FOXF1在涎腺腺样囊性癌中的表达及临床意义研究

目的探讨叉头蛋白1（FOXF1）在涎腺腺样囊性癌（SACC）中的表达，并分析其临床意义。方法选取行手术切除治疗、术前未行放疗或化疗且术后组织病理学检查确诊为原发性SACC的患者93例，回顾并记录患者的临床病理特征与预后情况，采用免疫组化染色法检测SACC组织FOXF1的表达，分析SACC组织FOXF1表达与患者临床病理特征、复发及无瘤生存的关系。结果46.2％（43/93）的患者SACC组织中FOXF1表达阳性。肿瘤位于大涎腺的患者FOXF1表达阳性率明显高于位于小涎腺的患者（P＜0.05）。T1~3期患者FOXF1表达阳性率明显高于T4期患者（P＜0.05）。SACC组织FOXF1表达与患者是否首诊、性别、年龄、远处转移、神经侵犯、淋巴结转移和组织类型等病理特征无明显关系（均P＞0.05）。年龄、FOXF1表达是SACC患者复发的独立影响因素（均P＜0.05）。SACC组织FOXF1阳性表达患者5年无瘤生存率高于阴性表达患者（81.2％vs50.9％，P＜0.05）。结论FOXF1在SACC的发生、发展中起肿瘤抑制因子的作用，且可能是SACC预后较好的预测指标。     

涎腺腺样囊性癌p16蛋白和增殖细胞核抗原的表达

目的 探讨涎腺腺样囊性癌中p16蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）表达与病理分型及淋巴转移关系，为临床治疗及判断预后提供资料。方法 利用免疫组化检测36例涎腺腺样囊性癌组织中p16蛋白阳性表达及PCNA表达。结果 p16蛋白在腺样囊性癌组织中阳性率为33．33％，PCNA阳性率为72．22％；癌组织中p16蛋白阳性表达随着病理分级增高而降低（P〈0．05）；不同病理类型癌组织中PCNA阳性表达差异无统计学意义（P〉0．05）；有淋巴转移癌组织中p16蛋白的阳性表达低于无淋巴转移癌组织（P〈0．05），而PCNA阳性表达则高于无淋巴转移癌组织（P〈0．05）。结论 p16和增殖细胞核抗原表达水平反映该肿瘤浸润性和恶性度，可作为预测淋巴结转移和判断预后的参考指标。     

乳腺癌中PCNA和BCA-225蛋白表达与预后相关性研究

目的：检测PCNA和BCA-225蛋白在乳腺癌组织中的表达,并探讨两者与病理特征和预后的关系。方法：采用免疫组化SP法检测PCNA和BCA-225蛋白在70例原发性乳腺浸润性导管癌及10例乳腺良性病变中的表达,分析其与组织病理分级、淋巴结转移个数、临床TNM分期和癌基因Her-2等因素及预后的关系。结果：乳腺癌组织中PCNA和BCA-225高表达率分别为64.29%和55.71%,均显著高于乳腺良性病变组织,差异均有统计学意义（P均＜0.01）。乳腺癌中PCNA表达与组织病理分级、淋巴结转移个数、临床TNM分期及癌基因Her-2相关（P＜0.05）,而BCA-225表达与病理分级和Her-2相关（P＜0.05）,PCNA与BCA-225表达呈正相关（r=0.2685,P＜0.05）。乳腺癌生存组PCNA蛋白表达明显低于死亡组,差异有统计学意义（P＜0.05）。Kaplan-Meier生存曲线分析表明PCNA低表达患者生存期明显长于高表达患者,差异有统计学意义（P＜0.05）。Cox多因素回归分析显示PCNA蛋白为乳腺癌患者独立有效的预后指标,风险度exp为1.819224（P＜0.05）。结论：乳腺癌PCNA高表达与肿瘤的侵袭转移、增殖、发展及预后紧密相关,PCNA 低表达患者的生存状况好于高表达患者,是评价乳腺癌患者预后的独立有效指标。BCA-225对判断乳腺癌患者的预后可能有一定的参考价值。     

