Fas/FasL系统在邻苯二甲酸二丁酯睾丸毒性机制中的作用

目的 探讨细胞凋亡Fas／FasL系统在邻苯二甲酸二丁酯（DBP）的雄性生殖毒性机制中的作用。方法 在大鼠多代繁殖实验的基础上，运用免疫组织化学染色的方法，通过对睾丸组织损伤的观察和细胞凋亡相关蛋白（Fas／FasL）的检测和分析，探讨不同剂量DBP对成年F;代大鼠（PND70天）睾丸损害的情况及可能的作用机制。结果 与对照组相比较，随着DBP染毒剂量的增高，PND70天F1代雄性大鼠睾丸曲细精管生精上皮退化变性，生精细胞脱落至曲细精管管腔面，甚至有部分曲细精管内的生精细胞耗竭；免疫组织化学染色结果表明，与对照组相比，中、高剂量组（每天250和500mg／kg）大鼠睾丸组织Fas／FasL染色范围扩大，着色细胞数量增多，且存在剂量-反应关系。结论 DBP对大鼠睾丸生精细胞损伤可能是由于DBP启动了睾丸支持细胞Fas／FasL系统，阻抑生精过程造成的，Fas／FasL系统在DBP的雄性生殖毒性中起一定作用。     

邻苯二甲酸二丁酯对大鼠生精细胞凋亡的影响

目的：观察不同剂量的邻苯二甲酸二丁酯（DBP）对成年大鼠生精细胞凋亡的影响。方法：32只健康雄性sD大鼠随机分成4组,分别为每天250mg／kg、500mg／kg、1000mg／kg3个染毒组和对照组,灌胃法连续给药4周后对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数,并计算每日精子生成量（DSP）。采用TUNEL原位细胞杂交方法检测大鼠生精细胞凋亡情况。结果：①中剂量组（500mg／kg）和高剂量组（1000mg／kg）睾丸精子头计数和DSP均低于对照组（P〈0．05）;②与对照组相比,中剂量组和高剂量组生精细胞凋亡指数（AI）均显著升高（P〈0．01）;③生精细胞凋亡指数与每日精子生成量呈负相关（r=-0．542,P〈0．01）。结论：一定剂量的DBP可通过促进生精细胞凋亡而导致精子生成量的减少,产生生殖毒性。     

生精丸治疗精索静脉曲张不育症的实验研究

目的：探讨生精丸治疗精索静脉曲张不育症的机理。方法：选成年雄性Wistar大鼠，制成精索静脉曲张模型。治疗组术后1周给生精丸400mg/kg，1次／日灌胃；模型组术后1周给同等剂量清水，1次／日灌胃。各组普食喂养3个月，手术取睾丸组织进行检测。结果：模型组睾丸重量明显低于对照组。治疗组病理组织学改变明显轻于模型组，生精过程中断等病理改变不明显。治疗组睾丸内LPO含量明显低于模型组。结论：生精丸能促进睾丸生精上皮损伤修复，有恢复生殖功能作用。     

哺乳期母鼠氯氰菊酯暴露对成年雄性子代精子质量的影响

目的 探讨哺乳期母鼠氯氰菊酯暴露对子代雄鼠成年后精子质量和生育力的影响.方法 21只孕鼠被随机分为对照组、低剂最组和高剂量组,于分娩后第1天分别经口灌胃给予母鼠氯氰菊酯[0、6.25、25 mg/(kg·d)]处理,染毒至母鼠产后21 d,断乳后仔鼠正常喂养至出生后70 d,分别评价成年雄性仔鼠精子质最和生育力,TUNEL法检测睾丸细胞凋亡,观察睾丸组织病理学改变.结果与对照组相比,高剂量组附睾精子数明显减少(P<0.05);生育力指标以及睾丸生精细胞凋亡数各组间差异均无统计学意义;组织病理学结果显示,处理组成年雄性后代睾丸生精细胞层减少、管腔内径增大、细胞相对稀疏且排列较紊乱.结论 哺乳期母鼠氯氰菊酯暴露对雄性子代成年后精子质量有明显影响.     

