甲氟喹和卤泛曲林伍用对感染日本血吸虫小鼠疗效评价

目的分析感染日本血吸虫的小鼠临床以甲氟喹、卤泛曲林配合治疗的效果。方法选取健康清洁级Wistar小鼠90只随机分为对照组、单一组、联合组,每组小鼠30只,所有小鼠均感染日本血吸虫尾蚴20条,在感染35 d后,单一组随机选15只小鼠小剂量用药甲氟喹200 mg/kg,另外15只大剂量400 mg/kg,联合组小鼠随机选15只小剂量使用甲氟喹、卤泛曲林200 mg/kg、4 mg/kg,另外15只两种药物大剂量使用均为400 mg/kg、8 mg/kg,对照组使用生理盐水,治疗7、14、21、28、35 d后,单一组、联合组取不同剂量治疗的3只小鼠杀死,对照组取6只小鼠杀死,取其肝脏以10%甲醛固定,观察肝脏内含有成熟虫卵的肉芽肿平均直径变化情况。结果对照组肉芽肿直径高于单一组、对照组小鼠,联合组肉芽肿直径低于单一组小剂量,联合组大剂量肉芽肿直径低于单一组,P0.05。结论临床对日本血吸虫感染小鼠治疗时,以甲氟喹、卤泛曲林配合使用,能有效灭杀血吸虫,抑制虫卵肉芽肿形成。     

血水草白屈菜红碱杀灭日本血吸虫尾蚴预防感染的研究

目的:探讨血水草白屈菜红碱(Chelerythrine,CHE)杀灭尾蚴、预防日本血吸虫感染的保护性效果。方法:实验室配置浓度分别为100 mg/L,50 mg/L,25 mg/L,12.5 mg/L,6.25 mg/L,3.125 mg/L的CHE溶液,采用玻片法灭蚴,观察15 min,30 min,60 min,120 min时尾蚴的死亡率;实验室防护动物血吸虫感染的实验,所用CHE溶液浓度同前。结果:尾蚴接触药物25 mg/L,60 min死亡率为88%,50 mg/L、60 min死亡率为100%。100 mg/L组药物浸杀尾蚴30 min后,对小鼠的防护率为100%;50 mg/L组药物浸杀尾蚴30min的防护率为82.35%。结论:CHE具有杀灭日本血吸虫尾蚴的作用。     

血水草生物碱杀灭日本血吸虫尾蚴预防感染的实验研究

目的 探讨血水草生物碱(ECA)实验室及现场杀灭尾蚴、预防日本血吸虫感染的保护性效果。方法 在实验室配置不同浓度的血水草生物碱溶液：玻片法灭蚴、实验室及现场防护动物血吸虫感染的试验。结果 尾蚴接触药物2.5mg/L，60min死亡率为97．71％，5mg/L死亡率为100％。10mg／L-100mg/L尾蚴100％死亡时间由45min缩短至3min。10mg／L组药物浸杀尾蚴后，对小鼠的防护率为100％；5mg／L ECA组的防护率为82．35％—94．53％。现场实验1．25mg/L能完全阻止血吸虫尾蚴感染。结论 血水草生物碱具有杀灭日本血吸虫尾蚴的效果。     

丙烯基硫脲对日本血吸虫成虫及虫卵作用的初步研究

采用丙烯基硫脲 30 0mg/ (kg·d)连续 3d经腹腔注射感染日本血吸虫 42d的小鼠 ,停药后 2h进行解剖 ,结果发现 :丙烯基硫脲对日本血吸虫雌雄成虫生长发育及雌虫卵巢长度无明显影响 (P >0 .0 5 ) ,而雌虫子宫内则出现无卵或虫卵形状不规则 ,呈沙粒状小团块物 ,未见明显虫卵卵壳。提示丙烯基硫脲作为酚抑制剂能有效抑制日本血吸虫雌虫成虫产卵     

