鱼油制剂中DHA对小鼠红核、黑质区NOS阳性细胞表达的影响

目的：富含DHA的鱼油制剂对小鼠中脑红核，黑质区NOS阳性神经元表达的影响，方法：实验小鼠分为两组，鱼油组和对照组，应用NADPH－d组化法显示小鼠红核及黑质NOS阳性神经元的数量，突起及透光率。结果：鱼油组NOS阳性神经元数量及透光率均大于对照组，鱼油组NOS阳性神经元胞体大而深染，透光率低，树突棘增多，对照组NOS阳性神经元胞体数量少，透光率高。结论：鱼油制剂中DHA对从胎鼠到幼鼠期神经系统的生长，发育有促进作用。     

失血性休克大鼠中脑导水管周围灰质腹外侧区一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的 观察失血性休克大鼠中脑导水管周围灰质（PAG）腹外侧区的一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的变化。方法 取雄性SD大鼠20只随机分成4组,即对照组（假手术组）、休克时组、休克45 min组和休克90 min组。对照组仅进行左股动脉插管而不放血;其他各组经左股动脉插管放血复制失血性休克模型。分别在休克时、休克45 min和休克90 min灌注固定后取脑干进行冰冻切片,行NADPH-d组化染色观察,并对各组PAG腹外侧区尾段的NOS阳性神经元和其背内侧NOS阳性突起密度进行比较。结果 PAG腹外侧区尾段的NOS阳性神经元密度的变化无统计学意义（P〉0.01）,但在失血性休克后NOS阳性神经元染色明显加深,其背内侧突起增密,变化有统计学意义（P〈0.01）。结论 大鼠PAG腹外侧区的NOS阳性神经元可能参与了失血性休克的发生发展,并且发挥着影响。     

大鼠上丘一氧化氮合酶阳性神经元的发育

目的：研究大鼠胚胎时期及生后早期一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元在上丘的分布，进一步探讨一氧化氮(NO)在上丘发育过程中的作用。方法：应用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH—d)组织化学方法观察孕17d起至生后14d大鼠上丘NOS阳性神经元的发育。结果：孕20d上丘深白层与深灰层出现NOS阳性神经元。P0上丘中层也观察到NOS阳性神经元。随着发育，阳性神经元增多，胞体增大，染色加深。到P14，视神经层出现少许：NOS阳性神经元，浅灰层观察到大量的NOS阳性神经元。结论：胚胎20天上丘深层首先出现NOS阳性神经元并沿腹背方向发生，提示NO在上丘发育过程中起着重要作用。     

人胎后期大肠NOS阳性神经元发育的免疫组化观察

目的探讨人胎发育后期大肠壁内NOS阳性神经元的生长发育规律。方法用免疫组织化学法显示NOS阳性神经元并进行观察、分析。结果第8~10个月龄时,肌间神经丛内NOS阳性神经元胞体呈圆形或椭圆形,大小不一,染色深浅不同。胞体大的神经元,胞质丰富,染色深;胞体小的神经元,胞质少,染色淡。内环肌层有散在分布的NOS阳性神经元。有的神经元突起与内环肌肌纤维之间的膨体纤维紧密接触。内环肌层膨体纤维分布较密。粘膜下层结缔组织内NOS阳性神经元分布稀疏,胞体大,染色深,并发出大量神经纤维伸入其周围的结缔组织。粘膜固有层中可见到NOS阳性神经元分布,粘膜肌内也有NOS阳性神经纤维表达。结论在人胎后期,大肠壁内NOS阳性神经元逐渐发育成熟,并与各层组织细胞的发育有密切关系。     

大鼠中脑导水管周围灰质和中缝背核内GABAA受体α1、α2、β亚型和GABAB受体的定位分布

目的 观察大鼠中脑导水管周围灰质（PAG）和中缝背核（DR）内γ－基丁酸（GABA）A受体α1、α2、β亚型（GABABRα1,α2,β)的GABAB受体的定位分布。方法 GABAA受体亚型和GABAB受体特异性抗体的免疫细胞化学染色方法。结果 在PAG和DR内可观察到GABAAR亚型和GABABR阳性的神经元胞体、纤维和终末，但不同受体的分布有差别：GABAARα1主要分布于PAG腹外侧区神经元的突体和突起。可见到散在的GABAARα2阳性终末混于PAG和DR的神经毡内。GABAARβ主要分布于DR及PAG背侧区和背外侧区的纤维和终末，胞体多呈阴性。GABABR主要分布于PAG和DR神经元的胞体和突起。结论 GABAA受体和GABAB受体均密集分布于PAG和DR，提示GABA与GABAA受体和GABAB受体结合并对PAG和DR的神经元发挥抑制作用。     

