T-CAM表面修饰n-HA/PA66复合骨修复材料修复兔桡骨骨缺损的实验研究

目的 探讨T-CAM表面修饰纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(nano-hydroxyapatite/polyamide 66,n-HA/PA66)复合骨修复材料修复兔桡骨中段骨缺损的疗效.方法 选择36只成年新西兰大白兔,建立右桡骨中段1.5 cm骨缺损模型后分为两组:实验组植入T-CAM表面修饰n-HA/PA66复合骨修复材料;对照组植入n-HA/PA66.观察术前,术后2、4、8、12周静脉血碱性磷酸酶(ALP)值;术后4、8、12周每个时间点处死6只兔子,进行X线片、大体标本观察、组织学等观察桡骨骨缺损愈合情况.结果 所有兔子术后切口均一期愈合,无死亡,无体内植入材料脱落.影像学及组织学结果表明实验组在术后4周就有新生骨组织,随着时间的延长,实验组新骨生长速度和数量明显优于对照组,术后12周Lane-Sandhu法X线片和组织学评分实验组均高于对照组(P＜0.05);术后2周实验组ALP值开始升高,随着时间的推移,两组ALP值均升高,术后8周达最高峰,之后开始下降,在12周时接近于术前,静脉血ALP值在术后第2、4、8周与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 T-CAM表面修饰mHA/PA66复合骨修复材料具有促进骨质愈合的作用,尤其在早期修复骨缺损的效果优于n-HA/PA66.     

MSCs和PRP碳纳米管复合修复兔桡骨骨缺损的研究

目的研究骨髓基质干细胞（MSCs）和富含血小板血浆（PRP）的碳纳米管复合修复骨缺损的能力。方法将54只兔制备成双侧桡骨15mm骨缺损模型,根据植入的材料不同分为3组。实验组植入MSCs／PRP／碳纳米管支架,对照组植入PRP／碳纳米管支架,空白组不植入任何材料。术后4、8及12周各组分别处死6只兔,通过大体观察、扫描电镜检查、组织学观察评价修复大块骨缺损的效果。结果实验组新生骨组织占缺损面积的百分比明显高于对照组和空白组,差异有统计学意义（F=3．56,P〈0．05）;且随着时间的增加各组新生骨组织占缺损面积的百分比显著增加（F=77．67,P〈0．05）。结论与PRP／碳纳米管相比,MSCs／PRP／碳纳米管修复骨缺损能力更强,成骨更迅速。     

纳米羟基磷灰石/聚酰胺66椎间融合器对山羊颈椎的融合效果研究

目的研究纳米羟基磷灰石／聚酰胺66（n-HA／PA66）复合生物活性椎间融合器对山羊颈椎的融合效果和可行性。方法取30只成年雌性山羊，按随机数字表分为2组：n-HA／PA66复合生物活性椎间融合器组和自体髂骨组。所有山羊行颈3、4椎间盘及部分椎体切除术，分别植入n-HA／PA66复合生物活性椎间融合器和自体髂骨块，术后4、12、24周行CT检查；术后12、24周行组织学和生物力学评估。结果24周时n-HA／PA66椎间融合器与自体髂骨在山羊颈3、4椎间均可形成骨性融合，组织学、影像学及生物力学等各项测试指标比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论n-HA／PA66椎间融合器具有良好的骨传导性和生物力学特性，达到了良好的融合效果，是一种理想的椎间融合材料。     

羟基磷灰石／脱矿骨复合物增高牙槽嵴的实验研究

「目的」观察羟基磷灰石（ＨＡ）／脱矿骨复合物骨膜下植入增高牙槽嵴的成骨反应。「方法」在犬下颌体部及下颌磨牙无牙颌牙槽骨顶部,骨膜下植入羟基磷灰石／脱矿骨复合物为实验组,并设单独羟基磷灰石植入为对照组。经３周、６周、１２周和２４周后处死动物,取材作大体观察、组织学观察和扫描电镜观察。「结果」实验组术后３周即见类骨质产生,材料和基骨界面开始结合;术后６周材料和基骨大部分结合;１２￣２４周新骨增多,相互     

