血小板微颗粒、血小板膜活化糖蛋白在血栓性脑血管疾病诊断与治疗中的意义

目的:检测脑血管疾病患者治疗前后血小板微颗粒(platele-derived microparticals,PMP)数量的变化,研究其与血小板表面膜糖蛋白CD62P、GPⅡb/Ⅲa活化比率的关系,探讨其在血栓性脑血管疾病发病机制中的作用及其临床意义。方法:选取28例患者作为病例组,30例健康查体者作为对照组,采用流式细胞仪分别测定上述指标。结果:病例组治疗前PMP(223±54)/10~4Plt,CD62P(52.19±12.37)％,GPⅡb/Ⅲa(77.98±14.22)％;治疗后PMP(136±18)/10~4Plt,CD62P(31.16±17.43)％,GPⅡb/Ⅲa(40.71±11.64)％;对照组PMP(66±17)/10~4Plt,CD62P(4.27±2.17)％,GPⅡb/Ⅲa(10.23±3.44)％。病例组上述指标治疗后均下降(P均<0.01),但仍高于对照组(P均<0.01)。PMP数量与CD62P、GPⅡb/Ⅲa活化比率呈正相关(r=0.69,r=0.86 P均<0.01)。结论:血小板微颗粒在血栓性脑血管疾病中与CD62P、GPⅡb/Ⅲa活化比率间存在明显正相关,可作为血栓性脑血管疾病血小板体内活化的特异性指标。PMP、CD62P、GPⅡb/Ⅲa的联合检测对该病的疗效观察有重要价值。     

高血压患者服用丹芎通脉颗粒后的血小板活化水平

目的 用流式细胞仪测定高血压病人服用丹芎通脉颗粒前后血小板活化水平。方法 在服药前后,采用双注射器采集外周静脉血,3 8％枸掾酸钠抗凝,加入三种荧光素标记的单克隆抗体。分别加入FITC-PACl,PE-CD62P及PerCP-CD61单抗,室温避光孵育,1％多聚甲醛固定,上机检测。 结果 16例病人服药前后PACl ％从(12.61±3.15)％下降到(2.83±0.71)％(P<0.0001)。34例病人服药前后CD62P ％从(5.49±3.64)％下降到(2.31±1.54)％(P<0.0001)。结论 服用丹芎通脉颗粒后,病人的血小板活化水平都有显著性下降。     

低温体外保存对血小板活化和凋亡的影响

目的 观察保存温度对血小板活化和凋亡的影响,评估低温体外保存血小板的效果.方法 取20份单采血小板,一分为三,一份于(22±2)℃振荡保存(对照组),另两份悬浮于血小板添加液(65％)与自体血浆(35％)的混合液中分别静置于10℃储血冰箱(实验Ⅰ组)和(22±2)℃振荡仪(实验Ⅱ组),于1、3、4、5、7d检测血小板计数(platelet count,PLT)、血小板P选择素(cluster of differentiation 62 platelet,CD62p)表达率、血小板线粒体跨膜电位(mitochondrial transmembrane potentia,△Ψm).结果 随着时间延长,3组PLT比较平稳,在组间、时点间以及组间·时点间交互作用差异均无统计学意义(P＞0.05);随着时间延长CD62p逐渐升高,而△Ψm％逐渐下降,3组CD62p、△Ψm在组间、时点间以及组间·时点间交互作用差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 血小板添加液混合血浆10℃低温保存比(22±2)℃保存血小板的活化和凋亡程度均较低.     

冠心病与血小板活化关系的研究

目的 探讨冠心病患者血小板活化状态.方法 采用全血流式细胞术(FCM)三色荧光分析技术对50例冠心病患者和50例健康人的血小板活化标志物CD62P,GPⅡb/Ⅲa(PAC-1)进行检测.结果 冠心病组血小板CD62P(34.17±9.82)%与PAC-1(82.66±11.33)%阳性百分率显著高于对照组[(15.13±2.63)%,(38.07±5.44)%],两组间比较差异具有显著性(P＜0.05).结论 冠心病组存在血小板活化,全血流式细胞术检测血小板活化可用于冠心病预防、治疗和复发的监测.     

