丹参酮对阿尔茨海黩病样大鼠海马内乙酰胆碱酯酶和一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨丹参酮治疗阿尔茨海黩病（Alzheimer‘s disease,AD)样大鼠的神经化学机制。方法 应用凝聚态β-淀粉样肽1-40片段（Aβ1-40）在大鼠海马齿状回背侧进行微量注射以建立AD样记忆障碍的动物模型；利用改良的乙酰胆碱酯酶（AChE)组织化学方法观察大鼠海马内各亚区胆碱能纤维的变化；用免疫组织化学方法检测大鼠海马内神经元型一氧化氮合酶（nNOS)、诱导型一氧化氮合酶（iNOS)的表达。结果 大鼠双侧海马内注射Aβ1-40（μg）14d后，海马内各亚区AChe阳性纤维面积百分比显著低于对照组；海马内iNOS的表达上调，而nNOS的表达则明显降低。此外，大鼠海马各亚区内AChE阳性纤维面积百分比与iNOS细胞数存在显著负相关，丹参酮50mg/kg连续灌胃14d后，分别对上述变化有不同程度的改善作用。结论 丹参酮治疗AD样大鼠的作用机制可能民保护脑内胆碱能系统和调节NOS的表达有关。     

丹参酮对阿尔茨海默病样大鼠海马内乙酰胆碱酯酶和一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨丹参酮治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)样大鼠的神经化学机制.方法应用凝聚态β-淀粉样肽1～40片段(Aβ1～ 40)在大鼠海马齿状回背侧进行微量注射以建立AD样记忆障碍的动物模型;利用改良的乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学方法观察大鼠海马内各亚区胆碱能纤维的变化;用免疫组织化学方法检测大鼠海马内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达.结果大鼠双侧海马内注射Aβ1～40(20μg)14 d后,海马内各亚区AChE阳性纤维面积百分比显著低于对照组;海马内iNOS的表达上调,而nNOS的表达则明显降低.此外,大鼠海马各亚区内AChE阳性纤维面积百分比与iNOS细胞数存在显著负相关.丹参酮50 mg/kg连续灌胃14 d后,分别对上述变化有不同程度的改善作用.结论丹参酮治疗AD样大鼠的作用机制可能与保护脑内胆碱能系统和调节NOS的表达有关.     

丹参酮对阿尔茨海默病样大鼠海马内诱导型一氧化氮合酶mRNA和乙酰胆碱酯酶表达的影响

目的探讨丹参酮（Tan）对阿尔茨海默病（AD）样大鼠海马内诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mR—NA及乙酰胆碱酯酶（AChE）表达水平的影响。方法60只SD大鼠随机分为3组，每组20只：对照组、模型组、治疗组。模型组与治疗组，在大鼠双侧海马齿状回背侧细胞带微量注射10μg凝聚态Aβ1—42以建立AD样记忆障碍的动物模型；建模24h后，用丹参酮（50mg／kg）对治疗组大鼠连续灌胃14d。采用以下方法观察丹参酮的干预效果：采用明暗箱被动回避法、穿梭法检测丹参酮对大鼠学习记忆功能障碍的改善作用；用半定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）方法测定海马内iNOS mRNA的表达；利用AChE组织化学方法观察大鼠海马内各亚区胆碱能纤维的变化。结果与对照组相比，模型组大鼠的学习记忆功能明显障碍，而给予丹参酮治疗后，可以有效延长大鼠进洞潜伏期（P〈O．05），显著增加大鼠主动回避次数（P〈O．05），减少逃避失败次数（P〈O.05）。模型组大鼠海马内iNOS的表达上调，各亚区AChE阳性纤维面积百分比则显著低于对照组（P〈O．01）；治疗组中上述指标变化有不同程度的改善。结论丹参酮对Aβl—42诱导大鼠的学习记忆功能障碍具有显著改善作用。其机制可能是保护AD样大鼠脑内胆碱能系统，并调节iNOS的表达。     

