柯萨奇病毒B4 2B基因siRNA表达载体的构建及其对柯萨奇病毒B4抑制作用的研究

目的构建针对柯萨奇病毒B42B基因的siRNA表达载体并检测该载体在体外培养细胞中对柯萨奇病毒B4的抑制作用。方法选择柯萨奇病毒B4的2B基因区21bp的基因片段作为靶序列，合成含有靶序列的DNA片段并克隆到pGCai-U6／Neo／GFP／siNeGative载体中，构建pGCsi-U6／Neo／GFP／2B，使其可表达具有发夹结构的双链siRNA，在转染该载体后用柯萨奇病毒B4攻击Hela细胞，检测该载体对病毒感染细胞的保护效应。结果通过酶切、电泳、序列分析及荧光显微镜观察证明载体构建成功，而且DGCsi-U6／Neo／GFP／2B转染组的柯萨奇病毒B4的滴度及TCID50都明显低于pGCsi-U6／Neo／GFP／siNeGative转染组。结论成功构建了柯萨奇病毒2B基因的siRNA表达载体，而且该载体在体外培养细胞中对柯萨奇病毒的复制具有抑制作用。     

柯萨奇病毒B4 2B基因siRNA达载体的构建及其对柯萨奇病毒B4抑制作用的研究

目的构建针对柯萨奇病毒B4 2B基因的siRNA表达载体并检测该载体在体外培养细胞中对柯萨奇病毒B4的抑制作用.方法选择柯萨奇病毒B4的2B基因区21bp的基因片段作为靶序列,合成含有靶序列的DNA片段并克隆到pGCsi-U6/Neo/GFP/siNeGative载体中,构建pGCsi-U6/Neo/GFP/2B,使其可表达具有发夹结构的双链siR-NA,在转染该载体后用柯萨奇病毒B4攻击Hela细胞,检测该载体对病毒感染细胞的保护效应.结果通过酶切、电泳、序列分析及荧光显微镜观察证明载体构建成功,而且pGCsi-U6/Neo/GFP/2B转染组的柯萨奇病毒B4的滴度及TCID50都明显低于pGCsi-U6/Neo/GFP/siNeGative转染组.结论成功构建了柯萨奇病毒2B基因的siRNA表达载体,而且该载体在体外培养细胞中对柯萨奇病毒的复制具有抑制作用.     

正念癌症康复对早期非小细胞肺癌手术患者的影响

目的 探讨正念癌症康复对早期非小细胞肺癌手术患者的影响。方法 选择高邮市人民医院2020年7月至11月收治的86例早期非小细胞肺癌手术患者为研究对象。采用随机数字表法将其分为观察组43例和对照组43例。对照组采用常规护理,观察组在常规护理的基础上实施正念癌症康复。干预前和干预后8周采用中文版压力知觉量表（CPSS）、疾病不确定感成人量表(MUIS A）和创伤后成长评定量表(PTGI) 对两组患者的压力、疾病不确定感和创伤后成长进行评价和比较。结果 两组患者干预后压力和疾病不确定感评分均低于干预前（P＜0.05）,创伤后成长高于干预前（P＜0.05）。观察组干预后压力和疾病不确定感评分均低于同期对照组（P＜0.05）,创伤后成长评分高于同期对照组（P＜0.05）。结论 正念癌症康复可有效缓解早期非小细胞肺癌患者感知压力和降低其疾病不确定感水平,促进患者创伤后成长。     

铜绿假单胞菌普通菌毛与耐药性R质粒的关系

目的：检测铜绿假单胞菌耐药株PA36的耐药性R质粒与菌毛及粘附性的关系。 方法：应用琼脂糖凝胶电泳试验、电镜照片制备及观察、粘附试验及质粒消除试验。 结果：PA36含有一条相对分子质量是3.3×10⁶的R质粒;电镜下观察PA36具有周毛型菌毛;粘附试验于光镜下可见该菌大量粘附到脱落的尿道上皮细胞上;该R质粒消除后该菌株的耐药性与菌毛一起消失,粘附性明显减弱。 结论：铜绿假单胞菌菌株PA36编码普通菌毛、决定粘附性的基因主要是在相对分子质量为3.3×10⁶的一个R质粒上。     

对我院病原生物学教学改革的调查与分析

为了搞好病原生物学教学 ,对我院已学过这门课的医学生进行了病原生物学教学教改内容的问卷调查。直接听取学生对这门课的安排和教改内容的反馈意见 ,以便进一步调整改革。一、调查对象与方法调查对象为吉林大学白求恩医学部 2 0 0 0级临床医学专业五年制学生和 1999级临床医学专业六年制 (日语班 )学生。调查采取不记名问卷调查方式 ,由学生自愿填写 ,共发出问卷 4 0 0份 ,回收 378份 ,回收率 94 5 %。二、调查内容与结果分析调查内容分以下几个方面 ,并留有意见和建议栏。问卷情况统计如下。在回答“加入病历讨论这种教学方式你是否喜欢 …     