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯和邻苯二甲酸二丁酯联合染毒对青春期大鼠精子生成的影响

目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)联合染毒对青春期大鼠精子生成的影响。方法:6周龄SD大鼠(56只)随机分为染毒[375、750和1 500 mg/(kg.d)]组[予等质量DEHP和DBP混合物(溶解于玉米油中)灌胃]和对照组(予等量玉米油),每组14只。两组2、4周末断头各处死7只,并观察生精功能和附睾组织学改变。结果:染毒2周,750、1 500 mg/(kg.d)组睾丸内精子头数目、每日精子生成量和附睾精子总数及精子畸形率与对照组比有统计学意义(P<0.05);染毒4周,1 500 mg/(kg.d)组睾丸内精子头数目、每日精子生成量和附睾精子总数及精子畸形率与对照组比有统计学意义(P<0.05)。染毒2、4周,染毒组附睾管厚度与对照组比有统计学意义(P<0.01)。结论:DEHP和DBP联合染毒对青春期大鼠有明显的生殖毒性作用,可严重影响精子生成数量和质量,且对附睾有一定的毒害作用。     

蛇床子素对生殖系统损伤小鼠睾丸和附睾组织形态的影响

目的研究蛇床子素对环磷酰胺所致生殖系统损伤小鼠的睾丸和附睾组织形态学、血清睾酮含量的影响。方法建立环磷酰胺致生殖系统损伤雄性小鼠模型，连续灌胃蛇床子素20d后，测定血清睾酮水平，观察睾丸和附睾的组织形态改变。结果蛇床子素（150mg／kg）高剂量组可显著升高环磷酰胺致生殖系统损伤雄性小鼠血清中睾酮的含量；蛇床子素（150、75mg／kg）剂量组可减轻睾丸曲细精管间质水肿，管腔内可见成熟精子，生精细胞排列较规则；附睾间质水肿减轻。结论蛇床子素对环磷酰胺所致的生精功能低下有一定改善作用。     

LD50剂量芥子气中毒对大鼠生殖系统的影响

目的：评价芥子气中毒对大鼠生殖系统的影响。方法：成年SD大鼠80只，随机分为中毒组和对照组，每组40只，雌雄各半。中毒组背部皮下注射芥子气（5mg／kg，LD50，溶于丙二醇中），对照组注射等量丙二醇，分别于1、3、5、7和28d每次取雌、雄各3只从眼球取静脉血，采用放免试剂盒检测血清中雌二醇、睾酮、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）的浓度。取血后处死动物，取其生殖器官（卵巢或睾丸）光镜下观察组织学改变。于中毒后第4天及第5天死亡雌鼠2只，雄鼠3只。站果：雌性大鼠的组织学及血清学改变均在一定时期内恢复正常。雄性大鼠在染毒后1个月，病理结果仍显示生精细胞大部分坏死脱落，曲细精管呈空网状；同时血清FSH水平从对照组的（1.210O±0.3546）mmol／L升高至染毒28d后的（1.475O±0.0451）mmol／L，差异具有显著性（P〈0.01）。结论：芥子气对雌性大鼠生殖系统的损害较轻，且恢复较快，而对雄性大鼠的生殖系统却存在着持久而不可逆的损害。     

丙烯酰胺对雄性大鼠的生殖损伤及机制研究

目的：研究丙烯酰胺对雄性大鼠生精功能及睾丸的损害作用,探讨产生雄性生殖毒性的原因及CYP2E1的作用。方法：选择健康成熟的雄性Wistar大鼠60只,随机分为阴性对照组（生理盐水）、ACR 20mg/kg组、诱导剂无水乙醇200mg/kg组、无水乙醇200mg/kg＋ACR 20mg/kg组、抑制剂二乙基二硫代氨荃甲酸钠（DDC）20mg/kg组、DDC20mg/kg＋ACR20mg/kg共6组,以5ml/kg容量连续灌胃染毒4周。检测睾丸、附睾、前列腺、精囊腺脏器系数和睾丸病理;血中睾酮（T）、雌二醇（E2）含量;睾丸组织GSH、GR、GSH-Px水平;精子数,精子畸形率;曲细精管第Ⅶ、Ⅷ期各细胞成分构成变化。结果：ACR、ACR＋诱导剂及ACR＋抑制剂组精子数下降、畸形率升高,与阴性对照组比较存在显著差异,GSH含量显著升高（P〈0.05）,其它指标均无显著变化（P〉0.05）。结论：ACR可引起大鼠生精功能的改变,但未观察到CYP2E1在这种改变中的明显作用。     