人胎大肠NOS阳性神经元发育的免疫组化观察

目的探讨人胎大肠NOS阳性神经元发育的规律。方法用免疫组织化学法对人胎大肠NOS阳性神经元的表达进行观察。结果第3个月龄时,肌间神经丛处有单个分布或三、五成群的NOS阳性神经元,胞体较小,圆形或椭圆形,胞质少,染色淡,有的神经元一端有小的突起。随着胎龄的增加,NOS阳性神经元胞体逐渐增大,粘膜下层也出现单个的NOS阳性神经元。第6-7个月龄时,肌间神经丛内NOS阳性神经元为多极神经元,稀疏地分布在靠内环肌一侧,肌间神经丛内形成神经纤维网,网中出现胞体较小淡染的NOS阳性神经元。在环肌层内可见到NOS阳性神经元分布。结论大肠壁内NOS阳性神经元的发育与各层组织细胞的发育有密切关系。     

切断部分背根神经对脊神经节和脊髓Ⅱ板层一氧化氮合酶表达的影响

目的：观察部分背根神经切断对猫脊神经节（SG）和脊髓II板层一氧化氮合酶（NOS）表达的影响。方法：采用尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶（NADPH－d）法显示单侧部分背根切断（切断一侧L1－L5，L7－S2背根节，保留L6为备用根）后10d的猫L6SG和L6脊髓II板层NOS的分布及变化。结果：NOS的阳性物主要分布于SG胞体偏小的神经元和脊髓II板层的神经膨体内，部分背根切断后10d，手术侧SG内胞体偏小的NOS阳性神经元数量及II板层NOS阳性神经膨体密度均较非手术侧者增多（P＜0．05）。结论：部分背根切断不仅致备用SG胞体偏小的神经元NOS表达增加，且II板层NOS的阳性膨体数量亦有增多。提示由NOS产生的一氧化氮（NO)可能在部分背根切断后猫脊髓可塑性中发挥作用。     

自发性高血压大鼠室周灰质中NOS阳性神经元的形态学观察

【目的】探讨自发性高血压大鼠(SHR)脑室与中脑水管周围灰质中一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的变化及其与高血压病的可能关系。【方法】选10月龄成年SHR大鼠12只,同龄正常血压对照大鼠(Wistar-Kyoto,WKY)12只,灌注固定后取脑和脑干作冠状位冰冻切片,行NADPH-d组织化学方法染色,光镜观察和图象分析。【结果】(1)NOS阳性神经元主要分布在中脑水管周围灰质(PAG)的背外侧部,下丘脑第三脑室(3V)室周灰质,以及第四脑室(4V)室底灰质中;在3V周围,NOS阳性神经元散在分布,并可区分为室管膜下(远位)、膜内和膜上3种;左、右侧脑室周围未见阳性神经元分布。(2)SHR组上述部位的NOS阳性神经元数量较少,且平均灰度值增加(染色变浅),两组间比较具有统计学意义(P<0.05)。【结论】SHR室周灰质中NOS阳性神经元数量减少、NOS水平下降,NO合成减少,可能参与了高血压病的发病过程。     

人胎中后期大脑额叶一氧化氮合酶阳性神经元发育的免疫组织化学观察

目的探讨人胎发育中后期大脑额叶内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的生长发育规律。方法采用免疫组织化学方法对人胎大脑额叶NOS阳性神经元的发育进行观察。结果第7～8个月龄时,大脑额叶皮质板深层NOS阳性神经元大小不一,形态多样,呈散在分布,NOS阳性反应较强;在神经元之间脑组织内有膨体神经纤维分布。第9～10个月龄时,大脑皮质板深层NOS阳性神经元胞体略大,胞质丰富,形态饱满,染色深;膨体神经纤维明显;在皮质板浅层出现散在分布的NOS阳性神经元,胞体呈圆形或椭圆形,核大,胞质少,神经突起明显。结论大脑额叶皮质深层NOS阳性神经元基本形成神经网络系统,产生较高浓度的一氧化氮微环境,有利于各种类型神经元的分化、增殖、迁移和发育。     

人胎幽门括约肌内NOS阳性神经元发育的研究

用NADPH d组织化学法对第 3个月龄至足月 (10个月胎龄 )人胎幽门括约肌内NOS阳性神经元的发育进行了观察。结果显示 :第 5个月胎龄时 ,肌间神经节处的圆形细胞中部分细胞出现较弱的NOS阳性反应。第 6个月胎龄时 ,该处圆形细胞NOS阳性反应增强 ,并分化形成梭形NOS阳性神经细胞 ,部分细胞呈条索状排列向内环肌层方向延伸 ,有的到达粘膜下层。第 7个月胎龄时 ,肌间神经节细胞胞体明显增大 ,细胞数增加 ,胞质增多 ,染色增强 ,突起伸长 ,在肌层、粘膜层和粘膜下层出现NOS阳性神经纤维分布。第 8～ 10个月胎龄时 ,幽门括约肌内NOS阳性神经元胞体及其神经纤维呈NOS强阳性反应。其胞体分布以肌层最多 ,粘膜下层较少。NOS阳性神经纤维的分布密度以肌层最高 ,粘膜层基部次之 ,粘膜下层较低。本研究揭示了幽门括约肌内NOS阳性神经元发育的变化规律。     