日本血吸虫虫卵在诱导型一氧化氮合酶敲除大鼠中的分布

目的观察血吸虫虫卵在野生型(WT)大鼠和诱导型一氧化氮合酶敲除(iNOS~(-/-))大鼠肝肠组织及粪便中的分布情况,分析iNOS在感染大鼠中对日本血吸虫感染及虫卵产生的影响。方法采用WT大鼠和iNOS~(-/-)大鼠构建日本血吸虫感染实验动物模型。采用碱消化组织虫卵计数法及改良加藤厚涂片法检测日本血吸虫虫卵在大鼠肠组织和粪便中的分布,并用透射电镜观察虫卵内部结构,随后采用HE染色和环卵沉淀实验检测日本血吸虫感染7周后大鼠体内虫卵的活性。结果日本血吸虫感染7周后,WT大鼠虫卵仅少量分布于肝组织中,而在肠组织和粪便中均未发现虫卵。iNOS~(-/-)大鼠虫卵大量沉积于肝组织中,且在肠组织和粪便中均发现有虫卵。透射电镜结果显示,与WT大鼠中的虫卵比较,iNOS~(-/-)大鼠体内的虫卵结构更为完整,并可见到毛蚴。另外,iNOS~(-/-)大鼠的肠组织中形成了虫卵肉芽肿,而WT大鼠的肠组织中并未发现有虫卵肉芽肿。通过环卵沉淀实验进一步发现,与WT大鼠比较,iNOS~(-/-)大鼠中收集的虫卵周围出现了大量的阳性反应,且虫卵周围可见大量沉淀反应。结论日本血吸虫感染i NOS~(-/-)大鼠后可产生具有较强抗原分泌能力的成熟虫卵,进而改变日本血吸虫虫卵在大鼠体内的分布,即虫卵可到达大鼠的肠组织及粪便,且可排出到体外。     

阿奇霉素对体外弓形虫作用的实验研究

目的：了解阿奇霉素体外抗弓形虫的作用效果。方法：在细胞培养板里，将小鼠肾细胞作为弓形虫速殖子的滋养细胞，加入不同药物浓度的阿奇霉素(实验组)和乙酰螺旋霉素(阳性对照组)，用细胞计数和染色方法测定药物对弓形虫的抑制和杀灭作用。结果：药物作用72h后，当阿奇霉素浓度为0．625mg/L时，相对抑制率为13．12％，虫体死亡率为10．61％，乙酰螺旋霉素浓度为3．125mg/L时，相对抑制率和虫体死亡率分别为3．14％和0．85％。两种药物的浓度与作用效果均成正相关。结论：阿奇霉素对体外弓形虫具有抑制和杀灭作用，在常量药物浓度下，阿奇霉素对弓形虫的杀灭作用比乙酰螺旋霉素明显。     

日本血吸虫纯净活虫卵的制备

日本血吸虫活虫卵的大量制备和纯化是有关日本血吸虫研究的重要一环,血吸虫虫卵抗原的制备及研究、建立动物的肺或肝脏组织血吸虫卵肉芽肿模型、血吸虫卵体外培养及血吸虫卵的发育过程或其影响因素的研究以及血吸虫卵RNA和DNA提职等都涉及血吸虫卵的分离和纯化。我们参照陈佩惠’“’、Cho。ozynski等“’和曹建平等’”’方法进行改进,建立了分离和纯化日本血吸虫卵的方法,现报道如下。1材料和方法11动物感染不同的动物种类以及不同的实验自的,感染日本血吸虫尾蛐的数量有所不同’“‘。制备虫卵通常用小鼠和家兔,小鼠均是不同品系日本…     

