大剂量5-FU致肠黏膜严重损伤时肠上皮细胞PCNA的表达

目的探讨大剂量5-FU致肠黏膜严重损伤时肠上皮细胞增殖细胞核抗原（PCNA）的表达及其意义。方法成年C57BL／6J小鼠40只,分为对照组（n=8）和实验组（n=32）。对照组给予腹腔注射PBS,实验组给予腹腔注射大剂量5-FU（150mg／kg．d,连续五d）,分别于处理后第1、3、5天,剖杀小鼠取小肠,常规HE染色,免疫组化检测PCNA的表达。结果与对照组比较,腹腔注射大剂量5-FU后,小鼠肠黏膜遭受严重破坏,黏膜萎缩,绒毛、隐窝结构消失;免疫组化结果显示PCNA表达增加,PCNA指数显著增高（P〈0．01）。结论腹腔注射大剂量5-FU后。肠黏膜细胞中表达PCNA的肠上皮细胞比例增加．可能与肠黏膜榻伤后修复有密切的关系．     

氯吡格雷对小鼠小肠黏膜的损伤及其机制研究

目的 初探氯吡格雷对小鼠小肠黏膜的损伤及可能的机制。方法 20 只无特定病原体（SPF）级 BALB/c 雄性小鼠,随机分为2 组：空白对照组、氯吡格雷组,空白对照组灌服生理盐水,氯吡格雷组灌服氯吡 格雷,2 周后处死小鼠,观察小鼠小肠黏膜大体变化及组织学变化,免疫组织化学（简称免疫组化）法检测小 肠黏膜组织中Occludin 蛋白的表达情况。结果 氯吡格雷组小鼠小肠黏膜大体损伤、组织病理学损伤高于空 白对照组（P <0.05）;免疫组化测得氯吡格雷组小鼠小肠黏膜Occludin 蛋白表达低于空白对照组（P <0.05）。 结论 氯吡格雷可造成小鼠小肠黏膜损伤;可能通过降低Occludin 蛋白表达造成小肠黏膜损伤。     

丹皮酚对EMT6乳腺癌小鼠免疫功能的影响

目的 研究丹皮酚(Pae)对EMT6乳腺癌小鼠免疫功能的影响.方法 将50只小鼠随机分为5组;正常组、模型组、阳性药物组、Pae低剂量组(Pae L)、Pae高剂量组(Pae H),每组各10只.除正常组外,小鼠均接种EMT6乳腺癌细胞(0.2 mL),于接种后24 h给予不同处理,模型组给予生理盐水、阳性药物组给予环磷酰胺25 mg/kg(CTX组)、Pae L、Pae H分别给予Pae 150mg/kg和300 mg/kg,每日1次,腹腔注射.14 d后,采用流式细胞技术对各组小鼠外周血T淋巴细胞亚群进行检测,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中白细胞介素-2(IL-2)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,RT-PCR对外周血单个核细胞(PBMC)IL-2与TNF-α mRNA表达进行检测.结果 和正常组相比,模型组CD4+T细胞亚群数目与CD4+/CD8+比值明显减少(P＜0.05),血清IL-2水平显著降低(P＜0.05);经治疗,Pae组CD4+T细胞百分数与CD4+/CD8+比值比模型组明显回升(P＜0.05),同时,血清IL-2和TNF-α水平也高于模型组(P＜0.05),PBMC中IL-2和TNF-α mRNA表达高于模型组(P＜0.05),以Pae H变化更为明显.结论 Pae通过调节T细胞亚群比例,修复CD4+/CD8+比值改善了EMT6乳腺癌小鼠的免疫功能,并通过促进IL-2和TNF-α基因转录使IL-2和TNF-α分泌增加进而增强Pae的抗肿瘤作用.     