过敏性紫癜患儿血小板表面黏附分子CD62P和GPⅡb/Ⅲa表达水平的变化

目的 了解过敏性紫癜(HSP)患儿血小板表面黏附分子CD62P、GPⅡb/Ⅲa的表达情况,探讨其在HSP发病机制中的作用.方法 选择2006年3～11月我院收治的29例HSP患儿,选择同期27例外科非感染性疾病患儿作为对照,应用流式细胞仪检测外周血小板黏附分子CD62P、GPⅡb/Ⅲa的水平.结果 与对照组比较,HSP组血小板GPⅡb/Ⅲa表达水平为(26.30±10.25)%,比对照组的(20.67±7.80)%明显增高(P＜0.05),且HSP肾炎者[(29.43±10.10)%]明显高于HSP非肾炎者[(21.18±8.72)%,P＜0.05];HSP组与对照组CD62P分子的表达水平分别为(1.33±0.40)%和(1.24±0.41)%.两组比较无显著性差异(P=0.43).结论 HSP患儿血小板GPⅡb/Ⅲa表达增加,尤以合并肾脏损害时明显.血小板的异常活化参与了HSP、过敏性紫癜肾炎(HSPN)发病的病理生理过程.     

高血压性视网膜病变血小板膜糖蛋白的变化及临床意义

目的探讨高血压性视网膜病变血小板活化及临床意义。方法采用流式细胞术对73例原发性高血压患者(其中高血压性视网膜病变Ⅰ、Ⅱ级者35例,高血压性视网膜病变Ⅲ、Ⅳ级者38例)及35名正常对照者外周血血小板活化分子标记物颗粒蛋白(GMP)CD62P、CD63进行了检测。结果原发性高血压者组CD62P、CD63阳性表达率分别为(6.10±7.15)%、(7.57±4.54)%均显著高于健康对照组(0.71±0.40)%、(2.91±1.69)%(P<0.01),高血压性视网膜病变Ⅲ、Ⅳ级组高于高血压性视网膜病变Ⅰ、Ⅱ级组(P<0.05)。结论检测活化血小板对高血压性视网膜病变的早期诊断具有重要的临床意义。     

血小板分离联合术中自体血回收对骨科大手术减少失血和血小板活化的影响

目的 探讨血小板分离联合术中自体血回收对骨科大手术节约用血和血小板活化的影响.方法 150例择期行骨科大手术的患者(估计术中出血量≥800ml),随机分为3组,每组50例.Ⅰ组进行自体血小板分离和术中自体血回收,术中分别予以回输;Ⅱ组只进行自体血回收,不进行血小板分离,术中予以回输;Ⅲ组为对照组,不进行上述任何血液保护措施,按需输注异体血.测定各组患者5个时间点的凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、血栓弹力图(TEG)的凝血功能参数[包括反应时间(R)、凝血时间(K)、a角、最大振幅(MA)和凝血指数(CI)]及血小板PAC-1、CD62P和CD63的表达量.结果术中Ⅰ、Ⅱ两组均未输注异体血,Ⅲ组输注异体红细胞悬液(2±1)U;术后Ⅰ组未输注异体血,Ⅱ组、Ⅲ组输注异体血比例分别为30%(15/50)和32%(16/50).3组间PT、APTT变化差异均无统计学意义(均P>0.05).Ⅰ组术后CD62P表达低于麻醉诱导前和输注自体富血小板血浆前(P<0.05).与Ⅰ组比较,术后Ⅱ组、Ⅲ组的MA值呈下降明显(P<0.05),而CD62P表达明显升高(P<0.05).3组间PAC-1、CD63表达差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 术中自体血回收可以减少术中用血但不能减少术后出血和输血.血小板分离不会引起血小板活化,并在一定程度上保护血小板的功能,可以起到减少术后出血及节约用血的效果.     

高血压患者服用丹芎通脉颗粒后的血小板活化水平

目的用流式细胞仪测定高血压病人服用丹芎通脉颗粒前后血小板活化水平.方法在服药前后,采用双注射器采集外周静脉血,3.8%枸掾酸钠抗凝,加入三种荧光素标记的单克隆抗体.分别加入FITC-PAC1,PE-CD62P及PerCP-CD61单抗,室温避光孵育,1%多聚甲醛固定,上机检测.结果16例病人服药前后PAC1+%从(12.61±3.15)%下降到(2.83±0.71)%(P<0.0001).34例病人服药前后CD62P+%从(5.49±3.64)%下降到(2.31±1.54)%(P<0.0001).结论服用丹芎通脉颗粒后,病人的血小板活化水平都有显著性下降.     