氟对体外培养的小鼠睾丸间质细胞增殖和细胞凋亡的影响

目的 观察不同浓度氟化钠对睾丸间质细胞增殖和细胞凋亡的影响,为氟中毒的机制研究提供依据.方法 取体外培养的睾丸间质细胞,胰酶消化后制成单细胞悬液,常规培养,待细胞融合率达80％,且未出现细胞分化时,将细胞分4组,加入不同浓度的氟化钠染毒(0,5,10,20 mg/L)睾丸间质细胞,分别干预0,24,48,72,96,120 h后采用MTT法检测各组细胞的增殖.干预48 h后采用流式细胞仪Annexin V-PI双染法检测细胞凋亡率.结果 ①氟作用24,48 h后,20 mg/L的氟化钠对睾丸间质细胞增殖率有明显抑制作用,而5 mg/L和10 mg/L组没有明显影响；作用72 h后,10 mg/L的氟化钠明显抑制睾丸间质细胞的增殖；各浓度氟作用96 h和120 h后均表现明显抑制作用.②不同浓度氟化钠对睾丸间质细胞作用48 h后,均可诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡.氟化钠浓度为10 mg/L时,晚期凋亡率最高.氟化钠浓度为20 mg/L时,早期凋亡率最高.结论 氟对小鼠睾丸间质细胞的增殖有抑制作用,并诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡.     

二巯基丙磺酸钠对食管癌EC109细胞系和小鼠艾氏腹水癌的作用研究

目的观察二巯基丙磺酸钠(DMPS)对食管癌EC-109细胞和小鼠艾氏腹水癌的作用。方法在体外培养的食管癌EC-109细胞株中,通过MTT实验,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞生长增殖的抑制作用;通过荧光显微镜和细胞凋亡-Hoechst33258染色试剂盒,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞凋亡的诱导作用。在小鼠艾氏腹水癌中,观察不同浓度的DMPS对小鼠生存期的影响。结果体外实验中,终浓度为8、4、21、mmol/L的DMPS应用24 h和48 h后,对肿瘤细胞的生长增殖有显著地促进作用(P<0.01);应用72 h后,则显著地抑制肿瘤细胞的生长增殖(P<0.01)。终浓度为8、4、2、1 mmol/L的DMPS应用24 h和48 h后,肿瘤细胞凋亡数量无显著改变(P>0.05),但应用72 h后,各浓度组可显著增加肿瘤细胞凋亡数量(P<0.01)。体内实验中,751、50 mg/kg的DMPS腹腔注射,每天1次,连续10 d,可显著地延长小鼠生存时间(P<0.01)。结论DMPS应用72 h后,可能通过诱导肿瘤细胞的凋亡而显著地抑制体外食管癌EC109细胞系的生长增殖;腹腔注射751、50 mg/kg连续10 d,可延长艾氏腹水癌小鼠的生存时间。     

甲氧滴滴涕对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

目的:观察甲氧滴滴涕(MXC)对小鼠卵母细胞体外成熟的影响.方法:实验组小鼠未成熟卵用7.25,14.5,29ms/L MXC不同浓度培养液培养;对照组小鼠未成熟卵直接用合成人输卵管培养液培养,两组培养时间均为24 h.观察各组生发卵泡破裂(GVBD)和第一极体(PBl)的形成,出现PBl的卵母细胞视为核成熟.结果:培养24 h时,卵母细胞GVBD发生率7.25 ms/L MXC组为80.4%,14.5 ms/L MXC组为78.8%,29 ms/L MXC组为78.4%,与对照组的86%相比较并没有明显改变.培养过程中不同浓度MXC试验组GVBD发生较同期对照组相比较也没有明显延迟.但在培养液培养24 h时PBl的排出率7,25 mg/L MXC组为52.8%,14.5 mg/L MXC组为44.4%.29 mg/L MXC组为22%,明显低于对照组的71.2%,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:MXC对体外培养的小鼠卵母细胞GVBD发生没有影响,但能抑制其卵母细胞的核成熟.     

