白藜芦醇对人上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究白藜芦醇抑制人上皮性卵巢癌细胞增殖并促进其凋亡的作用及机制。方法:将人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3细胞随机分为5组,即正常对照组、白藜芦醇高剂量组(40 mg·L~(-1))、白藜芦醇中剂量组(20 mg·L~(-1))、白藜芦醇低剂量组(10 mg·L~(-1))和顺铂组(40 mg·L~(-1))。干预48 h后,通过光学显微镜观察各组细胞形态,MTT比色法检测各组细胞增值抑制率。通过流式细胞仪分析细胞周期的改变、流式细胞术检测细胞凋亡并计算细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测细胞Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达并计算Bax/Bcl-2比值,Western blot法检测细胞caspase-3蛋白表达。结果:与正常对照组比较,白藜芦醇高、中剂量组细胞出现变圆、脱壁、细胞间接触松散等状态,细胞抑制作用明显、增殖抑制率显著升高(P0.01);白藜芦醇各剂量组细胞周期被阻滞于G2/M期,白藜芦醇高、中剂量组细胞凋亡率显著升高(P0.01),同时可明显下调Bcl-2 mRNA而上调Bax mRNA表达,显著提高Bax/Bcl-2值(P0.05,P0.01),上调caspase-3蛋白表达(P0.01)。结论:白藜芦醇能够通过抑制增殖并促进凋亡对人上皮性卵巢癌SKOV3细胞生长起到一定的抑制作用,其机制可能与白藜芦醇调节凋亡相关基因蛋白表达有关。     

大蒜素对脑胶质瘤C6细胞增殖和凋亡的实验研究

[目的]探讨大蒜素对体外培养的脑胶质瘤C6细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用及其机制。[方法]培养脑胶质瘤C6细胞至对数生长期,不同浓度大蒜素作用下,于倒置显微镜及Hoechst33258荧光染色显微镜下观察C6细胞形态学变化;四甲基偶氮噻唑蓝法(tetrazolium salt colorimetry,MTT)检测不同浓度大蒜素对C6细胞增殖的影响并计算抑制率;钙依赖性磷脂结合蛋白-荧光素/碘化丙啶双染法(Annexin V-fluorescein/propidium iodide,Annexin V-FITC/PI)检测凋亡率;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞周期;蛋白质印迹法(western blotting,WB)检测Bax、Bcl-2基因的表达。[结果]大蒜素作用C6细胞24h后,于倒置显微镜观察可见C6细胞生长明显抑制,部分细胞皱缩变形,出现成泡现象;Hoechst33258荧光染色显微镜下观察发现凋亡的细胞,细胞的体积变大,核固缩、凝集,核染色质边集,出现浓染致密的颗粒块荧光信号,并随着大蒜素浓度增加表现越加明显。不同浓度(5、10、20、40、80μg·m L~(-1))大蒜素作用C6细胞(24h、48h、72h)后,细胞增殖受到抑制,与0μg·m L~(-1)大蒜素比较差异有统计学意义(P0.01);同一浓度大蒜素作用C6细胞48h、72h后,与24h比,差异有统计学意义(P0.01)。随着大蒜素浓度的增加,C6细胞凋亡率上升,与0μg·m L~(-1)大蒜素比较差异有统计学意义(P0.01);其中80μg·m L~(-1)大蒜素显著抑制C6细胞增殖、诱导其凋亡,与各浓度大蒜素比,差异有统计学意义(P0.01)。20μg·m L~(-1)大蒜素作用C6细胞24h后,与0μg·m L~(-1)大蒜素比G0/G1期细胞比例增加,S、G2/M期细胞比例降低,差异有统计学意义(P0.05)。随着大蒜素浓度的增加Bax表达水平上升、Bcl-2表达水平下降,Bcl-2/Bax比值逐渐上升,与0μg·m L~(-1)大蒜素比较差异有统计学意义(P0.01);其中80μg·m L~(-1)大蒜素与5、20μg·m L~(-1)大蒜素比,差异有统计学意义(P0.01)。[结论]大蒜素能体外抑制C6细胞的增殖,并诱导其凋亡,其中80μg·m L~(-1)大蒜素作用最强,分子机制涉及调控Bax、Bcl-2基因的表达。     

