抗多胺代谢与HL-60细胞c-myc、c-fos、c-Ha-ras及ODC基因的表达

用核酸分子杂交技术研究多胺生物合成限速酶L-鸟氨酸脱羧酶(ODC)的不可逆抑制剂—二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对HL-60细胞c-myc、c-fos、c-Ha-ras癌基因及ODC基因表达的影响。结果表明DFMO处理的HL-60细胞中,c-myc癌基因表达减少,c-fos基因表达水平上升,而DFMO对ODC基因表达无明显影响。此外,本文证实了加入外源性腐胺能阻止DFMO引起的上述变化,表明DFMO对HL-60细胞基因表达的影响是其抑制细胞内多胺生物合成所致。     

党参对应激性溃疡和细胞迁移及多胺的影响

[目的]探讨益气健脾中药党参对胃肠黏膜损伤修复的药效机理及物质基础.[方法]在水浸束缚应激性溃疡大鼠模型上观察党参水提液对胃肠黏膜损伤修复的作用;在小肠上皮细胞(IEC-6)上观察党参糖提取物对细胞迁移和多胺含量的影响.采用划痕法复制细胞迁移模型,柱前衍生—高效液相色谱法检测多胺含量.[结果]党参水提液能减轻应激性溃疡大鼠胃黏膜损伤,减轻病理损害,提高胃黏膜多胺(精脒)含量.党参糖提取物能促进IEC-6细胞迁移,逆转由二氟甲基鸟氨酸(DFMO)或4-氨基吡啶(4-AP)所致的细胞迁移抑制,并提高细胞迁移过程中细胞内多胺(精脒)含量;同时,可逆转由DFMO所致的多胺(精脒)含量降低.[结论]党参的胃肠黏膜损伤修复作用机制可能与其促进上皮细胞迁移,作用于多胺调控信号通路有关.     

多胺在低氧内皮细胞条件培养基促猪肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

在低氧条件下，猪肺动脉内皮细胞（PAEC）对猪肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖调控，是研究低氧性肺动脉高压时肺动脉结构重组的重要内容。应用MTT比色法、DNA荧光测定法，观察了低氧PAEC条件培养基（HECCM）中多胺促PASMC增殖的作用。结果表明，在PAEC培养液中加入鸟氨酸脱梭酶抑制剂二氟甲基鸟氨酸（DFMO），可阻止HECCM促PASMC增殖的效应。故认为低氧刺激PAEC产生的多胺亦是HECCM中促PASMC增殖的一个重要因子。     

多胺抑制物DFMO的抗癌、抗转移作用研究(论著摘要)

多胺包括腐胺、精脒、精胺,它们与核酸代谢、细胞生长繁殖有密切关系,是癌变机制中的一个重要环节.近年来从抑制多胺体内合成出发进行癌防治,阻止癌转移的研究在国际上有了新的发展.本实验研究多胺抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对高转移瘤株小鼠MT-8612乳腺癌的抗癌和抗转移作用及对体内多胶合成的影响.实验用雌性615小鼠,皮下注入MT-8612癌细胞数在10~6/只.待肿瘤出现后,在实验组动物饮水中加入2％DFMO,共30d.在此期间对照组荷瘤动物死亡率为30％(6/2O),实验组死亡     

减缓宫颈癌发展的新药

新奥尔良—在休斯顿的安德森博士肿瘤中心进行了Ⅰ期试验,一种预防性化学药物双氟甲基鸟氨酸(DFMO)使3期宫颈上皮癌明显缩小。DFMO可抑制鸟氨酸脱羧酶,此酶在致癌的多氨合成链中有重要作用,故认为DFMO是一个强有力的抗细胞增生药,已用于治疗结肠癌。30名女病人接受了30天的治疗,每人使用配剂DFMO五种不同剂量中的一种。治疗后,     