经脾脏注射血吸虫虫卵实验方法的探讨

报告应用经脾脏注射虫卵法建立Ｃ５７ＢＬ／６小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型，并与自然感染模型作比较。结果表明，脾脏注射组小鼠肝虫卵肉芽肿发生率为１００％，其肉芽肿的形态、细胞组成、转化发展过程均与自然感区染模型相似。本实验提示经脾脏注射虫卵是一种较好的、建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型的方法。     

Anti-fecundity immunity in mice immunized with anti-idiotypic monoclonal antibody NP30 of Schistosoma japonicum

Ｉｔｉｓｄｉｆｆｉｃｕｌｔｔｏｂｌｏｃｋｔｈｅｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｏｆｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａｓｉｓｂｙｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ,ｔｈｅｒｅｆｏｒｅｍａｎｙｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓｈａｖｅｂｅｅｎｉｎｔｅｒｅｓｔｅｄｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｖａｃｃｉｎｅｏｆｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａｓｉｓ Ｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｖａｃｃｉｎｅｏｆｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａｓｉｓｗａｓｍｏｓｔｌｙｆｏｃｕｓｅｄｏｎａｎｔｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｍｍｕｎｉｔｙ ,ｂｕｔｔｈｅｍｏｓｔｈｏｐｅｆｕｌｃａｎｄｉｄａｔｅｍｏｌｅ…     

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠血清IgG动态观察及免疫保护力的研究

为检测血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠血清IgG动态变化和免疫保护力,采用106CFU疫苗皮下1次和3次接种小鼠,接种后8周用日本血吸虫尾蚴攻击感染。感染后6周剖杀小鼠,计算减虫率和减卵率,同时设有BCG对照组。结果发现实验组免疫后血清IgG抗体迅速升高并持续于高水平;减虫率分别为39.74%和39.74%,减卵率分别为62.86%和55.62%,与对照组相比均有非常显著的差异（P<0.01）。而免疫3次和免疫1次小鼠血清IgG抗体水平及减虫率、减卵率均无显著差异。血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗皮下注射1次即能诱导小鼠较高水平的IgG抗体和免疫保护力,是一种比较理想的新型疫苗,值得进一步研究。     

日本血吸虫组织蛋白酶B2在小鼠抗血吸虫再感染中的作用

目的 构建日本血吸虫组织蛋白酶B（Sjcb2）真核表达载体,检测日本血吸虫组织蛋白酶B2单独和联合吡喹酮（PZQ）在小鼠抗血吸虫再感染中的作用.方法 将60只BALB/c雌性小鼠随机均分为六组,建立日本血吸虫感染动物模型：感染组、感染攻击组、空质粒处理组、Sjcb2免疫组、吡喹酮处理组、Sjcb2联合吡喹酮处理组.Sjcb2免疫组和Sjcb2联合吡喹酮组分别在初次尾蚴感染前第21天、14天及7天接种pcDNA3.1（＋）/Sjcb2重组质粒,空质粒处理组接种pcDNA3.1（＋）空质粒.初次尾蚴感染后第六周,对吡喹酮处理组和Sjcb2联合吡喹酮处理组小鼠给予PZQ治疗.除感染组外其它各组在第八周再次进行尾蚴攻击感染.分别于第8周和第14周取各组小鼠肝脏组织做病理切片,观察虫卵肉芽肿大小;采用间接ELISA法检测血清中特异性IgE和IgG亚型（IgG1,IgG2和IgG3）;检测各组小鼠荷成虫数,计算抗血吸虫再感染率.结果 Sjcb2免疫组、联合组与其它组分别比较,小鼠荷虫数显著性减少,抗血吸虫再感染率显著升高,虫卵肉芽肿直径显著减小,IgG1水平显著下降和IgE水平显著升高（P〈0.01）.结论 Sjcb2在小鼠模型中具有抗日本血吸虫再感染作用,抗血吸虫再感染率为70.3%,抗再感染作用机制可能与特异性IgE水平升高和IgG1水平下降有关.     