川楝子油对雄性大鼠的抗生育作用

目的：研究川楝子油对雄性大鼠的抗生育作用。方法：实验组ＳＤ大鼠２０只，川楝子油两侧附睾尾部注射，１００μｌ／侧。１０天后，将上述大鼠分别与有生育力的雌鼠进行交配研究、ＦＣＭ检查、组织学研究、睾丸酮测定。结果：用药组及对照组大鼠生育率分别为１３．３％和９０％。用药组５周时组织学检查附睾及输精管，均无梗阻改变；睾丸形态正常；附睾出现了轻度炎症。６周时睾丸曲细精管口径缩小。ＦＣＭ表明川楝子油可抑制睾丸生精细胞的生成，刺激非生精细胞使其合成代谢增加。结论：附睾注射川楝子油可影响睾丸生精功能，激活睾丸间质细胞使其功能增强，产生局部免疫性不育，而不影响雄性大鼠的睾丸酮分泌及性功能。     

男性避孕药AF-2364对雄兔生殖细胞的影响

目的：观察男性避孕药AF-2364对雄兔生殖细胞的组织学和超微结构的影响。方法：将27只雄兔随机分为对照组、静脉给药组和灌胃给药组,静脉给药组和灌胃给药组分别给予AF-2364 25 mg/kg每周1次,连续4周;每隔2周,各组随机处死3只兔子,取睾丸、附睾等组织;睾丸电镜标本用2.5%戊二醛固定,制作成组织标本,用H-7500透射电镜观察;光镜标本用Bouin液固定,用OLYMPUS CX31电子显微镜观察。结果：光镜检查显示给药后生精细胞脱落,生精上皮变薄,附睾管内精子减少。电镜检查显示精子核头部溶解,尾部中段线粒体数目减少,生精细胞之间以及与支持细胞间的连接点破坏,间隙增大。结论：AF-2364能有效、可逆地抑制兔睾丸精子的发生。     

还原型谷胱甘肽对大鼠隐睾生精上皮保护作用的实验研究

目的:探讨单侧隐睾鼠双侧睾丸生殖细胞和Sertoli细胞变化和还原型谷胱甘肽(GSH)对睾丸的保护作用。方法:30只SD雄性大鼠分为对照组(A组),隐睾组(B组),隐睾加GSH组(C组),每组各10只。采用化学比色法测定双侧睾丸GSH、丙二醛(MDA)含量;生物素-dUTP/酶标亲和素法检测睾丸生殖细胞的凋亡;透射电镜观察Sertoli细胞的超微结构。结果:术后2周,与A组比较,B组双侧睾丸GSH明显降低,MDA和细胞凋亡明显增加(P<0.01),Sertoli细胞线粒体和滑面内质网扩张。C组这种变化则明显减轻(P<0.01),与A组比较无差别(P>0.05)。结论:外源性GSH对单侧隐睾鼠双侧睾丸生殖细胞和Sertoli细胞有保护作用。     

p53、p63在SD大鼠隐睾中的表达

目的 探讨p53、p63在SD大鼠隐睾中的表达及其在隐睾所致生精障碍过程中的可能作用.方法 本实验将30只健康雄性SD大鼠随机分为隐睾组和假手术组,建立单侧隐睾模型.术后7天脱颈椎处死大鼠,留取各组大鼠双侧睾丸称湿重,常规组织学切片观察各组睾丸生精上皮形态,免疫组化分别检测p53、p63蛋白表达的变化.结果 术后第7天,与正常侧睾丸相比,隐睾侧睾丸重量明显减轻,生精小管内生精细胞排列紊乱,生精细胞与精子的数量减少,可见较多多核巨细胞;免疫组化显示p53在各组睾丸的生精小管的各级生精细胞的胞质中均有表达,尤其是在精母细胞胞质中,但在隐睾中表达最强;p63在假手术组表达较少且较弱,而在隐睾组中表达较多且较强.结论 隐睾能导致睾丸内p53、p63表达增高,从而促进生精细胞凋亡增加.     

