氯霉素对大肠杆菌质粒的扩增作用

<正> 为适应国内实验条件,我们在固相条件下用氯霉素扩增质粒却获得成功。所培养的大肠杆菌为K12,为作者们从人肝细胞cDNA文库中筛选出的人清蛋白阳性克隆HSA_6,含pEX表达质粒及清蛋白cDNA插入片段,培养温度30℃。所用氯霉素为东北制药总厂生产。本方法的主要关键是让氯霉素从下层琼脂中缓慢扩散入上层生长大肠杆菌的琼脂中,从而使质粒扩增。具体方法是制备两种琼脂平皿,甲平皿琼脂底层填有一张灭菌滤纸,以便于转移琼脂。乙平皿除含有与甲平     

痢疾杆菌中R因子的检出及其消除的研究(摘要)

作者以大肠杆菌K_(12)W_(1485)(F~-)菌株的两个突变型作为受体菌,用两次结合传递法,从一株三重抗药性痢疾杆菌中分离出了R因子(Resistancefactor),并且用溴化乙锭作了R因子消除试验。     

大肠埃希菌耐药性质粒的提取及鉴定

目的检测大肠埃希菌对9种抗生素的耐药性，探讨大肠埃希菌耐药的分子机制。方法采用平皿二倍稀释法测定40株临床分离的大肠埃希菌对抗生素的敏感性，同时用碱裂解法对耐药菌株进行质粒的抽提，将得到的质粒转化至受体菌JM109进行质粒耐药性的鉴定。结果40株大肠埃希菌对头孢菌素等9种抗生素呈现出不同程度的耐药现象。对氨苄西林和青霉素的耐药性分别达到了87．5％和97．5％。从两株耐药大肠埃希菌中提取出质粒，对其中一株进行转化鉴定，确定为耐药质粒，大小约为3．0kb。结论临床分离大肠埃希菌对多种抗生素表现出较高的耐药性，而耐药性质粒的存在是细菌产生耐药性的机制之一。     

产毒性大肠杆菌R质粒转移的实验研究

以长春地区婴几腹泻患者分离的3株大肠杆菌为供体菌,分别与受体菌C_(600)及绿脓杆菌P~(97)菌株进行了R质粒的接合传递和转化试验。通过接合和转化试验,证明了3株大肠杆菌的多重耐药性与R质粒的关系,以及检出R质粒的特性。     

大蒜芦荟液消除R质粒的实验研究

目的：探讨大蒜芦荟混合液对大肠杆菌耐氯霉素（CM）R质粒和痢疾杆菌耐氯霉素（CM）R质粒消除作用。方法：将大蒜芦荟混合液作为R质粒消除剂,消除痢疾杆菌耐CM质粒和大肠杆菌耐CM质粒。结果：经大蒜芦荟液作用的大肠杆菌和痢疾杆菌在含CM中国蓝培养基和含CMSS培养基均不生长,但在不含CM中国蓝培养基和不含CMSS培养基都能生长。结论：大蒜芦荟混合液对大肠杆菌和痢疾杆菌的R质粒在体外均具有消除作用,说明大蒜芦荟液有预防肠道菌耐药性作用。     

EI Tor生物型霍乱弧菌耐药性质粒(R因子)的研究

以多重耐药性EI Tor生物型霍乱弧菌9057株为供体菌,大肠杆菌K_(12)W_(1485)(F~-)Rif~r株为受体菌,用接合传递法检出了一株R因子(R_(9057)),其耐药性基因结构为Tc~r Sm~r Cm~r Km~r Em~r Tr~r。获得了R_(9057)的受体菌生化反应和营养缺陷标记均未发生变化,R_(9057)由供体菌向受体菌转移的频率为5.82×10~(-6)。将大肠杆菌K_(12)W_(1485)(F~-)Rif~r(R_(9057))株在无药肉汤中连续传90代,未见整个R因子或R因子上单个耐药性基因丢失。说明R_(9057)在新的宿主大肠杆菌中也是稳定的。 以大肠杆菌K_(12)W_(1485)(F~-)Rif~r(R_(9057))株为供体菌、大肠杆菌K_(12)W_(1485)(F~-)Gm~r株为受体菌,再作第二次接合传递试验,证明R_(9057)也可传递,转移频率为4.83×10~(-6)。     