KiSS-1和VEGF在涎腺黏液表皮样癌中的表达及其对血管生成的影响

目的 研究肿瘤转移抑制基因KiSS-1和血管内皮生长因子(VEGF)在涎腺黏液表皮样癌(MEC)组织中的表达情况及其对血管生成的影响.方法 选择河北北方学院附属第一医院口腔科2007年6月至2016年6月收治的68例MEC患者为研究对象.应用免疫组织化学SP法检测68例MEC组织、20例正常涎腺组织中KiSS-1和VEGF的表达,统计学比较其在不同临床病理特征的MEC组织中表达阳性率的差异.光镜下计数利用CD105标记的微血管密度(MVD),统计学比较不同临床病理特征的MEC组织MVD值的差异,并观察KiSS-1和VEGF的表达对MEC组织MVD值的影响.结果 68例MEC组织中KiSS-1的阳性表达率为38.24%,明显低于正常涎腺组织的70.00%,VEGF的阳性表达率为70.59%,明显高于正常涎腺组织的10.00%,差异均有统计学意义(P<0.05).KiSS-1的表达与MEC的淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05),VEGF的表达与MEC的病理分级、淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05);KiSS-1阳性组MVD值为(29.50±9.14),明显低于阴性组的(35.24±10.45),VEGF阳性组MVD值为(35.33±10.20),明显高于阴性组的(27.57±8.45),差异均有显著统计学意义(P<0.01);KiSS-1的表达与VEGF表达呈负相关(rs=-0.488,P=0.000).结论 在MEC组织中KiSS-1表达的下调可能促进VEGF的表达,从而促进了MEC组织血管的生成,促进其侵袭和转移.     

涎腺肿瘤中MMP-2与HSP70的表达及其意义

目的研究基质金属蛋白酶2（MMP-2）与热休克蛋白70（HSP70）在涎腺肿瘤中的表达,探讨其临床病理意义。方法采用SP免疫组化染色方法检测38例涎腺肿瘤中MMP-2与HSP70的表达,采用SPSS软件统计分析。结果MMP-2、HSP70在涎腺肿瘤中的表达明显高于正常涎腺组织（P〈0．01）;MMP-2及HSP70在涎腺恶性肿瘤中的表达明显高于涎腺多形性腺瘤（P〈0．01）。结论在涎腺肿瘤中,MMP-2、HSP70均有较高水平表达,与正常涎腺组织比较差别有高度统计意义,MMP-2及HSP70在涎腺恶性肿瘤中的表达明显高于涎腺多形性腺瘤。     

涎腺肿瘤中增殖细胞核抗原,bcl-2,c-myc与细胞凋亡关系的研究

目的：探讨涎腺肿瘤中细胞凋亡及其调控基因bcl-2,c-myc及增殖细胞核抗原（PCNA）间的关系，方法：采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术，免疫组织化学染色和HE染色对18例多形性腺瘤和52例恶性涎腺肿瘤中细胞凋亡和PCNA，bcl-2,c-myc蛋白表达进行观察和比较。结果：恶性涎腺肿瘤的凋亡细胞指数和增殖细胞指数明显高于多形性腺瘤（P＜0．05），恶性涎腺肿瘤中bcl－2和c-myc蛋白表达率和表达强度明显高于多形性腺瘤（P＜0．05），结论：细胞凋亡和调控基因异常在涎腺肿瘤中可能起重要作用，在涎腺肿瘤中，bcl-2和c-myc蛋白的共同作用可抑制细胞凋亡。     

基质金属蛋白酶-9在涎腺黏液表皮样癌中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达与涎腺黏液表皮样癌细胞增殖活性和转移的关系.方法 采用免疫组织化学SP法检测42例涎腺黏液表皮样癌标本中MMP-9及PCNA的表达.结果 MMP-9在涎腺黏液表皮样癌中的表达与淋巴结转移、TNM 分期密切相关(P＜0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤分化程度无关(P＞0.05).有淋巴结转移、TNMⅢ Ⅳ期者,MMP-9的表达分别明显高于无淋巴结转移、TNMⅠ Ⅱ期者(P＜0.05).黏液表皮样癌中MMP-9与PCNA的表达呈正相关(r=0.621,P＜0.01).结论 MMP-9在黏液表皮样癌细胞的增殖和转移中起重要作用,可作为判断涎腺黏液表皮样癌恶性潜能的生物学指标.     