胼胝体内的一氧化氮合酶阳性细胞

应用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法研究大鼠胼胝体内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性细胞的生后发育。结果发现大鼠出生后１天胼胝体内ＮＯＳ阳性神经元少见，但在侧脑室背侧见有ＮＯＳ阳性细胞层；生后７天已见有ＮＯＳ阳性细胞，但胞体小，其突起呈点线状；生后１４天ＮＯＳ阳性细胞胞体及突起进一步发育，突起呈线状；至２１、２８天时，胼胝体内所见ＮＯＳ阳性细胞与成鼠胼胝体内所见阳性细胞无差异。这些ＮＯＳ阳性细胞散在分布于胼胝体中，有的紧贴于皮质下方并可见有突起伸入皮质；有的位于侧脑室室管膜附近，突起伸入室管膜细胞间，亦见有ＮＯＳ阳性细胞位于室管膜细胞层中；散在于胼胝体中的细胞其突起有的与胼胝体联合纤维并行，有的向各个方向伸展。     

正常和剥夺性弱视大鼠视皮质NOS阳性神经元的生后发育变化

目的：探讨NO参与正常视觉发育可塑性的分子机制及视觉剥夺对NO的表达所产生的影响。方法：正常和剥夺性弱视大鼠分别在不同时限(P14～P45)测定视皮质17区的NOS阳性神经元组织切片下的表达。结果 用光镜下计数和计算机图形分析系统得出。结果：正常大鼠视皮质17区中的NOS阳性神经元，P14时数量最多，到P21时神经元胞体截面积最大，树突分枝最复杂。剥夺对侧与同期正常鼠及剥夺同侧比较无显著性差异。结论：在视觉发育关键期，NOS在正常发育大鼠及剥夺性弱视大鼠视觉中枢中成短暂的高水平表达。单跟剥夺不会影响NOS在皮质17区的表达。     

银杏内酯对大鼠胚基底前脑NOS、AchE阳性神经元发育的影响

目的:探讨银杏内酯对大鼠胚基底前脑NOS、AchE阳性神经元发育的影响及可能的作用机制。方法:实验分银杏组、神经生长因子(NGF)组、脑原神经营养因子(BDNF)组和单纯对照组。取孕17天SD大鼠胚基底前脑原基制成细胞悬液接种于96孔培养板和2块24孔培养板中,分别加入含银杏内酯、NGF、BDNF及不含上述成分的DMEM培养液。于体外培养18天后,96孔培养板行MTT比色分析测定光密度值(A值),以检测培养的神经元活力。2块24孔培养板分别行NADPH-d和AchE组织化学染色,显微镜下计数各组每孔中一氧化氢合酶(NOS)、AchE阳性神经元数目,并用CMM-301图像分析系统对两种神经元的细胞面积和细胞周长进行处理,数据用方差分析、SNK检验作统计学处理。结果:银杏组MTT比色分析的A值和NOS、AchE阳性神经元数目、细胞面积、细胞周长等指标均优于单纯对照组,达到或仅稍差于NGF组或BDNF组的指标。结论:银杏内酯在促进大鼠胚基底前脑NOS、AchE阳性神经元发育方面具有类似NGF或BDNF的作用。     

大鼠背侧丘脑一氧化氮合酶阳性神经元的分布

目的：探讨一氧化氮合酶（NOS）在大鼠背侧丘脑各核团内的分布特点。方法：用NADPH－d组织化学方法观察一氧化氮合酶阳性神经元及纤维在大鼠背侧丘脑内的分布和形态特征。结果与结论：在大鼠且脑前内侧核、脑连结核、丘脑中央连结核、丘脑菱形核、丘脑带旁核、丘脑中央内侧核内可见少量淡染，小型阳性神经元，卵圆形或圆形，绝大部分阳性神经元未见突起，少数可见短突起，在丘脑室旁核内可见成群的中等或弱阳性神经元，突起少见，以卵圆形为主。背侧丘脑中线核群各亚核内阳性神经元分布相对较多。     

