长链非编码RNA linc00460在胃癌中的表达及对预后的影响

目的：探讨长链非编码RNA linc00460在胃癌中的表达及其与胃癌患者临床病理特征和预后的关系。方法：通过癌症基因组图谱（TCGA）胃癌数据集系统评估linc00460的差异表达,并采用实时定量PCR（qRT?PCR）在88例接受胃癌手术的患者中验证TCGA结果。采用qRT?PCR检测胃癌细胞株和正常人胃上皮细胞中linc00460的表达情况。采用基因集富集分析（gene set enrichment analysis,GSEA）法预测linc00460的调控基因。将AGS细胞分别转染linc00460过表达质粒（pcDNA?linc00460）和阴性对照序列（pcDNA3.1）,分别采用Western blot检测相关蛋白表达和CCK?8法检测两组细胞的增殖情况。结果：我们发现并证实linc00460在胃癌组织和细胞中显著高表达（P < 0.05）;高linc00460表达与患者M分期相关;linc00460表达与胃癌患者总生存期之间存在显著负相关（P < 0.05）;且Cox比例风险模型的单变量和多变量分析证实其为胃癌相关独立生存预测因子（P < 0.05）。linc00460相对高表达样本富集到P53类介质对DNA损伤反应信号转导的调控（P=0.002）、P53类介质对信号转导的正向调节作用（P < 0.001）、细胞分裂的正向调节（P < 0.001）、核分裂的正向调节（P=0.002）等基因集。AGS细胞过表达质粒pcDNA?linc00460转染组中linc00460表达水平显著高于pcDNA3.1组,差异有统计学意义（P < 0.05）。Western blot检测结果表明linc00460可下调P53蛋白表达,上调Bcl?2和Cyclin B1表达。CCK?8结果表明pcDNA? linc00460组AGS细胞增殖指数均高于pcDNA3.1组,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论：linc00460在胃癌组织中高表达,且其高表达的患者预后较差,linc00460可能通过上调P53信号通路促进胃癌细胞生长,linc00460可能参与了胃癌的恶性进展。     

LncRNA-MEG3 对胃癌生物学特性 及铂类化疗敏感性的研究

目的 探讨LncRNA-MEG3 对胃癌增殖、凋亡及顺铂化疗敏感性的影响。方法 以人正 常胃黏膜上皮细胞GES1 作为对照细胞,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测胃癌MKN28、 SGC7901、AGS 及BGC823 细胞中LncRNA-MEG3 的表达;将过表达MEG3 的质粒转染BGC823 细胞作为 pcDNA3.1-MEG3 组,转染空白质粒的阴性对照作为pcDNA3.1 组,同时设置Control 组;将BGC823 细胞 分为pcDNA3.1 组、pcDNA3.1-MEG3 组、顺铂组及pcDNA3.1-MEG3+ 顺铂组。qRT-PCR 检测转染48 h 后细胞中LncRNA-MEG3 的表达;pcDNA3.1-MEG3、顺铂单独或共同处理BGC823 细胞,细胞计数试剂 盒法及流式细胞仪分别检测细胞活力及凋亡率;Western blotting 检测STAT3、磷酸化的信号转导与转录因 子3（p-STAT3）、Cyclin D1 和Bcl-2 的表达。结果 胃癌细胞中LncRNA-MEG3 的表达均低于GES1 细胞 （P <0.05）;4 组LncRNA-MEG3 相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）;pcDNA3.1-MEG3 组和顺 铂组Cyclin D1、Bcl-2 及p-STAT3 的蛋白表达低于pcDNA3.1 组（P <0.05）,细胞凋亡率高于pcDNA3.1 组 （P <0.05）。结论 胃癌细胞中LncRNA-MEG3 表达降低,过表达LncRNA-MEG3 可降低胃癌细胞活力并诱 导细胞凋亡,增加顺铂的化疗敏感性,其机制与下调STAT3 信号通路有关。     

人AQP5真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达

目的构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒,观察水通道蛋白5(AQP5)基因在胃癌AGS细胞中的稳定表达。方法采用基因重组技术将人AQP5cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1/myc-His,构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒。脂质体介导空载体pcDNA3.1/myc-His和表达质粒pcDNA3.1-AQP5/myc-His分别转染人胃癌AGS细胞株,G418筛选,挑取阳性克隆,扩大培养,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)分别检测AQP5mRNA和蛋白表达。结果双酶切和基因测序结果均证实人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒构建成功。AQP5转染组与空白对照组、空载体组比较,AQP5mRNA表达显著增加(P<0.05),AQP5蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论成功构建人AQP5真核表达质粒并获得稳定表达AQP5基因的胃癌AGS细胞系,为进一步研究AQP5蛋白对胃癌恶性表型的影响奠定实验基础。     