培养基对肺炎链球菌抗生素敏感试验结果的影响

目的 研究培养基对肺炎链球菌体外抗生素敏感试验的影响程度。方法 同时应用普通血平皿和Mueller-Hinton血平皿，对肺炎链球菌标准株ATCC49619和临床分离的臻病株以kirby-Bauer琼脂扩散法进行12种抗生素的敏感试验。用Etest法检测青霉素和红霉素的最低抑菌尝试。结果 复方SMZ在普通血平皿上的误判率最高，达34.4%。错判程度也最严重，17.8%为敏感错判成耐药。居第二位的是氨苄西林，错判率17.9%。其中16.1%为中介错判成耐药。青霉素，头孢曲松，头孢噻肟，四环素和氯霉素的错判率分别为3.6%,3.6%,1.8%,1.8%和1.8%。四种抗生素均以中介错判成敏感为主。红霉素，利福平，氧氟沙星和万古霉素在两种培养基上的药敏结果完全相同。头孢克罗在普通血平皿上的抑菌圈走私平均比药敏平皿上的大3.5cm，两者差值超过5cm 的达35.9%。结论 用kirby-Bauer琼脂扩散法对肺炎链球菌进行抗生素敏感试验必须在药敏专用培养基-Mueller-Hinton血平皿上进行。     

大肠杆菌-钩端螺旋体重组穿梭质粒pGKINVA的构建及重组钩体的筛选

目的 构建大肠杆菌-钩体穿梭质粒pGKINVA,并重组于钩体PatocⅠ株,为进一步确定钩体invA基因的功能奠定基础.方法 将invA基因克隆于pGKble24载体,PCR、限制性内切酶双酶切及测序鉴定重组穿梭质粒pGKINVA.质粒pGKINVA经电穿孔法转化无毒钩体PatocⅠ株,并筛选重组钩体菌株.结论 从钩体基因组中克隆出长558 bp的invA基因,定向插入pGKble24构建重组穿梭质粒pGKINVA,抗生素及蓝/白斑筛选和测序鉴定并获得正确的重组质粒后,电穿孔法转化钩体PatocⅠ株,在Korthof固体培养基生长并抗生素筛选、PCR鉴定出重组钩体菌株.结论 成功构建重组大肠杆菌-钩端螺旋体穿梭质粒pGKINVA,并筛选出2个重组钩体菌株,将有助于进一步阐明invA基因在钩体体内中的功能分析.     

山莨菪碱对低密度脂蛋白受体再循环的影响

目的：观察山莨菪碱对低密度脂蛋白受体再循环的影响。方法：应用抗免低密度脂蛋白受体（LDL－R）单克隆抗体，以细胞ELISA法测定成纤维细胞LDL－R，并观察蛋白合成受抑制时山莨菪碱对LDL受体的影响。结果：细胞生长汇合成单层时加入亚胺环己酮．受体无明显减少，加入山莨菪碱则细胞表面受体增加；细胞生长呈不全汇合状态时，亚胺环己酮使受体减少，但山莨菪碱对受体数无明显影响。结论：山莨菪碱具有促进生长汇合的成纤维细胞LDL－R再循环的作用。     

628株大肠杆菌R质粒的检测

本文检测来源于新生儿及健康猪的628株大肠杆菌的耐药谱及R质粒。这些菌株对四环素的耐药率最高,人源菌株对氨(?)青霉素和庆大霉素的耐药率高达67.82％和51.49％。R质粒的检出率在60％以上。多重耐药菌株中R质粒检出率特别高。三耐以上菌株的耐药谱型多以四环素、磺胺抗性为基础,对比过去的资料;耐药类型由四耐已发展到以五耐以上居优势;应引起医务界及社会上的重视。     