氧化苦参碱对HPV16感染宫颈癌Siha细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨氧化苦参碱对人类乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)16感染宫颈癌Siha细胞增殖与凋亡的影响。方法:以人子宫颈鳞癌Siha细胞作为HPV16感染型宫颈癌体外实验模型,常规复苏、培养及传代;加入不同质量浓度氧化苦参碱(0.2 g·L~(-1)、0.4 g·L~(-1)、0.8 g·L~(-1)、1.6 g·L~(-1))作为实验组,加入等体积RPMI-1640作为溶剂对照组,作用24 h、48 h、72 h;噻唑蓝法检测细胞增殖活性改变,流式细胞仪分析细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法分析凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、P53表达。结果:噻唑蓝结果显示:氧化苦参碱对HPV16感染宫颈癌Siha细胞增殖抑制作用呈质量浓度和时间依赖性(P0.05)。流式细胞仪检测结果显示:不同质量浓度氧化苦参碱作用48 h后,细胞凋亡率与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);氧化苦参碱作用48 h后,与对照组比较,实验组Siha细胞G0/G1期比率上升(P0.05),S期和G2/M期比率下降(P0.05),细胞生长周期停滞于G1期。蛋白免疫印迹检测结果显示:不同质量浓度氧化苦参碱作用48 h后,实验组凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达下调,Bax、P53蛋白表达上调,且其上调(下调)呈质量浓度依赖性。结论:氧化苦参碱通过抑制Siha细胞增殖和诱导Siha细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。     

环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨环巴胺（Cyclopamine）对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响.方法 不同浓度环巴胺（1、5、10、15μmol·L^-1）干预LNCaP细胞,分别在不同作用时间（24、48、72h）用MTT法检测环巴胺对LNCaP细胞增殖的抑制,Hoechst染色观察细胞凋亡形态的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化.结果 环巴胺5、10、15μmol·L^-1浓度组对LNCaP细胞增殖有显著抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.随着浓度的增大对细胞增殖的抑制作用显著增强.10μmol·L^-1组于48 h达到半数抑制量（IC50）.环巴胺10μmol·L^-1组24、48、72h凋亡率分别为37.21％、57.38％、57.98％,15μmol·L^-1组凋亡率分别为21.16％、71.31％、72.90％,与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.01）.随着浓度的增大细胞凋亡率逐渐增大.细胞凋亡形态的改变随着环巴胺浓度增大和作用时间的延长而增强.结论 环巴胺能够明显抑制LNCaP细胞的增殖,诱导细胞凋亡.     

丙戊酸钠抑制NB4细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)对NB4细胞的作用.方法:台盼蓝细胞计数检测不同浓度VPA对NB4细胞增殖的抑制作用,应用流式细胞术检测VPA作用后NB4细胞CD11b的表达,用DNA梯形片段电泳分析细胞凋亡.结果:VPA能显著抑制NB4细胞的增殖(P＜0.01),VPA处理NB4细胞72h时的半数抑制浓度(IC50)为1.17mmol/L;VPA组NB4细胞髓系分化抗原CD11b表达水平明显高于对照组(P＜0.05);NB4细胞经不同浓度VPA处理48h后,出现典型的凋亡细胞所具有的梯形DNA条带.结论:VPA能抑制NB4细胞增殖,诱导细胞分化和凋亡.     

丙戊酸钠对K562细胞的增殖抑制作用

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)对慢性髓系白血病细胞株K562的增殖抑制作用.方法:噻唑蓝比色法(MTT法)检测不同浓度VPA对K562细胞增殖的抑制作用;Western Blot法检测K562细胞Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果:VPA能显著抑制K562细胞的增殖(P＜0.01),VPA处理K562细胞72h的半数抑制浓度(IC50)为(2.34±0.14)mmol/L;3mmol/L VPA处理K562细胞72h后,Bax蛋白的表达明显升高、Bcl-2蛋白的表达明显降低.结论:VPA可通过上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达抑制K562细胞增殖,诱导K562细胞凋亡.     