精制补中益气颗粒对5-FU化疗大肠癌植瘤小鼠肠道损伤保护作用

目的研究精制补中益气颗粒（HT185）对5-FU化疗大肠癌移植瘤小鼠肠道损伤的保护作用。方法构建大肠癌移植瘤小鼠5-FU化疗肠道损伤模型,按照瘤体体积随机分为对照组、HT185组、5-FU组、5-FU+HT185组,每组10只;每天观察小鼠一般生活状态;测量小鼠体重;观察粪便质地,根据腹泻评分进行分级;HE（苏木素-伊红）染色观察空肠组织病理形态,评估损伤程度;IHC（免疫组化）检测TUNEL、Bax、Bcl2指标观察空肠组织肠腺隐窝细胞凋亡情况。结果与对照组相比较,5-FU组小鼠的活动度降低、毛发枯槁、体重减轻,腹泻严重;空肠组织肠绒毛断裂、长度变短,肠道细胞、固有层水肿;TUNEL、Bax表达上调,Bcl2表达下调。与5-FU组相比较,5-FU+HT185组小鼠,活动度提高、毛发光亮,腹泻次数明显减少;空肠组织完整性,绒毛长度、肠细胞、固有层水肿等情况明显改善;TUNEL、Bax表达下调,Bcl2表达上调。结论 HT185能够减轻大肠癌移植瘤小鼠5-FU化疗所致的肠道损伤,调节促凋亡蛋白Bax、促进抗凋亡蛋白Bcl2的表达,可能是HT185对大肠癌移植瘤小鼠5-FU化疗肠道损伤保护的作用机制之一。     

丹皮酚对血管性认知障碍小鼠认知功能的保护作用

目的：探讨丹皮酚对血管性认知障碍（VCI）小鼠认知功能及海马神经元损伤的影响。方法：雄性C57BL/6小鼠60只,随机分为假手术（Sham）组、模型（VCI）组、丹皮酚（Pae）低、中、高剂量治疗组,每组12只。采用双侧颈总动脉结扎（2VO）制备小鼠反复缺血再灌注VCI模型,Morris水迷宫检测小鼠的认知功能,尼氏染色观察小鼠海马神经元的形态学变化,比色法检测海马SOD活性、MDA和NO含量的变化。结果：VCI小鼠认知功能下降（P〈0.01）,海马CA1区神经元变性坏死,MDA和NO含量增加,SOD活性降低（P〈0.01）;丹皮酚中、高剂量治疗可显著提高VCI小鼠的学习记忆能力,减少VCI所致的海马CA1区神经元死亡,并降低MDA和NO含量,升高SOD活性（P〈0.05或P〈0.01）。结论：丹皮酚可有效增强VCI小鼠的认知功能,并改善海马神经元病理改变,可能与其抗氧化应激有关。     

重组东亚钳蝎镇痛抗肿瘤肽协同5-氟尿嘧啶对小鼠H22肝癌的抑制作用

目的：探讨重组东亚钳蝎镇痛抗肿瘤肽（recombinant analgesic-antitumor peptide,rAGAP）增强5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）对肝癌H22细胞的抑制作用及机制。方法：SPF级雄性小鼠120只,采用接种H22肝癌小鼠腹水方法建立模型,随机分为4组：rAGAP组（予rAGAP 0.03 mg/kg）、5-FU组（予5-FU 10 mg/kg）、联合组（予rAGAP 0.03 mg/kg, 5-FU 10 mg/kg）,模型组（予等体积生理盐水）,每4 d腹腔注射1次,用药持续24 d。用药结束后取出肿瘤组织标本,检测各组瘤体组织重量和抑瘤率,Western blot方法检测PI3K、AKT、PTEN蛋白表达。结果：与模型组相比,其他各组小鼠瘤体组织重量均明显降低（P＜0.05）;联合组抑瘤率明显高于rAGAP组和5-FU组（P＜0.05）。与模型组相比,其他各组PI3K、p-Akt表达均明显减弱,PTEN表达明显增强（P＜0.05）;与5-FU组、rAGAP组相比,联合组PI3K、p-Akt表达均明显减弱,PTEN表达明显增强（P＜0.05）。结论：rAGAP能增强5-FU对肝癌组织的抑制作用,其机制可能与影响PI3K/AKT/PTEN信号通路,进而抑制肝癌细胞的增殖有关。     

