急性角膜排斥患者的房水蛋白组学分析

目的:比较急性角膜排斥反应眼房水(AH)和白内障眼(对照组)AH的蛋白组学差异。方法:采用Bradford法测定房水中的总蛋白含量,并用二维(2D)凝胶电泳法测定蛋白组分。使用图像分析法检测二维凝胶上的蛋白斑点,排斥反应组的斑点较对照增大2倍以上。用免疫印迹法及质谱测定法辨别增大的蛋白印迹。结果:角膜排斥反应组AH总蛋白含量明显比对照组高,2D凝胶中有31个蛋白印迹明显增大,这此印迹源于白蛋白、α1-抗胰蛋白酶、载脂蛋白J、II型细胞角蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制因子、甲状腺激素结合蛋白等。蛋白印迹含量经总蛋白浓度矫正后,源于白蛋白、…     

高危角膜移植免疫排斥反应中ICAM-1的作用

目的:探讨细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion Molecule-1,ICAM-1)在高危角膜移植免疫排斥反应中的作用.方法:制作兔角膜新生血管(Comeal neovascularization,CNV)模型后行穿透性角膜移植(penetrating keratoplasty,PKP)4组,A组:正常对照组;B组:自体穿透性角膜移植组;C组:同种异体穿透性角膜移植组;D组:新生血管化角膜穿透性移植组.术后对CNV生长情况进行评分;记录植片存活时间;记录移植排斥指数(rejection index,RI);应用酶联免疫吸附(ELISA)双抗体夹心法检测房水及外周血中sICAM-1的含量.结果:CNV生长达中央平均为16.4±1.8d;排斥组植片平均存活12.4±1.3d,其他组角膜植片长期存活;正常房水和血清中均可检测到少量的sICAM-1,它们的浓度分别为16.55±3.63pg/ml,95.15±6.26pg/ml;术后早期D组房水及外周血中sICAM-1含量即升高,至排斥反应前达最高水平分别为53.87±19.25pg/ml,378.78±30.58pg/ml,在观察期内维持高水平;排斥反应发生时,炎性细胞布满全层,基质结构紊乱,有大量新生血管,部分内皮消失.结论:ICAM-1在角膜移植免疫排斥反应中发挥重要作用,术后监测ICAM-1浓度变化对排斥反应的发生有一定预测和早期诊断作用.     

炎症性牙周病患者血清α_1抗胰蛋白酶和α_2巨球蛋白的测定

采用ICSⅡ型免疫化学分析仪-速率散射比浊法测定了22名炎症性牙周病患者及10名正常人血清α_1-抗胰蛋白酶和α_2-巨球蛋白浓度。结果:炎症性牙周病患者血清α_1-抗胰蛋白酶和α_2-巨球蛋白浓度高于正常对照组,且α_1-抗胰蛋白酶与牙周炎症程度(牙龈指数)呈显著正相关,α_2-巨球蛋白与牙周袋深度呈显著负相关。提示机体可增加蛋白酶抑制因子合成,以抑制或排除过多的蛋白溶解酶,其中α_1-抗胰蛋白酶较α_2-巨球蛋白可能更重要。     

角膜不同保存方法与术后免疫排斥反应相关性的实验研究

目的:探讨角膜保存时间与术后免疫排斥反应的关系,检测角膜植片的细胞间黏附因子1(ICAM-1)表达及房水、血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量与角膜移植排斥反应的关系。方法:先选用Wistar大鼠15只30只眼随机分3组(每组10只眼),分别用不同方法保存,即:湿房保存12h,中期保存液保存7d,深低温长期保存12周。再选用SD大鼠30只30只眼(右眼)作为受体,分别使用上述不同保存方法的Wistar大鼠眼作为供体建立角膜移植排斥反应动物模型。将SD大鼠随机分3组每组10只眼:Ⅰ组(异体湿房保存组);Ⅱ组(异体中期保存组);Ⅲ组(异体长期保存组)。观察各组角膜移植术后排斥反应指数(RI)、植片存活时间(MST)和植片的病理变化。HE染色及免疫组化染色观察免疫排斥反应的程度及ICAM-1表达程度。采用酶联免疫吸附试验检测各组大鼠角膜移植术后10d时房水、血清中TNF-α含量变化。结果:Ⅲ组RI明显降低,MST明显延长,与其他两组比较均差异十分显著(P<0.01)。角膜移植术后10d时HE染色显示Ⅲ组炎性反应较Ⅰ组、Ⅱ组明显减轻,免疫组化染色显示Ⅲ组ICAM-1表达较Ⅰ组、Ⅱ组明显减少。Ⅲ组眶血清及房水中TNF-α含量明显低于Ⅱ组和Ⅰ组,差异十分显著(P<0.01)。结论:深低温保存的大鼠角膜移植术后免疫排斥反应发生率降低,发生时间延迟。ICAM-1和TNF-α是角膜移植免疫排斥反应发生的重要因素之一。     