胃化学性炎性痛时幽门括约肌内肠神经系统神经递质的变化

为探讨大鼠幽门括约肌在化学性炎性痛时氮能和胆碱能神经元的变化,采用还原型辅酶Ⅱ和亚铁氰化铜直接显色的组织化学法,分别显示一氧化氮合酶（NOS）和乙酰胆碱酯酶（AChE)阳性神经元成分及甲醛诱发胃癌后2种神经元成的变化,结果显示：甲醛致胃炎性痛时大鼠幽门括约肌粘膜下丛及肌间神经丛NOS和AChE阳性神经成分活性均降低,仅于括约肌肠侧端或胃侧端偶见单个分布的2种酶弱阳性胞体,肌内2种神经纤维减少,酶活性也弱。图像分析肌为NOS和AChE阳性神经纤维活性平均光密度,甲醛组比对照组均显著降低（P＜0．01）。提示在甲醛引起的胃急性化学性炎性痛时肠神经系统中NO－和ACh能神经参与了幽门括约肌活动的调控。     

丹参酮对两种学习记忆功能障碍模型大鼠治疗作用的实验研究

目的研究丹参酮对拟人类阿尔茨海默病（AD）和血管性痴呆（VD）2种模型大鼠学习、记忆功能障碍的改善作用。方法①实验动物随机分成5组：痴呆（AD／VD）模型组、丹参酮治疗组、假造模对照组和正常对照组。VD模型组：应用改良的大脑中动脉线栓塞（MCAO）法建模；AD模型组：应用D-半乳糖腹腔注射和海马内注射β-淀粉样肽蛋白片段1-40（Aβ1-40）复合造模方法建模。丹参酮治疗组：VD大鼠造模完成后或AD大鼠造模24h后给予丹参酮[somg／（kg·d）]，溶于5ml玉米油中灌胃14d。假造模对照组：与VD大鼠同法，但不做插线、结扎；与AD大鼠同法注射等量溶媒。正常对照组：大鼠不做任何处理。②采用水迷宫行为学实验，以单位时间逃避潜伏期及其频率为指标，测定大鼠空间学习、记忆功能。结果①AD／VD大鼠逃避潜伏期明显延长，逃生错误频率高，与两个对照组比较差异均有显著性意义。②丹参酮治疗组大鼠较痴呆模型组逃避潜伏期明显缩短，逃生错误频率减低，差异有统计学意义。结论①2种痴呆大鼠模型具有较好仿真人类AD／VD的特点。②丹参酮对AD／VD具有一定的治疗作用。     

SE大鼠认知、情感障碍与海马乙酰胆碱酯酶纤维分布改变的关系

目的 探讨实验性癫痫持续状态(status epilepsy,SE)对大鼠认知功能的影响及与乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)阳性神经纤维在脑部分布变化的关系.方法 戊四氮诱导大鼠SE,行为学检测大鼠情感反应和学习记忆功能的改变.组织化学的方法观察海马、皮层AChE纤维分布的改变.结果 SE可引发实验动物活动习性发生改变,警觉水平、恐惧、焦虑等防护性情感反应下降及空间学习和记忆能力受损,伴有海马、皮层分子层AChE阳性神经纤维密度减低.结论 SE使大鼠情感行为发生改变和学习记忆功能受损,可能与海马、皮层AChE阳性神经纤维减少有关.     