云母对NSAIDs相关性小肠黏膜损伤COX-2及HSP70表达的影响

目的：研究NSAIDs相关性小肠黏膜损伤COX-2及HSP70表达,探讨云母对小肠黏膜的保护机制。方法：24只SD大鼠,随机分为对照组、模型组、云母组,每组8只。模型组和云母组每天予双氯酚酸钠溶液7.8mg/（kg·d）剂量灌胃,制备大鼠NSAIDs相关性小肠黏膜损伤模型,云母组每天造模前予云母液120mg/（kg·d）剂量灌胃。灌胃给药5天后处死大鼠,进行大体形态观察,肠黏膜损伤指数（CMDI）及病理Chiu氏评分;免疫组化法检测小肠黏膜COX-2及HSP70表达。结果：与对照组比较,模型组CMDI、Chiu氏评分及COX-2、HSP70表达水平明显升高（P＜0.01）。而云母组CMDI、Chiu氏评分及COX-2表达水平较模型组有明显下降（P＜0.01）,HSP70水平更进一步升高（P＜0.01）。结论：NSAIDs相关性小肠黏膜损伤与COX-2及HSP70表达有关,云母可抑制损伤小肠黏膜COX-2表达,同时增强HSP70表达,从而对小肠黏膜起到保护作用。     

丹皮酚急性毒性和抗肿瘤活性的实验研究

目的观察丹皮酚的急性毒及抗肿瘤活性的作用。方法先以少量（10只）动物做实验，以获红粗略的LD50和LD100，然后在此剂量范围内，取体重20～22g小鼠50只，按等比级数分成5组，每组10只，雌雄各半。接种后带瘤鼠每组10只，阴性对照组蒸馏水灌胃，环磷酰胺组环磷酰胺灌胃，实验组丹皮酚灌胃，10天后除死，称瘤重。结果以丹皮酚LD5n为3435mg／kg丹皮酚组与环磷酰胺组的差异无显著性（P〉0．05），但环磷酰胺组的毒性较大，丹皮酚LD50=3118～4459／kg，环磷酰胺LD50=579～778／kg。结论丹皮酚对肿瘤有明显的抑制作用，是一种具有发展前途的抗癌药物。     

三奇注射液对小鼠H_(22)肝癌移植瘤突变型P53和增殖细胞核抗原表达的影响

目的通过研究三奇注射液(SQ)对荷H22肝癌ICR小鼠的突变型P53和增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达水平的影响,探讨其抗肿瘤的可能机制。方法参考动物移植性肿瘤模型造模法,配制H22肝癌细胞液,接种于50只ICR小鼠的右腋部皮下,随机分为5组,即生理盐水组(NS 10 mg/kg),5-FU组(5-FU25 mg/kg),SQ高剂量组(SQH20 g/kg),SQ中剂量组(SQM10 g/kg),SQ低剂量组(SQL5 g/kg),次日起每天腹腔注射给药,第15天处死小鼠,按组别固定瘤块,免疫组化法检测突变型P53和PCNA基因表达水平。结果与生理盐水组比较,SQ高、中、低剂量组突变型P53和PCNA基因表达水平降低(P0.05)。结论 SQ可下调小鼠移植性H22肝癌突变型P53和PCNA表达水平。     