术中自体血回收对血小板活化的影响

目的研究术中自体血回收对血小板活化和血液流变学的影响。方法将择期手术估计术中出血量>500mL的40例骨科患者分为两组(Ⅰ组及Ⅱ组),每组20例;Ⅰ组术中自体血回收及回输;Ⅱ组不进行自体血回收。利用流式细胞仪(FCM)和微量全血法,比较两组凝血功能、血液流变学及血小板活化标志物(CD单抗CD62P、PAC-1和CD63)的变化。结果术中Ⅰ组未输异体血,Ⅱ组输注异体红细胞悬液2±1U;术后Ⅰ组和Ⅱ组输注异体血比率为30%(6/20)和35%(7/20);两组间凝血功能和血液流变学指标变化差异无显著性,CD62P、PAC-1和CD63两组间比较差异无统计学意义。结论术中回收自体血回输不会引起血小板激活和凝血功能及血液流变学指标的变化。     

流式细胞术检测冠心病患者血小板表面糖蛋白的变化

目的 观察冠心病患者及其亚组的血小板膜P选择素(CD62P)和糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(PAC-1)的变化及其意义.方法 采用流式细胞仪三色荧光标记技术来测定急性冠脉综合征、慢性心肌缺血综合征患者及22名健康对照组的血小板表面糖蛋白(CD62p/PAC-1)的表达率,并比较其变化.结果 病例组的血小板表面糖蛋白表达率显著高于对照组,其中急性冠脉综合征患者的PAC-1:(15.54±6.43)%,CD62p:(9.83±6.06)%,与对照组相比(P＜0.001),慢性心肌缺血综合征PAC-1:(5.38±2.62)%,CD62p:(11.00±6.37%),较对照组也有显著升高(P＜0.001).急性冠脉综合征组的PAC-1水平显著高于慢性心肌缺血综合征CIS组P＜0.001.结论 冠心病患者处于血小板高度活化状态,其中急性冠脉综合征患者血小板处于活化的早期阶段,而慢性心肌缺血综合征患者血小板处于慢性激活状态,CD62P和PAC-1是血小板功能检测非常敏感的指标.     

老年脑梗死患者血清胆固醇、高密度脂蛋白及其图谱的变化

目的观察老年脑梗死患者血清胆固醇、高密度脂蛋白及其图谱的变化。方法采用改良的双梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测118例老年脑梗死患者和60例健康老年人的血清脂蛋白谱(SLPG),同时测定血清总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量。结果与对照组比较,老年脑梗死组血清HDL-C含量[(1.0±0.3)mmol/L]显著降低(P<0.001),TC/HDL-C(5.3±1.4)显著增高(P<0.001),而TC 含量](5.0±1.5)mmol/L]则无显著统计学差异。老年脑梗死组SLPG异常率为86.4%,不管HDL-C含量降低与否,α脂蛋白在SLPG的表现均显著异常(P<0.001~0.05)。结论血清HDL-C水平降低、TC/HDL-C增高以及SLPG异常可能是老年脑梗死发病的危险因素,其中α脂蛋白图谱较HDL-C更具敏感性,而TC水平的预警作用可能不大。     

低密度及氧化低密度脂蛋白对内皮细胞分泌肾上腺髓质素的影响

目的探讨低密度及氧化低密度脂蛋白对内皮细胞分泌肾上腺髓质素(ADM)的影响.方法利用培养的内皮细胞株ECV-304细胞,分别与不同浓度的低密度(50 100mg/L)、氧化低密度脂蛋白(50 100mg/L)及低密度脂蛋白(50 mg/L) 氧化低密度脂蛋白(50 mg/L)进行孵育,24 h后分别收集培养上清及细胞,用放免分析检测上清及细胞内肾上腺髓质素的含量.结果低密度脂蛋白对肾上腺髓质素的分泌无影响,而氧化型低密度脂蛋白能明显刺激ADM的分泌,二者合用的作用接近于100mg/L的OX-LDL.结论OX-LDL可能具有氧化LDL使其成为OX-LDL的作用,ADM的分泌可能是对细胞损伤的一种反应.     