复方利福平片对结核分枝杆菌的抗菌作用

目的:研究复方利福平片剂对结核分枝杆菌的体内、体外抗菌活性,并与抗结核药利福平进行比较.方法:采用琼脂稀释法体外检测最小抑菌浓度(MIC);建立结核分枝杆菌的动物感染模型,观察药物在体内的保护作用.结果:体外实验复方利福平对26株结核分枝杆菌有抑制作用,复方利福平片剂中所含利福平的MIC低于单纯利福平的;体内保护实验结果表明,阴性对照组感染小鼠半数存活时间(50% survival time,ST50)为17 d,复方利福平片剂(337.5 mg*kg-1)组其ST50则达29 d.复方利福平片剂的病变指数分别为0.4、0.34、0.24;复方利福平片剂组与空白对照组相比肺重量指数差异有显著性(P<0.01).结论:复方利福平具有较好的抗菌活性.     

慢性胃炎、消化性溃疡患者幽门螺旋杆菌的分离鉴定和耐药性分析

目的通过对慢性胃炎和消化性溃疡患者幽门螺旋杆菌的分离培养和耐药性分析，为幽门螺杆菌感染的根除性治疗提供依据。方法经胃镜活检快速尿素酶阳性的195例慢性胃病患者，取病变黏膜组织，常规方法培养鉴定幽门螺杆菌，采用平皿稀释法对分离菌株进行药物敏感试验。结果195例慢性胃炎及消化性溃疡患者中，幽门螺杆菌的分离率高达79．5％。药敏显示，此次分离的幽门螺杆菌对甲硝唑和替硝唑呈现不同程度的耐药，对阿莫西林、克拉霉素敏感。结论幽门螺杆菌是慢性胃炎和消化性溃疡发病的首要因素，阿莫西林、克拉霉素仍然是根除治疗首选药物。     

芬太尼透皮贴治疗重度癌性疼痛的临床观察

目的对32例癌症晚期疼痛病人,不能口服吗啡类止痛剂,采用芬太尼透皮贴剂进行外敷治疗.观察用药前后疼痛强度,生活质量,不良反应情况。方法疼痛总的缓解率为93.8%(30/32),其中完全缓解率25.0%(8/32),明显缓解率53.1%(17/32),中度缓解率15.6%(5/32)。主要不良反应有头晕、恶心呕吐、嗜睡和便秘等。结论芬太尼透皮贴可有效地控制癌性疼痛,不良反应小与吗啡类(美施康定)无明显差异。对不能口服吗啡类止痛药的病人可做首选药物。     

妇康片体内外抑菌作用的实验研究

目的:研究妇康片在体内外的抑菌作用。方法:①采取平板倍比稀释法测定了妇康片对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、化脓性链球菌、肺炎克雷伯菌、淋病奈瑟菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌及单细胞真菌白假丝酵母的体外抑菌作用;②采用小鼠灌胃给药法,测定妇康片对金黄色葡萄球菌的体内保护效果。结果:妇康片在体外对上述细菌及单细胞真菌的MIC50及MIC90与止痛化疒胶囊接近,对体内感染金黄色葡萄球菌的小鼠也具有保护作用,与止痛化疒胶囊作用相当。结论:妇康片在体外对上述致病微生物具有抑制作用,对体内感染金黄色葡萄球菌的小鼠也具有保护作用。徵徵     

人乳头瘤病毒16型E7基因原核表达载体的构建及表达

目的: 构建人乳头瘤病毒16型 (HPV-16) E7基因原核表达载体,观察目的基因的蛋白表达。方法:人工合成HPV16 E7基因核苷酸序列,利用特异性引物通过聚合酶链反应扩增HPV16 E7基因,并克隆至pGEX-4T1原核表达载体,构建重组表达载体pGEX-4T1-HPV16-E7。 将其转化到工程菌Rosetta后,经IPTG诱导表达,进行E7-GST融合蛋白的SDS-PAGE分析和Ni2+-NTA亲和层析纯化。结果: E7基因PCR扩增产物和重组表达质粒的双酶切产物经琼脂糖
凝胶电泳,均可见300 bp的目的基因条带。表达的重组蛋白经SDS-PAGE电泳和纯化后,在相对分子质量约36 000处有特异性表达带,与预期相符。结论: 在原核系统中含E7基因的重组质粒可有效表达E7-GST融合蛋白。