HPLC法测定火麻仁油中大麻二酚的含量

目的　建立HPLC法测定火麻仁油中大麻二酚含量的方法。方法　固定相为Irregular H C18柱 (2 5 0mm×4 6mm ,10 μm) ,流动相为甲醇 乙腈 水 冰醋酸 (2 5∶5 0∶2 5∶0 4 ) ,流速为 0 8mL/min ,检测波长为 2 2 0nm ,柱温为室温。结果　大麻二酚在 1 2～ 9 6 μg/mL呈良好的线性关系 (r =0 9994 ) ,平均回收率为 94 6 % ,RSD =1 9%(n =9)。结论　本方法简便、准确、重现性好。     

大麻中非成瘾性成分大麻二酚及其类似物的研究概况

大麻作为一种古老的栽培植物,很早就有相关的记载.药理研究表明,大麻中的主要活性成分是大麻素类化合物(cannabinoids),目前已知天然大麻素有70种,其中四氢大麻酚(THC)、大麻二酚(CBD)是大麻中的主要化学成分.虽然THC被认为是其最重要的活性成分,具有神经活性,可用于治疗癌症引起的呕吐,但THC具有致幻作用,这也成为许多国家禁种大麻的唯一原因.与THC不同的是,CBD是大麻中的非成瘾性成分,能阻碍THC对人体神经系统影响,并具有抗痉挛、抗风湿性关节炎、抗焦虑等药理活性.近年来,人们对大麻二酚类化合物以及其与大麻受体CB1和CB2相互作用的研究成为新的研究热点,为此,就CBD及其类似物的研究概况进行综述.     

大麻二酚上调BDNF、突触蛋白发挥抗抑郁作用

目的 研究大麻二酚(CBD)对抑郁样小鼠的快速抗抑郁作用及可能的作用机制。方法 采用慢性束缚建立小鼠抑郁模型。将供试小鼠分为5组：正常对照组、模型组、阳性对照组、CBD低剂量组(25 mg/kg)、CBD高剂量组(50 mg/kg)。在行为学实验前1 h对每组小鼠灌胃给药。行为学实验结束后,收集海马和前额皮层样本,采用ELISA测定脑源神经营养因子(BDNF)、突触后密度-95蛋白(PSD-95)、突触素(SYP)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)。结果 与模型组相比,CBD低剂量组旷场实验中央区域活动路程百分比、中央区域活动时间百分比和总路程均增加。与模型组相比,CBD低剂量组强迫游泳实验不动时间百分比降低。ELISA检测结果显示,CBD能快速上调前额皮层中BDNF、PSD-95浓度,快速上调海马和前额皮层中SYP、mTOR浓度。结论 CBD能快速改善抑郁样小鼠的行为学表现,快速上调海马或前额皮层中的BDNF、突触蛋白水平。     

大麻二酚在医学上的应用前景

大麻中具有药用价值的主要成分是Δ9-四氢大麻酚（Δ9-THC）和大麻二酚（CBD），其中CBD因不能直接激活大麻素1型受体（CB1R）和大麻素2型受体（CB2R）而不具有精神活性和药物依赖性，安全性相对高。CBD作为主要的大麻素提取物，证实具有镇痛、镇静、抗炎、抗惊厥、改善睡眠、抗焦虑、抗精神病、抗风湿、保护皮肤屏障、抗细胞凋亡和神经保护等作用。本综述旨在总结CBD在临床疾病治疗中的应用现状，为今后CBD相关药物在治疗癫痫、神经病理性疼痛、焦虑症和抑郁症、肿瘤、皮肤、代谢相关疾病的应用提供新思路。     