COX6B2在胃癌组织中高表达并影响患者的远期预后：基于抑制p53信号调控胃癌细胞的增殖及细胞周期

目的 分析COX6B2在胃癌组织中的表达对患者远期预后的影响及其作用机制。方法 基于公共数据库、患者病历资料分析COX6B2在胃癌和癌旁组织中表达量及其对患者预后的影响;富集分析COX6B2在胃癌中可能发挥的作用;应用慢病毒转染技术干预COX6B2的表达;通过CCK-8、流式细胞术及免疫印迹实验验证其生物学功能。结果 TCGA数据库、免疫组化、免疫印迹和荧光定量PCR检测显示,COX6B2在胃癌组织中高表达（P<0.05）;Kaplan-Meier plotter数据库和K-M曲线显示,COX6B2高表达组生存期短（P<0.05）;统计分析发现COX6B2在胃癌组织高表达与临床病理分期、CEA及CA19-9密切相关（P<0.05）,COX6B2高表达、CEA≥5μg/L及CA19-9≥37 kU/L均是影响患者术后5年生存率的独立危险因素（P<0.05）且COX6B2表达量对患者远期预后有一定预判价值（P<0.05）;GO及KEGG富集结果显示,COX6B2主要参与细胞周期的调控等;CCK-8和流式检测显示,上调COX6B2促进细胞增殖,通过增加G1/S期...     

丙泊酚通过调控miR-574-5p/SOX2表达抑制胃癌AGS细胞增殖、侵袭和迁移

【摘要】 目的 探讨丙泊酚通过调控微小RNA-574-5P(miRNA-574-5P）/性别决定区Y框蛋白（SOX2）对胃癌AGS细胞增殖、侵袭和迁移的影响和分子机制。 方法 以0、5、10和20 μg/mL丙泊酚处理AGS细胞48 h。筛选丙泊酚最佳使用浓度。将转染后的AGS细胞分为对照组、丙泊酚组、丙泊酚+miR-NC组、丙泊酚+miR-574-5p组、丙泊酚+si-con组、丙泊酚+si-SOX2组、丙泊酚+miR-574-5p+pcDNA组、丙泊酚+miR-574-5p+ pcDNA-SOX2组。采用细胞计数（CCK-8）法检测细胞增殖;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Transwell实验检测细胞侵袭和迁移;实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测细胞中微小RNA（miR）-574-5p的表达水平;免疫印迹法检测细胞中SOX2蛋白的表达水平。采用上述方法检测AGS细胞增殖、侵袭、迁移能力。双荧光素酶报告基因实验检测miR-574-5p与SOX2的靶向关系。 结果 选择20 μg/mL丙泊酚浓度进行实验。与0μg/mL比较,5、10、20 μg/mL丙泊酚处理组细胞存活率、克隆形成率、侵袭细胞数和迁移细胞数均明显降低（P＜0.05）,且呈浓度依赖性,miR-574-5P表达水平呈浓度依赖性降低,SOX2呈浓度依赖性升高（P＜0.05）。与对照组比较,丙泊酚组AGS细胞存活率、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数以及miR-574-5p表达显著降低（均P＜0.05）,SOX2蛋白表达显著升高（P＜0.05）。与丙泊酚+miR-NC组比较,丙泊酚+miR-574-5p组AGS细胞存活率、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数以及miR-574-5p表达显著升高（均P＜0.05）,SOX2蛋白表达显著降低（P＜0.05）。与丙泊酚+si-con组比较,丙泊酚+si-SOX2组AGS细胞存活率、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数以及miR-574-5p表达显著升高（均P＜0.05）,SOX2蛋白表达显著降低（P＜0.05）。与丙泊酚+miR-574-5p+pcDNA组比较,丙泊酚+miR-574-5p+ pcDNA-SOX2组AGS细胞存活率、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数以及miR-574-5p表达显著降低（均P＜0.05）,SOX2蛋白表达显著升高（P＜0.05）。miR-574-5p直接与SOX2结合。 结论 丙泊酚通过调控miR-574-5p/SOX2表达抑制胃癌AGS细胞增殖、侵袭和迁移。     