非小细胞肺癌survivin和增殖细胞核抗原表达的意义

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）组织中survivin蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达及探讨其临床病理学意义。方法：采用免疫组织化学SP法,分别检测43例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中survivin和PCNA蛋白的表达。43例均随访或追观5年以上。结果：NSCLC的survivin阳性表达率（79.1%,34/43）明显高于正常支气管上皮组织阳性表达率（13.3%,2/15）(P＜0.01）;Ⅲ期survivin表达明显高于Ⅰ+Ⅱ期（P＜0.05）;Survivin++～+++组的生存期明显较survivin－～+组短;Survivin的表达与其它临床病理参数均无明显关系（P＞0.05）。NSCLC的PCNA增殖指数显著高于正常支气管黏膜上皮组织（P＜0.01）;增殖指数与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期呈正相关（P＜0.01）,与生存期呈负相关（P＜0.01）。增殖指数与其它临床病理参数均无明显关系（P＞0.05）。Survivin蛋白++～+++组中,增殖指数明显高于survivin－～+组（P＜0.05）。结论：Survivin和PCNA蛋白过度表达与NSCLC的发展、预后有密切关系,可作为临床评估NSCLC的进展及判断其预后的重要指标之一。Survivin在NSCLC中表达上调,与细胞增殖关系密切,提示survivin对肺癌的发生发展起重要作用。     

涎腺腺样囊性癌组织SEMA3G表达及甲基化研究

目的探讨信号素分子3G（SEMA3G）在涎腺腺样囊性癌（SACC）组织中的表达及基因启动子甲基化水平,以及与患者临床病理特征和预后的关系。方法选取2002年2月至2013年12月中国科学院大学附属肿瘤医院（浙江省肿瘤医院）收治的SACC患者55例。采用免疫组化SP法检测55例SACC组织及对应癌旁正常组织中SEMA3G的表达情况,采用实时荧光定量甲基化特异性聚合酶链反应检测SEMA3G基因的甲基化情况。分析SACC组织SEMA3G表达水平、基因甲基化水平与临床病理特征及预后的关系。结果SACC组织SEMA3G表达水平低于癌旁正常组织,甲基化水平高于癌旁正常组织（均P＜0.05）;SEMA3G表达水平与SACC患者是否复发、T分级及TNM分期有关（均P＜0.05）。SEMA3G基因甲基化水平与SACC患者T分级、TNM分期有关（均P＜0.05）。两者与患者性别、年龄、肿瘤位置、组织类型、是否侵犯邻近组织、淋巴结转移、神经累及、肌层浸润及远处转移均无关（均P＞0.05）。与阳性表达患者比较,SEMA3G阴性表达的SACC患者预后较差（P＜0.05）。结论SEMA3G异常表达与SACC发生、预后可能存在密切关系,启动子区甲基化可能是该基因表达失活的主要调控机制之一。     

PLK1基因与胃癌AZ521细胞肿瘤生物学行为的研究

［摘要］ 目的观察抑制PLK1基因表达后对胃癌AZ521细胞生长增殖和侵袭转移的影响,探讨PLK1基因作为胃癌基因治疗靶点的可行性及相关机制。 方法应用siRNA干扰技术抑制PLK1基因表达,采用实时荧光定量PCR法检测胃癌AZ521细胞PLK1 mRNA表达水平;采用Western blot法检测AZ521细胞中PLK1、MMP-9、E-cadherin、Vimentin蛋白表达;应用流式细胞仪检测AZ521细胞周期分布的变化;采用Transwell实验检测AZ521细胞侵袭能力的影响。 结果siRNA组PLK1 mRNA表达水平明显低于control组（P＜0.05）。siRNA组PLK1、Vimentin、MMP-9蛋白表达明显低于control组,E-cadherin蛋白表达明显高于control组（P＜0.05）。siRNA组G2/M期细胞细胞表达量明显高于control组,S期细胞表达量明显低于control组（P＜0.05）;2组G0/G1期细胞表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。siRNA组AZ521细胞穿膜细胞数明显少于control组（P＜0.05）。 结论PLK1 siRNA可以阻断PLK1的表达和功能,PLK1在胃癌的生长和侵袭转移中发挥了重要作用。     

