连接蛋白43在胎盘组织中的表达及与妊娠糖尿病的相关研究

目的：观察连接蛋白43（connexin43,Cx43）在妊娠糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）患者胎盘组织中的表达,探讨Cx43及其构成的缝隙连接细胞间通讯（gap junctional intercellular communication,GJIC）在GDM胎盘组织中的作用。方法应用免疫组织化学法和Western blotting法检测GDM未治疗组（18例）、GDM治疗组（22例）和正常妊娠组（12例）胎盘组织中Cx43的定位和表达。结果免疫组织化学染色显示Cx43表达在滋养细胞的细胞浆及细胞膜。 GDM未治疗组Cx43阳性颗粒主要集中在细胞浆中,且明显减少。 GDM未治疗组Cx43蛋白水平明显低于其他两组（P＜0.05）。结论 Cx43在GDM未治疗组的滋养细胞低表达,提示滋养细胞间GJIC异常,导致GDM胎盘滋养细胞间融合、分化异常,可能与GDM的不良妊娠有关。     

Syncytin及其受体ASCT2在子(癎)前期胎盘的表达以及缺氧对其表达的影响

目的研究syncytin及其受体ASCT2在胎盘发育、子癎前期胎盘中的表达以及缺氧对两者表达的影响。方法实时PCR检测syncytin及ASCT2 mRNA的表达。比较25例正常妊娠胎盘（分妊娠7～12周、30～36周和37～40周三组）syncytin和ASCT2表达的不同；比较8例子癎前期胎盘与正常妊娠胎盘syncytin及ASCT2表达的不同；比较正常和缺氧条件下forskolin诱导BeWo细胞分化成合体滋养细胞时，syncytin及ASCT2表达的变化。结果①与妊娠7～12周相比，syncytin mRNA的表达在妊娠30～36周显著增加（P〈0．05），妊娠37周后减少，但仍高于妊娠7～12周（P〈0．05），ASCT2 mRNA妊娠30～36周起减少（P〈0．05），以后一直维持较低水平。②将对照组胎盘和子癎前期组胎盘孕周匹配后比较发现，子痴前期组胎盘syncytin mRNA表达减少（P〈0．01），ASCT2mRNA表达无明显变化。③BeWo细胞分化成合体滋养细胞时，伴syncy—tinmRNA表达增加和AScT2mRNA表达降低（P〈0．05），缺氧抑制syncytin mRNA的表达（P〈0．05），对ASCT2 mRNA的表达无明显影响。结论Syncytin及其受体ASCT2在胎盘的表达与孕周有关，并参与合体滋养细胞形成的调控，子癎前期合体滋养细胞异常可能与缺氧导致syncytin表达异常有关。     

胎盘生长因子于胎儿生长受限时在胎盘及蜕膜组织中的表达

目的 研究胎儿生长受限(fetal growth restriction, FGR)时胎盘生长因子(placenta growth factor, PLGF)在胎盘及蜕膜组织中的表达.方法 采用免疫组织化学和分子原位杂交的方法对正常妊娠和胎儿生长受限的胎盘及蜕膜组织中的PLGF及PLGF mRNA的表达进行检测,并通过计算机软件对组织中表达的情况进行定量分析. 结果①胎盘生长因子及其mRNA在正常组与FGR组间表达的部位相同,主要在胎盘的合体滋养细胞中表达,在绒毛间质细胞、内皮细胞及蜕膜细胞中也是有少量表达.②FGR组15例患者的胎盘合体滋养细胞、绒毛间质细胞、内皮细胞及蜕膜组织中PLGF的表达均较正常组明显减少.③FGR组15例患者的上述组织细胞中PLGF mRNA 的转录水平也较正常组明显降低.结论 胎儿生长受限时,胎盘及蜕膜中PLGF及PLGF mRNA中表达较正常妊娠时明显减少,提示滋养细胞合成及分泌PLGF的功能下降,这可能是胎儿生长受限发病机制中的一个重要环节.     