丹皮酚对心梗后心室重构大鼠心肌组织TGF-β1表达的影响

目的：：探讨丹皮酚(Pae)对急性心肌梗死(AMI)后心室重构大鼠心肌组织TGF-β1表达的影响。方法：SD大鼠随机分为假手术组、模型组、Pae组和卡托普利组。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法建立AMI大鼠模型,Pae组大鼠腹腔注射Pae(16.0mg/kg),卡托普利组大鼠灌胃给予卡托普利(10.0mg/kg),连续给药4周。分别检测各组大鼠的左心指数(LVWI)、左室胶原容积分数(CVF),免疫组化法检测心肌组织TGF-β1蛋白的表达。结果：与模型组大鼠比较,Pae组、卡托普利组大鼠的LVWI、CVF和心肌组织TGF-β1蛋白的表达明显降低(P＜0.01)。结论：Pae改善大鼠心室重构的机制可能与其下调TGF-β1蛋白的表达有关。     

丹皮酚协同顺铂对人卵巢癌细胞A2780s的增殖抑制及促凋亡作用

目的:探讨丹皮酚(Pae)单药及联合顺铂(CDDP)对人卵巢癌细胞A2780s的增殖抑制,凋亡诱导作用及对细胞周期分布的影响.方法:以不同浓度的Pae、CDDP和两药联合作用于人卵巢癌细胞A2780s,采用MTT法测定药物对体外培养的人卵巢癌细胞A2780s增殖的抑制作用,应用两药相互作用指数(CDI)进行联合用药分析...     

丹皮酚的抗炎作用及其机制

丹皮酚对由角叉菜胶、蛋清、甲醛、组胺、5-羟色胺和缓激肽所致的大鼠足砳肿胀,对二甲苯致小鼠耳壳肿胀和内毒素致腹腔毛细血管通透性升高均有显著的抑制作用,摘除大鼠双侧肾上腺后其抗炎作用仍存在。丹皮酚抑制炎性组织中PGE_2的生物合成,抑制角叉菜胶胸膜炎多形核白细胞的移行,对大鼠肾上腺Vc的含量无明显影响,也不能抑制由单侧切除大鼠肾上腺所致对侧肾上腺代偿性增生。     

丹皮酚对水应激所致小鼠胃溃疡保护作用的实验研究

目的:观察丹皮酚对水应激所致小鼠胃溃疡模型的保护作用。方法:采用水应激诱导小鼠急性胃粘膜损伤,灌胃给予丹皮酚(50,100mg/kg),每天一次,连续5天,以溃疡指数及胃粘膜形态学改变为观察指标,探讨丹皮酚对水应激所致小鼠胃粘膜损伤的影响并与奥美拉唑比较。结果:丹皮酚对水应激所致小鼠胃溃疡有保护作用,剂量增大溃疡指数减小更加明显,胃黏膜损伤程度减轻;丹皮酚的抗溃疡强度与奥美拉唑相似。结论:丹皮酚可显著减轻水应激引起的胃黏膜损伤。     

FGFR3与小鼠小肠缺血再灌注损伤后肠上皮细胞凋亡的关系

目的探讨成纤维细胞因子受体3（fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3）与小鼠小肠粘膜缺血再灌注损伤后肠上皮细胞凋亡的关系。方法应用小肠缺血再灌注模型,检测野生小鼠及FGFR3增强小鼠小肠缺血再灌注损伤后1、3、6 h和1、3天各时间点肠粘膜结构、粘膜隐窝上皮细胞增殖能力及粘膜上皮细胞凋亡的改变。结果肠缺血再灌注l、3、6 h,肠粘膜损害明显,粘膜上皮细胞凋亡增加,粘膜隐窝上皮细胞增殖增多;肠粘膜再生1、3天组肠粘膜上皮细胞凋亡明显减少,粘膜隐窝上皮细胞增殖活性逐渐降低,肠粘膜结构恢复至正常。FGFR3增强小鼠在各时间点增殖能力明显强于野生小鼠,凋亡程度及肠粘膜损害程度均轻于野生小鼠。结论FGFR3抑制肠上皮细胞凋亡,促进增殖,可能在肠缺血再灌注损伤及肠再生修复过程中起重要作用。     

5-氟尿嘧啶缓释剂瘤内植入治疗胰腺癌的实验研究和临床研究(英文)