大麻制剂治疗多发性硬化症患者中枢性疼痛的随机对照试验

背景:多发性硬化症(M S)患者的中枢性疼痛比较常见并难以治疗。方法:设计一项为期5周(第1周为入组,后4周为治疗时间)的单中心、随机、双盲、安慰剂对照的平行组试验,66例伴中枢性疼痛的M S患者(59例患者为感觉障碍,7例患者为痛性痉挛)纳入研究。对患者使用制成口腔黏膜喷剂的纯生物提取大麻制剂(CBM)治疗,其主要成分为δ-9-四氢大麻酚∶大麻二酚(TH C∶CBD),可作为辅助性的止痛剂治疗。喷剂每次用量中含有2.7m g TH C和2.5m g CBD,患者可以根据自己的情况逐渐加大剂量至48次/24h。结果:共64例(97%)患者完成试验,其中34例患者应用CB…     

大麻二酚对博来霉素诱导肺纤维化大鼠的药效学研究

目的：研究大麻二酚（CBD）对肺纤维化大鼠的保护作用，并探讨其可能的机制，为CBD治疗肺纤维化提供理论依据。方法：将60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、泼尼松组、CBD低、中、高剂量组（12、36、108 mg/kg,ig），每组10只，除正常对照组外，其余5组均使用气管注射博来霉素的方法构建肺纤维化大鼠模型，造模后开始每天1次灌胃给药，连续灌胃28 d，采集样本。检测肺水肿程度；HE、Masson染色法观察肺组织病理改变；ELISA法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)，白细胞介素-1β(IL-1β)，白细胞介素-6(IL-6)含量及肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、羟脯氨酸（HYP）含量，免疫组化法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的浓度，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测TGF-β1,α-SMA,Nrf2和核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的mRNA表达水平。结果：CBD给药组肺脏器系数和W/D值显著降低（P<0.05）；中、高剂量的CBD能减少胶原纤维数量和成纤维细胞；CBD低、中、高剂量组肺纤维...     

大麻二酚对衰老小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化影响的体外细胞实验

背景 衰老状态的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化能力降低,影响正常骨代谢.细胞自噬在衰老过程及成骨代谢中发挥重要作用,大麻二酚(cannabidiol,CBD)能促进自噬,但CBD能否通过调节自噬进而促进衰老BMSCs成骨分化仍不清楚.目的 探...     

不同产地大麻的ITS全序列分析

目的:对分别采自云南、新疆两个地区的大麻植物,通过ITS序列的分析,从分子水平进行鉴定。方法:采用DNA提取试剂盒提取大麻的ITS全序列DNA,经过PCR扩增,胶回收后测序,所得序列与从Genbank中获取3个大麻科植物的ITS全序列比对,以葎草的ITS全序列为外源基因构建了大麻属的系统发育树。结果:对获得的基因序列进行同源性分析,NCBI数据库中登陆的大麻相应序列与新疆大麻(毒品大麻)的ITS全序列亲缘关系性最近,为99%;云南大麻(工业大麻)与新疆大麻(毒品大麻)亲缘关系较远。结论:ITS序列能够较准确的将毒品大麻和工业大麻区分开。     

大麻二酚对创伤性脑损伤大鼠脑皮质Occludin、ZO-1表达水平及血脑屏障通透性的影响

目的 观察创伤性脑损伤(TBI)大鼠血脑屏障(BBB)中紧密连接蛋白闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)的表达及变化趋势,探讨大麻二酚(CBD)对BBB的干预作用。方法 采用改良Feeney自由落体法制备大鼠TBI模型,将大鼠随机分为3组：假手术组(Sham组)、模型组(TBI+vehicle组)和CBD干预组(TBI+CBD组),每组24只;每个组又分为损伤后8 h、1、2、3、5和7 d共6个时间点,通过免疫组化和免疫荧光染色,Western blot检测与BBB通透性密切相关的Occludin和ZO-1在不同时间点的表达情况;通过荧光素钠实验检测BBB通透性。结果 免疫组化实验结果表明,与假手术组相比,TBI后随着时间推移Occludin和ZO-1蛋白阳性表达减少（P<0.05）,2d达到最低;CBD干预1d后Occludin和ZO-1蛋白表达水平均上调（P<0.05）;免疫荧光染色实验与Westernblot结果趋势近似,与假手术组相比,TBI后Occludin和ZO-1荧光表达强度及蛋白表达量减少（P<0.05）,CBD干预2d后Occl...     