体外下丘脑神经细胞培养技术探讨

目的探讨体外下丘脑神经细胞培养的技术。方法选用生后1～3d的SD大鼠,取下丘脑组织进行单细胞原代培养。结果培养1d,神经元胞体小,圆形或梭形,无突起或突起极短;培养3d时,胞体明显增大,突起长度增加;到培养7d,神经元的胞体截面积和突起长度均达到最高峰,分别为161.63±21.17μm2和103.51±21.33μm;到14d时,神经元的胞体截面积和突起长度基本维持在7d时的水平。结论培养前7d是下丘脑神经元体外生长成熟的关键时期,这种良好的发育状态可维持到14d。体外下丘脑神经细胞培养技术的关键在于准确的取材部位,良好的单细胞悬液的制备,尤其是贴壁物的选择。     

一氧化氮合酶神经元在大鼠下丘脑中的分布观察

目的：观察大鼠下丘脑各核团内一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的形态及分布特征。方法：用黄递酶组织化学染色方法观测NOS神经元在大鼠下丘脑各核团中的分布。结果：视上核、室旁核内密集的NOS阳性神经元为大细胞型神经分泌神经元;其他核团内的阳性神经元主要为小细胞型神经分泌神经元,其中弓状核最密集,视前内侧核、Broca斜带核水平支次之,视前室周核、视前腹前核和视前外侧区内的密度最低。第三脑室室管膜上皮下见一些NOS阳性“触液神经元”,其胞体或突起伸向室管膜上皮,甚至嵌入其中。在弓状核、视前内侧束内有密集的NOS阳性神经纤维。结论：下丘脑各核团内NOS神经元的分布有差异。NO在下丘脑神经内分泌调节系统中起重要作用。     

大鼠中缝背核一氧化氮合酶神经元投射分布于大脑皮质一氧化氮合酶神经元

目的：研究通过损毁脑干中缝背核（DR），探讨中缝背核一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元是否投射分布于大脑皮质NOS阳性神经元。方法：将16只SD雄性成年大鼠分为实验组与对照组，对实验组动物DR微量注射喹啉酸，饲养1周，灌注固定，然后将大脑及脑干作冠状冷冻切片，NADPH－d组化染色。结果：实验组动物的中缝背核被有效损毁，其NOS阳性神经元的数量减少了59．1％（P＜0．001），大脑皮质NOS阳性纤维终末减少了28．2％（P＜0．05），与大脑皮质NOS神经元构成接触的NOS阳性纤维终末减少了33．9％（P＜0．05），结论：位于中缝背核的NOS阳性神经元投射分布于大脑皮质NOS神经元，推测中缝背核的NOS阳性神经元可能通过大脑皮质NOS阳性神经元间接对皮质脑血流量起调节作用。     

噪声损伤后豚鼠耳蜗核复合体一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的 :探讨噪声对豚鼠耳蜗核复合体 (CNC)内一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元数目和面积的影响。方法 :采用依赖还原型辅酶II的尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶 (NADPH d)组织化学方法 ,观察正常组和噪声损伤组 (噪声损伤后 1d ,1周 ,4周 )CNC内NOS阳性神经元数目和面积的变化。结果 :与正常组相比 ,噪声损伤后 1d至 4周 ,CNC内NOS阳性神经元数目逐渐增多 ;噪声损伤后 1dNOS阳性神经元面积急剧缩小 ,噪声损伤后 1～ 4周NOS阳性神经元面积逐渐升高并超过正常水平。与正常组比较 ,噪声损伤后 1d ,1周 ,4周组 ,NOS阳性神经元面积和数目差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,噪声损伤后 1d ,1周 ,4周 3组之间差异亦有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :在噪声损伤后 ,NO释放增多 ,对听觉核团有复杂的调节作用     

去势对雌性大鼠下丘脑外侧区一氧化氮合酶表达的影响

目的 通过研究去势前后大鼠下丘脑外侧区(lateral hypothalamic area,LHA)一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)阳性神经元的分布与形态变化,进一步探讨LHA神经细胞参与生殖活动的作用机制. 方法 将20只实验大鼠分为对照组、去势组、去势给药一月组及去势给药两月组4组,每组5只.各组大鼠脑组织作冰冻切片,行免疫组织化学染色,在光学显微镜下观察LHA 的NOS阳性神经元.应用图像分析系统对各切片LHA的NOS阳性神经元进行计数并计算其密度,测定阳性神经元的灰度值. 结果 去势组LHA的NOS阳性神经元密度值和灰度值都比对照组和去势给药一月组、去势给药两月组高,差异具有统计学意义;而对照组与去势给药一月组、去势给药两月组的阳性神经元的密度以及平均灰度值比较均无统计学差异. 结论 LHA的NOS可能参与了雌激素对垂体-性腺轴的负反馈调节.