孕中期羊水中生化物质与妊娠结局关系的探讨

目的 探讨孕中期羊水中生化物质与妊娠结局的关系.方法 选择133例孕16～24周的单胎孕妇,常规羊膜腔穿刺抽取羊水3ml,测定其葡萄糖、C-反应蛋白、瘦素、甲胎蛋白与α1-抗胰蛋白酶的含量,并观察妊娠结局.结果 孕中期羊水中葡萄糖含量与新生儿出生体重呈线性正相关(r=0.182,P=0.04),以羊水葡萄糖含量＞2.7mmol/L为临界值.预测巨大儿发生的敏感性为53.8%,特异性为67.8%.早产组孕中期羊水α1-抗胰蛋白酶含量[(1901.36±914.87)μg/ml]明显高于足月分娩组[(1025.03±656.94)μg/ml](P=0.006).ROC曲线分析表明以羊水α1-抗胰蛋白酶值＞1245μg/ml为临界值,预测早产发生的敏感性为80%,特异性为72%,相关分析表明孕中期羊水α1-抗胰蛋白酶含量与新生儿出生体重呈线性负相关(r=-0.255,P=0.022).结论 孕中期羊水中葡萄糖、C-反应蛋白、瘦素和甲胎蛋白不能作为预测早产和胎膜早破的指标,孕中期羊水中葡萄糖、C-反应蛋白、瘦素不能作为预测糖代谢异常和妊娠高血压疾病的指标,孕中期羊水α1-抗胰蛋白酶可作为预测早产的特异性指标.     

原发性肾病综合征湿热证与蛋白关系探讨

目的讨论肾病综合征患者血清中蛋白成分与湿热证的关系。方法对我院肾病综合征伴有湿热证患者的血液过滤液成分分析,与健康对照组进行对比,观察蛋白成分变化结果总血清蛋白质浓度,对照组为(1.25±0.02)μg/μl,湿热证组蛋白质浓度为(1.38±0.03)μg/μl。两组相比(t=-12.277,P=0.001)具有统计学意义(P<0.05)。结论载脂蛋白C-Ⅲ,α2-HS糖蛋白可以作为反映原发性肾病综合征湿热证的特异性蛋白,α1抗胰蛋白酶不能作为湿热证的特异性蛋白检测指标。     

食管鳞癌组织中HIF-1α和EGFR蛋白的表达与预后的关系

目的研究食管鳞状细胞癌(ESCC)中HIF-1α、EGFR蛋白的表达与食管癌病理特征及预后的关系。方法采用免疫组织化学(SP)法检测116例ESCC组织中HIF-1α、EGFR蛋白的表达,并分析其与临床病理因素及患者生存的关系。结果 HIF-1α与EGFR在ESCC组织中的阳性率分别为63.8%和68.1%,HIF-1α与EGFR均阳性率为50.9%。HIF-1α蛋白的阳性表达与T分期相关(P=0.014)。联合检测HIF-1α和EGFR蛋白均阳性表达与浸润深度及临床分期相关(P=0.006,0.023)。HIF-1α与EGFR蛋白表达呈正相关(r=0.331,P=0.000)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,EGFR蛋白阳性表达的ESCC患者生存时间短(P=0.019)。结论 HIF-1α、EGFR蛋白在ESCC组织中呈高表达,二者密切相关,在ESCC发生发展中有重要作用,EGFR可作为判断预后的重要指标。     

血清急性时相蛋白检测在消化系统恶性疾病诊断中的意义

目的:探讨急性时相蛋白检测在消化系统恶性疾病诊断的临床意义。方法:选取我院150例胃癌,结、直肠癌患者在术前行血清α1-酸性糖蛋白(α1-AG)、α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)、C-反应蛋白(CRP)浓度检测,并与同期收治的消化系统良性疾病、应激患者及健康体检者进行对比观察。结果:消化系统良性疾病患者血清α1-AG、α1-AT、CRP水平比健康对照组略有增高,但差异无统计学意义(P>0.05);消化系统恶性疾病患者术前血清α1-AG、α1-AT、CRP水平较良性疾病组与健康对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:急性时相蛋白在消化系统恶性疾病中增高显著,表明急性时相蛋白的检测对胃肠良、恶性肿瘤的辅助诊断具有重要的临床意义。     