网孔型纳米羟基磷灰石/聚酰胺66复合生物活性材料治疗早期股骨头缺血坏死的实验研究

目的观察网孔型纳米羟基磷灰石/聚酰胺66（n-HA/PA66）支撑棒及其复合血管内皮细胞生长因子（VEGF）后治疗兔股骨头早期缺血性坏死的实验效果。方法将n-HA/PA66支撑棒及VEGF缓释微球植入兔早期股骨头缺血坏死模型,术后3、6、12周行影像学及组织切片观察。结果植入n-HA/PA66支撑棒的实验兔未发现股骨头塌陷的影像学征象且骨质修复良好,其组织学检查显示新生骨长入n-HA/PA66,VEGF的持续缓释能促进骨长入及血管重建。结论网孔型n-HA/PA66支撑棒能有效预防早期股骨头缺血坏死的股骨头塌陷,VEGF缓释微球能加快骨修复过程。     

辛伐他汀与Bio-Oss骨粉复合物修复种植体周骨缺损的实验研究

目的探讨辛伐他汀（simvastatin,Simv）与Bio-Oss骨粉复合物对兔胫骨种植体周骨缺损修复的效果。方法选择12只健康日本大耳白兔,分别在双侧胫骨体部上1/3处各植入1枚种植体,并在种植体一侧建立骨缺损区。随机分为实验组（A组）和对照组（B组）,每组6只。实验组植入辛伐他汀与Bio-Oss骨粉复合物;对照组仅植入Bio-Oss骨粉,分别于术后4、8周各处死动物6只,行大体观察和骨密度分析。结果大体观察：4周时,A、B两组标本表面有少许骨痂生成;8周时,A组较B组可见明显的新骨生成。骨密度扫描：4周时,两组间差异无统计学意义;8周时,两组间差异有统计学意义,实验组单位面积的骨矿盐含量高于对照组。结论辛伐他汀与Bio-Oss骨粉复合物较Bio-Oss骨粉单独应用可以更好地促进兔胫骨种植体周围缺损区骨质的形成。     

骨形态发生蛋白-2复合纤维蛋白缓释胶修复骨缺损的实验研究

［摘要］目的　探讨纤维蛋白胶作为骨形态发生蛋白-2（BMP-2）的缓释载体修复骨缺损,促进早期成骨的作用,为临床应用提供实验依据．方法　实验制备纤维蛋白胶/ BMP-2复合物,BMP-2在复合物中的浓度为1 μg/mL．将36只健康成年家兔随机分成3组,均造成双侧桡骨外侧中1/3段长8 mm,宽2 mm,深1 mm的骨缺损．实验组:植入纤维蛋白胶与BMP-2的复合物对骨缺损进行修复;对照组:在骨缺损区单独植入纤维蛋白胶进行修复;空白组:骨缺损区不植入任何材料,骨缺损自然愈合．于术后 2周、4周、8周分期处死动物,每个时间点每组取样本4只,采用X线检查、组织学观察、骨钙素（OC）免疫组化检测骨缺损部位成骨情况．结果　X线检查显示,实验组术后4周,骨痂形成的量较对照组和空白组明显增多．Masson染色显示,实验组术后2周有少量骨基质沉积．对照组骨小梁稀疏．空白组骨缺损区由纤维组织充填,未见新骨形成．术后4周,实验组骨缺损区有较多的新骨形成,骨小梁排列规则,连成网格状．对照组骨小梁仍较稀疏．空白组仅见少量稀疏的骨小梁,小梁间有较多纤维组织充填．骨钙素（OC）免疫组化结果显示:术后第2周,实验组、对照组和空白组OC表达分别达到高峰,其中实验组表达量大于对照组和空白组（P＜0.01）．术后第4周,实验组、对照组和空白组OC表达均明显下降（P＜0.01）,但实验组表达量大于对照组和空白组（P＜0.01）．术后8周3组的OC表达无明显差异（P＞0.05）．结论　纤维蛋白胶/BMP-2复合物具有缓慢释放BMP-2的作用,能够持续促进骨缺损区骨组织的再生和钙化,加速骨缺损的愈合,为临床提供一种有效促进骨愈合的方法．     