沉默PLK1基因表达对肺腺癌H1792细胞肿瘤生物学行为影响的研究

［摘要］ 〖HTH〗目的〖HTSS〗〖KG*2〗探讨PLK1表达下调对肺腺癌H1792细胞肿瘤生物学行为的影响,并分析相关机制。 〖HTH〗方法〖HTSS〗〖KG*2〗将PLK1 siRNA和control siRNA转染肺腺癌H1792细胞48 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）法检测肺腺癌H1792细胞PLK1 mRNA表达水平;采用Western blot法检测H1792细胞中PLK1、E-cadherin、Vimentin蛋白表达;再通过流式细胞术检测肺腺癌H1792细胞检测周期分布的变化情况;Transwell实验检测H1792细胞侵袭能力的改变。 〖HTH〗结果〖HTSS〗〖KG*2〗PLK1 siRNA组PLK1 mRNA表达水平显著低于control siRNA组（P＜0.05）。PLK1 siRNA组PLK1蛋白和 Vimentin蛋白表达显著低于control siRNA组,E-cadherin蛋白表达显著高于control siRNA组（P＜0.05）。PLK1 siRNA组G2/M期细胞比例显著高于control siRNA组,S期细胞比例显著低于control siRNA组（P＜0.05）。siRNA组穿膜细胞数显著少于control siRNA组（P＜0.05）。 〖HTH〗结论〖HTSS〗〖KG*2〗PLK1在肺腺癌的生长和侵袭转移中发挥重要作用。     

去甲斑蝥素对人黑色素瘤A375细胞周期、活性氧自由基及细胞凋亡的影响

［摘要］ 目的探讨去甲斑蝥素（Norcantharidin,NCTD）对人黑色素瘤A375细胞周期、ROS自由基及细胞凋亡的影响及其机制。 方法培养人A375黑素瘤细胞,分别采用10,20,40 μmol/L NCTD预处理,培养48 h后,采用流式细胞术测定NCTD对人A375黑素瘤细胞周期的影响,采用免疫印迹法检测NCTD对人A375黑素瘤细胞蛋白Cyclin D1和P21表达的影响,采用流式细胞术测定NCTD对人A375黑素瘤细胞ROS及凋亡水平的影响。 结果10,20,40 μmol/L NCTD组G1期细胞比例高于对照组,S期和G2期细胞比例低于对照组,20,40 μmol/L NCTD组G1期细胞比例高于10 μmol/L NCTD组,S期和G2期细胞比例低于10 μmol/L NCTD组,40 μmol/L NCTD组G1期细胞比例高于20 μmol/L NCTD组,S期和G2期细胞比例低于20 μmol/L NCTD组（P＜0.05）。40 μmol/L NCTD组处理人A375黑色素瘤细胞48 h后,细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin A和CDK2低于对照组,P21蛋白高于对照组（P＜0.05）。10,20,40 μmo/L NCTD组细胞内ROS水平高于对照组,20,40 μmol/L NCTD组细胞内ROS水平高于10 μmol/L NCTD组,40 μmol/L NCTD组细胞内ROS水平高于20 μmol/L NCTD组（P＜0.05）。10,20,40 μmol/L NCTD组细胞凋亡率高于对照组,20,40 μmol/L NCTD组细胞凋亡率高于10 μmol/L NCTD组,40 μmol/L NCTD组细胞凋亡率高于20 μmol/L NCTD组（P＜0.05）。NAC组细胞凋亡率低于对照组,NCTD组和NAC+NCTD组细胞凋亡率高于对照组,NAC+NCTD组细胞凋亡率低于NCTD组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。 结论NCTD通过阻滞细胞G1周期、减少S期抑制人A375黑色素瘤细胞的增殖,通过诱导ROS水平升高诱导细胞凋亡。     