雌激素受体α和β mRNA变异型在胎盘组织的表达及定位

目的 探讨人足月胎盘组织雌激素受体α、β（ERα、ERβ）的mRNA变异型种类及其在胎盘的组织细胞学定位。方法 采用逆转录聚合酶链反应技术和免疫组织化学技术检测正常足月妊娠胎盘组织中ERα、ERβ表达及细胞学定位。结果 人足月胎盘组织中有ERα、ERβmRNA的表达，胎盘组织中ERβmRNA的表达为ERβ5变异型ERα表达定位于滋养层细胞滋养细胞核，ERβ表达定位于滋养层合体滋养细胞胞浆。结果 ERβ5是胎盘组织ERβ的变异型种类，定位于胎盘合体滋养细胞，与胎盘合成和分泌雌激素有关。     

妊娠期胎盘组织中Fas基因mRNA表达变化的研究

目的探讨死亡受体Fas基因 mRNA在正常妊娠各期及妊娠期高血压疾病（HDCP）中的表达变化.方法分别选取正常妊娠早期和晚期及HDCP胎盘绒毛组织.采用RT-PCR方法检测Fas mRNA表达,并用紫外图像分析扫描仪对其表达进行分析.结果 Fas mRNA在妊娠早期胎盘组织中极少表达,在妊娠晚期胎盘组织中表达增高.HDCP胎盘组织中Fas mRNA表达明显升高,与前两组比较差异有极显著性意义（P〈0.01）.结论孕早期滋养细胞表面Fas表达在母胎免疫耐受中发挥重要作用,孕晚期Fas表达增加可能是引起HDCP的原因之一.     

Cx43在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨非小细胞肺癌组织及癌旁正常肺组织中Cx43蛋白及mRNA的表达及意义.方法 应用免疫组织化学、Western blot和原位分子杂交观察48例非小细胞肺癌（NSCLC）及22例癌旁正常肺组织中Cx43蛋白及mRNA的表达.结果 ①癌旁正常肺组织和NSCLC组织中Cx43蛋白阳性表达率分别为90.91%和47.92%;Cx43mRNA的阳性表达率分另别为95.45%和60.42%.NSCLC组织中Cx43蛋白及mRNA阳性表达率均低于正常肺组织（P均＜0.05）.②有淋巴结转移组Cx43蛋白及mRNA阳性表达率分别为16.00%和20.00%;无淋巴结转移组两者的阳性表达率分别为69.57%和78.26%.两两比较差异均有统计学意义（P均＜0.05）.③Western blot显示NSCLC组织中Cx43的蛋白表达水平低于正常肺组织,有转移组中Cx43的蛋白表达水平低于无转移组,各组比较差异均有统计学意义,P均＜0.05.结论 Cx43蛋白和mRNA低表达与非小细胞肺癌发生和转移有关.     

瘦素在妊娠期高血压疾病母体血浆以及胎盘中的表达

目的 探讨瘦素(leptin)在正常妊娠以及妊娠期高血压疾病母体血浆以及胎盘中的表达.方法 采用前瞻性的研究方法,对孕早期血压正常的180例孕妇,保留妊娠10～14、20～24、30～34周以及终止妊娠后24 h母体血浆、胎盘,根据随访结局分为子痫前期组(4例重度、6例轻度),妊娠期高血压组(12例)和正常妊娠组(22例,选自158例正常妊娠).用ELISA法测定不同时间段母体血浆瘦素浓度,采用免疫组织化学法检测瘦素在胎盘组织中的定位和表达;采用QF-RT-PCR法检测胎盘中瘦素mRNA的表达水平.同时选取15例未孕健康妇女作为未孕对照组.结果 正常妊娠孕妇母体血浆瘦素浓度随妊娠的进展逐渐升高;妊娠期子痫前期组的血浆瘦素浓度明显高于同期正常妊娠组,差异均有极显著性意义(P<0.01),而妊娠期高血压组与正常妊娠组比较差异均无显著性意义(P>0.05);终止妊娠后24 h所有病例母体血浆瘦素水平急剧下降,接近正常未孕水平.瘦素表达分布于胎盘绒毛合体滋养细胞、细胞滋养细胞;瘦素蛋白和mRNA表达强度在正常妊娠、妊娠期高血压、子痫前期依次上升,差异均有极显著性意义(P<0.01).结论 子痫前期患者母体血浆瘦素水平在妊娠早期就已经明显升高,随着病情加重,胎盘分泌的瘦素逐步增加,是预示妊娠期高血压疾病病情严重程度的敏感信号分子之一.     