日本血吸虫云南品系SIEA对小鼠的免疫保护作用

目的观察日本血吸虫云南品系SIEA(未成熟卵可溶性抗原)免疫小鼠后产生的免疫保护效果.方法ICR小鼠经日本血吸虫云南品系SIEA免疫后攻击感染血吸虫尾蚴,感染后46 d剖杀,观察减虫率、粪卵减少率、雌虫子宫内虫卵数、肝表面虫卵结节数、肝脏各期虫卵数及各期虫卵构成比.结果经SIEA免疫后感染血吸虫尾蚴的小鼠粪卵及雌虫子宫内虫卵减少率分别为33.25%,34.75%(P<50.05);肝表面虫卵结节密度下降47.76%(P<0.05);肝组织内虫卵总数下降,每雌肝卵减少率为41.83%(P<0.05);每雌成熟虫卵减少率为54.37%(P<0.05);肝组织内成熟虫卵比例下降,未成熟卵比例增加(P<0.05).结论日本血吸虫云南品系未成熟卵可溶性抗原(SIEA)的抗原性较强,诱导小鼠产生了抗卵胚发育及抗雌虫生殖免疫力,可望作为血吸虫抗病疫苗候选抗原.     

日本血吸虫虫卵蛋白组双向凝胶电泳的初步探讨

目的:寻找日本血吸虫虫卵蛋白质抗原组分分析的一条新途径。方法:以日本血吸虫虫卵为材料,用固相pH梯度等电聚焦和SDS-PAGE双向凝胶电泳方法对其进行蛋白组分析。结果:获得日本血吸虫虫卵蛋白组双向凝胶电泳图谱。结论:双向凝胶电泳蛋白组分析方法可运用于日本血吸虫虫卵蛋白组的分析。     

日本血吸虫主要虫卵抗原Sjp40在感染新西兰白兔肝脏中的表达与免疫定位

目的观察Sjp40在感染新西兰白兔肝脏沉积虫卵及其肉芽肿病变形成中的表达情况,并进行免疫定位。方法日本血吸
虫尾蚴感染新西兰白兔,收集未感染组、29 dpi组和45 dpi组肝脏,Trizol法提取各组肝脏总RNA,以日本血吸虫甘油醛-3-磷酸
脱氢酶（GAPDH）为内参,Taqman探针qRT-PCR检测Sjp40 mRNA的表达;提取各组肝脏总蛋白,以硫酸铵盐析法和Protein G
免疫亲和柱层析法纯化的抗Sjp40-McAb 9G7和抗弓形虫tSAG1-McAb Y3A8（对照抗体）,western blot检测Sjp40蛋白的表达;
制备肝脏石蜡切片,HE染色观察肝脏虫卵肉芽肿的形成与发展,进一步以免疫荧光技术进行Sjp40在肝脏沉积虫卵及其肉芽肿
组织中的定位。结果日本血吸虫感染兔呈急性肝肉芽肿病变期的45 dpi肝脏沉积虫卵中Sjp40 mRNA水平显著高于29 dpi 尚
未形成虫卵肉芽肿结节的肝脏沉积的未成熟虫卵（P<0.05）,westernb blot 证实了Sjp40 蛋白在29 dpi 和45 dpi 兔肝脏中的表
达。免疫荧光显示：Sjp40在29 dpi兔肝脏中定位于未成熟虫卵内,而45 dpi可见感染兔肝脏中沉积大量成簇内含毛蚴的成熟虫
卵及其周围肉芽肿组织均有明显荧光。结论Sjp40在日本血吸虫感染兔肝脏沉积虫卵中的转录水平随虫卵发育成熟而显著增
加,在感染兔急性肉芽肿病变期（45dpi）呈现由虫卵向其周围肉芽肿组织扩散现象,提示该分子在血吸虫肉芽肿形成与发展过
程中具有重要作用。
     