丹参酮对阿尔茨海默病样大鼠海马内IL-1β、IL-6 mRNA以及一氧化氮合酶表达的影响

[目的]探讨丹参酮(tanshinone,Tan)抑制β-淀粉样肽对神经元毒性的分子机制.[方法]在大鼠双侧海马齿状回背侧细胞带微量注射凝聚态β-淀粉样肽1-40片段(amyloid β-peptide1-40 Aβ1-40)20μg以建立阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)样记忆障碍的动物模型;用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定海马内白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)mRNA含量;Western blot检测海马内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达;采用丹参酮(Tan,50 mg/kg)对Aβ1-40处理的大鼠连续灌胃14 d,观察其干预效果.[结果]海马内注射Aβ1-40 14 d后,经行为学检测大鼠出现记忆障碍时,海马内IL-1β和IL-6 mRNA以及iNOS蛋白的表达均显著高于对照组(P＜0.01),相关性分析发现iNOS表达与IL-1β和IL-6存在明显正相关(P＜0.01,P＜0.05).以Tan 50mg/kg连续灌胃14 d后,对上述变化有不同程度的改善作用,和模型组比较,P＜0.01.[结论]Tan能有效地抑制AD样大鼠海马内IL-1β、IL-6与iNOS表达,这可能为其抑制Aβ神经毒的分子机制.     

D-半乳糖-Aβ复合造模致大鼠学习记忆功能障碍及丹参酮治疗作用的研究

目的研究拟老年痴呆症（alzheimer’s disease,AD）模型大鼠学习记忆功能的改变及丹参酮的治疗作用。方法（1）实验动物随机分成4组。AD-模型组：采用D-半乳糖腹腔注射和大鼠双侧海马齿状回背侧微量注射凝聚态β-淀粉样肽1-40（amyloid beta-peptide,Aβ1-40）的复合造模方法,拟建立AD样学习记忆障碍动物模型;丹参酮治疗组：AD大鼠造模24h后给予丹参酮[60mg／（kg·d）],溶于5mL玉米油中灌胃14d;假造模对照组：与AD大鼠同法注射等量生理盐水;正常对照组：大鼠不做任何处理。（2）采用水迷宫行为学实验检测各组大鼠的学习记忆功能。结果（1）AD模型大鼠发生了空间学习记忆功能障碍,与两对照组比较有显著性差异（P〈0．01）。（2）丹参酮治疗组治疗后较AD模型组潜伏期缩短、误入盲端次数也明显减少。结论（1）D-半乳糖-Aβ复合造模致AD样学习记忆功能障碍的动物模型具有较好的仿真AD的特点。水迷宫实验能较真实地反应动物学习记忆功能。（2）丹参酮对AD样大鼠的学习记忆功能障碍具有一定的改善作用。     

脑尔康对阿尔茨海默病模型大鼠海马β淀粉样肽1-42及脑啡肽酶表达的影响

目的：观察复方中药脑尔康对阿尔茨海默病（Alzheimers disease, AD）模型大鼠海马β淀粉样肽1-42（β-amyloid peptide 1-42,Aβ1-42）及其降解酶——脑啡肽酶（neprilysin, NEP）表达的影响,探讨其抗痴呆的作用机制。 方法：48只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、吡拉西坦组和大、中、小剂量脑尔康组,每组8只。除空白对照组外,其余各组大鼠双侧海马CA1区各一次性注射凝聚态Aβ1-425 μL（2 μg/μL）制备AD模型,空白对照组注射等体积生理盐水。3个剂量脑尔康组大鼠给予脑尔康［60、30、15 g/（kg·d）］连续灌胃28 d,吡拉西坦组给予吡拉西坦［0.375 g/（kg·d）］灌胃,空白对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃。采用Y型电迷宫检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组织化学法检测海马内Aβ1-42和NEP的表达。 结果：大鼠海马注射Aβ1-42后,与空白对照组比较,模型组大鼠学习记忆能力下降,海马内Aβ1-42表达明显增多（P＜0.01）。用药干预28 d后,与模型组比较,吡拉西坦组和各剂量脑尔康组大鼠学习记忆能力改善（P＜0.05,P＜0.01）,海马内Aβ1-42的表达下降（P＜0.05,P＜0.01）,NEP的表达增加（P＜0.05,P＜0.01）,其中以大剂量脑尔康组效果最佳。 结论：复方中药脑尔康可能通过上调AD模型大鼠海马NEP的表达来降低Aβ1-42的含量,改善其学习记忆能力,发挥抗痴呆作用。     