LncRNA MEG3对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

目的 本研究旨在探究LncRNA MEG3在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma, OSCC）组织和细胞中的表达水平及对OSCC细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。 方法 qRT-PCR法检测OSCC患者口腔粘膜组织、肿瘤组织、及Tca8113细胞系中LncRNA MEG3的表达水平。构建pcDNA3.1-MEG3重组质粒转染Tca8113细胞,分为3组：转染过表达pcDNA3.1-MEG3的质粒（MEG3组）和空质粒pcDNA3.1-NC （NC组）;空白对照组（BLANK组）加入PBS。分别采用qRT-PCR法、CCK-8法、流式细胞术和Transwell检测LncRNA MEG3表达、细胞增殖、凋亡率和侵袭能力。结果 与正常口腔粘膜组织和细胞相比,LncRNA MEG3在OSCC组织和细胞中的表达下调（P<0.05）。体外实验发现,与空白对照组和NC组相比,过表达LncRNA MEG3组细胞增殖和侵袭能力受到抑制,凋亡率明显升高（P<0.05）。结论 LncRNA MEG3在OSCC组织和细胞中低表达;LncRNA MEG3过表达可抑制OCSS细胞的增殖和侵袭,促进凋亡。     

幽门螺旋杆菌毒力因子CagA介导的ERK信号通路活化对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨幽门螺旋杆菌毒力因子细胞毒素相关基因A蛋白（CagA）对细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路的作用,阐明CagA的致癌机制。方法：构建pcDNA3.1/CagA真核表达载体,将胃癌AGS细胞分为空白对照组（空载体转染）、CagA转染组（GZ7/CagA转染）和CagA+ERKi组（ERK1/2抑制剂预处理+GZ7/CagA转染）,采用Western blotting法测定各组细胞中CagA、磷酸化ERK（p-ERK）、总ERK（T-ERK）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和激活型caspase-3（cleaved caspase-3）蛋白表达水平,采用CCK-8法检测各组胃癌AGS细胞活性,采用流式细胞术检测胃癌AGS细胞凋亡率。结果：与空白对照组比较,CagA转染组胃癌细胞中CagA、p-ERK和Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显降低（P<0.01）;与CagA转染组比较,CagA+ERKi组胃癌细胞中p-ERK和Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.01）;与CagA转染组比较,CagA+ERKi组各时间点胃癌细胞活性明显降低（P<0.01）;与CagA转染组比较,CagA+ERKi组胃癌细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。结论：幽门螺旋杆菌毒力因子CagA可抑制胃癌细胞凋亡,促进胃癌细胞增殖,其机制可能与CagA活化ERK信号通路有关。     

UBE2C基因沉默表达对人胃癌AGS细胞增殖和迁移的影响

  目的  探讨UBE2C基因沉默对人胃癌AGS细胞增殖和迁移能力的影响。  方法  将用RNA 干扰技术构建的UBE2C-shRNA表达载体转染到293T细胞，用含有病毒颗粒的上清感染人胃癌AGS细胞，经puromycin筛选获得稳定表达的AGS细胞株。实验分为UBE2C表达沉默人胃癌AGS细胞组（干扰组）和对照组。采用qRT-PCR验证人胃癌AGS细胞中UBE2C的mRNA 表达水平，随后利用实时无标记细胞分析仪（RTCA）检测UBE2C沉默对人胃癌AGS细胞的增殖和迁移情况；同时应用CCK-8 细胞增殖检测试剂盒进一步印证UBE2C表达水平对人胃癌AGS细胞增殖能力影响。  结果  干扰组中UBE2C mRNA 表达 水平与对照组相比明显降低，AGS细胞增殖和迁移能力显著下降（P < 0.01）。  结论  靶向沉默UBE2C基因表达能抑制人胃癌AGS细胞恶性生物学行为。     