正常妊娠及老化胎盘组织中PCNA蛋白表达的研究

目的通过检测增殖蛋白PCNA在正常妊娠各期和老化胎盘中的表达,探讨其在胎盘发育过程中的功能。方法采取免疫组化法取妊娠各期胎盘组织共42例,检测PCNA蛋白的表达。结果（1）PCNA的表达主要定位在细胞滋养细胞,在合体滋养细胞中呈阴性表达。（2）PCNA在早、中、晚期胎盘组织阳性表达率无统计学意义（P〉0.05）,表达强度早、中期无显著差别;中、晚期有显著差异（P〈0.05）;早、晚期有极显著差异（P〈0.01）;老化组与正常妊娠晚期组胎盘中PCNA表达阳性率之间无显著差异（P〉0.05）,表达强度亦无显著差别（P〉0.05）。结论（1）PCNA在妊娠早期、中期表达强度高,说明滋养细胞处于高增殖状态。（2）PCNA随妊娠进展表达下调,提示与胎盘老化和分娩发动有关。     

胰岛素样生长因子-Ⅱ在妊振高血压综合征胎盘滋养细胞浅浸润中的影响

目的检测胎盘滋养细胞中胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growthfactor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)及其mRNA的表达,研究IGF-Ⅱ对细胞滋养细胞浸润能力的影响,评估IGF-Ⅱ在妊娠高血压综合征(妊高征)中的作用.方法①用免疫组化法检测正常及妊高征孕妇的胎盘组织中IGF-Ⅱ的表达,并用计算机图像分析系统进行定量分析比较.②用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常妊娠及妊高征胎盘滋养细胞中IGF-ⅡmRNA表达水平,并通过紫外凝胶图像分析进行定量分析比较.③用滋养细胞体外侵袭试验研究IGF-Ⅱ对正常及妊高征胎盘细胞滋养细胞浸润能力的影响.结果①IGF-Ⅱ主要位于绒毛小叶的合体滋养细胞及细胞滋养细胞.此外,也存在于羊膜绒毛层,但染色较以上两种细胞明显减弱.经图像分析检测证实妊高征组胎盘IGF-Ⅱ的平均光密度显著低于正常妊娠组(P＜0.05).②妊高征胎盘滋养细胞IGF-ⅡmRNA的表达亦显著低于正常妊娠者(P＜0.05).③妊高征滋养细胞较正常滋养细胞的浸润能力显著降低.④IGF-Ⅱ能明显促进正常妊娠滋养细胞的侵袭能力;但对妊高征滋养细胞侵袭能力的影响不显著.结论IGF-Ⅱ可能在妊高征胎盘滋养细胞浅浸润过程中起重要作用.     

妊娠高血压综合征患者血浆及胎盘绒毛组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达

目的探讨肿瘤坏死因子-α在妊高征发病机制中的作用.方法采用放射免疫测定方法检测59例妊高征患者和21例正常妊娠妇女血浆TNF-α的含量.用免疫组织化学法,检测妊高征患者及正常妊娠胎盘绒毛组织TNF-α的表达.结果妊高征组血浆TNF-α水平比正常妊娠组增高,P＜0.05.且随妊高征病情的加重呈上升趋势.但轻度妊高征与正常妊娠组之间差异无显著性,P＞0.05.中、重度妊高征与正常妊娠组比较差异显著,P＜0.05.胎盘绒毛合体滋养细胞有TNF-α的表达,且妊高征组胎盘绒毛组织合体滋养细胞TNF-α的表达明显高于正常对照组.结论TNF-α在妊高征的发病中起重要作用.     