不同生理状态下银荷方药物制备物黄酮类成分的质量表征特性研究

目的建立银荷方药物制备物及大鼠血浆中槲皮素、山奈酚、异鼠李素的含量测定方法,以研究银荷方药物制备物黄酮类成分的质量表征特性。方法制备物和血浆样品均加酸进行水解,并用乙醚-丙酮(14∶1)萃取法处理血浆样品,采用HPLC分析,以C_(18)为固定相,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱,在270 nm检测黄酮类苷元槲皮素、山奈酚、异鼠李素的含量。结果经方法学考证,槲皮素、山奈酚、异鼠李素的线性范围分别为1.49~29.70 mg/L(r=0.999 3),0.65~12.90mg/L(r=0.999 5),0.47~9.40 mg/L(r=0.999 0),日内、日间精密度RSD≤5.85%,血浆样品冻融稳定性良好,室温放置10 h,在-80℃条件下保存1个月的稳定性均良好,符合生物样品分析要求。槲皮素、山奈酚、异鼠李素在正常组中的血药浓度分别为7.25、1.71、3.73 mg/L,在血栓组中血药浓度分别为8.53、2.64、5.69 mg/L,在抗凝组中血药浓度分别为8.32、2.76、4.56 mg/L。结论本文所建立的检测方法适用于银荷方药物制备物黄酮类成分槲皮素、山奈酚和异鼠李素的体内含量测定,并可应用于分析黄酮类成分质量表征特性,为基于黄酮类成分的银荷方药物质量精准控制提供科学依据。     

大麻二酚通过促进自噬流减轻棕榈酸诱导的肝细胞损伤

目的 观察大麻二酚(CBD)对棕榈酸(PA)诱导的肝细胞损伤的保护作用,并考察其与自噬流相关的潜在机制.方法 原代培养大鼠肝细胞,分别给予1 μmol/L和5μmol/L的CBD处理24 h,采用蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和p62的表达,考察CBD对细胞自噬的影响.将细胞分为4组并分别给予不同处理:PA组(800μmol/L PA处理细胞)、PA+CBD组(800 μmol/L PA和5μmol/L CBD联合作用)、PA+CBD+CQ组[800 μmol/L PA、5μmol/L CBD和50 nmol/L自噬抑制剂氯喹(CQ)共同作用]和阴性对照组(加入等体积0.03％ DMSO处理细胞),每组作用时间均为24 h;采用蛋白质印迹法检测LC3和p62的蛋白表达,流式细胞术考察细胞凋亡情况,qPCR法检测内质网应激相关因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和X盒结合蛋白1(XBP-1) mRNA的表达,Rh123和lucigenin荧光探针分别检测线粒体的膜电位和活性氧簇(ROS)含量.结果 1μmol/L和5μmol/L CBD均不影响肝细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值以及p62蛋白的表达.与阴性对照组相比,PA组肝细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值和p62蛋白表达增加(P＜0.05),细胞凋亡增加(P＜0.05),CHOP、GRP78、XBP-1 mRNA表达增加(P＜0.05),线粒体膜电位降低(P＜0.05),线粒体ROS的生成增加(P＜0.05);与PA组相比,PA+CBD组肝细胞内的自噬流恢复,细胞凋亡减少,内质网应激和线粒体失常减轻(P＜0.05);同时给予CQ处理可以逆转CBD的保护作用(P＜0.05).结论 CBD能够通过促进自噬流减轻PA诱导的肝细胞损伤,改善内质网应激和线粒体功能.     