罗布麻对红细胞膜脂质过氧化损伤的保护作用

目的 研究罗布麻提取物对红细胞膜脂质过氧化损伤的保护作用。方法 采用三种活性氧产生体系诱发脂质过氧化为实验模型,设立模型对照组(MC),正常对照组(NC),以及剂量分别为0．1,0．2,0．4,0．8mg/mL的四个罗布麻提取物给药组,观察比较各组的丙二醛(MDA)含量。结果 同MC组相比,四组罗布麻提取物对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统,H2O2及UV照射三种方法引起的细胞膜脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的生成增加均有抑制作用,且有一定的剂量依赖关系。结论 罗布麻醇提物对自由基引起的细胞膜脂质过氧化损伤有保护作用。     

罗布麻茶对心血管系统的生物学效应研究

目的 研究罗布麻茶对心血管系统的生物学效应，为罗布麻的医药应用提供参考依据。方法 以新疆罗布泊地区所卢罗布麻茶为研究材料，对其降血压、降血脂和延缓衰老的生物学效应进行实验研究。结果 罗布麻茶对大鼠高血压动物有显著降血压作用；不同剂量罗布麻茶能抑制食物性高脂血症大鼠模型血清TC、TG、LDL-C的升高及血清HDL-C的降低，其生物学效应具剂量依赖性；延缓衰老作用研究显示，在果蝇生存试验中罗布麻茶科延长果蝇寿命，在小鼠抗氧化试验中罗布麻茶能提高红细胞超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力，降低肝匀浆丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量。结论 罗布麻茶具有降血压、降血脂和延缓衰老的生物学活性，可作为心血管类天然保健食品进一步开发利用。     

罗布麻泡腾片制剂工艺研究

目的：研究罗布麻泡腾片的制剂工艺.方法：采用正交设计L9（34）表安排实验,选择柠檬酸、碳酸氢钠、PEG6000、安赛密为罗布麻泡腾片辅料,采用直接压片法制备泡腾片,以泡腾片外观、硬度、崩解时限、口感为综合考察指标,优化罗布麻泡腾片的处方组成.结果：罗布麻泡腾片优化处方配比为：罗布麻干浸膏用量35％,崩解剂柠檬酸用量29％、碳酸氢钠用量29％,PEG6000用量4％、矫味剂安赛密用量3％.结论：按优化处方制备的罗布麻泡腾片崩解迅速,口感良好,制备方法简便可行.     

五种养心安神中药的抗惊厥作用初探

目的：研究远志、酸枣仁、合欢皮、柏子仁和罗布麻叶等五种养心安神药的抗惊厥活性。方法：采用95％乙醇分别对远志、酸枣仁、合欢皮、柏子仁和罗布麻叶进行提取，制备其醇提物；然后采用戊四唑（PTZ）致小鼠惊厥模型对所得5种醇提物的抗惊厥活性进行考察。结果：远志醇提物8g/kg能降低小鼠惊厥发生率，并显著延长小鼠发生惊厥的潜伏期和死亡时间，降低死亡率；酸枣仁醇提物和合欢皮醇提物在8g/kg时都明显延长惊厥小鼠的死亡时间，同时降低小鼠死亡率；柏子仁醇提物和罗布麻叶醇提物对P1Z致小鼠惊厥无影响。结论：远志醇提物、酸枣仁醇提物和合欢皮醇提物均有抗惊厥作用．其中远志醇提物作用最强：柏子仁醇提物和罗布麻叶醇提物无抗惊厥作用。     

罗布麻叶浸膏对脑内单胺类递质含量 及细胞膜流动性的影响△

罗布麻叶浸膏可使脑内５－ＨＴ及ＤＡ含量升高,其水溶性成分可使５－ＨＴ、５－ＨＩＡＡ及ＤＡ 含量升高,而ＮＥ含量降低,醇溶性成分上述作用更为明显。提示罗布麻叶浸膏可能含有兴奋中枢 ５－ＨＴ神经元功能及抑制中枢肾上腺素神经元功能的化学物质,这些化学物质为水溶性及酸溶性。 脑神经细胞膜脂质流动性测定结果提示罗布麻叶浸膏水溶性部分可使膜流动性增加。     

Observations on the anti-aging, antihypertensive and antihyperlipemic effect of Apocynum venetum leaf extract