胃化学性炎性痛时幽门括约肌内肠神经系统神经递质的变化

为探讨大鼠幽门括约肌在化学性炎性痛时氮能和胆碱能神经元的变化,采用还原型辅酶Ⅱ和亚铁氰化铜直接显色的组织化学法,分别显示一氧化氮合酶(NOS)和乙酰胆碱酯酶(AChE)阳性神经元成分及甲醛诱发胃痛后2种神经元成分的变化.结果显示甲醛致胃炎性痛时大鼠幽门括约肌粘膜下丛及肌间神经丛NOS和AChE阳性神经成分活性均降低,仅于括约肌肠侧端或胃侧端偶见单个分布的2种酶弱阳性胞体,肌内2种神经纤维数减少,酶活性也弱.图像分析肌内NOS和AChE阳性神经纤维活性平均光密度,甲醛组比对照组均显著降低(P＜0.01).提示在甲醛引起的胃急性化学性炎性痛时肠神经系统中NO-和ACh能神经参与了幽门括约肌活动的调控.     

大豆异黄酮对阿尔茨海默病大鼠乙酰胆碱代谢的影响

目的观察大豆异黄酮(soybean isoflavone,SIF)对阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)模型大鼠海马乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)代谢的影响,探讨SIF治疗AD的作用机制。方法将50只大鼠随机分为假手术组,模型组,戊酸雌二醇组和SIF高、低剂量组,采用双侧海马注射β-淀粉样蛋白(amyloidβ-pro-tein,Aβ)复制AD大鼠模型,分别给药21d后,采用Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力的变化,免疫组织化学法检测大鼠海马组织ACh、胆碱乙酰转移酶(choline acetyl transferase,ChAT)、乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,AchE)的表达。结果 SIF可显著降低AD大鼠的逃避潜伏期(P0.01),显著增加AD大鼠的游泳时间百分比、穿过平台次数以及海马组织ACh、ChAT、AchE的表达(P0.05,或P0.01)。结论 SIF可能通过增强海马组织ACh的代谢起到提高学习记忆能力的作用。     

脑缺血对AD大鼠神经元异常磷酸化tau表达的影响

目的观察脑缺血对AD大鼠皮层和海马异常磷酸化tau蛋白表达的影响,探讨脑缺血在AD进展中的作用。方法大鼠海马注射Aβ1-40成功建立AD大鼠模型后,于AD大鼠右侧纹状体注射内皮素-1建立临床常见的基底节区多发性腔隙性脑梗死的脑缺血模型,采用免疫组织化学法观察脑缺血对AD大鼠皮层和海马内Ser202位点异常磷酸化tau蛋白表达的影响。结果脑缺血后AD大鼠皮层和海马内异常磷酸化tau的表达较单纯的AD大鼠明显增多(P<0.05)。结论脑缺血促进AD大鼠皮层和海马内异常磷酸化tau的表达,进一步可促进神经纤维缠结的形成,提示脑缺血可促进AD的进展。     

姜黄素调控β-分泌酶基因表达抑制老年性痴呆大鼠Aβ蛋白生成的机制

目的：探讨姜黄素对老年性痴呆（ Alzhelmer＇s disease,AD）大鼠海马区β-淀粉样前体蛋白（β-amyloid protein precursor,β-APP）和β-分泌酶（amyloidβ secretase1,BACE1）基因表达的影响。方法：采用Aβ1-40右侧海马区注射,制备AD大鼠模型,腹腔注射姜黄素给予治疗,采用ELISA法检测血清与海马组织中Aβ的含量,免疫组织化学法检测海马区神经元中β-APP蛋白表达,RT-PCR法检测海马组织中β-APP和BACE1 mRNA表达。结果：造模后大鼠血清和脑组织海马中Aβ含量显著升高,脑组织海马区神经元中β-APP蛋白表达、β-APP mRNA和BACE1 mRNA表达明显增加。与模型组比较,姜黄素高剂量组、低剂量组β-APP蛋白表达、β-APP mRNA和BACE1 mRNA明显降低,差异均有统计学意义（ P<0.05）。结论：姜黄素可通过对BACE1 mRNA调控作用,阻断β-APP裂解进程,抑制Aβ在脑内生成与沉积,从而减少Aβ对神经元的毒性作用。     