妊娠期糖尿病胎盘组织HIF-1α及EPO表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和促红细胞生成素（EPO）在妊娠期糖尿病（GDM）胎盘组织的表达及临床意义。方法采用RT-PCR方法检测44例GDM孕妇、37例正常产妇胎盘组织中HIF-1αmRNA和EPO mRNA的表达。结果 GDM组HIF-1αmRNA水平高于正常对照组,差异有显著意义（t=15.907,P〈0.05）;GDM组EPO mRNA表达水平高于正常对照组,差异有显著性（t=10.167,P〈0.05）。GDM巨大儿组新生儿出生体质量与HIF-1α及EPO表达均呈正相关（r=0.662、0.475,P〈0.05）。结论胎盘组织中存在HIF-1α和EPO的基因表达,与GDM巨大儿的发生有关。HIF-1α的高表达可能是EPO表达上调的机制之一。     

Netrin-1在妊娠期糖尿病胎盘中的表达及其意义研究

目的胎儿生长部分取决于胎盘丰富血供。妊娠期糖尿病胎儿体重常增加明显,神经突起导向因子Ne—trin-1具有促血管新生作用,检测晚期正常妊娠及妊娠期糖尿病胎盘的微血管密度,同时测定相应胎盘表达Ne—trin-1的情况及患者娩出新生儿出生体重,从而探讨Netrin-1在妊娠期糖尿病中影响胎儿生长的可能机制。方法选取2012年1月1日-2013年9月12日间嘉兴市妇幼保健院剖宫产终止妊娠孕妇共46例,其中28例正常足月妊娠孕妇为对照组,18例妊娠期糖尿病患者为研究组。用免疫组织化学方法检测对所有入选病例胎盘中微血管数目;用实时定量PCR及蛋白免疫印迹检测所有入选病例胎盘Netrin-1表达情况,同时测定相应新生儿出生体重。结果在每高倍镜视野下正常足月妊娠及妊娠期糖尿病胎盘中,微血管密度依次为66．29±7．32、94．94±4．66。与正常足月妊娠相比,妊娠期糖尿病胎盘微血管密度增加明显（P〈0．05）。正常足月妊娠及妊娠期糖尿病两组胎盘组织Netrin-1mRNA含量依次为1．004±0．00及3．09±0．14,正常足月妊娠及妊娠期糖尿病两组胎盘组织Netrin-1蛋白含量依次为1．00±0．00及3．204±0．39。与正常足月妊娠相比,妊娠期糖尿病胎盘Netrin-1表达水平增加明显（P〈0．05）。正常足月妊娠及妊娠期糖尿病两组新生儿出生体重依次为（3362．86±413．65）g、（3838．61±332．02）g。同时两组新生儿出生体重可见相同变化趋势（P〈0．05）。结论Netrin-1可能通过血管新生过程影响妊娠期糖尿病胎儿宫内生长过程。     

妊娠期糖尿病孕妇血清视黄醇结合蛋白4水平变化及临床意义

目的了解妊娠期糖尿病（GDM）孕妇血清视黄醇结合蛋白4（RBP4）水平变化及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定50例孕晚期GDM孕妇及50例正常孕晚期孕妇血清RBP4水平,同时测定两组孕妇空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbAlc）、空腹胰岛素（FINS）水平,计算稳态模型评估的胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）及胰岛β细胞分泌功能指数（HOMA-β）。结果（1）GDM组孕妇血清RBP4水平为（18．48±4．60）ng/ml,明显高于正常孕妇血清RBP4水平（13．26±2．35）ng/ml（P〈0．01）。（2）GDM组孕妇FPG、HbAlc、FNS水平分别为（5．40±0．57）mmoL/L、（5．68±0．58）％、（9．32±1．30）mmoL/L,明显高于正常孕妇血清水平（4．99±0．27）mmoL/L、（4．75±0．51）％、（8．24±0．77）mmoL/L（P均〈0．01）。（3）GDM组孕妇HOMA—IR为（2．24±0．43）,明显高于正常孕妇（1．82±0．24）（P〈0．01）;GDM组孕妇HOMA-β为（107．29±35．54）,正常孕妇为（112．02±19．35）（P〉0．05）。（4）Pearson相关分析结果显示,两组孕妇血清RBP4水平分别与HbAlc、FINS呈显著正相关性（r=0．400,0．266,P〈0．05）;与HOMA-IR、HOMA-β无明显相关性（r=0．072,0．029,P〉0．05）。结论GDM孕妇血清RBP4水平明显升高,RBP4可能参与了GDM孕妇糖代谢紊乱,但是RBP4与GDM孕妇胰岛素抵抗无明显相关性;GDM孕妇尚不存在胰岛B细胞功能异常。     