茶多酚对成纤维细胞L929中鸟氨酸脱羧酶的抑制作用

目的:探讨茶多酚对成纤维细胞L929的增殖抑制作用及其作用机制。方法:体外培养小鼠成纤维细胞L929,加入茶多酚、二氟甲基鸟氨酸(DFMO)作用于细胞。用MTT法观察茶多酚对细胞增殖抑制作用,利用琼脂糖凝胶电泳和流式细胞技术检测细胞的调亡,RT鄄PCR技术检测鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因的表达。结果:20μmol/L的茶多酚即能明显抑制L929细胞的增殖,促进细胞的调亡,其半数有效浓度为200μmol/L。RT鄄PCR显示细胞中ODCmRNA表达明显下降(P<0.05)。200μmol/L的茶多酚的抑制效果与5mmol/L的DFMO的作用效果相似。二者共同作用于细胞时,对ODC的活性抑制作用更强,抑制效果更佳。结论:茶多酚能通过抑制细胞中ODC的表达来抑制细胞的增殖。     

二氟甲基鸟氨酸对T淋巴瘤Jurkat细胞生长的影响

目的研究二氟甲基鸟氨酸(difluromethylornithine,DFMO)对人T淋巴瘤Jurkat细胞的影响及其作用机制,为探讨DFMO能否用于治疗人白血病提供实验依据。方法DFMO(0～10mmol/L)处理人T淋巴瘤Jurkat细胞24～72h后,MTS法检测细胞的存活率,化学分析法检测精胺氧化酶(spermine oxidase,SMO)和乙酰多胺氧化酶(acetylpolyamine oxidase,APAO)活性,DNA片段化分析检测细胞凋亡,荧光染料法检测细胞线粒体膜电位变化,Western blot法检测细胞内Bax含量,分光光度法检测caspase-3酶活性。结果DFMO处理细胞能显著抑制Jurkat细胞的生长(P<0.01),抑制率随药物浓度的增加和作用时间的延长而加大,DFMO浓度为10mmol/L时,24h抑制率为33%,48h抑制率为38%,72h抑制率为49%。DFMO处理可导致Jurkat细胞DNA片段化,促进Bax由细胞质向线粒体转移,细胞内caspase-3活性增加(增加46%,P<0.05),并伴有线粒体膜电位的显著降低,DFMO浓液为2和5mmol/L时,分别降低29...     

二氟甲基鸟氨酸对人肺癌细胞生长特性的影响及其相关基因ALT-04ag表达调控

目的研究抑制多胺生物合成对人肺癌细胞生长特性的影响及该影响与肺癌相关基因ALT-04ag表达调控的关系。方法以细胞形态观察、生长曲线、流式细胞分析、DNA电泳图谱等方法,研究鸟氨酸脱羧酶(ODC)不可逆抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对人肺鳞癌细胞L78生长特性的影响;根据人肺癌相关抗原ALT-04ag基因片段序列设计引物进行RT-PCR及用抗相关抗原单抗ALT-04进行免疫组化,分别检测ALT-04ag相关基因的mRNA及蛋白表达。结果5mmol/LDFMO作用人肺鳞癌细胞L785d,引起ALT-04ag基因mRNA和蛋白表达下调,并能明显抑制细胞生长、诱导细胞凋亡。同时加入外源性腐胺(Pu)可阻止上述基因及细胞形态的变化。结论抑制多胺生物合成引起的L78细胞生长抑制和细胞凋亡的诱导与肺癌相关抗原基因表达的下调有关。     

抑制多胺生物合成对A549细胞生长及端粒酶激活的抑制作用

目的：研究抑制多胺生物合成对肿瘤细胞生长及端粒酶活性的作用。方法：以人肺腺癌A549细胞系为模型,MTT法观察细胞生长,流式细胞分析法,Mary-Grnermrold法和DNA Ladder电泳法检测细胞凋亡,端粒酶重复扩增法测定端粒酶活性。结果：经二氟甲基鸟氨酸（DFMO）处理的A549细胞,其生长受到抑制,部分细胞发生凋亡,端粒酶活性被明显抑制,如同时加入外源性腐胺,上述现象消失,结论：DFMO对多胺生物合成的抑制所引起的肿瘤细胞生长抑制及凋亡诱导,可能与其对端粒酶激活的抑制有关。     