半枝莲对人结肠癌细胞SW620增殖和凋亡的影响

目的探索半枝莲对人结肠癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度（0、12.5、25、50、75μg/mL）的半枝莲氯仿极性部位提取物（ECSB）干预SW620细胞后,MTT法检测细胞活力,DAPI染色观察SW620细胞的凋亡,流式细胞术检测SW620细胞的周期,蛋白质印迹法（Western blot）检测SW620细胞中PCNA、Survivin的表达。结果ECSB显著抑制了SW620细胞的活力（P<0.01）,并呈剂量性依赖;DAPI染色显示ECSB处理SW620细胞24 h后出现明显的细胞核固缩,核碎裂形成,提示ECSB促进SW620细胞的凋亡;流式细胞术检测结果显示在50μg/mL ECSB干预SW620细胞48 h后,S期明显增高,提示ECSB抑制SW620细胞的增殖;Western blot检测结果显示各浓度的ECSB均能显著抑制SW620细胞的PCNA表达,75μg/mL ECSB能显著抑制SW620细胞的Survivin表达。结论 ECSB促进人结肠癌细胞株SW620的凋亡,抑制其增殖,其可能机制是通过下调PCNA、Survivin的表达。     

人参皂苷Rg3对急性髓细胞性白血病THP-1、HL-60细胞的干预作用

目的:探讨人参皂苷Rg3对急性髓细胞性白血病的干预机制。方法:体外培养急性单核细胞性白血病细胞系(THP-1)、急髓白血病M3细胞系(HL-60),采用人参皂苷Rg3对细胞系进行干预,采用MTS法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法分析相关蛋白表达。结果:人参皂苷Rg3对THP-1、HL-60细胞均有不同程度的抑制生长效果,IC50分别为3.5、3.02 g·L~(-1)。人参皂苷Rg3作用24 h、48 h均可抑制急性髓细胞性白血病细胞增殖,且抑制作用与药物剂量呈依赖关系;人参皂苷Rg3对THP-1以及HL-60细胞的凋亡可起到诱导作用,细胞凋亡会随药物浓度升高而增加,且干预时间延长同样会增加细胞凋亡率,细胞凋亡率呈现时间、剂量依赖性。在作用48 h后,凋亡相关因子PARP出现了降解分裂条带,THP-1出现了Caspase-8条带轻度减弱,HL-60细胞出现了p-Akt明显减弱。结论:人参皂苷Rg3可以对Caspase-8及PARP相关蛋白的表达以及凋亡过程起到激活作用,使p-Akt表达水平降低,从而对肿瘤细胞的增殖以及凋亡起到抑制以及诱导作用。     

苦参碱诱导U937细胞凋亡及其对Bcl-2表达的影响

目的:探讨苦参碱(Mat)抑制人淋巴瘤细胞(U937)增殖及诱导其凋亡的机制.方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察Mat对U937细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化;Annexin V双标记染色结合FCM检测凋亡率;RT-PCR方法检测Bcl-2 mRNA表达.结果:Mat(0.2～0.5 g/L)作用24,48,72 h后对U937细胞均有增殖抑制作用(P<0.05或P<0.01),在该浓度范围内呈剂量和时间依赖性,其半数抑制浓度(IC50>)为0.4 g/L;Mat 0.2～0.5 g/L组作用U937细胞72 h后,s期细胞比例均增加,细胞发生S期阻滞(P<0.01);细胞凋亡率分别为3.25%,5.32%,8.17%,11.20%,与U937细胞对照组(1.84%)及Mat 0.1 g/L组(1.95%)相比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).RT-PCR显示Bcl-2 mRNA表达明显减弱,且随剂量增加越明显.结论:Mat在一定浓度和时间对U937细胞具有增殖抑制作用,其机制可能是使细胞发生S期阻滞;Mat可以下调U937细胞Bcl-2表达,促进细胞凋亡.     