LINC00315在胃癌中的表达及对胃癌细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNALINC00315在胃癌中的表达、临床意义及其对胃癌细胞增殖、凋亡的影响。方法选取2018年1月1日—2019年12月31日在宁波市医疗中心李惠利医院接受手术治疗并经术后病理诊断确诊的胃癌患者75例,收集每例患者的胃癌组织和对应的癌旁组织。胃癌细胞系（NCI-N87、SGC-7901、AGS、HCG27）和正常胃黏膜细胞（GES-1）均购自中国科学院上海细胞库。采用qRT-PCR法检测胃癌组织和各细胞系中LINC00315的表达水平,分析LINC00315表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系。基于TCGA数据分析LINC00315的表达水平与胃癌患者预后的关系。采用MTT实验和EdU细胞增殖实验观察LINC00315对胃癌HCG27细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测LINC00315对胃癌HCG27细胞凋亡的影响。结果LINC00315在胃癌组织中的表达水平较对应的癌旁组织升高（P＜0.05）,LINC00315在胃癌细胞系（NCI-N87、SGC-7901、AGS、HCG27）中的表达水平较正常胃黏膜细胞（GES-1）升高（P＜0.05）。LINC00315表达水平与胃癌肿瘤大小及TNM分期有关（均P＜0.05）,高表达患者肿瘤较大、TNM分期较晚。TCGA数据分析结果显示：LINC00315高表达的胃癌患者总生存率、无病生存率均较低表达患者差（均P＜0.05）。MTT实验和EdU细胞增殖实验表明：敲低LINC00315能够显著抑制胃癌HCG27细胞的增殖能力。流式细胞术分析结果显示：敲低LINC00315能够显著诱导胃癌HCG27细胞凋亡。结论LINC00315在胃癌中表达上调,可能是一个胃癌预后不良的潜在分子标志物,LINC00315能够促进胃癌细胞增殖,抑制胃癌细胞凋亡。     

linc00346调控膀胱癌细胞增殖的分子机制

目的：探讨长链非编码RNA-linc00346 调控膀胱癌细胞增殖的分子机制。方法：通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测膀胱尿路上皮癌组织中linc00346 mRNA和PTEN mRNA的表达情况;沉默膀胱癌T24细胞系内linc00346的表达,通过RT-PCR检测T24细胞内的linc00346 mRNA和PTEN mRNA表达变化情况,通过蛋白质印迹（Western blot）法检测T24细胞内PTEN蛋白和PI3K/Akt信号通路中Akt、p-Akt蛋白的表达情况;CCK-8实验检测各组T24细胞的增殖能力。结果：与膀胱正常组织比较,膀胱尿路上皮癌组织中linc00346 mRNA表达上调,而PTEN mRNA的表达水平降低（均P ＜0.05）。沉默linc00346表达后,T24细胞内linc00346 mRNA的表达水平显著下降,PTEN mRNA的表达水平显著上调,PTEN蛋白水平升高,p-Akt蛋白水平降低（均P ＜0.05）;给予PTEN特异性抑制剂SF1670处理后,PTEN蛋白水平显著下调,p-Akt蛋白水平明显增加（均P ＜0.05）。沉默linc00346表达后,T24细胞的增殖能力明显受到抑制,给予SF1670处理后细胞的增殖能力显著增强（均P ＜0.05）。结论：linc00346可以增强膀胱尿路上皮癌细胞的增殖能力,其作用机制可能是通过抑制PTEN表达,激活PI3K/Akt信号通路实现的。     

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1对胃癌细胞生物学行为的影响及相关机制

目的： 探讨磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1，PCK1)在胃癌中的表达、与胃癌患者预后的关系及其潜在机制。方法： 利用TCGA数据库、HPA数据库及Oncomine 4.5数据库中胃癌以及癌旁组织的相关数据与图片，分析PCK1表达水平与胃癌患者临床病理学特征和总生存期的关系，采用基因功能富集分析(GSEA)预测PCK1调控胃癌潜在的信号通路。体外细胞学实验采用慢病毒转染胃癌HGC-27和AGS细胞，分别敲低与过表达PCK1，采用细胞功能学实验检测PCK1对胃癌细胞生长、增殖、迁移等影响，同时采用蛋白质免疫印迹检测相关蛋白的表达。结果： 与癌旁组织相比，PCK1在胃癌组织中表达明显上调(P＜0.05)；ROC曲线提示PCK1对胃癌患者预后具有良好的预测效能；通过GSEA富集分析提示原发性免疫缺陷、细胞黏附分子、趋化因子信号通路、全身性红斑狼疮、产生IgA的肠道免疫网络及RIGⅠ样受体信号通路相关的基因集在PCK1基因低表达表型中差异富集；敲低PCK1后，胃癌HGC-27和AGS细胞生长、克隆形成能力、迁移能力显著下降，同时p-AKT(Ser473)、p-mTOR、p-S6和p-4EBP1表达水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01)；过表达PCK1则与之作用相反。结论： PCK1在胃癌中呈高表达且与患者预后相关，其可能通过活化AKT mTOR信号通路促进胃癌细胞生长、增殖与迁移。     