HPLC法测定十三味逐瘀合剂中游离大黄酚含量

目的 建立十三味逐瘀合剂中大黄酚高效液相含量测定的方法。方法 采用高效液相色谱法(HPLC法)对十三味逐瘀合剂中游离大黄酚含量进行测定,从提取溶剂、取样量、提取时间等影响因素中选出最优条件,建立完整的含量测定方法。结果 用thermos C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);以甲醇-0.1%磷酸(75∶25,V/V)为流动相,采用等度洗脱法,254 nm波长的色谱条件;以甲醇为浸膏提取溶剂,超声30 min的提取方法;大黄酚质量浓度在1.63～16.32μg/mL(R²=0.9995)范围内具有良好的线性关系;平均回收率为104.17%;测得十三味逐瘀合剂中游离大黄酚平均含量为15.32μg/mL。结论 本实验所建立的方法操作简单,专属性强,重现性好,可用于十三味逐瘀合剂中游离大黄酚的含量测定。     

大麻环萜酚的抗炎作用

在大麻类药物中,四氢大麻酚(△~9- THC)的抗炎作用最强,大麻二醇(CBD),大麻醇(CBN)和天然大麻提取物依次减弱。用角叉莱胶诱导大鼠爪肿胀的方法比较了大麻醇、保泰松及辅形剂的作用。每组8只Sprague-Dawley种系大鼠雄性和雌性各四只腹腔注射。腹腔试验时性别差异对结果无影响,在以后的口服试验中,仅选用雄性大鼠。全部试验与对照的动物于实验前一小时腹腔注射乙基尿烷750毫克/公斤,使动物处于安定状态。尿烷注射无论对保泰松还是对照组反应均无影响。30分钟后将左右爪浸于     

英GW公司大麻药品临床试验新进展

2002年10月,英国 GW Pharmaceutical公司宣称,根据新的Ⅱ期临床试验结果,其大麻制品可以缓解多发硬化症、脊髓损伤等患者的难治性疼痛,还可以改善他们的睡眠问题。34名受试者中28人感觉大麻制品能缓解或明显缓解他们的疼痛,从而决定参加另一项长期试验。另25名患者仍然进行该Ⅱ期临床试验,其中一些人已接受治疗2年以上了。在Ⅱ期临床试验中,该公司试验了3种非吸食性大麻制品:富含四氢大麻酚的制剂(THC),富含大麻二酚的制剂(CBD)和等     

不同产地白英中澳洲茄胺的含量测定

目的:建立HPLC测定白英中澳洲茄胺含量的方法。方法:采用Agilent Zorabax-SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长为210 nm。结果:澳洲茄胺含量在0.4μg～1.8μg范围内有良好的线性关系,计算得回归方程Y=4791.6X-230(r2=0.999 3),平均加样回收率为101.4%(RSD=2.2%)。13个不同产地的白英药材中,澳洲茄胺的含量在2.0 mg/g～2.4 mg/g之间。结论:所建立的HPLC法精密度、稳定性和重复性均良好,可用于白英中澳洲茄胺的含量测定。     

HPLC法测定桂附地黄胶囊中丹皮酚的含量研究

目的:建立新的桂附地黄胶囊中丹皮酚含量测定方法.方法:采用HPLC法采测定桂附地黄胶囊中丹皮酚成分,流动相为甲醇—水(70:30),Lichropher5 - C18(150×4.6mm,5um)色谱柱,流速1.0ml/min,柱温为室温,检测波长为274nm下进行检测.结果:HPLC法中丹皮酚在0.2664 - 1.8648μg范围内呈良好的线性关系(r=1.0000,n=7),回收率为99.27％,RSD =0.89％.结论:采用HPLC法测定桂附地黄胶囊中丹皮酚的含量简单、快捷、稳定.     