蛇葡萄素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的影响

目的研究蛇葡萄素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的影响。方法用MTT比色法检测蛇葡萄素对MCF-7细胞的增殖抑制作用,绘制量效曲线并计算IC50,流式Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。结果蛇葡萄素能明显抑制MCF-7细胞增殖,IC50为19.15μg/mL;蛇葡萄素对MCF-7细胞作用6 h后,细胞凋亡率显著增加,且呈量效关系。结论蛇葡萄素能显著抑制MCF-7细胞的增殖,诱导细胞凋亡。     

藤梨根制剂对胃癌SGC-7901细胞MMP-2、MMP-9和SDF-1表达的影响

目的:通过观察藤梨根制剂对胃癌细胞基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)表达的影响,探讨藤梨根制剂的抗胃癌机制。方法:分别采用0 g·L~(-1)、15 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)、25 g·L~(-1)、30 g·L~(-1)藤梨根制剂处理胃癌SGC-7901细胞,分别处理12 h、24 h、48 h、72 h,采用噻唑蓝比色法(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)实验检测胃癌SGC-7901细胞增殖情况,采用Transwell实验及细胞划痕实验检测胃癌SGC-7901细胞侵袭、迁移能力,采用实时荧光定量聚合酶链式反应及蛋白印迹法检测胃癌SGC-7901细胞MMP-2、MMP-9、SDF-1 m RNA及蛋白表达水平。结果:MTT检测结果可见,15 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)、25 g·L~(-1)、30 g·L~(-1)藤梨根制剂可明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,且呈现一定剂量、时间依赖性(P0.05);细胞划痕实验结果可见,15 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)、25 g·L~(-1)藤梨根制剂可明显降低胃癌SGC-7901细胞迁移能力,且呈现一定剂量、时间依赖性(P0.05);15 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)、25 g·L~(-1)藤梨根制剂可明显抑制胃癌SGC-7901细胞侵袭能力,且呈现一定剂量依赖性(P0.05);15 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)、25 g·L~(-1)藤梨根制剂可明显抑制胃癌SGC-7901细胞MMP-2、MMP-9、SDF-1 m RNA及蛋白水平表达,且呈现一定剂量依赖性。结论:藤梨根制剂可明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭,其作用机制可能为下调胃癌细胞MMP-2、MMP-9、SDF-1表达。     

白花蛇舌草-半枝莲药对组分对胃癌SGC-7901细胞增殖、线粒体自噬及凋亡的影响

目的:观察白花蛇舌草-半枝莲药对组分对胃癌SGC-7901细胞增殖、线粒体自噬及凋亡的影响。方法:实验分为对照组(正常培养SGC-7901细胞),白花蛇舌草-半枝莲药对组分低剂量组(SGC-7901细胞+25 mg·L~(-1))、中剂量组(SGC-7901细胞+37.5 mg·L~(-1))、高剂量组(SGC-7901细胞+50 mg·L~(-1))。噻唑蓝比色法检测各组细胞培养72 h后细胞增殖抑制率;透射电镜观察各组细胞超微结构;Lyso-Tracker Red荧光染色观察SGC-7901细胞自噬情况;荧光TUNEL染色观察SGC-7901细胞凋亡情况;JC-1染色检测SGC-7901细胞线粒体膜电位变化;Western blot检测各组细胞BNIP3、Beclin-1、LC3Ⅰ/LC3Ⅱ、Cyt C、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达。结果:与对照组比较,白花蛇舌草-半枝莲药对组分各剂量组均显著抑制胃癌SGC-7901细胞增殖(P0.01)。与对照组比较,白花蛇舌草-半枝莲药对组分各剂量组细胞均出现细胞线粒体膜电位降低、线粒体自噬及细胞凋亡现象(P0.01),BNIP3、Beclin-1、Cyt C、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达增加(P0.01),LC3Ⅰ/LC3Ⅱ比值降低(P0.01)。结论:白花蛇舌草-半枝莲药对组分对胃癌SGC-7901细胞增殖有显著抑制作用,其机制可能与激活线粒体自噬的同时,激活线粒体凋亡信号通路,诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

