不同价态形态砷与砷中毒患者病情关系的研究

目的:通过对砷中毒患者血样与尿样进行砷价态形态、肝肾功等指标的检测,初步探索砷不同价态形态与患者病情程度之间的关系。方法:采集150例新疆奎屯农七师、内蒙古呼和浩特市和山西省山阴县等地对照组及患者的血样与尿样,分别检测样品中总砷、As(Ⅲ)(三价无机砷)、DMA(二甲基砷酸盐)、MMA(一甲基砷酸盐)的浓度,以及患者皮肤损害、相关酶和肝肾功的变化;通过统计学分析,了解相互之间的关系。结果:对于重度砷中毒患者,iAsⅢ、MMA和DMA的浓度与GST01(谷胱甘肽硫转移酶)、PNP20(嘌呤核苷磷酸化酶)、PNP51的浓度密切相关;其中MMA与PNP51之间呈正相关,r值为0.72334,P<0.01;iAsⅢ和DMA与PNP51也呈正相关,r值分别为0.57496和0.56569,P<0.05;而iAsⅢ和DMA与GST01之间表现出负相关的关系,r分别为-0.42833和-0.47226,P<0.05;iAsⅢ和DMA与AS3MT(砷甲基转移酶)呈负相关,r分别为-0.50329和-0.65320,P<0.05。iAsⅢ、MMA和DMA含量则表现出与皮肤损害包括色素缺失、色素减少及皮肤角化的弱正相关关系,但相关性较弱,r为0.32389,P<0.05。Logistic有序回归分析结果显示:iAsⅢ、DMA、MMA的回归系数β在α=0.05水平上无统计学意义。结论:砷不同价态形态与患者病情程度相关,主要表现为影响酶的活性。     

比格犬经口给予雄黄和牛黄解毒片后血浆中砷化学态的研究

建立了比格犬血浆中4种砷化学态[三价无机砷As(Ⅲ)、五价无机砷As(Ⅴ)、一甲基砷(MMA)和二甲基砷(DMA)\]的液相色谱 氢化物发生 原子荧光(HPLC-HG-AFS)测定法,并用于比格犬灌胃给予牛黄解毒片和雄黄后血浆中砷化学态的比较研究。血浆样品经甲醇沉淀蛋白、上清液减压挥干浓缩、残渣以流动相复溶离心后,取上清液,采用Hamilton PRP-X 100阴离子交换色谱柱(250 mm×4.1 mm,10 μm),以15 mmol/L磷酸二氢钾(氢氧化钾溶液调至pH 5.9)为流动相,进行HPLC-HG-AFS分析,4种砷化学态在15 min内得到良好分离。6只比格犬随机双交叉单次经口给予雄黄(以砷元素计,相当于11 mg/kg)和牛黄解毒片(以砷元素计,相当于28 mg/kg),测得血浆中的主要砷化学态均为DMA,并有少量As(Ⅴ),未测得As(Ⅲ)或MMA。比格犬单次给药雄黄和牛黄解毒片后DMA的主要药代动力学参数：c_max分别为(14.7±4.2)和(57.0±32.0)ng/mL,t_max分别为(2.4±0.5)和(2.5±0.5)h,AUC_0-36 h分别为(151±13)和(636±418)ng·h/mL,t_1/2分别为(16.2±7.9)和(9.4±2.2)h。与雄黄相比,给药牛黄解毒片后DMA的c_max和AUC明显增加,而t _1/2显著减小,表明经牛黄解毒片配伍后,DMA的转化增加,而消除加快,说明牛黄解毒片复方配伍对砷的药代动力学行为有影响。     

无机砷及其代谢产物诱导体外培养人皮肤成纤维细胞的增殖作用

目的 探讨无机砷(iAsⅢ)、单甲基胂酸(DMAⅤ)、二甲基胂酸(MMAⅢ)对人皮肤成纤维细胞增殖作用的影响.方法 原代培养的人皮肤成纤维细胞,通过直接细胞计数法和噻唑蓝(MTT)还原法检测iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ对人皮肤成纤维细胞生长的影响.结果 荧光倒置显微镜下观察原代、11～13代人皮肤成纤维细胞形态;与对照组比较,人皮肤成纤维细胞经不同浓度的iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ诱导后,吸光度值均有改变,存在剂量-效应关系(P<0.05).0.5～5.0 μmol/L浓度的iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ对人皮肤成纤维细胞有明显的增殖作用,而10～15 μmol/L浓度的iAsⅢ、DMAⅤ 、MMAⅢ产生明显的毒性作用,毒性比较MMAⅢ>iAsⅢ> DMAⅤ.MMAⅢ对人皮肤成纤维细胞有明显的增殖作用,且峰值出现在0～1 μmol/L.结论 低浓度无机砷及其代谢产物刺激人皮肤成纤维细胞增殖,高浓度具有细胞毒性.     