UPLC法测定罗汉果不同部位中罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的含量

目的建立测定罗汉果不同部位(果皮、果瓢和种子)罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷含量的方法,并比较其不同部位之间的含量差异。方法采用超高效液相色谱法(UPLC)测罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的含量。色谱柱为Waters Acquity UPLCBEHC18(100mm×2.1mm,1.7 m);流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速:0.3 m L/min;检测波长:264 nm;柱温:35℃;进样量:5L。结果罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的线性范围分别为10.50～84.00和7.05～56.40 g/mL(均r≥0.999 9),检测限分别为0.021 0、0.014 1 g/mL,定量限分别为0.084 0、0.056 4 g/mL,平均加样回收率分别为99.7%、99.9%,精密度、稳定性、重复性试验均RSD≤1.36%。不同部位的罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷含量的高低整体趋势为果皮果瓢种子;果皮中罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的平均含量分别为0.472mg/g和0.095 mg/g,果瓢中罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的平均含量分别为0.218 mg/g和0.028 mg/g,种子中罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷均未检测。结论建立的方法操作简单,准确可靠,重复性好,适合于罗汉果不同部位罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷含量的测定。罗汉果不同部位罗汉果黄素和山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷含量有差异。     

金线莲中阿魏酸和肉桂酸的提取及HPLC测定

目的探讨金线莲中阿魏酸和肉桂酸提取的较佳方法。方法采用索氏回流提取法和超声-微波协同萃取法提取金线莲中的阿魏酸和肉桂酸,并建立高效液相色谱(HPLC)法测定其含量。结果阿魏酸在4.0～110.0μg/mL(r=0.9985),肉桂酸在2.5～50.0μg/mL(r=0.9995)范围内与峰面积呈良好线性关系;索氏提取中阿魏酸和肉桂酸的含量分别为0.189 mg/g和0.091 mg/g,超声-微波协同萃取中阿魏酸和肉桂酸的含量分别为0.543 mg/g和0.104 mg/g。结论建立的HPLC法测定结果准确,重现性好;超声-微波协同萃取法提取金线莲中阿魏酸和肉桂酸快速简便,提取效率高。     

女性和男性吸食大麻对体外受精及配子输卵管内移植结局影响的一项前瞻性研究

目的:本研究调查吸食大麻是否影响体外受精及配子输卵管内移植(IV F/G IFT)。研究设计:纳入221对IV F/G IFT夫妇的前瞻性研究。结果:终生大量吸食大麻对IVF/GIFT有负面影响。终身吸食大麻>90次的女性取卵减少27%(P=0.03),胚胎移植减少1次(P<0.05)。吸食大麻>10次的妇女,其17%的胎儿为小于胎龄儿(P=0.01)。如果男性吸食大麻11～90次,婴儿出生体重下降15%(P=0.03),如果吸食大麻>90次,则下降23%(P=0.01)。时间选择也起作用。在IV F/G IFT前1年吸食大麻的妇女取卵数减少25%(P=0.03),受精卵减少28%(P=0.04)。在过去的15年吸食大麻…     

内源性大麻素系统与神经胶质瘤细胞增殖与凋亡的关系分析

目的:探讨细胞实验分析内源性大麻素系统与神经胶质瘤细胞增殖与调亡的关系。方法:选择鼠C6细胞和鼠U251细胞及进行培养,采用MTT法测定大麻素四氢大麻酚(THC)对C6细胞增殖的影响,采用DNA梯度电泳法检测C6细胞凋亡,采用Western Blotting法检测CB1、CB2、重组人半胱天冬酶-3(caspase-3)和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)蛋白的表达。结果:大麻素受体CB1和CB2在C6细胞和U251细胞都有表达,对比差异无统计学意义(P>0.05)。不同浓度THC(0、1、10μmol/L)的细胞生长抑制率分别为0%、6.3%、29.3%,细胞凋亡率为5.2%、7.3%和12.7%,三组间的抑制与凋亡率对比差异有统计学意义(P<0.05)。THC不同浓度组(1、10μmol/L)C6细胞中Cleaved capase-3、PPAR蛋白表达均明显升高,与空白对照组(0μmol/L)比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:内源性大麻素系统在体外能抑制鼠C6细胞的增殖和促进其凋亡,其作用的发挥与caspase-3和PPAR表达有关。