肝病患者五种急性时相反应蛋白测定的临床意义

C反应蛋白(CRP)、α_1酸性糖蛋白(α_1AG)、α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)、触珠蛋白(HP)、铜兰蛋白(CP)都属于血液中急性时相反应蛋白,这些蛋白均由肝细胞合成,所以肝病时分别测定这些蛋白,有助于疾病的诊断和预后的判断。我们用速率散射比浊法对39名正常人和94例肝病患者进行上述五种蛋白的检测。结果见附表。ICS-Ⅱ型免疫化学分析系统系美国Beckman公司     

同种异体肾移植患者B型钠尿肽水平的临床观察

目的：探讨同种异体肾移植患者和发生急性排斥反应时血浆B型钠尿肽（BNP）水平及其临床意义。方法：采用免疫夹心化学发光法检测17例首次肾移植患者术前1d、术后第1天、第2天、第3天、1周、2周和3个月血BNP浓度。17例健康体检者作对照。结果：肾移植患者术前1d血BNP浓度显著高于健康对照组（P〈0．01）。肾移植术后血BNP浓度呈下降趋势（χ^2=14．25，P=0．027）。13例没有发生急性排斥反应的患者血BNP浓度术后1周和3个月与肾移植术前比较差异有显著性（P〈0．05）；4例发生急性排斥反应患者，发生急性排斥反应当天的血BNP浓度显著增高，加强抗排斥治疗后很快下降。结论：肾移植成功后可以降低血BNP水平，但发生急性排斥反应时血BNP浓度显著增高。因此，血BNP浓度可作为早期诊断移植肾急性排斥反应发生的敏感指标。     

α1-抗胰蛋白酶、CXCL12、IL-15Rα与艾滋病病毒感染患者预后的相关性分析

目的 探究α1-抗胰蛋白酶、CXCL12、IL-15Rα与艾滋病病毒感染患者预后的相关性。方法 对154例病理学检测确诊为艾滋病病毒感染患者以及154例健康志愿者进行了研究。按照疾病的分期将患者分为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期。使用Western blot法检测α1-抗胰蛋白酶、CXCL12表达，使用PC-PCR检测IL-15Rα表达，使用间接法检测CD3、CD4水平。结果 与对照组相比，艾滋病组患者CD4、CD8水平异常下降，差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组相比，艾滋病组患者α1-抗胰蛋白酶、CXCL12、IL-15Rα表达均有所上升(P<0.05);与Ⅰ期患者相比，Ⅱ期患者体内α1-抗胰蛋白酶、CXCL12、IL-15Rα表达升高(P<0.05);与Ⅱ期患者相比，Ⅲ期患者体内α1-抗胰蛋白酶、CXCL12、IL-15Rα表达升高(P<0.05);与Ⅲ期患者相比，Ⅳ期患者体内α1-抗胰蛋白酶、CXCL12、IL-15Rα表达升高(P<0.05)。结论 α1-抗胰蛋白酶、CXCL12、IL-15Rα与艾滋病病毒感染病症有着密切的关联，且与艾滋病病毒感...     

降钙素原在肾移植术后并发细菌感染中的临床应用

目的 :探讨降钙素原 (PCT)在肾移植术后并发细菌感染诊断中的临床意义。方法 :采用免疫层析法检测肾移植患者血清中的PCT浓度。结果 :肾移植术后并发细菌感染时患者血清中PCT浓度增高 ,发生急性排斥反应时不增高 ,二者之间的差异有显著性意义 (P <0 .0 1) ;发生急性排斥反应患者与无并发症患者血清PCT浓度之间的差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;随着感染的控制 ,PCT浓度逐渐下降至正常水平 ,若感染不能控制 ,PCT浓度将继续维持在可检测水平。结论 :PCT的检测可为肾移植术后并发细菌感染的诊断 ,及其和急性排斥反应的鉴别诊断提供有效的实验室依据。     