高效液相色谱分离中药中砷条件的优化

现代医学研究表明三价砷和五价砷在遗传上有致基因突变的作用。国际癌症研究机构（IARC）已将砷归类为人类致癌物。砷形态不同,其毒性或药用机制也不同,依次为As（Ⅲ）〉As（Ⅴ）〉MMA（monomethylarsonic acid,甲基胂酸）〉DMA（dimethylasonic acid二甲基胂酸）,可见无机砷的毒性最大,因此,在测定砷的含量时,对As（Ⅲ）和As（Ⅴ）进行分析是非常必要的。以主要无机砷[AS（Ⅲ）和As（Ⅴ））]的毒性来综合评价,比用砷的总量来评价砷的毒性更具有科学性。     

配伍减低关木通中马兜铃酸A溶出量的研究

目的 通过反相高效液相色谱法观察传统复方导赤散及其拆方与关木通药液中马兜铃酸A的溶出量,探讨复方配伍与马兜铃酸A溶出量的相关性.方法 以C18柱(250 mm× 4.6 mm,5 μm)为色谱柱,以甲醇-水-冰乙酸(67:32:1)为流动相,检测波长315 nm.结果 复方药液中马兜铃酸A溶出量明显低于单味关木通药液41%以上;而含有关木通 竹叶各组马兜铃酸A的溶出量均低,其中关木通 竹叶组较单味药关木通降低了62%.结论 传统复方导赤散配伍形式确有减低其马兜铃酸A溶出量的作用,且竹叶配伍作用最为显著.     

无机砷及其代谢产物与DNA甲基化的研究现状

砷及其化合物已被世界卫生组织(WHO)下属的国际癌症研究机构[1]等诸多国际权威机构公认为人类已确定的致癌物,无机砷(inorganic arsenic,iAs)可通过体内的甲基化进行生物转化作用.无机砷在体内经过氧化还原和甲基化过程,产生多种甲基化砷的代谢产物、氧化型和还原型的单甲基胂酸(Monome thylarsenic acid,MMA)和二甲基胂酸(Dimethyl arsinic acid,DMA)有3价(MMA3+、DMA3+)和5价(MMA5+、DMA5+)的化学形态.     

染砷大鼠脑砷代谢研究

目的研究染砷大鼠脑中砷形态代谢产物、代谢酶含量水平及其相关性,初步探讨砷代谢与砷毒性机制关联性。方法雄性清洁级Wistar大鼠20只,分成对照组及砷酸钠低、中、高剂量组4组。各组大鼠砷酸钠经口染毒3个月后处死并摘取脑组织。采用高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法(HPLC-HGAFS)测定并比较砷酸钠各剂量染毒组大鼠脑组织中砷形态代谢产物[i As(Ⅲ)、i As(Ⅴ)、总砷(Total As)含量以及一甲基化率(PMI)、二甲基化率(SMI)]及代谢酶GSSG含量、甲基转移酶活力、GST活力、GSH含量;通过试剂盒法分析各组大鼠脑中甲基转移酶的活力,并探讨大鼠脑中砷形态代谢产物与代谢酶的相关性。结果染毒组大鼠随染毒剂量和时间的增加,出现生长发育迟缓及狂躁、相互撕咬等现象;砷染毒剂量升高会促进脑中i As(Ⅲ)和总砷含量增加;同时砷染毒组脑组织中GSSG含量有所升高而GSH含量有所下降;随染毒剂量升高,GST活力也随之呈现升高趋势;与对照组比较,砷酸钠染毒各剂量组大鼠脑中PMI值均较低,SMI值有所升高(P<0.05)。砷酸钠染毒组甲基转移酶活力与i As(Ⅲ)%含量呈负相关(r=-0.714,P<0.05),与PMI和SMI均呈正相关(rPMI=0.714,rSMI=0.805,P<0.05);砷酸钠染毒组GSH含量与i As(Ⅲ)%含量呈正相关(r=0.855,P<0.05),与PMI和SMI均呈负相关(rPMI=-0.855,rSMI=-0.858,P<0.05)。结论低剂量砷酸钠染毒会打破脑组织中GSSG与GSH的动态平衡,造成脑组织的氧化损伤,砷酸钠染毒后其代谢产物在脑组织中可能具有一定的蓄积能力。     