linc00673在结直肠癌患者血浆中的表达及临床意义

目的 检测结肠息肉和结直肠癌患者血浆中linc00673的表达水平,为血浆linc00673在结直肠癌早期筛查中的应用提供理论依据。方法 收集某院2018年6月至2018年12月期间收治的结肠息肉、结直肠癌住院患者,共108例作为研究对象。采用real-time PCR检测linc00673在结直肠癌和结肠息肉患者血浆中的表达水平,分析linc00673表达水平与结直肠癌患者年龄、性别、TNM分期、肿瘤部位、大体类型、淋巴结转移及肿瘤大小的临床相关性。结果 结直肠癌患者血浆中linc00673表达水平明显高于结肠息肉患者(P<0.05);其表达水平与患者年龄、性别、TNM分期、肿瘤部位、大体形态和淋巴结转移无关,仅与肿瘤体积大小呈正相关(P<0.01)。结论 血浆linc00673水平与结直肠癌发生、发展密切相关,可作为结直肠癌早期筛查的潜在标志物。     

Linc01635对川崎病血管内皮细胞凋亡的影响

目的：探讨linc01635对川崎病（KD）血管内皮细胞凋亡的影响。方法：通过生物信息学网站预测和RNA FISH检测来分析linc01635的亚细胞定位。用KD患者血浆或健康儿童血浆刺激人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,qRT-PCR检测HUVECs内linc01635的相对表达量。通过慢病毒过表达或siRNA敲减HUVECs中的linc01635,流式细胞术分析细胞凋亡情况。用KD血浆诱导细胞凋亡,检测linc01635在KD诱导血管损伤中的作用。结果：Linc01635在HUVECs中主要分布于细胞核和细胞质。与健康对照相比,KD血浆培养的HUVECs中的linc01635相对表达量下降（P＜0.01）。Linc01635过表达抑制了HUVECs的凋亡（P＜0.01）,而linc01635敲减使HUVECs凋亡增加（P＜0.01）。KD血浆能促进HUVECs凋亡,而过表达linc01635能抑制KD血浆诱导的凋亡（P＜0.01）。结论：KD血浆处理会导致血管内皮细胞中linc01635表达量下降,而linc01635的减少会促进血管内皮细胞凋亡。     

食管癌相关基因2对EC9706细胞恶性增殖的抑制作用

目的探讨食管癌相关基因2(esophageal cancer related gene2,ECRG2)对EC9706食管癌细胞恶性增殖的抑制作用及其机制。方法利用DNA重组技术,构建ECRG2真核表达质粒(pcDNA3.1ECRG2),在食管癌EC9706细胞中转染并表达ECRG2蛋白,观察细胞的生长状态,比较平板集落和软琼脂克隆形成能力的改变,分析ECRG2对EC9706恶性表型的影响。进一步采用WesternBlot检测p53、p21的改变。结果转染表达ECRG2后,EC9706细胞的生长受到干扰,细胞的增殖速度受到抑制,实验组细胞平板集落形成率为18%,而对照组为55%,两者间差异显著(P<0.05);肿瘤细胞的停泊非依赖能力降低,实验组软琼脂克隆体积小且形成个数(8±1.88)明显少于对照组(14.3±3.13),差异显著(P<0.05)。WesternBlot分析表明,EC9706细胞转染表达ECRG2后伴随着p53、p21蛋白表达上升。结论转染表达ECRG2蛋白能够部分逆转食管癌EC8706细胞的恶性表型,其过程可能与p53、p21通路密切相关。     