利维爱对绝经后妇女血脂及氧化低密度脂蛋白的影响

目的观察利维爱治疗对绝经后妇女血脂及血清oxLDL的影响。方法有更年期症状的绝经后妇女138例,随机分为治疗组（利维爱2.5 mg/d）和对照组。利维爱治疗前及治疗2年后检测血清TC、TG、HDL-C、LDL-C及oxLDL水平。结果129例完成观察和治疗。利维爱治疗2年后血TC显著降低（P〈0.05）,LDL-C和Lp（a）极显著降低（P〈0.01）,HDL-C略有降低（P〉0.05）;血oxLDL-C（P〈0.01）显著降低。结论利维爱可调节血脂代谢,降低oxLDL-C,对动脉粥样硬化有预防作用。     

肝炎后肝硬化血清脂蛋白测定的临床意义

目的 观察肝炎后肝硬化患者血清脂蛋白水平变化，探讨它们在肝硬化发展过程中的作用。方法 采用直接酶法和免疫透射比浊法检测肝硬化患者和正常对照组血清脂蛋白水平。结果 肝硬化患者血清脂蛋白水平明显低于对照组，且随着肝功能分级逐渐下降。结论 脂蛋白水平与肝损害程度密切相关，可作为判断肝硬化病情及预后的辅助手段。     

修饰的脂蛋白(a)在动脉粥样硬化中的作用

本文观察了体外丙二醛（MDA）修饰的脂蛋白（a）[Lp（a）]结构与生物学性质的变化。硫代巴比妥酶活性物质实验（TBARS）和脂蛋白琼脂糖电泳显示经MDA修饰后，Lp（a）脂质过氧化程度增高，负电荷增多．小鼠腹腔巨噬细胞脂质蓄积实验和对125I－MDA－LDL降解抑制实验揭示，丙二醛修饰的Lp（a）较天然Lp（a）更明显提高鼠腹腔巨噬细胞对胆固醇酯的蓄积和对125I－MDA－LDL降解的抑制，证实了Lp（a）经丙二醛修饰后易被巨噬细胞-清道夫受体识别和摄取，导致细胞内胆固醇酯的蓄积和泡沫细胞的形成，参与动脉粥样硬化的病理过程。此外，通过比较MDA－Lp（a）与MDA-LDL氧化修饰的难易度和对巨噬细胞脂质蓄积的影响，提示Lp（a）分子中载脂蛋白apoB－100在丙二醛修饰Lp（a）中起主要作用。     

诺迪康对高脂血症大鼠血脂与脂蛋白的影响

目的 :研究诺迪康对高脂血症大鼠血症及脂蛋白的影响。方法 :用高脂饲料喂服雄性wistar大鼠 ,复制高脂血症大鼠模型。连续灌胃给药 10d后采血 ,测定血清甘油三脂 (TG) ,总胆固醇 (TC) ,高密度脂蛋白 (HDL C) ,计算低密度脂蛋白LDL C)。结果 :与高脂模型组比 ,诺迪康 1 0 0、0 5 0、0 2 5g/kg均能明显降低高脂血症大鼠TC、TG、LDL C、(p <0 0 5p <0 0 1) ,诺迪康 1 0 0、0 5 0g/kg也能升高HDL C。结论 :诺迪康能降低高脂血症大鼠TC、TG、LDL C而升高HDL C。     

低密度脂蛋白-胆固醇达标的冠心病患者脂蛋白(a)水平与冠脉病变复杂程度的相关性研究

目的:探讨低密度脂蛋白-胆固醇达标的冠心病患者脂蛋白（a）水平与冠脉病变复杂程度的相关性。方法:收集低密度脂蛋白-胆固醇已达标的212例行冠脉造影的冠心病患者临床资料,根据SYNTAX评分将患者分为低危组（0～22分）104例和中高危组（≥23分）108例,采用Pearson相关分析血脂指标与SYNTAX评分的相关性,绘制ROC曲线评估脂蛋白（a）对冠脉病变复杂程度的预测价值并确定最佳临界值。采用多因素Logistic回归分析脂蛋白（a）与冠脉病变复杂程度的关系。结果:中高危组脂蛋白（a）水平高于低危组[28.55（13.98,52.00）nmol/L vs.13.55（8.10,33.60）nmol/L（P <0.01）]。Pearson相关分析显示,脂蛋白（a）水平与SYNTAX评分呈正相关（r =0.235,P <0.01）。ROC曲线显示,脂蛋白（a）预测冠状动脉病变复杂程度的曲线下面积为0.653（95%CI:0.580~0.727,P<0.01）,最佳临界值12.70 nmol/L,灵敏度78.7%,特异度49%。多因素Logistic回归分析结果显示,脂蛋白（a）是冠脉病变复杂程度的独立危险因素（OR=2.734,95%CI:1.358~5.504,P <0.01）。结论:低密度脂蛋白-胆固醇达标的冠心病患者中脂蛋白（a）是冠状动脉病变复杂程度的独立危险因素,为冠心病药物治疗提供了新靶点。     