B族Ⅰ型清道夫受体过表达对血小板源性生长因子诱导的冠状动脉平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)在人冠状动脉平滑肌细胞(hCASMC)增殖和迁移过程中的作用及机制。方法常规培养hCASMC,根据处理方法将细胞分为空白对照组、5μg·L~(-1)血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)组、10μg·L~(-1)PDGF-BB组、20μg·L~(-1)PDGF-BB组、20μg·L~(-1)PDGF-BB+腺病毒绿色荧光蛋白(AdGFP)组(PDGF-BB+Ad-GFP组)、20μg·L~(-1)PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组(PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组)。采用噻唑兰法检测各组细胞增殖情况,Western blot法检测各组细胞中SR-BⅠ表达,Transwell法检测各组细胞迁移情况。结果空白对照组及5、10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞中SR-BⅠ相对表达量分别为1.00±0.05、0.76±0.08、0.52±0.06、0.30±0.05,5、10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞SR-BⅠ相对表达量均显著低于空白对照组(P<0.05),10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞SR-BⅠ相对表达量均显著低于5μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05),20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞SR-BⅠ相对表达量显著低于10μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05)。培养24、48、72 h时,5、10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组及PDGF-BB+Ad-GFP组、PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力均显著高于空白对照组(P<0.05),10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组及PDGF-BB+Ad-GFP组、PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力显著高于5μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05),20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组、PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力显著高于10μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05); PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力低于20μg·L~(-1)PDGF-BB组和PDGF-BB+Ad-GFP组(P<0.05); 20μg·L~(-1)PDGF-BB组与PDGF-BB+Ad-GFP组细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照组、20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组及PDGFBB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞迁移数分别为24.2±3.6、76.6±4.2、75.2±4.8和60.6±3.6,各组细胞迁移数比较差异有统计学意义(F=40.695,P<0.01); 20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组及PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞迁移数显著高于空白对照组,PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞迁移数显著低于20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组(P<0.05); 20μg·L~(-1)PDGF-BB组与PDGF-BB+Ad-GFP组细胞迁移数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PDGF-BB能够促进h CASMC增殖和迁移,并减少SR-BⅠ表达,过表达SR-BⅠ能够抑制PDGFBB的作用,抑制h CASMC增殖和迁移。     

山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖、迁移的影响。方法:利用细胞培养技术对人乳腺癌T-47D细胞进行培养;利用MTT法比较不同浓度山慈菇水煎剂组和对照组对T-47D细胞生长增殖情况的影响;利用细胞划痕实验,检测不同浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞迁移的影响。结果:不同浓度的山慈菇水煎剂(50 g·L~(-1)、100 g·L~(-1)、200 g·L~(-1),400 g·L~(-1)、600 g·L~(-1)、800 g·L~(-1))对T-47D细胞的生长抑制率分别为-0.60%、-17.10%、-0.60%、65.08%、81.15%、82.80%,400~800 g·L~(-1)质量浓度山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D细胞的增殖有明显抑制作用;划痕实验结果显示200 g·L~(-1)、300g·L~(-1)山慈菇水煎剂作用24h和48h后,与对照组比较,乳腺癌T-47D细胞的划痕距离较大,划痕未见明显愈合,差异有统计学意义(P0.05)。结论:一定浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞生长增殖具有抑制作用,低浓度(200 g·L~(-1))的山慈菇水煎剂对T-47D细胞的生长增殖无影响,即无细胞毒性;高浓度(200 g·L~(-1))的山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D的增殖有明显的抑制作用;一定浓度的山慈菇水煎剂可以抑制T-47D细胞的迁移运动。     

地骨皮醇提液对胰岛β细胞增殖和凋亡的影响

[目的]以大鼠INS-1胰岛素瘤细胞株作为研究对象,用中药地骨皮(Cortex Lycii)醇提液干预INS-1细胞株,观察不同浓度地骨皮醇提液对胰岛β细胞增殖、凋亡变化的影响,为中药保护胰岛β细胞提供实验室依据。[方法]将INS-1细胞株分为正常糖对照组(control)、高糖组(high glucose,HG)、HG+Cortex Lycii(1g·L-1)组、HG+Cortex Lycii(2g·L-1)组以及HG+Cortex Lycii(4g·L-1)组,分别于药物干预24h、48h、72h后通过CCK-8法检测各组INS-1细胞的增殖率、采用流式细胞术检测细胞的凋亡率,并行相应统计学分析。[结果]48h、72h时与HG组相比,HG+Cortex Lycii各浓度组INS-1细胞的增殖率均有提高(P0.01);与另外两个药物浓度组相比,72h时HG+Cortex Lycii(2g·L-1)组细胞增殖率最高,差异有统计学意义(P0.05)。与HG组相比,HG+Cortex Lycii(1g·L-1)组、HG+Cortex Lycii(2g·L-1)组和HG+Cortex Lycii(4g·L-1)组INS-1细胞凋亡率显著下降,差异有统计学意义(P0.01);HG+Cortex Lycii(2g·L-1)组凋亡率低于HG+Cortex Lycii(1g·L-1)组,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]地骨皮醇提液可促进高糖环境下INS-1细胞的增殖,抑制高糖环境下INS-1细胞的凋亡,其最佳的药物浓度为2g·L-1。     