PLGF、sFlt-1在胎儿生长受限患者胎盘中的表达

目的 研究胎儿生长受限(Fetal growth restriction,FGR)时胎盘生长因子(Placenta growth factor,PLGF)、可溶性血管内皮生长因子受体-1 (Soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1)在胎盘组织中的表达.方法 应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测30例胎儿生长受限孕妇和50例正常妊娠妇女胎盘中PLGF、sFlt-1的表达.结果 PLGF、sFlt-1 mRNA在两组胎盘中均有表达,PLGF在FGR组的表达明显低于对照组的表达分别为(20.57±2.1)、(25.95±3.68),两者差异有显著性(P＜0.05).sFlt-1 mRNA在FGR组的表达明显高于对照组的表达分别为(32.36±3.13)、(27.25±3.34),差异有显著性(P＜0.05).结论 PLGFrnRNA在胎儿生长受限患者胎盘组织表达降低,sFlt-1 mRNA表达升高,可能对胎儿生长受限的发病机制有一定的作用.     

妊娠肥胖、妊娠期糖尿病患者血清视黄醇结合蛋白4 水平的变化及其相关影响因素

 目的探讨妊娠肥胖、妊娠期糖尿病（GDM）患者血清视黄醇结合蛋白4（RBP-4）水平变化及其相关影响因素。方法采
用酶联免疫吸附法检测24 例孕前BMI>=28 kg/m2,孕期体质量增加P<20 kg 的GDM 孕妇（孕前肥胖GDM 组,A 组）;28 例孕前
BMI 18.5~23.9 kg/m2,孕期体质量增加P<20 kg 的GDM 孕妇（孕前非肥胖GDM 组,B 组）;23 例孕前BMI>=28 kg/m2,孕期体质量
增加P<20 kg,无任何妊娠并发症的孕妇（单纯肥胖孕妇组,C 组）;23 例孕前BMI 18.5~23.9 kg/m2,孕期体质量增加P<20 kg 的正常
健康孕妇（正常对照组,D 组）血清RBP-4、肿瘤坏死因子琢（TNF-α）、脂联素（APN）水平;同时测定所有受试者的糖、脂生化指
标,并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。结果（1）A 组孕妇FINS、HOMA-IR 明显高于其他3 组（ P<0.01）,B 组孕妇FINS、
HOMA-IR 高于C 组及D 组（ P<0.05）,C 组孕妇血清FINS、HOMA-IR 高于D 组（ P<0.01）;（2）A 组孕妇血清RBP-4 水平明显
高于其他3组孕妇（ P<0.05）,C 组孕妇血清RBP-4 水平高于B 组及D组（ P<0.05）;（3）血清RBP-4 与舒张压、孕前BMI、
FINS、HOMA-IR、TNF-琢正相关,与APN 负相关（ 值分别为0.274,0.667,0.500,0.435,0.528,-0.386, 均P<0.05）;（4）多元逐步回
归分析显示孕前BMI、TNF-琢是血清RBP-4 的独立相关因素（ P<0.05）。结论GDM 孕妇存在胰岛素抵抗,孕前肥胖的孕妇无
论是否合并有GDM,其血清RBP-4 水平均明显升高,血清RBP-4 水平与肥胖密切相关,脂肪细胞因子之间相互抑制或相互促
进,参与肥胖或GDM的发生。     