琼脂糖凝胶电泳法测定血清中各种脂蛋白胆固醇

目的：对琼脂糖凝胶电脉法同时测定血清极密度脂蛋白（VLDL）,低密度脂蛋白（LDL）,高密度脂蛋白（HDL）和脂蛋白（a)Lp(a）的胆固 即VLDL－C,LDL－C,HDL－C和Lp(a)-C含量的方法进行评价。方法：采用Helena REP全自动快速电泳系统分离血清VLDL,LDL,HDL和Lp(a),然后结合胆固醇染色法同时测定VLDL－C,LDL－C,HDL－C和Lp(a)-C的含量,分别了该法的精密度,准确度和干扰因素,并将该法与传统方法如测定HDL－C的磷钨酸－镁沉淀法（PTA－Mg2 )法,测定LDL－C的聚乙烯硫酸沉淀法（PVS法）及测定Lp(a)的免疫秀射比浊法（ITA法）进行比较,结果：电泳法测定VLDL－C,LDL－C和HLD－C批内CV分别为5．16％－7．46％,1.26％－3．28%,3．78－5．86％;批间CV分别为8．35％－11．25％,2．78％－4．08％,4．23％－6．36％。检测线性范围总胆固醇为94．3％和89．6。电泳法与传统法测定LDL－C,HDL－C的相关系数（r)分别为0．9609,0．9557,电泳法测定Lp(a)-C与ITA法测定Lq(a)的r为9235,以该法检测北京地区98例健康人,HDL－C,VLDL－C,LDL－C,Lp(a)－C参考范围分别为0．95－2．10mmol/L,0.07-0.46mmol/L,1.77-2.87mmol/L,0-0.22mmol/L。结论：电泳法测定值与传统法一致,电泳法操作简便,快速经济,可同时测定4种脂蛋白胆固醇,适合于临床常规及研究使用。     

异常血脂脂蛋白电泳谱研究

目的 对异常血脂症脂蛋白电泳谱的研究.方法 把异常血脂症按高胆固醇(TCH)、高甘油三酯(TG)、低高密度脂蛋白(HDL-C)、混合升高、高LP(a)分为5型,利用全自动电泳仪,琼脂糖凝胶电泳法进行电泳后染色,自动扫描仪扫描出HDL、VLDL、LDL和LP(a)电泳谱并与正常对照各组分比较.结果 高TCH型均无显著改变(P＞0.05);高TG型VLDL显著增高(P＜0.01),HDL、LDL二者显著降低(P＜0.01);低HDL-C型则表现在HDL显著降低(P＜0.01);混合型HDL显著降低(P＜0.01)、VLDL显著升高(P＜0.01);高LP(a)型HDL轻度降低(0.01＜P＜0.05),并出现LP(a)带.结论 脂蛋白电泳谱在简易5型分类中有其特殊的表现形式,对预防和治疗异常血脂症有重要作用.     

低密度脂蛋白胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇的比值与动脉粥样硬化的关系

目的探讨低密度脂蛋白胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇的比值(LDL-C/HDL-C比值)与早期动脉粥样硬化的关系。方法共连续收集2006年5月至2010年6月在第二军医大学长征医院贵宾诊疗科健康体检者1 320例,其中男性885例,女性435例,平均年龄(49.0±10.0)岁,利用多元逐步回归法了解LDL-C/HDL-C比值与颈动脉内中膜厚度的相关性。结果 LDL-C/HDL-C比值与颈动脉内中膜厚度独立相关(男性:β=0.067 3,P=0.005;女性:β=0.033 2,P<0.001),而且在女性患者中,即使LDL-C水平在合适范围内(<3.37mmol/L),该相关性仍然存在(β=0.100 9,P=0.015)。结论 LDL-C/HDL-C比值是颈动脉粥样硬化的独立危险因素;相对于LDL-C而言,LDL-C/HDL-C比值是一项更有价值的临床预测指标。