目的纲察5-氟尿嘧(5-FU)缓释剂对荷胰腺癌裸鼠肿瘤细胞及胰腺癌患者血清肿瘤标记物和细胞免疫的影响。方法(1)5-FU缓释剂的体外释放实验和体外抑瘤实验。(2)将荷胰腺癌细胞株PC3裸鼠60只,姑且机分成静脉对照组(A组)、5-Fu缓释剂植组(E组)治疗前、后14D测肿瘤大小。治疗2周后观察肿瘤组织学变化。免疫组化法测定bcl-2和Bax的蛋白表达水平;TUNEL法检测凋亡指数(AI)。(3)手术探查不能切除之胰腺癌69例随机分成3组。将5-FU缓释剂瘤内植入治疗组、术后行5-FU静脉化疗组和对照组。分别于术前1d和术后第14天采血,测定各组血清中NK细胞,T细胞亚群和CEA,CA50 ,CA19-9 ,CA242血清肿瘤记物水平。结果5 mg 5-FU缓释剂第1天释放量最大,为0 .85 mg,第3天为0 .45 mg,其后在0 .25 mg水平维持稳定的缓慢释放;释放时间长达14d以上。5-FU缓释剂第1天的浸出液对人胰腺癌细胞株PC-3的抑制率达60 .27 %,第3天为34 .25 %,以后稳定在25 %左右。5-FU缓释剂瘤内注谢治疗组裸鼠移植瘤生长速度减慢,bcl-2ad基因表达明显低于其他各组,而Bax基因表达明显高于其他各组,肿瘤细胞的AI明显高于其他各组。D组和E组肿瘤组织中炎症反应和血管内膜增厚程度明显高于其他各组。术后治疗组CD4+/CD8+和NK细胞水平高于静脉5-FU化疗组,而血清中上述5种肿瘤标记物低于对照组和静脉化疗组。结论5-FU缓释剂能在2周内在体外较稳定地特续释放,对人胰腺癌细胞株PC-3有持续抑制作用。该剂瘤内注射可明显抑制荷胰腺癌瘤裸鼠瘤体的生长,其作用机与药物在肿瘤组织中引起的炎症反应和血管内膜增厚等因素有关;并可能与诱导肿瘤细胞的凋亡有关。该剂植入胰腺癌实体内,能明显降低5种血清肿瘤标记物水平,同时对患者的细胞免疫功能影响较小,5-FU缓释剂可望成为治疗不能切除之胰腺癌的较好的制剂。     

贝伐单抗联合TNP-470治疗结肠癌的实验研究

目的观察贝伐单抗联合血管生成抑制剂TNP-470治疗裸鼠结肠癌移植瘤的疗效,二者是否有协同效果。方法随机将48只大肠癌裸鼠分为对照组(A组)、贝伐单抗组(B组)、血管生成抑制剂(C组)、贝伐单抗与血管生成抑制剂联合组(D组),A组于左侧腋部皮下注射0.9%生理盐水30mg/kg,B组于左侧腋部皮下注射贝伐单抗5mg/kg,C组于左侧腋部皮下注射血管生成抑制剂TNP-470 30mg/kg,D组于左侧腋部皮下注射贝伐单抗5mg/kg和TNP-470 30mg/kg,1次/d,连用14d,至治疗结束时处死裸鼠,测量皮下移植瘤的长短径,分析各组间肿瘤体积差异的显著性;测量皮下移植瘤重量,计算抑瘤率;用细胞凋亡检测试剂盒测定裸鼠移植瘤凋亡水平,免疫组化检测结肠癌转移瘤血管内皮生长因子(VEGF)的表达和肿瘤微血管密度(MVD)。结果各实验组肿瘤的生长明显受到抑制,裸鼠皮下移植瘤瘤重、抑瘤率,D组和A组、B组、C组比较差异均有统计学意义(P<0.01),且B组、C组和A组之间差异亦有统计学意义;B、C、D组均可诱导移植瘤的凋亡,且差异有统计学意义;D组中的VEGF表达及MVD计数较A、B、C组均明显降低,差异有统计学意义。结论贝伐单抗与血管生成抑制剂TNP-470联合治疗结肠癌裸鼠皮下移植瘤比贝伐单抗或TNP-470单药治疗具有更强的抑瘤作用,二者联和应用,抗肿瘤效应明显增强。     