全髋双动置换术与PFNA在治疗高龄股骨粗隆间骨折的临床疗效比较

［摘要］ 目的探究全髋双动置换术与股骨近端髓内钉内固定（proximal femoral nail anti-rotation,PFNA）治疗高龄股骨粗隆间骨折的临床疗效。 方法选择77例高龄股骨粗隆间骨折患者作为研究对象,32例患者行全髋双动置换术,纳入全髋双动置换术组,45例患者行PFNA手术治疗,纳入PFNA组。比较2组患者围手术期指标、疼痛评分、术后髋关节功能及并发症发生情况。 结果全髋双动置换术组手术时间、下地负重时间及住院时间短于PFNA组,术中出血量高于PFNA组,差异有统计学意义（P＜0.05）;2组患者术后2周时疼痛评分差异无统计学意义（P＞0.05）,全髋双动置换术组患者术后3、6个月时疼痛评分显著低于PFNA组（P＜0.05）;末次随访时全髋双动置换术组患者Harris评分优于PFNA组（P＜0.05）;全髋双动置换术组、PFNA组髋关节功能恢复Harris评分等级比较差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论全髋双动置换术治疗高龄股骨粗隆间骨折效果较好,与PFNA术比较,可缩短术后恢复时间,提高髋关节功能。     

miR-655-3p在头颈鳞状细胞癌中的表达改变及其临床意义

［摘要］ 目的 初步探讨miR-655-3p在头颈鳞状细胞癌中的表达情况及其可能的临床意义。 方法 通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）的方法,检测头颈鳞状细胞癌组织及其配对癌旁正常组织中miR-655-3p的相对表达水平,并分析其相对表达水平与头颈鳞状细胞癌患者临床病理参数之间的关系。 结果 miR-655-3p在头颈鳞状细胞癌组织样本中相对表达水平明显低于配对癌旁正常组织样本中（P＜0.05）;miR-655-3p高表达组和低表达组在临床分期（P=0.038）、组织分化程度（P=0.036）及是否发生颈部淋巴结转移（P=0.042）各临床特征中的构成比差异有统计学意义。而在患者性别、年龄、吸烟、饮酒等临床特征组的构成比中差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 头颈鳞状细胞癌中miR-655-3p表达降低,其表达水平与患者临床分期、癌组织分化程度及是否伴有颈部淋巴结转移等临床特征相关,提示其可能作为抑癌基因,在头颈鳞状细胞癌中表达失活,某种程度上促进了头颈鳞状细胞癌的发生发展。     

非HIV免疫抑制巨细胞病毒肺炎患者合并感染情况分析

［摘要］ 目的分析非获得性免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）免疫抑制患者罹患巨细胞病毒肺炎合并感染的特点,为临床治疗提供参考。 方法回顾性分析68例非HIV免疫抑制患者巨细胞病毒肺炎患者的一般临床资料和合并感染的病原学资料。 结果68例患者均为非HIV感染患者,免疫抑制为应用糖皮质激素或者免疫抑制剂所致,基础疾病为肾脏疾病、风湿性疾病、血液系统疾病,合并疾病者也非常多见;超过70%患者为混合感染,合并有细菌、真菌或其他病原体感染。患者总体病死率较高（33.82%）。因皮肤疾病应用药物所致免疫抑制患者病死率较高,合并疾病在死亡患者更为多见;肺部合并革兰阳性球菌感染或发生血流感染者预后更差。 结论肾脏疾病、风湿性疾病、血液系统疾病并接受糖皮质激素或免疫抑制剂治疗的患者,容易发生巨细胞病毒肺炎且总体病死率较高。因皮肤疾病应用药物所致免疫抑制患者或合并其他疾病者、肺部合并革兰阳性球菌感染或发生血流感染者病死率较高。     