The effect of Apocynum venetum leaf extract on hypertension, hyperlipemia, SOD content of erythrocyte, platelet aggregation rate, pulse wave transmission time (RP interval) and human diploid cell was studied to evaluate if it has some anti-aging effects. The mean BP in 60 cases of the treated group decreased from 171 +/- 19/98 +/- 11 mmHg to 154 +/- 22/91 +/- 10 mmHg and 148 +/- 17/89 +/- 10 mmHg after treatment for 4 and 8 weeks (P less than 0.01). The HDL-C in 40 cases of hyperlipemia increased from 47.5 +/- 13 mg% to 63.9 +/- 18 mg% (P less than 0.01). These results were better than those in the control groups. delta RPF was lengthened from 10.1 +/- 6.0 ms to 15.3 +/- 7.3 ms, which indicated that the cardiac performance was improved. No significant change of platelet aggregation rate was obtained after 5-8 weeks treatment. The retarding effect on cell aging was observed by the morphologic changes of nucleus and the increase of subcultivation from 77 to 80 generations. SOD content of erythrocyte was significantly increased from 546.1 +/- 51 micrograms/gHb to 574.6 +/- 42 micrograms/gHb in 20 cases. So Apocynum venetum leaf extract might have some anti-aging effects.     

星点设计-效应面法优选罗布麻叶总黄酮提取工艺

目的：采用星点设计-效应面法优化罗布麻总黄酮的提取工艺。方法：在预实验及单因素试验基础上,采用乙醇回流提取,并以乙醇体积分数、提取时间、料液比为自变量,罗布麻总黄酮得率为因变量,利用星点设计模型进行多元线性回归和二项式拟合,确定罗布麻的最佳提取工艺。结果：罗布麻的最佳提取工艺为23倍量65%乙醇,提取2次,150 min/次。得率实测值与预测值偏差为-1.60%,二项式拟合r=0.9870。结论：星点设计-效应面法优化罗布麻总黄酮提取工艺,方法简便,合理可行,预测性良好。     

Enterotoxin plasmids in bovine and porcine enterotoxigenic Escherichia coli of O groups 9, 20, 64 and 101

Fourteen strains of Escherichia coli of serogroups characteristic of porcine class 2 enterotoxigenic E. coli isolated from pigs or calves were selected for genetic studies. The strains were examined for their ability to cotransfer a number of plasmid-mediated properties during conjugation with E. coli K-12. These properties were antibiotic resistance, and the production of heat-stable enterotoxin, the K99 antigen and colicin and the ability to ferment raffinose. Distinction was made between the two types of heat-stable enterotoxin, STa and STb. All 14 strains were antibiotic resistant and 11 of them cotransferred antibiotic resistance and heat-stable enterotoxin. One strain which transferred heat-stable enterotoxin also transferred the raffinose gene. Among six K99-positive strains which transferred heat-stable enterotoxin, five always cotransferred K99. Three strains had 100% cotransfer of colicin as well as heat-stable enterotoxin and K99. Drug resistance determinants were cotransferred at high frequency with heat-stable enterotoxin for six of eight multiple drug resistant enterotoxigenic E. coli. A 100% cotransfer of combinations of heat-stable enterotoxin, K99, colicin and antibiotic resistance was often associated with a single plasmid band on agarose gel electrophoresis. For some strains, the genes for STa and STb were on the same plasmid and for others they were on separate plasmids. The enterotoxin plasmids ranged in size from 5.2 to 85 Mdal. Heterogeneity in molecular size occurred among enterotoxin plasmids in E. coli of the same serogroup and recovered from the same animal host species.     

罗布麻叶中三十烷醇的药理研究

罗布麻(Apocynum uenctum L.)叶经植化分析,含有脂溶性成分三十烷醇(Triacon tanol,简称TC)。该成分为一种植物生长调节剂,微量即能促进植物生长。对动物的影响,尚未见报道。本文就TC对小鼠生长和免疫功能的影响,以及对细胞染色体的保护作用等作了初步研究。     

几组易混叶类中药饮片辨析

一些叶类中药饮片存在名称相近,性状或功能主治相似的情况,容易混淆。如:大青叶与蓼大青叶,番泻叶与罗布麻叶,十大功劳叶与枸骨叶,淡竹叶、竹叶与苦竹叶。现将其从来源、性状、临床应用等方面进行辨析,总结出了比较容易掌握的区别点,为中医药工作者提供参考。