染砷家兔皮肤抗氧化水平与砷代谢关联研究

目的探讨亚砷酸钠(i As3+)染毒对家兔皮肤抗氧化水平的影响及其与砷代谢的关系。方法选取成年健康雄性家兔30只,随机分为5组,每组6只;各梁毒组家兔经口染毒,染毒剂量分别为低(L)(0.075 mg·kg-1·w-1)、中低(ML)(0.15 mg·kg-1·w-1)、中高(MH)(0.375 mg·kg-1·w-1)、高(H)(0.75 mg·kg-1·w-1),对照组(C)饮用去离子水。采用自由饮水法染毒,根据动物日饮水量配制染毒水溶液,自由饮水染毒12 w。12 w后处死动物,取同一部位皮肤组织用2.5%戊二醛固定后进行扫描电镜观察。取家兔背部皮肤组织进行匀浆,检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)活力。采用高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法(HPLC-HGAFS)测定尿液中砷形态代谢产物含量。结果与对照组相比,染毒组家兔体质量基本呈现增加的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。电镜结果显示染毒组家兔皮肤角质层有不同程度的改变。随着Na As O2染毒剂量的增加,GSH-Px活力降低,GST活力升高,差异有统计学意义(P<0.05);SOD差异无统计学意义(P>0.05)。尿液中DMA、MMA的含量随着染毒剂量的增加而升高,差异有统计学意义(P<0.05)。无机砷(i As3+、i As5+)与GSH-Px、GST无相关。GSH-Px与MMA呈负相关(r=-0.507,P<0.05),与DMA呈负相关(r=-0.562,P<0.05)。GST与MMA呈正相关(r=0.395,P<0.05),与DMA呈正相关(r=0.414,P<0.05)。结论砷的体内代谢过程和家兔皮肤组织的氧化与抗氧化平衡破坏有密切关系。     

DMPS对砷中毒患者尿砷排泄量及其种类影响的研究

 : 目的 探讨口服驱砷剂2,3-二巯基-1-丙基磺酸钠（DMPS）对砷中毒患者尿砷排泄量及其种类的影响 。方法 用激发实验原理设计实验方案, 盲法测定样品。高效液相色谱-氢化物发生-原子吸收光谱法(HPLC-HG-AAS)分离并测定尿中无机砷（iAs）、一甲基砷酸（MMA）和二甲基砷酸（DMA）3种形态砷的含量;尿液经消化后用氢化物发生-原子吸收光谱法(HG-AAS)测定尿中总砷。结果 无论对照还是砷中毒患者,服DMPS后尿中总砷、无机砷、MMA和DMA的排出量均有显著增加（P0.05）,DMPS可使砷中毒患者比正常对照排出更多的无机砷（P<0.05）。结论 DMPS能够动员器官和组织中蓄积砷,增加经尿的排泄总量。所增加的尿砷排泄以无机砷和MMA为主。     

含朱砂、雄黄的中成药，是药还是毒？

朱砂（96％HgS）和雄黄（90％As4S4）与其它中药配伍应用于临床已有上千年历史。但由于朱砂含汞,雄黄含砷,其安全性近年来引起了越来越多的关注。一般认为把已知的金属毒物用于医药中不可取,但也有不同的意见认为朱砂和雄黄有长期用药历史,临床有效,其毒副作用可耐受。含朱砂、雄黄的中药是药还是毒？本文就含朱砂和雄黄的中成药的研究进展作一综述,并提出（1）以总砷和总汞为标准进行评价含朱砂、雄黄中药的安全性不妥,（2）朱砂和雄黄的用药量和用药时间决定其毒性反应,（3）朱砂和雄黄是中药复方中的有效成分之一,应作深人研究来决定其取舍。