不同RNA提取及反转录方法对环状RNA聚合酶链反应的影响

［摘要］ 目的 比较不同总RNA提取方法及不同反转录引物对喉鳞状细胞癌细胞株Hep2细胞环状RAN扩增的影响,进一步为环状RNA鉴定与扩增提供可靠的实验方法。 方法 使用Trizol抽提法和miRNeasy Mini试剂盒提取Hep2细胞中的总RNA;Nanodrop 2000对总RNA进行定量及纯度测定;使用随机引物和通用引物分别对总RNA进步反转录;实时定量聚合酶链反应检测Hep2细胞中环状RNA-circHIPK3及circFLNA的表达。 结果 Trizol抽提法提取的RNA浓度和RNA总量高于miRNeasy Mini试剂盒提取的RNA总浓度结果（P＜0.01）,但应用miRNeasy Mini试剂盒提取的RNA纯度要高于Trizol抽提法（P＜0.05）,应用随机引物反转录,能扩增出circHIPK3和circFLNA,而利用通用引物进行反转录,circHIPK3及circFLNA不能被扩增;另外,利用miRNeasy Mini试剂盒法提取总RNA后所扩增出circHIPK3及circFLNA的相对表达量明显高于Trizol抽提法（P＜0.01）。 结论 miRNeasy Mini试剂盒提取总RNA纯度更高,更有利于环状RNA的扩增,利用随机引物进行反转录而非通用引物,可顺利扩增出环状RNA。     

改良Kawase入路手术切除岩斜区脑膜瘤的临床研究

［摘要］ 〖HTH〗目的〖HTSS〗探讨改良Kawase入路手术切除治疗岩斜区脑膜瘤（petroclival meningiomas,PCMs）的临床价值。 〖HTH〗方法〖HTSS〗回顾性分析102例PCMs患者的临床资料,根据手术方法分为颞下经小脑幕入路组(A组)50例和改良Kawase入路组(B组)52例,患者均给予PCMs常规基础治疗,A组在常规治疗基础上采取颞下经小脑幕入路手术切除治疗,B组在常规基础治疗上采用改良Kawase入路手术切除治疗,治疗结束后比较2组肿瘤切除程度、神经功能和生活质量情况、术后并发症发生情况。 〖HTH〗结果〖HTSS〗2组肿瘤切除程度差异无统计学意义（P＞005）;A组术后神经功能障碍发生率显著高于B组（P＜0.05）;2组术后生活质量差异无统计学意义（P＞005）;A组并发症发生率高于B组（P＜0.05）。 〖HTH〗结论〖HTSS〗改良Kawase入路手术切除治疗PCMs具有良好的临床疗效和预后效果,且具有一定的安全性,可作为临床治疗PCMs患者的首选方案。     

腮腺良恶性多形性腺瘤中COX-2与Survivin表达的相关性研究

［摘要］ 目的检测腮腺多形性腺瘤及恶性多形性腺瘤中COX-2与Survivin蛋白的表达情况,探讨COX-2、Survivin与腮腺多形性腺瘤发生、发展及恶变的相关性。 方法按照Seifert分型标准将多形性腺瘤标本分为4组。A组,基质丰富型20例;B组,其他型24例;C组,细胞丰富型22例;D组,恶性多形性腺瘤18例。采用免疫组织化学法检测各组COX-2和Survivin蛋白的表达情况,分析COX-2和Survivin蛋白的表达在腮腺良恶性多形性腺瘤生成及转归中的相关性。 结果COX-2蛋白于肿瘤细胞的细胞浆中阳性表达,偶尔于细胞膜和细胞核中阳性表达。C组和D组COX-2蛋白阳性表达率高于A组（P＜0.05）。Survivin蛋白在腺管样导管上皮细胞及黏液样组织中阳性表达,于细胞浆和（或）细胞核中可见棕褐色颗粒状阳性表达。D组Survivin蛋白阳性表达率高于A组（P＜0.05）。经Spearman相关性分析,COX-2与Survivin表达呈正相关(rs=0.560,P＜0.01),Survivin表达水平越高的组织细胞中,COX-2表达水平增高。 结论COX-2、Survivin在腮腺良恶性多形性腺瘤中的表达存在相关性,为多形性腺瘤临床病理诊断提供了一定的理论依据,并可能成为新的生物标志物和治疗基因靶点。