT-PCR法检测肿瘤组织中VEGF、HIF-1α、Bcl-2和Bax的基因表达量。结果:白花蛇舌草多糖各剂量组均可明显升高模型小鼠血清中IL-2、TNF-α、TFN-γ水平(P<0.05),降低IL-10、VEGF、HIF-1α、MMP-2水平(P<0.05),同时可明显降低模型小鼠肿瘤组织中VEGF mRNA、HIF-1α、Bcl-2 mRNA表达(P<0.05),升高Bax mRNA表达(P<0.05),从而抑制肿瘤瘤体的增长。结论:白花蛇舌草多糖对小鼠Lewis肺癌组织具有明显的抑制作用。