乙酰胆碱酯酶阳性神经在大鼠小肠壁丛内分布的研究——酶组织化学法

大鼠小肠壁切片和撕片标本，用酶组织化学法观察小肠壁层和肠肌丛内乙酰胆碱酯酶阳性神经的分布。结果发现，（１）小肠壁各层和肠肌丛内神经纤维十分丰富，神经纤维的分布密度从十二指肠向空肠到回肠有逐渐增高趋势。（２）肠肌丛中有大量酶阳性神经元胞体，密布于节（丛）和节间束内，有些细胞突起丛内和节间交织成网，有的突起末端膨大呈终扣样与邻近的细胞体呈突触样接触，小肠各段肠肌丛的节细胞酶活性和分布密度有明显差别；回     

神经肽Y免疫反应阳性神经纤维在大鼠脾脏内的分布

作者用ABC免疫组织化学法结合葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵(GDN)显色技术,研究神经肽Y(NPY)免疫反应阳性神经纤维在大鼠脾脏内的分布。结果表明,在脾脏内有较丰富的NPY免疫反应(NPY-IR)阳性神经纤维,它们多呈串珠状,主要伴动脉及其分支走行,也见于脾被膜的结缔组织内,白髓、红髓和边缘区等部位的淋巴组织中,以及脾血窦周围。脾内NPY免疫反应阳性神经纤维与血管和淋巴细胞的关系密切,     

脑灵汤对阿尔茨海默病模型大鼠海马 CA3区域iNOS蛋白表达的影响

目的：探讨脑灵汤对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马CA3区iNOS蛋白表达的影响,初步揭示脑灵汤可能的作用机制。方法：选取40只SPF清洁级SD大鼠,随机分为正常对照组、假手术组、AD组、脑灵汤组和脑复康组,每组8只,喂养1周后,采用Aβ1-42注射大鼠海马法制成大鼠模型,再喂养28 d,免疫组织化学法观察iNOS蛋白在大鼠海马CA3区中的表达。结果：AD组大鼠海马CA3区iNOS蛋白表达较正常对照组增多(P<0.05),脑灵汤治疗后iNOS蛋白的表达降低。 结论：脑灵汤能明显改善AD模型海马CA3区iNOS表达,对老年性痴呆大鼠有治疗作用。     

电针对老年性痴呆大鼠前额叶皮质nNOS阳性神经元表达的影响

目的：研究电针对老年性痴呆（AD）模型大鼠前额叶皮质（Prefrontal Cortex ,PFC）神经元型一氧化氮合酶（nNOS）阳性神经元表达的影响。方法：以D-半乳糖腹腔注射和Aβ1-40海马注射诱导形成的老年性痴呆模型大鼠为研究对象。电针“大椎”、“太溪”、“肾俞”三穴,以免疫组织化学法检测大鼠PFC中nNOS阳性神经元的表达。结果：与模型组相比,电针组nNOS阳性神经元数量明显增多,具有显著性差异。结论：电针可能通过上调大鼠PFC中nNOS阳性神经元的表达,进而发挥抗老年性痴呆的作用。     