食管鳞癌组织中HIF-1α及Fascin蛋白的表达

目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及细胞骨架蛋白(Fascin蛋白)在食管鳞癌组织中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化SP法检测80例食管鳞癌及癌旁组织中HIF-1α及Fascin蛋白的表达,分析其与食管鳞癌病理特征的关系。结果:食管鳞癌组织中HIF-1α及Fascin蛋白的总阳性表达率均明显高于癌旁组织(P0.05),在食管鳞癌组织中HIF-1α的表达与Fascin蛋白的表达呈正相关(r=0.252,P=0.024);HIF-1α及Fascin蛋白在食管鳞癌组织中的表达与癌组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(P0.05),但均与年龄、性别等因素无关(P0.05)。结论:高表达HIF-1α及Fascin蛋白在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用,且高表达的HIF-1α蛋白与Fascin蛋白存在相关性。     

肺癌患者血清α1—抗胰蛋白酶检测的临床意义

α_1-抗胰蛋白酶(α_1-antitrypsin,简称AAT或α_1-AT)是一种急性期反应蛋白。在机体发生炎症、肿瘤及损伤时,血清AAT浓度可增高。本文通过测定肺癌和良性肺部疾病患者的血清AAT浓度,并观察肺癌患者化疗前、后血清AAT浓度的变化及其与化疗效果之间的关系,以初步探讨血清AAT测定对肺癌诊断及预计化疗效果的意义。     

子痫前期产妇胎盘床HIF-1α蛋白的表达与母体外周血vWF浓度的变化

目的:研究子痫前期产妇胎盘床低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α, HIF-1α)蛋白的表达与母体外周血血管性假血友病性因子(von Willbrand Factor, vWF)浓度的变化,并探讨它们在子痫前期发病机制中的作用.方法:选取正常妊娠产妇、子痫前期轻度及子痫前期重度产妇各20例,采用Western印迹方法检测胎盘床HIF-1α蛋白的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测母体外周血vWF的浓度;Spearman相关分析比较两者的相关性.结果:HIF-1α蛋白在子痫前期重度组胎盘床中的表达最高,其次是子痫前期轻度组,对照组最低,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.001).vWF浓度在子痫前期重度组母体外周血中最高,其次是子痫前期轻度组,对照组最低,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).胎盘床HIF-1α蛋白的表达与母体外周血vWF浓度呈正相关(r_1=0.65,P＜0.001);母体外周血vWF浓度与子痫前期的病情程度呈正相关(r_2=0.61,P＜0.001).结论:HIF-1α和vWF可能在子痫前期的发生和发展中起协同作用.     

角膜穿孔伤对环丙沙星在兔眼内渗透性的影响

目的 研究角膜穿孔伤兔眼血-眼屏障的改变以及静脉注射环丙沙星后药物在眼内的渗透性。方法 15兔各右眼为实验组，左眼为对照组。右眼行角膜穿孔伤后1 h静脉注射环丙沙星，用药后0.5 h，取房水及玻璃体，用反向高效液相色谱法测定环丙沙星浓度，用双缩脲法测定房水蛋白含量。结果 实验组房水蛋白含量（12.641 ±6.786）g/L高于对照组的（2.739±1.111）g/L（P﹤0.01）；实验组房水环丙沙星浓度（1.365±0.588）ug /ml高于对照组的（0.669±0.329）ug/ml（P﹤0.01）；房水蛋白的含量与房水环丙沙星的浓度呈正相关，相关系数r=0.677（P﹤0.01）。实验组和对照组玻璃体中环丙沙星浓度均很低，两组之间的差异无显著性（P﹥0.05）。结论 角膜穿孔伤可以影响血-房水屏障，使其通透性明显增加；房水中环丙沙星的水平也明显提高，其浓度显著高于大部分眼内致病菌90%菌株最小抑菌浓度(MIC90s)，为环丙沙星作为角膜穿孔伤和白内障手术后性眼内炎静脉预防性用药提供实验依据。     