三叶青总黄酮对乳腺癌细胞增殖、转移的影响

目的:探讨三叶青总黄酮对乳腺癌细胞增殖、转移的影响,并分析其作用机制。方法:通过Cell Counting Kit-8/CCK8法检测不同质量浓度三叶青总黄酮(10 g·L~(-1)、20 g·L~(-1)及40 g·L~(-1))作用24 h、48 h和72 h对MCF-7细胞增殖的影响。细胞集落实验测定不同质量浓度三叶青总黄酮作用24 h对MCF-7细胞增殖的影响。Transwell技术和流式细胞术检测三叶青总黄酮作用24 h后对细胞迁移、侵袭和细胞周期的影响。采用蛋白质印迹技术检测CyclinD1、C-Myc、E-cadherin、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9、β-catenin和p-β-catenin蛋白表达水平。实时荧光定量核酸扩增检测系统法(real-time quantitative PCR detecting system,q-PCR)检测CyclinD1、C-Myc、E-cadherin和MMP-9 mRNA的表达水平。结果:各组MCF-7细胞抑制率比较,差异有统计学意义(F_(组别)=77.265,P=0.000),随着时间的延长,细胞抑制率逐渐增加(F_(时间)=14.581,P=0.000)。药物处理24 h后,三叶青总黄酮10 g·L~(-1)组、20 g·L~(-1)组及40 g·L~(-1)组的细胞集落数分别为(90.43±9.17)个、(45.64±4.67)个和(10.21±1.26)个,均显著低于对照组(F=919.002,P0.05)。三叶青总黄酮10 g·L~(-1)组、20 g·L~(-1)组及40 g·L~(-1)组的G0/G1期细胞比例分别为(70.59±7.13)%、(73.64±7.28)%和(78.83±7.89)%显著高于对照组(F=18.812,P=0.000)。三叶青总黄酮10 g·L~(-1)组、20 g·L~(-1)组及40 g·L~(-1)组的迁移、侵袭细胞数分别为(120.17±13.36)个、(96.75±9.81)个和(75.44±7.68)个,(84.08±8.62)个、(66.39±6.81)个和(42.45±4.41)个,均显著低于对照组(F=141.487、286.712,P=0.000)。三叶青总黄酮10 g·L~(-1)组、20 g·L~(-1)组及40 g·L~(-1) CyclinD1、C-myc、E-cadherin和MMP-9蛋白及mRNA表达水平均低于对照组,p-β-catenin蛋白表达水平低于对照组,E-cadherin蛋白和mRNA水平高于对照组(P0.05)。结论:三叶青总黄酮具有抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖和侵袭的作用,其可能的机制是将细胞周期阻滞于G0/G1期,调节Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。     

去甲斑蝥素体外抑制NCI-H446细胞迁移、增殖及促进凋亡

目的 研究去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)体外抑制人小细胞肺癌H446细胞迁移、增殖和诱导其凋亡作用.方法 以不同浓度NCTD处理H446细胞24h后,采用细胞划痕试验检测NCTD对H446细胞侧向迁移能力的影响;采用细胞计数检测对体外培养的H446细胞的抑制增殖作用;选用不同浓度的NCTD作用H446细胞48 h后,以Hoechst33258染色观察H446细胞形态的变化,研究NCTD对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的诱导作用.结果 经较高浓度的NCTD干预24h后,H446细胞的侧向迁移速度明显减慢(P＜0.01).细胞计数结果显示NCTD作用于H446细胞后其细胞群体倍增时间延长.NCTD作用H446细胞48 h后,部分凋亡细胞出现染色质凝集、核固缩、核碎裂等形态学改变,细胞凋亡率增加(P＜0.01).结论 NCTD能明显影响人小细胞肺癌H446细胞迁移、抑制其增殖并诱导其发生凋亡.     