一种新的大鼠隐睾模型的建立

目的 改善大鼠隐睾模型的制作方法,提高隐睾模型的质量,并对新模型的稳定性进行研究.方法 28只大鼠随机分为对照组(ctrl)和模型组(modl)采用模拟失重大鼠模型,对大鼠进行3周尾部悬吊进行造模,随后模型组大鼠解悬吊恢复8周观察该模型的稳定性.结果 经过3周的尾部悬吊,模型组所有大鼠睾丸均滑入腹腔,同时和对照组相比,睾丸和附睾的重量出现极显著的降低(P＜0.01).HE染色发现对照组大鼠睾丸的生精小管结构排列紊乱,精原细胞消失,附睾尾中成熟精子消失.经过8周的恢复,大鼠的睾丸及附睾仍未恢复到正常水平(P＜0.01),HE染色显示其生精小管结构和精原细胞数量并未出现明显的改善.结论 尾吊法所建立的大鼠隐睾模型效果稳定,可以有效模拟大鼠隐睾时的睾丸温度变化情况,同时对大鼠的伤害较小,操作比较简单.     

短期糖尿病雄鼠性腺重量和血糖、糖化血清蛋白、睾酮动态变化的分析

目的 :探讨短期糖尿病雄性大鼠血糖、糖化血清蛋白、血清睾酮和性腺重量的动态变化。方法 :Wistar雄性大鼠分为正常对照组 (C)和糖尿病组 (D)。糖尿病组分别观察 1、3、5、7及 14d。动物处死后 ,称量各性腺重量 ,检测血糖、糖化血清蛋白和血清睾酮。结果 :糖尿病组血糖、糖化血清蛋白水平显著升高 ,血清睾酮于链脲菌素 (STZ)注射 3d后显著下降。糖尿病组附睾、精囊腺、前列腺重量显著降低 ;精囊腺、前列腺重量与血糖、糖化血清蛋白负相关 ,与血清睾酮正相关。结论 :短期糖尿病雄鼠睾丸附睾、精囊腺和前列腺发生明显变化 ,性腺变化与糖尿病代谢紊乱及血清睾酮水平密切相关     

热休克蛋白70-2基因在大鼠隐睾中的表达及意义

目的 :探讨Hsp70 2基因表达在大鼠隐睾生精细胞中的作用。方法 :采用 2 2日龄Sprague Dawley雄性大鼠复制单侧隐睾模型 ,运用免疫组织化学SP法检测Hsp70 2和cdc2 基因在大鼠隐睾侧和对侧睾丸组织中的表达 ;运用生物素 dUTP 酶标亲和素测定法检测睾丸生精细胞凋亡。结果 :术后第 7d ,与对侧睾丸相比 ,隐睾侧Hsp70 2表达下降显著 (P <0 .0 1) ,cdc2 表达无显著性变化 (P >0 .0 5 ) ,生精细胞凋亡显著性增加 (P <0 .0 1)。术后第 14d ,隐睾侧生精细胞少见 ,Hsp70 2和cdc2 表达呈阴性。结论 :隐睾可以引起生精细胞发育停止和凋亡增加 ,这可能与Hsp70 2表达下降或不表达有关     

细胞因子TNF-α在大鼠先天性隐睾组织中的表达及意义

目的：探讨大鼠隐睾生精细胞细胞因子TNF-α表达的变化对隐睾生精障碍的影响.方法：应用免疫组化及图像分析技术,观察18例二级雄性Wistar大鼠隐睾和15例正常睾丸及附睾的细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的变化.结果：隐睾生精小管腔内的大多数细胞TNF-α染色呈阴性,间质呈阳性的细胞较对照组增多,阳性染色增强.结论：生精细胞TNF-α表达减少,在隐睾所致生精细胞损伤中发挥重要作用.     

PFT-α对隐睾所致生精细胞凋亡的影响

目的：通过研究PFT-α对隐睾生精细胞中p53和bcl-2/bax表达的影响,探讨生精细胞凋亡的分子机制。方
法：将雄性SD大鼠随机分为假手术组、隐睾组、隐睾+p53抑制剂(p-fifty three inhibitor-alpha,PFT-α)组、隐睾+ PFT-α溶
媒(DMSO)组。后三组建立单侧隐睾模型,后两组分别于大鼠腹腔内注射PFT-α和PFT-α溶媒,每天1次,定时定量。
7 d后处死所有大鼠,取双侧睾丸称湿重。观察手术侧睾丸生精细胞组织形态,采用TUNEL法结合流式细胞术(flow
cytometry,FCM)检测生精细胞凋亡程度,免疫组织化学和Western 印迹分别检测p53和bcl-2/bax的表达。结果：隐睾+PFT-α组
与隐睾组和隐睾+PFT-α溶媒组比较,生精上皮排列有序,细胞层数厚,凋亡指数较低,p53和bax表达弱,bcl-2表达强。结
论：PFT-α可能通过上调bcl-2,下调p53和bax的表达,抑制隐睾生精细胞的过度凋亡。     