纳米羟基磷灰石复合物修复骨缺损实验研究的影像学评价

目的:通过磁共振成像(Magnetic resonance imaging,MRI)与X线方法检测纳米羟基磷灰石/聚酰胺(n-HA/PA66)复合材料应用于修复骨缺损实验研究,综合评价其成骨能力,为骨缺损修复后全面、准确的影像学评价提供理论依据.方法:30只新西兰大白兔行一侧胫骨髁钻孔,并植入n-HA/PA66复合材料.术后2、4、6、8、12周各时相点摄DR片、MRI及动态增强MRI检查,并取材进行组织学观察.结果:(1)MRI显示n-HA/PA66复合材料与骨组织易于区分,术后第4周开始从材料内部逐步强化,周围软组织水肿逐步吸收,术后12周修复区强化明显,周围水肿基本吸收.(2)X线显示术后第8周开始,缺损填修复区内的骨质增生开始,术后12周缺损区呈高密度骨质修复表现.(3)组织学显示术后4～12周,n-HA/PA66复合材料被界膜分隔成小岛,界膜内可见大量间充质细胞、成纤维细胞及小血管,后形成破骨及成骨细胞,修复区内骨小梁逐步形成.结论:MRI联合X线能够清楚显示n-HA/PA66复合材料修复过程,对早期骨移植的成功有很好预测作用,并兼顾术区周围关节及软组织的恢复显示,具有临床可操作性.     

新型纳米生物活性接骨螺钉固定犬股骨髁间骨折

目的评估纳米羟基磷灰石(nano-hydroxyapatite,n-HA)/聚酰胺66(PA66)/玻璃纤维(glass fiber,GF)新型生物活性螺钉固定犬髁间骨折的效果。方法制备n-HA/PA66/GF生物活性螺钉。取24只成年中华田园犬,按随机数字表法分为2组:生物螺钉实验组和金属螺钉对照组。使用电锯将动物股骨外侧髁锯断造股骨髁间骨折,分别使用生物螺钉及金属螺钉固定骨折。术后4、8、12、24周行大体观察、组织学、CT片、生物力学及血常规、生化检测,术后24周行肝、肾、脾组织学检测。结果 2种螺钉均能有效固定犬髁间骨折。术后2组动物均活动正常,切口愈合良好。术后12周CT显示2组动物髁间骨折均已骨性愈合。组织学检测发现n-HA/PA66/GF螺钉表面被新生骨覆盖,新生骨不断钙化、成熟,骨-钉界面结合紧密。金属螺钉与骨之间存在较大间隙,螺钉周围骨组织被1层纤维组织包裹。生物力学测试证实2组最大推出载荷在术后4、8、12周无统计学差异(P>0.05),但在术后24周有统计学差异(P<0.05),推出生物螺钉所需的最大载荷比金属螺钉对照组大。生物螺钉实验组术后24周碱性磷酸酶水平升高[(58.8±14.49)U/L],2组其余外血常规、生化均正常。2组肝、脾、肾HE染色未见异常。结论 n-HA/PA66/GF生物活性螺钉具有良好的内固定性能和体内相容性。     

新型生物活性椎间融合器的实验研究

目的：研究纳米羟基磷灰石/聚酰胺66（n-HA/PA66）椎间融合器复合重组人骨形态蛋白-2（rhBMP-2）对山羊颈椎的融合效果和可行性.方法：取30只成年雌性山羊,随机分为三组：n-HA/PA66椎间融合器组、复合rhBMP-2的n-HA/PA66椎间融合器组和自体髂骨组.所有山羊均行颈3～4椎间盘及部分椎体切除术,分别植入n-HA/PA66椎间融合器、复合rhBMF-2的n-HA/PA66椎间融合器和自体髂骨块,术后4周、12周行X线检查 术后12周行组织学和生物力学评估.结果：12周时复合rhBMP-2的n-HA/PA66椎间融合器与自体髂骨在山羊颈3、4椎间均可形成骨性融合,组织学、影像学及生物力学等各项测试指标比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论：n-HA/PA66椎间融合器具有良好的生物相容性、骨传导性、和生物力学特性,复合rhBMP-2后使其具有骨诱导性,加快了的椎间融合速度,是一种理想的椎间融合材料.     