二氟甲基鸟氨酸对人肺癌细胞L78细胞生长抑制、凋亡诱导及相关基因的表达调控

目的：研究二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对人肺癌细胞L78生长及相关基因表达的影响。方法：应用细胞生长曲线、端粒酶活性、细胞形态及DNA电泳观察细胞生长速率及细胞凋亡情况，同时应用Northern blot及免疫组化技术检测相关基因的表达。结果：(1)DFMO处理的L78细胞与对照组相比生长受到抑制，同时，诱导细胞凋亡增多。(2)在DFMO作用下，L78细胞df4基因被诱导表达，同时伴有P21^ras表达下调，Fas基因表达的上调。结论：DFMO抑制L78细胞生长，诱导凋亡的作用与其对df4基因的诱导密切相关，DFMO通过对df4的诱导．调控P21^ras和Fas的表达．     

鸟氨酸脱羧酶与细胞增殖

鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)为多胺生物合成途径中的第一个限速酶(催化合成多胺的第一步反应,即催化L-鸟氨酸脱羧生成腐胺),具有超常转变率和对于刺激的迅速反应性。而多胺广泛存在于生物体的各种细胞和组织中,是一种重要的代谢调控物质,它可直接与DNA相互作用,调节DNA构象,并参与RNA及蛋白质的合成,与细胞增殖、分化密切相关。已有研究表明,哺乳动物细胞增殖体现出完全的多胺依赖性。     

丁酸钠促进结肠癌细胞的聚胺生物合成

聚胺、腐胺、精脒和精胺均与细胞的增生和分化调节有关。鸟氨酸脱羧酶(ODC)是真核生物细胞聚胺生物合成的限速酶,ODC活性升高和聚胺生物合成增加先于细胞的增生和分化。用二氟甲基鸟氨酸(DFMO)抑制ODC活性,可抑制细胞的生长和增生,并能阻止鼠胚发生、肠粘膜细胞的成熟和分化。     

DFMO对吗啡依赖NG108-15细胞内cAMP含量的影响

目的　观察二氟甲基鸟氨酸 (DFMO)对NG10 8 15细胞内cAMP含量的影响。方法　建立NG10 8 15细胞吗啡依赖模型 ,观察吗啡依赖细胞内cAMP含量的变化以及DFMO的作用。结果　吗啡 0 .1mmol/L处理 4 8h的细胞 ,纳洛酮 0 .1mmol/L催促后 ,与未催促组相比 ,细胞内cAMP的含量明显升高 ,由 (15 .3± 2 .4 ) pmol/(mg·pro)增至 (38.8± 5 .1)pmol/(mg·pro) (n =5 ,P <0 .0 5 ) ,称为cAMP超射现象。DFMO(0 .1mmol/L)能够浓度依赖性地抑制吗啡依赖的NG10 8 15细胞戒断时的cAMP超射现象 ,cAMP含量降至 (19.4± 2 .11) pmol/(mg·pro) (P <0 .0 5 )。 结论　DFMO可以抑制吗啡依赖的NG10 8 15细胞戒断时的cAMP超射现象 ,提示DFMO对吗啡依赖的抑制作用可能与降低cAMP有关     

Plating densities, alpha- difluoromethylornithine effects and time dependence on the proliferation of IEC- 6 cells

目的　观察接种密度和α 二氟甲基鸟氨酸 (DFMO)对小肠上皮细胞 (IEC 6 )体外增殖的影响。方法　IEC 6细胞以不同密度接种于 96孔培养板 ,加入或不加DFMO。细胞接种后第 1,2 ,3,4 ,5 ,6和 7天 ,分别用细胞计数板直接计数细胞数量 ,用噻唑蓝比色法 (MTT法 )测定波长 5 70nm处的光密度 (OD)值 ,确定细胞的增殖活力。结果　OD值和细胞数量具有正相关 (r=0 95 4,P <0 0 1) ;较高接种密度 (>0 5× 10 4 细胞 /孔 )组接种后第 2天 ,细胞生长抑制 ,尤其是密度增加到 4× 10 4 细胞 /孔时 ,第 2～第 3天OD值逐渐增加 ,第 4天明显增加 ,第 5天达高峰 ,此后OD值开始下降。而低密度 (0 2× 10 4 细胞 /孔 )接种后第 4天 ,细胞生长出现抑制 ,此后其生长与其它密度相似。另外 ,加入DFMO后 1～ 3天 ,完全抑制了细胞增殖 ,此后与对照组一样 ,细胞逐渐生长。结论　IEC 6细胞增殖与接种密度和培养时间有关 ;随着培养时间的延长 ,DFMO抑制细胞增殖作用具有可逆性 ,其与培养时间延长有关。     