连翘乙醇提取物对人胃癌细胞株BGC-823增殖和凋亡的影响

目的:探讨连翘乙醇提取物(EEFF)对人低分化胃腺癌细胞株BGC-823体外增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测不同EEFF浓度(31.25、62.5、125、250、500和1000μg/ml)处理24、48和72 h对BGC-823细胞增殖的抑制率。Annexin V/PI双染色法通过流式细胞仪检测不同浓度EEFF(0、200和400μg/ml)处理24 h及400μg/ml EEFF分别处理24和48 h的BGC-823细胞凋亡率。结果:EEFF作用于BGC-823细胞24、48和72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(566.21±31.76)、(338.91±29.11)和(159.01±17.23)μg/ml,且其作用呈明显的时效和剂量关系。不同浓度EEFF(0、200和400μg/ml)处理24 h的BGC-823细胞凋亡率分别为8.3%、10.4%和16.4%;400μg/ml EEFF分别处理BGC-823细胞24和48 h的细胞凋亡率分别为18.7%和33.3%。结论:EEFF对BGC-823细胞有抑制增殖和促凋亡作用。     

自噬与脂联素诱导的人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的关系

目的 研究全长脂联素( Acrp30 )在人乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、自噬、凋亡中的作用,并探讨自噬与凋亡的关系. 方法 体外培养 MCF-7 细胞,分为对照组(未加入Acrp30)、加药组(25、50、100、200 ng/ml Acrp30),四亚基偶氮唑盐( MTT)比色法检测各组细胞增殖情况. 选取100 ng/ml Acrp30浓度组( Acrp组)作用MCF-7 细胞,进行培养,倒置显微镜观察细胞形态、贴壁情况;划痕抑制试验了解细胞迁移能力;Western blot法评价细胞自噬水平;流式细胞仪检测Acrp组及3-甲基腺嘌呤(3-MA) 预处理组不同时间细胞的总凋亡率. 结果 ① MTT结果显示:与对照组相比,50、100 ng/ml组72 h,200 ng/ml 组48、72 h可显著抑制MCF-7细胞增殖( P<0. 05 );② 划痕抑制实验结果显示:与对照组相比, Acrp30 组作用 48、72 h,迁移距离显著减小( P <0. 01);③ Western blot结果显示:与对照组相比,Acrp30 组自噬水平( LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值) 24、48 h显著提高( P<0. 05,P<0. 01),但随时间延长,比值逐渐下降,作用72 h后LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值有所升高但差异无统计学意义;④ 流式细胞仪检测凋亡率结果显示:与对照组相比,Acrp30组和干预组48、72 h总凋亡率明显增加(P<0. 05,P<0. 01),与Acrp30组相比干预组72 h凋亡率显著升高( P<0. 05 ). 结论 Acrp30可抑制MCF-7细胞的增殖和迁移,诱导细胞的自噬和凋亡;抑制细胞自噬可促进Acrp30对MCF-7细胞凋亡的诱导.     

橘荔散结丸有效部位对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的?观察橘荔散结丸有效部位对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法?采用胶原酶消化法培养子宫肌瘤细胞,采用免疫细胞化学方法鉴定子宫肌瘤细胞;将不同浓度的橘荔散结丸各提取部位组作用于子宫肌瘤细胞24h后,用倒置显微镜观察细胞的形态变化,采用MTT法检测细胞的增殖活力,流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果?原代培养的子宫肌瘤细胞纯度接近100%;基质组对细胞活力无明显影响(P>0.05),而不同浓度的橘荔散结丸提取部位组能显著降低子宫肌瘤细胞的增殖活力(P<0.05),且呈浓度依赖关系(P<0.05);橘荔散结丸醇提物组则能提高其凋亡率(P<0.05)。结论?橘荔散结丸的各提取部位组通过降低子宫肌瘤细胞的增殖能力,其醇提物组能诱导子宫肌瘤细胞凋亡而使子宫肌瘤自然缩小或消退,可能是橘荔散结丸治疗子宫肌瘤的主要机理之一。