氨甲喋呤诱导的大鼠持续性肠黏膜损伤模型的建立与评价

摘要: 目的：建立一种大鼠肠黏膜持续损伤模型。方法：SD大鼠腹腔注射氨甲喋呤（MTX）建立肠黏膜炎模型。100只大鼠随机分为空白组(Control Group)、模型组Ⅰ（MTX Group Ⅰ）、模型组Ⅱ (MTX Group Ⅱ)和模型组Ⅲ (MTX Group Ⅲ),其中MTX Group Ⅰ10只大鼠,其余每组各30只。第0天,MTX Group Ⅰ大鼠注射MTX （20 mg/kg）,MTX Group Ⅱ和 MTX Group Ⅲ大鼠注射MTX（10 mg/kg）。第6天,MTX Group Ⅱ大鼠再次注射MTX 10 mg/kg,MTX Group Ⅲ大鼠注射MTX 5 mg/kg。Control Group在第0天和第6天均注射生理盐水。实验期间观察大鼠活动状态,并记录进食量和体重变化。MTX Group Ⅰ在第4天全部处死,其余每组于造模后第4、5、6、10、11、12天各处死5只大鼠,HE染色进行病理学分析,并检测血浆中的D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)及小肠组织中的髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)水平。结果：在第4天时,三个模型组大鼠小肠组织损伤评分(Chiu评分)均明显高于Control Group (p<0.05),血浆中D-乳酸含量、DAO活力及小肠组织中MPO活力、MDA含量也均显著高于Control Group (p<0.05)。在第5天时MTX Group Ⅱ和 MTX Group Ⅲ大鼠小肠黏膜损伤程度开始恢复,Chiu评分、D-乳酸含量、DAO活力、MPO活力和MDA含量逐渐降低,在第6天时与Control Group基本无差异。二次注射后,在第10天,MTX Group Ⅱ和 MTX Group Ⅲ大鼠Chiu评分再次升高,血浆中D-乳酸含量、DAO活力及小肠组织中MPO活力、MDA含量也显著高于Control Group (p<0.05),之后逐渐降低,损伤再次恢复。与MTX Group Ⅱ相比,二次注射后MTX Group Ⅲ损伤程度较轻（p<0.05）。结论：20 mg/kg MTX诱发大鼠肠黏膜炎是一个急性损伤过程,整个病程大约为4至5天,适用于药物治疗评价;两次间歇式10 mg/kg注射MTX可以造成大鼠肠黏膜的持续损伤,该模型更加适合中长期的营养治疗评价。     

参附注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤和修复的影响

目的观察肠上皮细胞凋亡与肠缺血再灌注损伤和修复特征的关系,探讨参附注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤和修复的影响。方法将SD大鼠54只随机分为：对照组、肠缺血再灌注组和参附处理组。处理组：大鼠阻断肠系膜上动脉血流1h,再灌注1、24、72h,观察大鼠在各个相应时间点的病理学改变,测定细胞凋亡指数与有丝分裂活性。结果肠缺血再灌注组缺血1h和再灌注1h肠黏膜损伤严重,上皮细胞凋亡增加,有丝分裂活性降低,再灌注24h这些变化最明显;参附处理组的病理学改变明显改善（P﹤0.05）。再灌注72h两组肠黏膜变化接近正常。结论细胞凋亡在肠缺血再灌注损伤与修复中起重要作用,参附注射液能减轻肠缺血再灌注损伤与修复过程中肠黏膜的病理损伤,促进上皮细胞再生与修复。