血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗接种后保护力的观察

为了探讨血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗免疫鼠后对尾蚴攻击感染的保护性作用,采用１０６ＣＦＵ和１０８ＣＦＵ重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗皮下接种ＢＡＬＢ／Ｃ鼠,接种后８周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染后６周剖杀小鼠,计算减虫率、减卵率,同时进行虫卵肉芽肿周长和面积测量,以及抗体水平和抗原水平测定,同时设有ＰＢＳ对照组。结果表明重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗免疫小鼠后,１０６ＣＦＵ、１０８ＣＦＵ组与对照组相比,减虫率分别为２７．３４％、１６．６４％,减卵率分别为５５．７５％、６０．５０％,虫卵肉芽肿的平均周长和平均面积、免疫后血清抗体水平差别均具有非常显著意义;１０８ＣＦＵ与１０６ＣＦＵ组相比,血清抗原水平差别具有显著意义,说明血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗是一种比较理想的新型疫苗,值得进一步深入研究     

左旋含羞草碱对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞凋亡及DNA损伤相关蛋白表达的影响

目的：探讨左旋含羞草碱对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞凋亡及DNA损伤相关蛋白表达的影响。方法：观察左旋含羞草碱作用不同时间后FaDu细胞的生长状况；以流式细胞仪检测左旋含羞草碱与枸橼酸铁铵对FaDu细胞凋亡的影响；CCK-8法检测左旋含羞草碱与枸橼酸铁铵作用后FaDu细胞的增殖活性；Western blot法检测左旋含羞草碱作用于FaDu细胞后p-Histone-H2AX、p-ATR、p-ATM、p-mTOR等DNA损伤相关蛋白的表达。结果：不同浓度的左旋含羞草碱作用于咽鳞状细胞癌FaDu细胞不同时间后细胞的生长受到抑制；100 μmol/L枸橼酸铁铵对FaDu细胞的凋亡具有抑制作用，缺铁或铁过量对肿瘤细胞凋亡具有促进作用；与对照组比，左旋含羞草碱组（200 μmol/L）FaDu细胞凋亡最显著，左旋含羞草碱200 μmol/L+枸橼酸铁铵50 μmol/L组和左旋含羞草碱200 μmol/L+枸橼酸铁铵100 μmol/L组FaDu细胞凋亡差异无统计学意义，枸橼酸铁铵组（50、100 μmol/L）FaDu细胞凋亡明显减低；对FaDu细胞增殖活性影响由强到弱依次为左旋含羞草碱组（200 μmol/L）、左旋含羞草碱200 μmol/L+枸橼酸铁铵50 μmol/L组、左旋含羞草碱200 μmol/L+枸橼酸铁铵100 μmol/L组，与对照组比，差异有统计学意义（P＜0.05）；随着左旋含羞草碱浓度的增加，FaDu细胞p-ATR蛋白的表达降低，p-Histone-H2AX、p-ATM、p-mTOR等蛋白的表达增强。结论：左旋含羞草碱可能通过干扰FaDu细胞铁代谢，调控AKT/mTOR等信号通路，引起细胞DNA双链损伤，导致肿瘤细胞凋亡。     

日本血吸虫Rho GTPaseDNA及重组蛋白免疫保护效果研究

目的研究日本血吸虫中国大陆株Rho家族小分子G蛋白(Sj-Rho GTPase)DNA疫苗及重组蛋白疫苗免疫保护效果.方法将pcDNA3.1-SjRho GTPase DNA疫苗和pGEX-5X-3原核载体所表达的重组蛋白疫苗三次分别或联合免疫昆明鼠,3周后,每鼠感染40条尾蚴,42 d后剖杀小鼠,记数成虫和肝脏虫卵数. 结果与佐剂或空白质粒对照组相比,DNA疫苗、重组蛋白疫苗及联合免疫分别获得22.16%(P<0.01)、18.71%(P<0.05)和39.20%(P<0.001)的减虫率以及34.55%、20.07%和49.55%(P<0.001)的肝组织减卵率.结论 Sj-Rho GTPase DNA疫苗及重组蛋白疫苗均可诱导小鼠产生一定的免疫保护作用,且联合免疫方案保护效果好于单一疫苗.