妊娠糖尿病患者血清高敏C反应蛋白的测定及临床意义

目的：探讨高敏C-反应蛋白（ hs-CRP）对早期妊娠糖尿病（ GDM）诊断的临床意义。方法：回顾性分析我院2008年1月至2012年1月收治入院的孕24-28周孕妇行葡萄糖筛查试验（GCT）,GCT异常孕妇行糖耐量（75g OGTT）筛查,用高敏感干化学微粒增强型免疫浊度法检测GCT正常孕妇组（100例）和GCT异常孕妇组（100例）的hs-CRP水平。结果：GCT正常孕妇hs-CRP阳性率为6．0％,GCT异常孕妇组hs-CRP阳性率为51．0％,GCT正常与异常两组hs-CRP水平经秩和检验,存在显著性差异（P＜0．05）。100例GCT异常孕妇根据葡萄糖耐量试验（OGTT）诊断,妊娠糖尿病（GDM）20例,葡萄糖代谢耐受不良（IGT）20例,其中GDM和IGT孕妇hs-CRP高水平浓度（＞10mg/L）阳性率高于OGTT正常孕妇。 GDM、IGT组和OGTT正常组hs-CRP阳性率各为55．0％（11/20）、50．0％（10/20）和50％（30/60）。结论：高敏C-反应蛋白（hs-CRP）参与了早期妊娠糖尿病（GDM）的发生发展,检测早期孕妇高敏CRP,对妊娠糖尿病的预防与控制具有十分重要的意义。     

两种诊断标准下妊娠期糖尿病发病率与妊娠结局的回顾性研究

目的：比较国际糖尿病与妊娠研究组（ International Association 0f Diabetes in Pregnancv Study Groups, IADPSG）妊娠期糖尿病（ gestational diabetes mellitus,GDM）诊断标准与美国国家糖尿病数据组（ National Diabetes data Group,NDDG）GDM诊断标准下GDM发病率及妊娠结局。方法：选取太原市妇幼保健院2011-2012年分娩的、接受规范的GDM筛查和诊断的非孕前糖尿病产妇5340例,对其病历资料进行回顾性分析,比较两种诊断标准计算的妊娠期糖尿病的发生率及对妊娠结局的影响;以同期妊娠分娩的糖代谢正常孕妇为对照。结果：发病率：NDDG诊断标准下,妊娠期糖尿病的发病率为4．87％,IADPSG诊断标准下发病率为11．7％;2011年该院按照NDDG标准诊治,回顾性将所有孕妇按照IADPSG标准诊断,新增GDM78例未经治疗,与新标准下的非GDM孕妇比较妊娠结局,未经治疗的GDM孕妇妊娠期高血压疾病、子痫前期、羊水过多、剖宫产率、产后出血、巨大儿、新生儿高胆红素血症的发生率明显增高（ P﹤0．05）;2012年该院按照IADPSG标准对GDM进行诊治,其中有123例GDM未达到NDDG标准,子痫前期、剖宫产率、巨大儿发生率明显低于2011年未治疗的新增GDM孕妇（ P﹤0．05）。结论：IADPSG诊断标准降低,可使更多患者被纳入到GDM的规范管理系统中,GDM孕妇经治疗后明显减少了巨大儿及剖宫产率,提示新的诊断标准对母婴保健是有意义的。     

控制血糖对改善妊娠期糖尿病孕妇妊娠结局的意义

目的:探讨控制妊娠期糖尿病孕妇血糖对减少母体及围生儿并发症和改善妊娠结局的意义。方法:将70例妊娠期糖尿病孕妇根据治疗后血糖控制情况分成血糖控制满意组(A组,54例)与血糖控制不满意组(B组,16例),同80例正常孕妇的妊娠过程进行比较,分析在孕产妇和围生儿并发症方面有无差异。结果:经临床治疗后,A组只有妊娠期高血压疾病发生率高于对照组孕妇(P<0.05),B组妊娠期高血压疾病、羊水过多、巨大儿、早产及新生儿窒息发生率均高于对照组(P<0.05)。结论:重视孕妇血糖筛查,及时诊断和治疗妊娠期糖尿病,选择合适的时间和方式终止妊娠可以有效地降低母儿并发症的发生率。