纳米羟基磷灰石/聚酰胺复合材料预防椎板切除后椎管狭窄、粘连的初步影像研究

目的：探讨影像学关于纳米羟基磷灰石／聚酰胺复合材料（n-HA／pA66）在预防椎板切除后并发症的表现，通过病理对照研究来提供临床指导。方法：建立22只家犬L5椎板切除实验模型，随机分成实验组和对照组。术后行CR和MRI扫描等影像方法与组织学的检测。结果：X线结果术后8周人工椎板与骨接触面开始模糊，至术后24周人工椎板与骨接触界面消失，密度增高，钙化；而对照组始终表现为腰5椎板棘突缺损，无致密影出现。组织学结果术后8周人工椎板内层的纤维组织-材料界面就出现较多成骨细胞团及骨小梁；对照组椎板缺损处是纤维瘢痕逐步形成，最终与硬膜粘连。MRI对脊髓受压及硬膜粘连情况显示较好，实验节段与对照节段相比，椎管面积及矢状径有明显差异（P〈0．05）。显示出重建椎板节段椎管完整性得到恢复，与组织学一致。结论：n-HA／PA66复合材料能够阻止硬膜外粘连，X线及MRI对其检测准确、全面。     

纳米羟基磷灰石/聚酰胺66与人胚胎成纤维细胞的生物相容性研究

目的:研究新型骨修复重建复合材料纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(n-HA/PA66)对人胚胎成纤维细胞可能存在的细胞毒性,为该材料应用于临床提供实验依据.方法:采用人胚胎成纤维细胞,经材料及材料浸提液分别与细胞共培养等方式对n-HA/PA66进行细胞毒性测试,细胞形态观察法观察各组细胞在24h、48h、72h、5天各时相点的细胞形态学变化,细胞生长抑制法(MTT比色法),测定各组1,2,4,7天细胞的相对增殖率.结果:材料表面的细胞黏附生长良好,各浸提液组和直接接触组分别与阴性对照组进行两两比较,各组对细胞的增殖均无显著影响(P＞0.05),各浸提液组和直接接触组分别与阳性对照组进行两两比较显示有显著差异(P＜0.05),材料的细胞毒性为0～1级.结论:体外试验结果显示,n-HA/PA66与人胚胎成纤维细胞相容性好,符合GB/T16886.5-1997-ISO 10993-5:1992规定的医用材料相应标准[1].     

Repair of Rabbit Femoral Defects with a Novel BMP2-derived Oligopeptide P24

In this study, the bioactivity of a novel BMP2-derived oligopeptide P24 was investigated by using the model of rabbit femoral defect after loaded in the biodegradable poly （lactic acid / glycolic acid / asparagic acid-co-polyethylene glycol） （PLGA-[ASP-PEG]）. A 1.5-cm unilateral segmental bone defect was created in the left femoral diaphysis in each of the 30 new zealand white rabbits. The defects of 18 legs filled with BMP2-derived peptide P24 combined with PLGA-[ASP-PEG] scaffold serves as the experimental group, and the defects in the rest 12 rabbits filled with （PLGA-[ASP-PEG]） without P24 as control group. The bone-repairing capability in the target region of the two group was grossly, radiologically, histopathologically and biomechanically evaluated 4, 8 and 12 weeks after the operation. Our results showed that in each group, primary healing of incision was achieved in the two groups. Radiographically, in experimental group, defects were filled with induced callus within 8 weeks, and a cortical bone-like structure was observed in some animals at the 12th week. According to the standardized stage of bone defect repair, 9 （64.28%） achieved grade-4 healing. In contrast, little bone formation was seen in the defects even 12 weeks after the operation, and 5 （62.50%） had grade 0 healing in this group. Histologically, tissue engineering material was mostly absorbed and cartilage was found around implants in the experimental group at the 4th week; 8 weeks after operation, the engineering material was completely absorbed, and formation of woven bone was observed and typical trabecular bone structure could be seen. In control group, 8 weeks after operation, the defect was filled with fibrous tissues, and no bone-like structure was observed. Statistical analysis showed very significant difference in biomechanical indicators between the two groups （P〈0.05）. It is concluded that new oligopeptide P24 can induce excellent bone regeneration and promote bone repair.     