颈交感神经干离断对妊娠高血压综合征大鼠NOS活性及雌激素含量的影响

目的 观察颈交感神经干离断（TCST）对妊高征（PIH）大鼠一氧化氮合酶（NOS）活性及雌激素含量的影响。方法 妊娠大鼠随机分5组，每组15只，对照组（A）：自妊娠14d开始皮下注射生理盐水至孕20d：妊高征1组、2组（B1、B2）：自妊娠14d开始皮下注射L—NAME分别为12．5mg／100g／d和6．25mg／100g／d，至孕20d；手术组（C）：妊第14天行右TCST，余同B1；假手术组（D）：妊第14天行右颈交感神经干分离，但不离断，余同B1。孕21天剖宫取仔。观察孕鼠血压、尿蛋白，胎鼠的大小、体重、畸形率、死亡率、孕鼠血清NOS活性及游离雌三醇（FE3）含量。结果 血压、尿蛋白除基础值外B1、B2组各时点值明显高于A组（P〈0．01）；B2组明显低于B1组（P〈0．01）；C组与A相比差异无显著性（P〉0．05）。胎鼠体重、大小B1、B2组明显低于A组（P〈0．01）；B1组明显低于B2组（P〈O．05，0．01）；C组与A相比差异无显著性（P〉0．05）。死亡率、畸形率变化与上述指标相反。孕鼠血清NOS活性和FE3含量B1、B2组明显低于A组（P〈0．01）；B1组明显低于B2组（P〈0．01，0．05）；C组明显高于B1组（P〈0．01），与A组比差异无显著性（P〉0．05）。结论 TCST可保护孕鼠免受PIH的影响，可能与其具有提高孕鼠NOS活性和增加雌激素含量有关。     

生殖股神经对单侧隐睾睾丸组织INSL3基因表达的影响

目的:研究生殖股神经(GFN)在单侧隐睾动物模型中,对睾丸组织中胰岛因子3(INSL3)基因表达的影响。探讨GFN在单侧隐睾对侧睾丸损害的可能机制。方法:通过注射17-β雌二醇获得隐睾大鼠动物模型,取单侧隐睾大鼠12只设为A组;另取12只单侧隐睾大鼠在出生后第30天切断隐睾侧GFN设为B组;双侧隐睾大鼠10只设为C组;10只正常大鼠设为对照D组。在第8周采集各组大鼠血清,放射免疫法测血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡激素浓度(FSH)。睾丸组织用Trazol法提取总RNA,通过RT-PCR和Northernblot检测INSL3基因mRNA表达水平。结果:隐睾大鼠血清T水平下降;A、B两组血清LH升高,B组较A组升高明显(P<0.05);A、B两组隐睾侧INSL3 mRNA表达量低于D组(P<0.05);B组正常侧睾丸表达量高于A组(P<0.05)。结论:INSL3基因表达量在单侧隐睾睾丸组织中降低,GFN可能是影响INSL3基因表达水平,从而造成对侧已降睾丸的生精功能的损害。     

壬基酚对围产期子代雄性SD大鼠性腺组织PCNA和Aromatase表达的影响

目的研究壬基酚对围产期雄性子代生殖系统PCNA和Aromatase表达的影响，探讨壬基酚生殖发育毒性作用机制。方法对母鼠孕期第7～20d染毒壬基酚（NP）（50、100、200mg／kg），妊娠第20d和产后第2d分两批处死母鼠，测定血清雌二醇和血清NP浓度，并取雄性子代睾丸和附睾进行组织病理学观察和PCNA，Aromatase免疫组织化学分析。结果实验组孕鼠血清雌二醇和血清NP浓度显著高于对照组，且呈剂量反应关系（P〈0．05）；妊娠第20d和产后第2d雄性子代睾丸的PCNA表达，100、200mg／kgNP染毒组低于对照组（P〈0．05），且产后第2d雄性子代附睾PCNA表达和睾丸Aromatase表达也低于对照组（P〈0．05）。结论NP能干扰围产期雄性子代睾丸和附睾的正常生长发育。