人早幼粒白血病细胞移植瘤株的建立及其实验治疗

将人早幼粒白血病细胞(HL-60)移植裸鼠皮下,形成了实体型移植瘤(HL-60X)。瘤株已传7代,成瘤率达100％。用该移植瘤模型初步观察到,多胺生物合成抑制剂二氟甲基乌氨酸(DFMO)、阿霉素、及两种药物联合使用,对肿瘤生长有抑制作用。抑制率分别为:55％、65％、99.4％。DFMO组对动物体重略有影响,阿霉素组则不明显。瘤组织病理检查表明,除程度不同的瘤细胞坏死外,对HL-60具有诱导分化作用。用药后肿瘤组织再次接种裸鼠,未见成瘤。实验结果说明,DFMO有增强阿霉素的抗癌作用。     

治疗肿瘤的药物DFMO

《Med Post》1983;19(23):38. 美国得克萨斯大学医学院的研究人员称,一种抑制多胺合成的药物α-difluoromethyl-ornithine(DFMO),可使肿瘤缩小,延缓动物结肠癌生长。普通外科住院医师Marilyn Marx说,他们决定研究DFMO,因为不断分裂的瘤细胞对DFMO的抑制作用特别敏感。     

DFMO诱导HL─60细胞分化和凋亡

细胞内多胺合成增加在维持细胞恶性表型中起重要作用，抑制其合成可负调控癌细胞的增殖。本文用多胺合成限速酶———鸟氨酸脱羧酶的抑制剂α二氟甲基鸟氨酸（ＤＦＭＯ）限制多胺合成，观察其对ＨＬ６０细胞生长的影响。发现ＤＦＭＯ使ＨＬ６０细胞向粒细胞分化并进行凋亡。提示，抑制多胺合成在细胞分化和凋亡中有重要作用，阻断此合成代谢可能是治疗恶性肿瘤的途径之一     

鸟氨酸脱羧酶与女性常见恶性肿瘤

鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase,ODC)是调控细胞内多胺生物合成的限速酶,参与胚胎发育、细胞周期、细胞增殖分化等重要的生理过程,同时也是肿瘤细胞的快速增殖所必须,是目前研究较多的抗肿瘤治疗的潜在分子靶点之一。本文简要综述ODC与女性常见恶性肿瘤关系的研究进展。     

大鼠短期十二指肠胃反流引起胃黏膜鸟氨酸脱羧酶表达增强

十二指肠胃反流 (duodenogastricreflux ,DGR)是指包括肠液、胆汁及胰液等碱性液体逆流入胃内的病理生理过程。十二指肠内容物如胆汁酸、胆盐、胰酶等长期作用于胃黏膜 ,可导致胃黏膜炎症、糜烂及溃疡等[1 ] 。多胺包括腐胺、精胺等是细胞增殖的标志性物质 ,鸟氨酸脱羧酶 (orni     

鸟氨酸脱羧酶与结直肠癌关系的研究进展

<正>多胺是调节细胞生长、发育和促进组织创伤愈合的细胞信号分子,鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)是多胺代谢过程中的第一限速酶,催化鸟氨酸脱羧生成腐胺,研究显示ODC活性和多胺合成在多种上皮癌中增加,其中包括皮肤癌、前列腺癌和结直肠癌。结直肠癌中K-ras基因突变和腺瘤性息肉病基因的突变诱导ODC基因表达,抑制多胺的代谢,ODC活性的增加与结直肠癌的发生与发展关系密切。在人类ODC