HLA—A2表达沉默的MSCs对兔桡骨缺损修复的影响

目的探讨沉默人白细胞抗原-A2（HLA-A2）基因后的骨髓间充质干细胞（MSCs）对兔桡骨缺损修复的影响。方法将HLA-A2沉默后的MSCs经体外诱导成骨后,与羟基磷灰石（HA）复合培养,形成MSCs/HA复合体,并植入骨缺损中。将日本大耳白兔24只分为2组：HLA-A2沉默后的MSCs/HA复合体修复桡骨缺损为实验组（n=12）,自体MSCs/HA复合体修复桡骨缺损为对照组（n=12）。于术后2、4、8周比较两组饮食与伤口的愈合情况、X线检测、HE染色结果,综合评价HLA-A2沉默后的MSCs/HA复合体对桡骨缺损修复的影响。结果实验组和对照组的伤口无明显渗出、红肿,愈合好;X线结果显示,2、4周骨缺损处有纤维骨痂形成,8周骨缺损处密度增高,骨痂形成;两组细胞钙结节数量、X线评分、组织学评分比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 HLA-A2沉默后的MSCs免疫原性低,不影响其成骨能力及骨缺损的愈合,为同种异体骨缺损修复提供了新的依据。     

鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料对家兔下颌骨缺损愈合的促进作用及其机制

目的：制备鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料,探讨其对家兔下颌骨缺损愈合的促进作用及其可能机制。方法：将胶原溶液和壳聚糖溶液充分混匀,采用戊二醛交联法制备复合材料,扫描电子显微镜（SEM）下观察复合材料的微观结构。选择36只家兔建立兔下颌骨单侧缺损模型,分为实验组和对照组,每组又设4、8和12周亚组,每亚组各6只家兔。实验组家兔植入鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料,对照组家兔不植入任何材料。分别于术后4、8和12周采用CT观察家兔造模部位的组织学及周围神经重建情况,免疫组织化学法检测家兔骨组织中血管内皮生长因子（VEGF）表达量,SEM下观察骨缺损处的超微结构。结果：复合材料呈现规则的层状皱褶结构,支架内部孔径变大且以片状结构为主,是生物材料理想的结构。术后4周,实验组家兔有新骨生成,新生骨样组织致密材料大部分降解,VEGF呈高表达;术后8周,实验组家兔中的骨缺损部位骨小梁明显增多,VEGF表达呈下降趋势;术后12周,实验组家兔新骨形成且密度基本与正常组织一致,VEGF表达恢复正常。术后各时间点实验组家兔骨缺损愈合程度和成骨速度明显优于对照组。结论：鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料对家兔下颌骨缺损愈合具有明显的促进作用,其机制可能与促进VEGF表达有关。     

外固定架制作兔股骨延迟愈合模型

目的 使用外固定架制作兔股骨骨折延迟愈合模型.方法 将72只新西兰白兔随机分成对照组,实验A组、B组,将所有兔左侧股骨中段截骨,以微型可调节外固定架为固定装置,实验A组及B组去除10 mm皮质骨,同时去除内外骨膜及骨髓,实验A组保持骨折断端1 mm间隙,实验B组使用骨蜡封堵骨折断端,然后保持骨折断端接触.对照组截断骨皮质后即行外固定,不去除骨膜及骨髓.术后通过大体观察、影像学观察及组织学方法观察截骨端的愈合情况.结果 实验A组及B组愈合时间均为12周,对照组愈合时间为4周.结论 该实验建立的兔股骨骨折延迟愈合模型具有延迟愈合的X线及病理特征,说明该模型制作合理、可靠.     

富血小板血浆一期应用治疗胫骨平台上端粉碎性骨折的临床研究

目的:观察自体富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)一期应用在治疗胫骨平台上端粉碎性骨折的临床疗效。方法:根据随机对照的原则,将本院2015年1月至2016年6月间收治的胫骨平台上端粉碎性骨折的患者55例,随机分为PRP组29例和对照组26例。对照组患者行常规切开复位钢板螺钉或髓内钉内固定的同时给与异体骨植骨,PRP组患者在常规切开复位异体植骨的基础上加用制备的自体PRP在粉碎性骨折缺损处植入复位并固定。观察两组患者的骨折愈合情况。结果:对以上患者进行随访后发现,两组患者膝关节恢复情况尚可,PRP组骨折愈合的平均时间约(17.4±2.1)周,未见骨不连、骨不愈合以及自体输血等并发症。对照组骨折愈合的平均时间为(23.5±3.7)周。PRP组患者的骨折愈合时间显著短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:应用PRP治疗胫骨平台上端粉碎性骨折时可加速骨折愈合,疗效显著。