长链非编码RNA linc00261在肝细胞癌中的表达及意义

目的研究长链非编码RNA linc00261 在肝细胞癌（HCC）中的表达、功能及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）法检测linc00261在74例肝癌、癌旁肝组织中的表达;采用卡方检验分析其表达量与临床病理指标的相关性;应用 COX回归模型分析其表达水平与肝癌患者术后预后的关系;qRT-PCR检测linc00261在5株肝癌细胞株中的表达;在肝癌细胞 株MHCC-LM3和SNU-449中采用siRNA（si-linc00261-1,si-linc00261-2,si-NC和空白对照组）和Lipofectamine3000进行转染 敲低linc00261,活细胞计数（CCK8）、Transwell实验分别研究linc00261对肝癌细胞增殖,侵袭迁移能力的影响。结果HCC组 织中linc00261的表达水平与肝癌患者术前血清AFP（P=0.032）、肿瘤大小（P=0.007）、有无微血管癌栓（P=0.01）、TNM分期（P= 0.02）显著相关;HCC组织中linc00261的低表达与患者的不良预后相关,其术后无瘤生存期明显缩短（P<0.05）,是影响HCC患 者术后无瘤生存期的一个独立危险因素;下调linc00261的表达可促进肝癌细胞株MHCC-LM3（P<0.01）和SNU-449（P<0.001） 的迁移和侵袭能力,对细胞增殖无明显影响（P>0.05）。结论Linc00261有望成为肝癌切除术后的一种新的预后指标。     

甲硫氨酸饥饿通过抑制程序性死亡配体1诱导胃癌细胞凋亡

目的 研究甲硫氨酸饥饿诱导胃癌细胞凋亡的分子机制。方法 TCGA数据库分析胃癌组织中PD-L1的表达;胃癌AGS细胞分为对照组、甲硫氨酸饥饿处理组、siPD-L1处理组、甲硫氨酸饥饿联合siPD-L1处理组,CCK-8检测胃癌细胞活力,AO/EB双染检测胃癌细胞凋亡数目,流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡率,western blotting检测胃癌细胞PD-L1、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达;Starbase数据库分析PD-L1与Bcl-2抗凋亡蛋白家族(BCL2A1,MCL1,BCL2,BCL2L1)之间的联系。结果 PD-L1在胃癌组织中高表达(P=0.0011),PD-L1的表达与胃癌G分级相关(P＜0.05);甲硫氨酸饥饿和siPD-L1能够抑制胃癌细胞存活率(P＜0.05),促进凋亡(P＜0.05),抑制PD-L1和Bcl-2表达(P＜0.05),上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达(P＜0.05);甲硫氨酸饥饿联合siPD-L1处理显示siPD-L1与甲硫氨酸饥饿起协同作用(P＜0.05)。PD-L1与Bcl-2抗凋亡蛋白家族之间存在正相关(P＜0.005)。结论 甲硫氨酸饥饿是通过抑制PD-L1的表达下调抗凋亡蛋白Bcl-2、上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达从而诱导胃癌细胞凋亡。     

IEX-1蛋白在胃癌中的表达及其意义

目的揭示即刻早期反应X-1（IEX-1）蛋白在胃癌组织及细胞系中的表达,探讨其对人胃癌细胞凋亡和增殖的影响。方法采用免疫组织化学法检测100 例胃镜活检标本中IEX-1 蛋白的表达,用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot 检测人正常胃黏膜细胞GES-1 和胃癌细胞MKN28 中-1 基因和蛋白的表达,同时转染IEX-1 的过表达质粒pcDNA3-FLAG-IEX-1 和干扰质粒pLL3.7-si-IEX-1,分别采用流式细胞术及四甲基偶氮唑盐比色法检测IEX-1 对细胞周期、凋亡及增殖的影响。结果胃癌组织中IEX-1 蛋白表达水平高于正常胃组织和慢性胃炎组织（p <0.05）,且随着病情进展,IEX-1 表达水平有逐渐升高的趋势。相对于人正常胃黏膜细胞GES-1,胃癌细胞MKN28 中-1 基因和蛋白表达更高（p <0.05）。与对照组相比,IEX-1 蛋白表达增高后S 期细胞比例升高,G2期细胞比例降低,细胞增殖率升高,凋亡减少（p <0.05）,而干扰IEX-1 蛋白表达后,G1期细胞升高,G2期细胞比例下降,细胞增殖率下降,细胞凋亡增加（p <0.05）。结论IEX-1 蛋白在胃癌组织中呈高表达,在人胃癌细胞中上调IEX-1 蛋白能促进细胞增殖,发挥抗凋亡能力,干扰IEX-1 蛋白表达能阻滞细胞周期进程,并诱导凋亡。