α1-抗胰蛋白酶和蛋白溶解酶-9与AL型肾脏淀粉样变性病的相关性分析

目的研究肾脏淀粉样变性病患者α1-抗胰蛋白酶和蛋白溶解酶-9的表达特点,探讨其在本病进展中的作用。方法 2006年1月至2014年1月于黄石市中心医院肾内科治疗或诊断的AL型肾脏淀粉样变性病患者共60例(其中蛋白尿期42、肾病综合征期16例、尿毒症期2例),比较蛋白尿期与肾病综合征期患者血清肾功能,同时对两组肾脏切片做免疫组化观察,最后ELISA与Western blot法测定两组肾脏提取液中α1-抗胰蛋白酶与蛋白溶解酶-9表达,RT-PCR法测定mRNA表达。结果肾病综合征期患者血清血尿素氮、血肌酐、血尿素以及血尿酸明显高于蛋白尿期患者(P<0.05);肾脏切片免疫组化示,α1-抗胰蛋白酶与蛋白溶解酶-9 2个指标肾病综合征期患者明显少于蛋白尿期患者(P<0.05);ELISA以及Western blot显示α1-抗胰蛋白酶与蛋白溶解酶-9表达肾病综合征期患者均明显低于蛋白尿期患者(P<0.05),RT-PCR结果显示,α1-抗胰蛋白酶与蛋白溶解酶-9 mRNA表达肾病综合征期患者明显低于蛋白尿期患者(P<0.05)。结论α1-抗胰蛋白酶和蛋白溶解酶-9与AL型肾脏淀粉样变性病的发生与发展密切相关,今后或可作为一个治疗靶点。     

年龄相关性白内障患者血清及房水中PDGF、MMP-9表达水平及意义

目的:探究年龄相关性白内障(ARC)患者血清及房水中血小板源性生长因子(PDGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平及意义。方法:选取138例ARC患者为研究对象，根据年龄不同分为60～69岁组(n=39)、70～79岁组(n=67)及≥80岁组(n=32)。采用ELISA检测患者房水及血清中PDGF、MMP-9水平；Spearman检验分析血清及房水中PDGF、MMP-9水平与年龄的相关性。根据术后6个月并发症发生情况将患者分为预后不良组(n=31)、预后较好组(n=107),采用ROC曲线分析血清及房水中PDGF、MMP-9水平联合检测对患者预后的评估价值。结果:血清及房水中MMP-9水平与年龄呈正相关(P<0.05);血清及房水中PDGF、MMP-9水平联合检测评估ARC患者预后的AUC值大于各指标单独检测(P<0.05);血清PDGF≥25.64 ng/L、房水PDGF≥35.00 ng/L、血清MMP-9≥177.38μg/L、房水MMP-9≥133.08μg/L是影响ARC患者出现不良预后的危险因素(P<0.05)。结论:ARC患者血清及房水中MM...     

血清α1-酸性糖蛋白测定在临床中的诊断价值

目的 探讨血清α-酸性糖蛋白(α1-AG)在临床疾病中的应用价值.方法 用德国BN-2全自动特定蛋白分析仪采用速率散射比浊法对106例患者(急性上呼吸道感染26例、肝炎23例、脑梗塞20例、手足口病20例、肺癌17例)和58例健康体检者进行血清α1一酸性糖蛋白(α1-AG)检测.结果 急性上呼吸道感染患者、脑梗塞患者、肺癌患者的α1-AG浓度明显高于正常对照(P＜0.01),其中以急性上呼吸道感染患者α1-AG浓度的升高尤为显著,手足口病患者的α1-AG浓度与正常对照无显著差异(P＞0.05),肝炎患者的α1-AG浓度明显低于正常对照(P＜0.01).结论 检测血清α1-酸性糖蛋白对各类临床疾病的诊断和预后判断有较大的价值.     

HIF-1α与VEGF在乳腺癌组织中的表达及与放疗敏感性的相关性研究

目的探讨缺血诱导因子-1α(HIF-1α)与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在原发性乳腺癌组织中的表达及与放疗疗效的关系。方法采用SABC免疫组化方法,检测乳腺癌组织(88例)和正常乳腺组织(20例)中HIF-1α与VEGF蛋白的表达。并分析HIF-1α或VEGF蛋白表达与原发性乳腺癌组织临床病理学特征和预后的关系。结果 HIF-1α与VEGF蛋白在原发性乳腺癌组织中的阳性表达率分别为69.32%(61/88)、78.40%(69/88),两者存在显著正相关性(r=0.68,P=0.006)。二者均与癌组织的临床病理学特征有关;27例HIF-1α阴性表达患者的生存时间明显长于61例阳性表达患者(P=0.008);19例阴性VEGF患者的生存时间明显长于69例阳性VEGF患者(P=0.006)。HIF-1α阳性表达患者中,VEGF表达强度及放疗后局部未控率均高于HIF-1α阴性组(P=0.01);其中16例VEGF阴性表达患者的生存时间明显长于42例VEGF阳性表达患者的生存时间(P=0.01)。结论 HIF-1α与VEGF蛋白表达可能与原发性乳腺癌的发生、浸润、转移有关,二者高表达与乳腺癌放射抗拒性有密切关系。