小脑顶核电刺激对AD模型大鼠学习记忆能力及海马bcl-2、Bax表达影响

目的：研究淀粉样β蛋白（Aβ1-40）对大鼠空间学习记忆能力及海马区Bax和bcl-2的表达的影响及小脑顶核电刺激（Fastigial nucleus stimulation,FNS）的干预作用。方法：将Aβ1-40微量注射至大鼠右侧海马,制作大鼠AD动物模型。分别予电刺激小脑顶核、齿状核。28d后进行水迷宫试验,观察各组大鼠空间学习记忆功能改变。免疫组化法检测各组海马CA1区bcl-2、Bax蛋白表达。结果：阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）组与假手术组（SC）比较,每天隐匿平台逃避潜伏期均明显增长（P〈0．05）,海马bcl-2阳性细胞光密度明显减少（P〈0．05）,Bax阳性细胞光密度明显增高（P〈0．05）;小脑顶核电刺激（FNS）组与AD组比较,空间学习记忆能力明显改善（P〈0．05）,海马bcl-2阳性细胞光密度明显增高（P〈0．05）,Bax阳性细胞光密度明显减少（P〈0．05）,齿状核刺激（DNS）组无此作用。结论：FNS可部分改善Aβ1-40诱导的AD模型大鼠空间学习记忆障碍,可能是通过促进bcl-2表达和降低Bax表达抑制海马神经细胞凋亡。     

丹参酮Ⅱ A对阿尔茨海默病模型大鼠海马MMP 2、iNOS表达及自由基释放的影响

目的探讨中药丹参酮ⅡA(TanⅡA)对AD模型大鼠学习记忆、海马内基质金属蛋白酶(MMP-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达及自由基释放的影响及作用机制。方法采用β-淀粉样蛋白(Aβ)定向注射法建立AD大鼠模型,并使用TanⅡA干预,通过观察大鼠学习记忆能力、定量分析大鼠海马MMP-2和iNOS基因及蛋白表达差异及表达相关性、自由基释放量的影响以阐明其作用机制。结果与正常对照组相比,Aβ注射法所建立AD模型大鼠海马内iNOS及MMP-2的表达显著增高(P0.05),两者的表达在mRNA及蛋白水平均正相关(P0.05)。AD大鼠海马内诱导释放的一氧化氮(NO)、ONOO-及活性氧(ROS)自由基含量显著增高(P0.05),同时AD模型组大鼠的学习记忆能力明显下降。而TanⅡA(50mg/kg)干预可显著降低AD大鼠海马内的NO、ONOO-及ROS含量,并降低iNOS(P0.05)及MMP-2蛋白的表达(P0.01),明显改善AD模型大鼠的学习记忆能力。结论TanⅡA可有效缓解AD症状,作用机制可能与抑制AD诱导的iNOS及MMP-2蛋白的表达,减少氧化性毒害自由基的产生,抑制氧化应激损伤有关。     

Aβ25-35诱导阿尔茨海默病模型大鼠海马神经元NT3及trkC的表达

观察Aβ_25-35诱导阿尔茨海默病（Alzheimer disease, AD）模型大鼠海马神经营养素3（neurotrophin-3,NT3）及其受体trkC的表达,并探讨其与AD的关系。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和模型组。采用立体定向下双侧海马注射Aβ_25-35建立AD模型,对照组大鼠采用相同方法注射等量生理盐水。2周后,用水迷宫实验测试大鼠学习和记忆功能;然后处死,光镜下观察海马组织结构,免疫组织化学法检测NT3和trkC蛋白的表达。结果：NT3与其受体trkC在两组大鼠海马各区表达变化不同。AD组大鼠海马CA1、CA2、CA3区NT3免疫反应阳性细胞数少于对照组,差异有统计学意义,尤以CA1和CA3区较为明显（P＜0.01）,而CA4区和hilar区NT3免疫反应阳性细胞数以及海马各区trkC免疫反应阳性细胞数在两组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：海马神经元NT3的表达含量减少而非其受体trkC的下调与AD模型大鼠学习和记忆功能损害相关,提示补充外源性NT3可有助于减轻Aβ_25-35的神经元毒性,从而改善其学习和记忆功能。